大肠癌组织中环氧合酶蛋白的表达

目的：研究大肠癌组织中环氧合酶1和2（COX－1和COX－2）的表达，探讨其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化SP法检测COX－1和COX－2在68例大肠癌组织和10例正常大肠组织中的表达。结果：（1）COX－1在正常大肠粘膜及大肠癌组织中均有不同程度的表达，阳性率分别为100％和92．4％，差异无统计学意义（P＞0．05）。（2）COX－2在大肠癌组织中的阳性表达率为66．18％，在正常大肠粘膜中未见表达，差异有统计学意义（P＜0．05）。（3）COX－2在有淋巴结转移的大肠癌组织的表达（74．07％）明显高于其在无淋巴结转移者（35．71％），差异有统计学意义（P＜0．05）。（4）COX－2在大肠癌组织中的表达率与大肠癌的大体分型，组织学分型，肿瘤大小，肿瘤部位及患者性别，年龄均无明显关系。结论：COX－2可能与大肠癌的发生发展及淋巴转移有密切相关系，而COX－1与大肠癌的发生无关。     

环氧合酶-2检测在胃肠肿瘤中的应用

目的　探讨环氧合酶 -2 (COX -2 )检测在胃肠肿瘤中的应用价值。方法　采用ABC法免疫组化检测 2 0例正常胃黏膜、12例早期胃癌、2 8例进展期胃癌和 2 3例正常大肠黏膜、3 4例大肠腺瘤、43例结肠癌组织标本中COX-2的表达。结果　①正常胃黏膜、早期胃癌和进展期胃癌的阳性率分别为 5 %、5 8.3 %、64 .3 %。早期胃癌和进展期胃癌的阳性率明显高于正常胃黏膜 (P <0 .0 1)。②大肠腺瘤和结肠癌的阳性率分别为 86.7%和 71.4%,明显高于正常大肠黏膜 16.7%(P <0 .0 1) ,其中高、中、低分化腺癌之间的阳性表达率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但高分化腺癌的阳性表达积分明显高于中、低分化腺癌 (P <0 .0 1)。结论　胃癌、大肠癌及大肠腺瘤COX -2的表达明显增高 ,并且在结肠癌中COX -2的表达与组织学分型有一定的关系 ,COX -2表达的检测对胃肠肿瘤研究和防治有重要意义。     

大肠黏膜癌变过程中PTEN和p27的表达及相关性研究

目的 :探讨PTEN及p2 7在大肠黏膜癌变过程中的表达及两者的相关性。方法 :采用免疫组织化学S -P法检测了 5 8例大肠癌 ,15例腺瘤性息肉及 11例配对的癌旁正常组织中抑癌基因PTEN和 p2 7的蛋白表达。分析PTEN和 p2 7的表达情况及与各种临床病理特征的关系及两者的相关性。结果 :在癌旁正常组织、大肠腺瘤性息肉、大肠癌组织中PTEN表达率分别为 (97.3± 4 .3) % ,(85 .2± 16 .8) % ,(13.8± 17.6 ) % ,呈递减趋势。大肠癌DukesA/B期组PTEN蛋白的高表达率为 88.9% ,明显高于DukesC/D期组中的 5 1.6 %。PTEN的高表达率与性别、年龄、肿瘤的大小、部位、分化程度、有无淋巴结转移无关。p2 7主要表达在细胞核 ,也有少量表达在细胞浆。在癌旁正常组织、大肠腺瘤性息肉、大肠癌组织中p2 7高表达率分别为 (98.8± 1.0 8) % ,(86 .0± 13.6 ) % ,(5 6 .8± 2 6 .0 ) % ,呈递减趋势。在大肠癌高、中分化组中 p2 7蛋白的表达率为 71.4 % ,明显高于低分化组中的 2 3.1%。p2 7的高表达率与患者的Dukes分期、性别、年龄、肿瘤的大小、部位及有无淋巴结转移无关。在大肠癌组织中 ,PTEN与 p2 7蛋白的表达呈正相关 (r =0 .6 4 2 )。结论 :PTEN及p2 7表达在癌旁正常组织、大肠腺瘤性息肉、大肠癌组织中均呈递减趋势 ,提示P     

