骨肿瘤组织C-erbB-2原癌基因产物表达及临床意义

 应用S-P法观察了67例骨肿瘤标本C-erbB-2癌基因产物的表达。结果显示：20例良性骨软骨瘤呈阴。性反应，而侵袭性骨巨细胞瘤与骨肉瘤分别有48%、65%的阳性表达（P<0.001）。提示C-erbB-2原癌基因产物的表达与骨肿瘤的细胞生物学行为有关，随骨肿瘤的恶性程度增高，阳性表达频率显著性增加。进一步研究表明：C-erbB-2的阳性表达随骨巨细胞瘤病理分级提高，软组织受累和局部复发而明显增高；肿瘤＞5cm的骨肉瘤患者C－erbB－2的阳性率越高。C-erbB-2阳性表达的骨肉瘤患者预后较差。     

骨肉瘤组织中Survivin基因表达及其与细胞周期蛋白D1表达的关系

目的：探讨骨肉瘤中抗凋亡基因Survivin的表达状态及其与细胞周期蛋白D1(cyclin D1)表达的关系。方法：采用原位杂交、免疫组织化学技术、DNA原位末端标记(TUNEL)法检测38例骨肉瘤、15例骨软骨瘤、5例正常骨组织中Survivin mRNA表达及骨肉瘤组织中cyclin D1表达和细胞凋亡情况，比较Survivin mRNA表达与骨肉瘤临床病理参数及cyclin D1表达的关系。结果：Survivin mRNA在正常骨和骨软骨瘤组织无明显表达，但显著表达于骨肉瘤中65．8％(25／38)，其表达率与骨肉瘤组织学分级无关，与WH0分型及转移有关，P＜O．05；骨肉瘤细胞凋亡指数(AI)均值为8．3％(O～17％)，Survivin阴性组AI值显著高于阳性组，P＜O．01；骨肉瘤中cyclin D1过度表达(71．1％，27／38)，其与Survivin表达正相关，rs=O．370，P＜O．05。结论：Survivin选择性表达于骨肉瘤组织，通过抑制细胞凋亡，并与cyclin D1协同作用参与骨肉瘤的发生发展，Survivin可能是评价骨肉瘤预后的重要参考指标。     

原发骨肿瘤端粒酶活性的检测及临床意义

目的：探讨端粒酶在原发骨肿瘤组织中的活性表达及临床意义。方法：采用TRAP-ELISA法对21例骨肉瘤、11例骨巨细胞瘤、9例软骨肉瘤、3例骨恶性纤维组织细胞瘤、1例脊索瘤、11例骨软骨瘤、5例骨样骨瘤、4例非骨化性纤维瘤、6例孤立性骨囊肿及7例正常骨组织进行端粒酶活性检测。结果：45例原发恶性骨肿瘤中有38例显示端粒酶活性,阳性率为84.4%,26例良性病变组织中只有2例骨软骨瘤具端粒酶活性,7例正常组织端粒酶表达均为阴性。结论：恶性骨肿瘤组织中端粒酶活性明显高于良性病变和正常组织,有可能成为恶性骨肿瘤的一种潜在性生化标志物和鉴别诊断的指标。     

原发骨肿瘤端粒酶活性的检测及临床意义

目的:探讨端粒酶在原发骨肿瘤组织中的活性表达及临床意义.方法:采用TRAP-ELISA法对21例骨肉瘤、11例骨巨细胞瘤、9例软骨肉瘤、3例骨恶性纤维组织细胞瘤、1例脊索瘤、11例骨软骨瘤、5例骨样骨瘤、4例非骨化性纤维瘤、6例孤立性骨囊肿及7例正常骨组织进行端粒酶活性检测.结果:45例原发恶性骨肿瘤中有38例显示端粒酶活性,阳性率为84.4%,26例良性病变组织中只有2例骨软骨瘤具端粒酶活性,7例正常组织端粒酶表达均为阴性.结论:恶性骨肿瘤组织中端粒酶活性明显高于良性病变和正常组织,有可能成为恶性骨肿瘤的一种潜在性生化标志物和鉴别诊断的指标.     