大肠癌组织P21~(WAF1/CIP1)的表达与p53基因突变的关系

目的 :探讨大肠癌组织P2 1WAF1/CIP1的表达与p5 3基因突变的关系及其意义。方法 :应用RT -PCR、RCR -SSCP方法对 42例新鲜大肠癌组织中上述两种基因的表达进行研究。结果 :p5 3基因在大肠癌组织中的突变率为47.6 % (2 0 / 42 ) ,且在中、低分化大肠癌组织中的突变北显著高于高分化者 (P <0 .0 5 ) ;P2 1WAF1/CIP1在中、低分化大肠癌组织中的表达显著低于高分化癌组织 (P <0 .0 1)。 2 0例p5 3基因突变组中 ,P2 1WAF1/CIP1表达阳性率明显低于 2 2例p5 3基因未突变组 (P <0 .0 5 )。结论 :大肠癌组织中P2 1WAF1/CIP1的低表达可能与p5 3基因突变有关。     

大肠肿瘤中p53、bcl-2及PCNA表达的关系

目的　研究 p5 3、bcl 2及PCNA在大肠肿瘤发生发展中的作用及相互关系。方法　应用免疫组化S P法分别检测大肠正常粘膜、增生性息肉、腺瘤及腺癌中p5 3、bcl 2及PCNA蛋白表达。结果　正常粘膜及增生性息肉中 p5 3表达阴性 ,腺瘤癌变及腺癌组 p5 3蛋白表达率明显高于腺瘤组(P <0 0 5 )。腺瘤和腺癌中bcl 2表达差异显著 (P <0 0 5 )。高分化腺癌bcl 2表达率高于差分化腺癌 (P <0 0 1)。bcl 2与p5 3表达在腺瘤和腺癌中呈负相关。PCNA强阳性表达在大肠腺瘤 -癌序列中逐渐增高 ,它与腺瘤 p5 3表达、不典型增生程度及腺癌组织分化有关 (P <0 0 5 )。结论　p5 3基因突变主要涉及到腺瘤向腺癌的转变过程 ,大肠癌的发生与腺瘤中凋亡相对抑制和增殖活性增高有关。综合分析 p5 3、bcl 2和PCNA表达有助于大肠癌的早期诊断和预后判断     

大肠癌组织中P~(53)蛋白的表达及临床意义

应用S -P法免疫组化技术研究P53 在 5 3例大肠癌及 30例正常大肠粘膜中的表达。结果显示 :5 3例大肠癌标本中 ,P53 表达阳性率为 6 2 .2 6 % ,正常大肠粘膜呈阴性表达。癌组中P53 蛋白的表达与组织学类型无关 ;大肠癌DukesB、C期的P53 表达显著高于A期 (P <0 .0 5 ) ;在淋巴结转移组和无淋巴结转移组间P53 阳性程度差异有显著性 ,P <0 .0 5。认为P53 异常表达是大肠癌重要标志之一。     

p27Kip1,Skp2蛋白在大肠癌表达的临床研究

目的 检测p27Kip1及Skp2在正常大肠黏膜、大肠腺瘤、大肠癌组织中的表达,探讨p27Kip1,Skp2在正常大肠黏膜、大肠腺瘤、大肠癌之间的表达差异及其表达与大肠癌临床病理特征的关系.方法 用免疫组化S-P法检测15例正常大肠黏膜、15例大肠腺瘤、50例结直肠癌组织中p27Kip1,Skp2的表达情况.结果 ①p27Kip1在大肠癌组织中的表达明显低于大肠黏膜、大肠腺瘤组(P＜0.05),在各病理分化程度的大肠癌组织中表达差异无显著性(P＞0.05),在有淋巴结转移的大肠癌组织中p27Kip1表达明显低于无淋巴结转移组(P＜0.05),DukesC,D期大肠癌组织中p27Kip1表达明显低于DukesA,B期大肠癌组织(P＜0.05).②Skp2在大肠癌组织中的表达明显高于正常大肠黏膜、大肠腺瘤组(P＜0.05),在低分化大肠癌组织中的表达明显高于高分化大肠癌组织(P＜0.05),在有无淋巴结转移大肠癌组织中表达差异无显著性(P＞0.05),在DukesA,B期及DukesC,D期大肠癌组织表达差异无显著性(P＞0.05).③在大肠癌中p27Kip1与Skp2表达呈显著负相关(r=-0.470,P＜0.01).结论 ①p27Kip1表达的降低及Skp2表达的升高与大肠癌的发生有一定关系.②p27Kip1的低表达与大肠癌淋巴结转移、Dukes分期存在相关性,p27Kip1低表达可能合并淋巴结转移或高Dukes分期.③Skp2在低分化大肠癌组织中高表达,Skp2可作为大肠癌分化程度的辅助判断指标.④在大肠癌组织中Skp2与p27Kip1的表达呈负相关.     

大肠癌组织中survivin基因表达谱的改变

目的 研究大肠癌组织中凋亡抑制因子survivin表达水平的变化,探讨survivin在大肠癌发生中的作用.方法 收集60例临床大肠癌和20例正常大肠组织标本,用半定量RT-PCR和westem blot方法检测大肠癌及正常大肠组织中survivin的表达浓度,比较表达差异.结果 大肠癌组织中survivin基因mRNA表达总阳性率为58.3%(35/60),显著高于正常大肠组织0%(0/25),P<0.01;Westem blot验证结果表明大肠癌标本组织中survivin蛋白检测表达为阳性,其中正常大肠组织5例中仅有1例survivin微弱表达,进一步证实了survivin蛋白在大肠癌中表达增高.结论 Survivin的过表达同大肠癌的发生相关.     

p53 cDNA突变和突变型p53蛋白表达与大肠癌预后的关系

目的 探讨p53基因cDNA突变和突变型p53基因蛋白表达与大肠腺癌预后的关系。方法 RT-PCR-SSCP检测大肠腺癌组织p53基因cDNA突变,PAb240单抗免疫组化检测大肠腺癌组织突变型p53基因蛋白表达,比较两者与大肠腺癌预后的关系。结果 100例大肠腺癌中,p53基因cDNA突变51例（51%）,突变型p53基因蛋白高表达76例（76%）,两者同步阳性49例;p53基因cDNA突变与突变型p53基因蛋白高表达相关,有显著统计学差异（P<0.01）;与Dukes分期无关（P>0.05）。从Kaplan-Meier 生存曲线和log-rank 分析结果看,突变型p53基因蛋白高表达与大肠腺癌预后无显著统计学差异（P=0.72）;p53基因cDNA突变与大肠腺癌预后有关,统计学差异明显 （P=0.03）。结论 p53基因cDNA突变与突变型p53基因蛋白高表达密切相关。高频率p53基因cDNA突变直接反映大肠腺癌预后差。突变型p53基因高表达则可能受多因素影响,不能直接反映大肠腺癌预后。     

大肠腺瘤、大肠癌序列过程中AKT2、HIF-α的表达及其临床意义

目的检测丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶2（AKT2）、缺氧诱导因子-1α（HIF-100在正常大肠组织、癌旁大肠黏膜组织、大肠腺瘤及大肠癌中的表达，探讨2种标志物在大肠癌发生、发展中的作用及其相关性，为大肠癌临床病理诊断及预后判断提供参考指标。方法将50例大肠癌手术标本和10例相应癌旁大肠黏膜组织及14例正常大肠组织制作成组织芯片，同时将17例大肠腺瘤活检标本进行常规切片，应用免疫组化SABC法研究AKT2、HIF—1α在其中的表达。结果AKT2、HIF—1α在大肠癌中的阳性表达分别为84．0％、64．0％，二者表达呈显著正相关（r=0．285,P〈0．05）。AKT2在大肠癌中的阳性表达（84．0％）明显高于大肠腺瘤阳性表达（52．9％）和正常大肠组织的阳性表达（14．3％）（P〈O．05、P〈0．01）。HIF-1α在大肠癌中的阳性表达（64．0％）明显高于正常大肠组织（28．6％）（P〈0．05）；但在大肠腺瘤中的阳性表达为58．8％，与大肠癌的阳性表达比较，无显著性差异（P〉0．05）。AKT2、HIF—1α的表达与Dukes分期、淋巴结转移有关，而与患者性别、年龄及组织学分级无关。结论AKT2、HIF-1α在大肠癌中的阳性表达均较正常大肠组织增高，且二者呈正相关。AKT2可能通过调节HIF-1α表达来影响大肠癌的发生、发展、转移；AKT2、HIF-1α在正常大肠组织-大肠腺瘤-大肠癌发展过程中可能起重要作用，AKT2比HIF-1α能更好地作为临床监控大肠腺瘤癌变及大肠癌进展的指标。     

环氧化酶-2与胃癌的相关性研究进展

近年的研究表明，环氧化酶-2（COX-2）在胃癌中的表达增强，且可能在胃癌的发生发展过程中起了较为重要的作用。COX-2的表达与胃癌的组织来源有关。COX-2表达于肿瘤细胞的胞浆中，且其表达受启动子CPG鸟甲基化，NF-kappaB及p53突变等因素调节，幽门螺杆菌感染可以使COX-2表达增强，使用COX-2特异性抑制剂可以干预COX-2的表达，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡。     