p27^Kip1基因及蛋白在骨肉瘤中的表达及其意义

目的 探讨p27^KIP1基因在骨肉瘤MG-63、U2细胞株及骨肉瘤组织中的表达情况及其与骨肉瘤生物学行为的关系。方法 培养人骨肉瘤细胞MG-63、U2和人成骨细胞OB；以半定量RT-PCR技术检测3种细胞中p27^KIP1基因的mRNA表达情况。以免疫细胞化学染色技术检测MG-63、U2及OB中p27^KIP1蛋白的表达情况。以免疫组织化学方法检测骨肉瘤、骨软骨瘤、正常骨3种组织中p27^KIP1蛋白的表达情况，并探讨其与临床病理学特征之间的关系。结果 p27^KIP1基因mRNA的表达在人骨肉瘤细胞MG-63、U2和人成骨细胞OB中没有差别。p27^KIP1蛋白的表达在OB中高于MG-63和U2，MG-63和U2间p27^KIP1蛋白的表达没有差别。骨肉瘤组织的p27^KIP1蛋白表达低于骨软骨瘤组织和正常骨组织，p27^KIP1蛋白表达与Enneking外科分期及是否发生转移相关。结论 骨肉瘤细胞、组织p27^KIP1蛋白表达明显降低；p27^KIP1蛋白的表达可作为骨肉瘤预后判断的一个有价值的指标。     

666例骨肿瘤发病原因的统计分析

作者通过天津医院近10年经病理证实的666树五种常见骨肿瘤（骨肉瘤、软骨肉瘤、骨软骨瘤、骨巨细胞瘤、软骨瘤），按性别、年龄、部位分布结果分析发现，骨肿瘤发病与人体骨干错端骨结构所受压应力异常有一定关系。五种常见骨肿瘤：骨肉瘤163例，软骨肉瘤对例，骨软骨瘤2（）例，软骨癌31例。0无例骨肿瘤，男女之比为骨肉瘤1．7：1，软骨肉瘤1．扣：1，骨软骨瘤1．幻：1，骨巨细胞瘤1．18：1，软骨瘤1．田河。五种骨肿瘤合计为1．56：1。发病以11岁一30岁年龄组最高。于刀岁后随年龄增长发病呈递减趋势。发病部位显示：股骨下端占第一位，股…     

p15蛋白在骨巨细胞瘤中表达的研究

目的　研究p1 5蛋白在骨巨细胞瘤和骨软骨瘤中的表达 ,探讨其在骨肿瘤发生、发展中的作用。方法　采用S -P免疫组织化学方法对 42例骨巨细胞瘤p1 5蛋白进行检测 ,并与 2 0例骨软骨瘤标本作对照。结果　p1 5蛋白在骨巨细胞瘤中表达的阳性率为 43 % ,在骨软骨瘤中表达的阳性率为 1 5 %。骨巨细胞瘤中p1 5蛋白的表达与骨软骨瘤相比差异显著 ( χ2 =5 1 1 ,P <0 0 5 )。结论　p1 5蛋白的表达可能与肿瘤的恶性度相关 ,在骨巨细胞瘤的发生、发展中起作用。     

骨肉瘤端粒酶的表达及其与临床的关系

目的 研究骨肉瘤端粒酶的表达,探讨骨肉瘤端粒酶的表达与临床特征的相关性。方法 应用原位杂交方法,检测49例骨肉瘤石蜡标本及10例正常骨组织和10例骨软骨瘤石蜡标本的端粒酶表达活性,并分析骨肉瘤的端粒酶表达活性与临床病理特征的关系。结果 49例骨肉瘤中端粒酶表达阳性39例(阳性率79.6％),而正常骨组织和骨软骨瘤端粒酶阳性表达率分别为0％和10％,与骨肉瘤比较差异极显著(P=0.001);骨肉瘤端粒酶的表达与肿瘤的大小、病理分级、3年存活率等明显相关。结论 端粒酶在骨肉瘤中阳性表达高,有辅助早期诊断的意义;骨肉瘤端粒酶的表达情况可以作为骨肉瘤预后评判的有效指标。     

埃兹蛋白在骨巨细胞瘤中的表达及意义

目的：检测埃兹蛋白（Ezrin）在骨巨细胞瘤组织中的表达,探讨其临床意义。方法将本院2008年1月至2013年12月穿刺活检确诊的60例骨巨细胞瘤设为观察组,同期8例良性病变中的反应性新生骨、12例骨样骨瘤及11例骨母细胞瘤的瘤组织作为对照组,用 Western blotting 及实时 PCR 方法检测 Ezrin 蛋白及基因水平。60例骨巨细胞瘤患者接受瘤段切除加假体置换术,术前均接受2个疗程的化疗,观察化疗前后瘤组织线粒体形态的变化以及 Ezrin 蛋白和基因的变化。结果骨巨细胞瘤中Ezrin 蛋白阳性表达主要位于细胞质中,表达阳性率为76.7%,远高于良性病变中反应性新生骨的19.7%、骨样骨瘤的21.2%以及骨母细胞瘤的20.7%,差异有统计学意义（χ2=4.18,P =0.024）,良性病变中的反应性新生骨组、骨样骨瘤及骨母细胞瘤之间的 Ezrin 表达差异并无统计学意义（χ2=6.18, P =0.087）。化疗后骨巨细胞瘤组织中线粒体固缩及液态空泡现象较治疗前减少,Ezrin 蛋白表达减少,基因水平降低[（23.99±1.49）：（20.11±1.11）,t =5.03,P =0.018）]。结论 Ezrin 在骨巨细胞瘤的表达较其他良性骨肿瘤高,可能成为鉴别良恶性骨肿瘤的辅助生物学指标;对 Ezrin 的早期干预可能有助于骨巨细胞瘤的治疗。     

良恶性骨肿瘤p27蛋白表达与DNA含量研究

目的 :探讨良恶性骨肿瘤细胞 p2 7蛋白表达与 DNA含量的关系及意义。方法 :取骨肿瘤新鲜标本 5 2例(骨软骨瘤 10例 ,骨巨细胞瘤 10例 ,骨肉瘤 2 0例 ,其他恶性骨肿瘤 12例 ) ,运用流式细胞术、单克隆抗体技术和定量免疫荧光技术 ,检测瘤细胞 p2 7蛋白表达、S期细胞百分数 (SPF)及 DNA含量 (DI) ,分析三者之间的关系。结果 :5 2例骨肿瘤 p2 7蛋白表达的平均 FI值为 1.37(骨软骨瘤 2 .2 4± 0 . 38,骨巨细胞瘤 1.79± 0 .36 ,骨肉瘤1.0 6± 0 .39,其他恶性骨肿瘤 1.0 1± 0 .45 ) ;p2 7<1.37组 2 5例 ,均为恶性骨肿瘤 ;p2 7<1.37组的 DI、SPF均明显高于 p2 7≥ 1.37组 (P<0 .0 0 1)。结论 :p2 7蛋白表达减少 ,导致细胞周期失调 ,S期细胞增多 ,DNA合成增强 ,细胞过度增生、恶变 ,可能是骨肿瘤发生发展的原因之一。     

KISS1 expression in osteosarcoma: high in chinese clinical cases, but lower in cell lines

Purpose: Osteosarcoma is the most common primary bone malignancy with a notorious feature of high metastasis. KISS1 has been identified as a putative human metastasis suppressor gene in numerous types of cancer. This study was aimed to evaluate the relationship between expression of KISS1 and invasion ability in osteosarcoma cell lines, and the relationships between KISS1 expression levels and prognosis of clincial cases. Methods: Expression levels of KISS1 in 3 types of osteosarcoma cell lines (MG-63, Saos-2 and U-2 OS) and a normal osteoblast cell line (hF-OB 1.19) were examined using semi-quantitative RT-PCR and immunochemistry staining. Transwell assays were used to detect the cell invasion ability. The osteosarcoma cell lines and specimen sections of osteosarcoma together with control were immuno-stained with KISS1 antibody. The relationship between the clinical data and the expression of KISS1 was evaluated. Results: KISS1 mRNA expression was moderate in U-2 OS, weak in Saos-2 and lost in MG-63. Transwell assays displayed a gradually increased aggressive phenomenon in osteosarcoma cell lines U-2 OS, Saos-2 and MG-63. However, a contrary conclusion was obtained with clinical specimen, a higher positive rate of KISS1 expression being displayed in osteosarcoma patients, especially in metastastic cases, compared to the benign osteochondroma patients. Furthermore, significant earlier distant metastasis was observed in KISS1 positive than negative cases. Conclusion: KISS1 expression levels were found to be decreased with the increasing aggressive ability in osteosarcoma cell lines. However, expression of KISS1 positively correlated with metastasis in osteosarcoma patients.     