大肠癌p53基因突变及p16基因缺失检测及临床意义

目的：探讨本地区散发性大肠癌p53、p16蛋白表达、临床病理因素的关系。方法：SSCP－PCR检测p53基因突变、p16基因缺失,免疫组化检测p53,p16蛋白表达,结果p16基因缺失率48％（19／40例）,未见突变,p16蛋白缺失率为55％（22／40）。p53基因突变率30％,p53蛋白阳性表达率为68％（27／40例）。组织学分组Ⅱ,Ⅲ级p16基因缺失率明显高于Ⅰ级（P＜0．01）,临床分期D期p53估变明显高于临床分期B,C期（P＜0．05）,结论p16基因缺失、53基因突变与大肠癌的发生、发展有关。     

诱导型一氧化氮合酶在结肠癌组织中表达及其与p53增殖细胞核抗原的相关关系

目的 :探讨诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的产物一氧化氮 (NO)在结肠癌癌变过程中可能作用机制 ,进一步研究结肠癌中iNOS、p5 3及增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的相关关系。方法 :应用免疫组织化学检测 60例结肠癌、3 0例癌旁组织及 3 0例正常结肠粘膜中iNOS蛋白表达 ,同时检测 60例结肠癌中p5 3、PCNA蛋白表达。应用原位分子杂交方法检测 60例结肠癌中iNOSmRNA表达。结果 :60例结肠癌组织中iNOS表达阳性率为 75 % (4 5 60 ) ,3 0例癌旁组织中iNOS阳性表达率为 2 0 % (6 3 0 ) ,3 0例正常结肠粘膜组织中iNOS呈阴性表达。结肠癌组织中iNOS表达明显高于癌旁组织 ,统计学分析有显著性差异 (P <0 .0 1)。DukesA、B期iNOS蛋白及iNOSmRNA的表达明显高于DukesC、D期 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。iNOS表达与p5 3表达呈正相关 (r =0 .743 2 ,P <0 .0 0 1) ,iNOS表达与PCNA表达呈正相关 (r =0 .612 2 ,P <0 .0 5 )。结论 :iNOS在结肠癌组织中表达上调 ,提示iNOS可能在结肠粘膜细胞癌变过程中起重要作用。iNOS表达可促进结肠癌细胞增殖。iNOS的异常表达及抑癌基因p5 3的失活在结肠癌的癌变过程中起协同作用。     

大肠癌患者外周血CK20表达及p53基因突变的研究

目的建立高效,快速的外周血Cytokeratin20(CK20)表达的检测方法,探讨大肠癌患者外周血中CK20的表达与微转移的关系,研究大肠癌与P53基因突变的关系.方法,运用荧光监测技术结合RT-PCR,检测36例大肠癌患者术前后不同时间外周血中的CK20的表达,用SSCP技术对大肠癌患者进行P53基因突变检测.结果36例患者术前的外周血中检出CK20表达的有27例,阳性率为75%手术后24h患者外周血中检出CK20表达的有30例,阳性率为83.3%,术后早期化疗结束后仅13例为阳性,阳性率为36%.36表达可以监测癌症微转移的发生,简便快速,检出率高.     

P53及Bcl-2蛋白在大肠腺瘤及腺癌中的表达

目的：检测大肠腺瘤及腺癌中Ｐ５３蛋白及Ｂｃｌ－２蛋白的表达，探讨ｐ５３基因、ｂｃｌ－２基因在大肠癌发生发展过程中的作用。方法：应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测１０例正常大肠粘膜、３０例大肠腺瘤、１００例大肠腺癌及癌旁粘膜中Ｐ５３蛋白及Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：大肠腺瘤Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白阳性率分别为２６．７％及７６．７％，大肠腺癌Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白阳性率分别为４３％及６７％，均显著高于正常粘膜与癌旁粘膜（Ｐ＜０．０１）；随着腺瘤不典型增生程度的加重，Ｐ５３蛋白阳性率显著增高（Ｐ＜０．０１），而Ｂｃｌ－２蛋白表达与腺瘤分级无关；大肠腺癌Ｐ５３蛋白阳性率显著高于腺瘤Ⅰ级不典型增生（Ｐ＜０．０１），与Ⅱ、Ⅲ级不典型增生间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），分化差的大肠腺癌Ｐ５３蛋白阳性率显著高于分化好的大肠腺癌（Ｐ＜０．０１），而分化差的大肠腺癌Ｂｃｌ－２蛋白阳性率显著低于分化好的大肠腺癌（Ｐ＜０．０５），大肠腺癌Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白表达呈负相关（Ｐ＜０．０５）；Ｐ５３蛋白表达患者复发率高、５年生存率低（Ｐ＜０．０５），Ｂｃｌ－２蛋白过度表达的大肠癌患者复发率低、５年生存率高（Ｐ＜０．０５）。结论：ｂｃｌ－２     