p63蛋白在软骨母细胞瘤中的表达及其价值探讨

目的探讨p63蛋白在软骨母细胞瘤中的表达水平及其诊断价值。方法 采用免疫组织化学法(Maxvision)技术对25例软骨母细胞瘤、52例骨巨细胞瘤、10例动脉瘤样骨囊肿和20例腱鞘巨细胞瘤中p63和S-100p蛋白的表达水平进行分析。结果 p63蛋白在软骨母细胞瘤中呈单核细胞的胞核阳性,阳性率为88.0%(22/25)。而骨巨细胞瘤中除呈单核细胞的胞核阳性,少数多核巨细胞的胞核亦呈阳性,阳性表达率为92.3%(48/52)。p63蛋白在软骨母细胞瘤和骨巨细胞瘤中的表达两者比较差异无统计学意义(P>0.05),而S-100p在软骨母细胞瘤和骨巨细胞瘤中阳性表达率分别为88.0%(22/25)和1.9%(1/52),两者差异有统计学意义(P<0.05)。p63蛋白和S-100p在动脉瘤样骨囊肿和腱鞘巨细胞瘤中均不表达。结论 p63蛋白在软骨母细胞瘤和骨巨细胞瘤中均呈高表达,并有相似的免疫表型,提示两者在发生分化上可能均来自相同的起源细胞或肿瘤干细胞。p63蛋白结合S-100p联合应用对鉴别软骨母细胞瘤及其相关性病变具有一定辅助诊断意义。     

转移抑制基因BRMS1mRNA在骨肉瘤细胞株中的表达及临床意义的研究

目的研究转移抑制基因BRMS1在人骨肉瘤细胞株中的体外转录水平,探讨其在侵袭转移过程中的作用。方法应用半定量RT-PCR技术检测BRMS1mRNA在3种人骨肉瘤细胞株(SaOS-2、HOS和MG-63)中的表达。结果半定量RT-PCR检测BRMS1mRNA在3株骨肉瘤细胞株中表达水平下降,在正常成骨细胞中则以较高水平表达。结论人骨肉瘤细胞株SaOS-2、HOS和MG-63细胞随侵袭转移能力的增强,BRMS1mRNA表达水平下降,为研究骨肉瘤的转移机制提供了理论基础。     

Notch1 siRNA影响Notch-Wnt信号通路对人成骨肉瘤细胞增殖的抑制作用

背景与目的：骨肉瘤是骨肿瘤中最常见的原发性恶性肿瘤。迄今为止,骨肉瘤发生、发展的相关分子机制尚不明确,临床上也没有针对性的有效治疗药物。该研究探索Notch1蛋白在骨肉瘤中的作用及与影响骨肉瘤发生、发展的Notch-Wnt信号通路之间的关系。方法：采用免疫组织化学染色法检测骨肉瘤组织中Notch1的表达;采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法与流式细胞术检测靶向Notch1siRNA转染的人骨肉瘤细胞MG-63与U-2 OS凋亡的影响,实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）、蛋白质印迹法（Western bolt）检测转染后骨肉瘤细胞内Notch与Wnt信号通路中相关蛋白及RIPK4蛋白的表达变化。结果：Notch1在人骨肉瘤活检组织中的表达呈阳性,同时Notch1 siRNA能够显著抑制人骨肉瘤MG-63和U-2 OS细胞的增殖,并促进骨肉瘤细胞发生凋亡。此外诱导降低或缺失Notch1后,Notch与Wnt信号通路中相关蛋白及RIPK4蛋白表达明显减少。结论：siRNA-Notch1脂质体转染骨肉瘤细胞后,可影响Notch1-Wnt信号通路并降低促增殖分子RIPK4的表达,发挥抑制肿瘤细胞生长的作用。     

MTA1基因表达与人骨肉瘤细胞浸润和转移的关系

背景与目的:骨肉瘤具有很高的转移特性,以肺转移多见。尽管能成功控制原发瘤,但5年内仍然有超过30%的患者死于肺转移。肿瘤转移相关基因(MTA1)是新近发现的一个肿瘤转移候选基因,其表达增高与乳腺癌及胃癌、结直肠癌的侵袭转移能力成正相关。MTA1在骨肉瘤中的表达国内外尚未见相关研究报道,通过比较MTA1基因在人骨肉瘤细胞高低转移株的表达水平,探讨MTA1表达与骨肉瘤细胞浸润和转移潜能的相关性。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MG-63骨肉瘤细胞高低转移株MTA1的表达情况,用Boyden小室体外侵袭实验检测两株MG-63细胞的体外侵袭力;用脂质体介导的MTA1基因转染MG-63低转移株细胞,通过RT-PCR检测MTA1的表达;Boyden小室体外侵袭实验检测转染前后细胞侵袭力的变化。结果:RT-PCR结果显示MTA1在MG-63低转移细胞株中表达水平低(1.32),在高转移细胞株中表达水平高(6.27)(P<0.05);Boyden小室体外侵袭实验显示MG-63高转移株细胞体外侵袭力强,其穿膜细胞相对百分率为(46.3±2.4)%,低转移株细胞体外侵袭力较弱,其穿膜细胞相对百分率(12.6±1.1)%,两者差异有显著性(P<0.05);转染MTA1基因后,低转移细胞株转移潜能较未转染细胞明显增高。结论:MTA1与人骨肉瘤细胞转移潜能有密切关系,MTA1对肿瘤转移的作用机制以及作为干预肿瘤转移靶基因的可能性值得进一步探讨。     

ELL2在人成骨肉瘤中的表达及对MG-63细胞增殖的影响

目的:研究ELL2在人成骨肉瘤中的表达情况以及其对人成骨肉瘤细胞增殖的影响.方法:运用RT-PCR检测ELL2在人成骨肉瘤组织及其正常毗邻组织中的表达,RT-PCR及Western-blot检测ELL2在人成骨肉瘤细胞系及人正常成骨细胞系中的表达.构建ELL2过表达载体,MTT和细胞计数试验检测过表达ELL2对人成骨肉瘤细胞系MG-63增殖的影响.结果:ELL2在人成骨肉瘤组织中的表达显著低于其正常毗邻组织(P=0.001).ELL2在人成骨肉瘤细胞系中的表达相比于人正常成骨细胞系明显下调(P<0.05).过表达ELL2能够显著抑制MG-63细胞的增殖(P<0.05).结论:ELL2在人成骨肉瘤中表达下调,其过表达能够抑制肿瘤细胞的增殖.     

G蛋白偶联受体54基因在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的:研究G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPR)54基因的表达与骨肉瘤生物学行为和临床预后的关系。方法:应用RT-PCR检测3种人骨肉瘤细胞(MG-63、Saos-2、U-2 OS细胞)和正常人成骨hF-OB1.19细胞中GPR54 mRNA的表达情况,免疫组织化学技术检测44例骨肉瘤和12例骨软骨瘤组织中GPR54蛋白的表达情况,应用Transwell侵袭实验比较不同骨肉瘤细胞的侵袭、迁移能力。结果:在人骨肉瘤MG-63、Saos-2、U-2 OS细胞和正常人成骨hF-OB1.19细胞中,GPR54mRNA表达水平均较高,各组细胞间差别无统计学意义[(0.87±0.05)、(0.88±0.07)、(0.88±0.08)、(0.86±0.05),P>0.05]。骨肉瘤MG-63、Saos-2、U-2 OS细胞侵袭、迁移细胞数逐渐降低[(61.00±7.15)vs(32.40±5.36)、(18.10±3.21)个,P<0.05或P<0.01]。人骨肉瘤组织中GPR54蛋白表达阳性率显著高于骨软骨瘤组织(81.82%vs 41.67%,P<0.05)。GPR54蛋白阳性表达的骨肉瘤患者平均生存期明显短于GPR54蛋白阴性表达的患者[(27.39±6.05)vs(40.33±4.88)月,P<0.05]。结论:GPR54基因在骨肉瘤组织中的表达阳性率增高,且与患者临床生存期呈负相关。