大肠癌发生中突变型P53与hMLH1表达的关系

[目的]探讨在大肠癌发生过程中错配修复基因hMLH1对p53基因突变的影响。[方法]采用免疫组化SP法检测37例正常大肠黏膜、32例大肠腺瘤与165例大肠癌中P53及hMLHI蛋白的表达。[结果]（D正常大肠黏膜组、大肠腺瘤组与大肠癌组P53蛋白的阳性表达率分别为0％、21．9％与48．5％,三组间差异有显著性意义（P〈0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为100％、87．5％与87．3％,其中正常大肠黏膜组与大肠癌组的差异有显著性意义（P〈0．05）。②高中分化、低分化与黏液腺癌组中P53蛋白的阳性表达率分别为53．5％、17．6％与16．7％,其中前者与后两者的差异有显著性意义（P〈0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为90．8％、70．6％与50．0％,前者明显高于后两者（P〈0．05）。③在大肠腺瘤轻中度不典型增生和重度不典型增生组中P53蛋白的阳性表达率分别为18．5％与40．0％（P〉0．05）;hMLH1蛋白的阳性表达率分别为92．6％与60．0％（P〈0．05）。④大肠腺瘤中随hMLH1蛋白的表达减少P53蛋白表达增多,但无明显相关性（P〉0．05）;大肠癌中两者的表达呈明显负相关（P〈0．05）。[结论]大肠癌发生过程中hMLH1基因的功能异常可能是p53基因突变的原因之一．     

大肠癌细胞对化疗药物的敏感性与p53基因突变的相关性研究

目的研究大肠癌细胞对化疗药物的敏感性与p53基因突变的相关性.方法用MTT比色法检测20位大肠癌患者的癌细胞对化疗药物的敏感性,并用PCR-SSCP技术分析其癌细胞的p53基因突变.结果大肠癌细胞对5-Fu[IR=(54.7±14.1)%]比对MMC[IR=(43.9±10.8)%]及ADM[IR=(43.9±9.4)%]更敏感(P＜0.05),但对DDP有耐药性[IR=(25.9±12.8)%,P＜0.01].p53基因的突变率为45%(9/20).癌细胞对MMC和ADM的敏感性与p53基因突变呈正相关(rmmc=0.589,rabm=0.624,P＜0.005).结论化疗药物MMC和ADM对大肠癌的作用依赖于p53基因的状态,而大肠癌对5-Fu和DDP的敏感性却与p53基因突变无关.     

外周血p53基因SNP检测与大肠癌早期诊断的关系

目的分析大肠癌发生过程中p53基因突变的作用,评估外周血p53基因突变分析作为大肠癌高危对象筛查指标的实际应用价值。方法用LDR-PCR技术对100例大肠癌家系成员和100例健康人（对照组）的外周血p53基因第5-8外显子进行单核苷酸多态性（SNP）检测。结果大肠癌家系成员和对照组的外周血p53基因的突变率为分别为24％和0,差异有显著性（P〈0．05）。结论p53基因突变在大肠癌的发生过程中起重要作用,外周血p53基因SNP突变分析可望成为大肠癌高危对象的早期诊断手段。     

大肠腺癌p53基因突变与p53基因蛋白表达的关系

目的为了解大肠癌p53基因突变与p53基因蛋白表达之间的关系。方法用RT－PCR－SSCP方法检测100例新鲜大肠腺癌组织P53基因突变，以PAb1801单克隆抗体（单抗）免疫组织化学（LSAB法）染色检测相同腺癌组织p53基因蛋白表达。结果在这100例大肠腺癌中，p53基因突变阳性率为51％，PAb1801单抗免疫组织化学染色（免疫级化）阳性率为62％。在p53基因突变检测阴性的49例中，24例PAb1801阴性，25例PAb1801阳性；51例p53基因突变检测阳性中，14例PAb1801阴性，37例PAb1801阳性，Fisher＇sexacttestP＝0．02。结论大肠腺癌p53基因突变是参与和影响p53基因蛋白表达的一个主要因素。