丁酸钠对DMH诱导大鼠肠道肿瘤的作用

目的:观察1,2-二甲基肼(1,2-dimethy lhydrazine,DMH)是否可以诱导出小肠肿瘤,并与大肠进行比较.并探讨丁酸钠(sodium butyrate,NaBt)对DMH诱导肠道肿瘤的作用.方法:实验动物用SPF级♂Wistar大鼠,大小为8-9周龄,共分4组:DMH组、DMH+NaBt组、NaBt组、对照组.实验30-32wk之后过量麻醉使大鼠安乐死,取出小肠和大肠,观察肿瘤部位、数量、大小等;然后用10%甲醛固定,制作病理切片,观察各部位组织学改变.结果:实验结束时DMH组大鼠死亡率60.00%(18/30),DMH+NaBt组死亡率48.00%(12/25).DMH组肠道肿瘤发生率66.67%(8/12),4只肿瘤单发,4只多发,荷瘤率1.33(16/12),小肠肿瘤4个,大肠肿瘤12个;DMH+NaBt组肠道肿瘤发生率84.62%(11/13),6只为单发肿瘤,5只多发,荷瘤率1.46(19/13),小肠肿瘤3个,大肠肿瘤16个.两组之间肿瘤发生率及荷瘤率均无统计学差异.无论是DMH组还是DMH+NaBt组,结肠肿瘤发生率都高于小肠肿瘤,统计学有显著性差异(75.00%vs25.00%,P<0.05;84.21%vs15.79%,P<0.01).DMH组中肿瘤平均体积>0.05cm3个数占37.5%;DMH+NaBt组中肿瘤平均体积>0.05cm3个数占73.68%,两组肿瘤大小有统计学差异(37.50%vs73.68%,P<0.05).与DMH+NaBt组相比,DMH组浸润深度多局限于黏膜层内,有统计学差异(43.75%vs10.53%,P<0.05).结论:DMH也可诱导大鼠小肠肿瘤的发生,但发生率明显低于大肠肿瘤;NaBt可能促进肿瘤生长,关于NaBt对DMH诱导的肠道肿瘤作用仍需做进一步的深入研究.     

丁酸钠对人胃癌MKN-28细胞增殖的抑制作用及其机制

目的 观察脱乙酰化酶抑制剂丁酸钠对人胃癌MKN-28细胞增殖的抑制作用,并探讨其作用机制.方法 MTT法观察丁酸钠对人胃癌MKN-28细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;RT-PCR检测丁酸钠作用前后p21WAF1 mRNA的表达.结果 1.0、2.5、5.0 mmol/L丁酸钠作用24、48、72 h均可抑制 MKN-28细胞增殖,其效果具有时间、剂量依赖性(P＜0.05);丁酸钠1.0、2.5、5.0 mmol/L处理72 h后,MKN-28细胞G0/G1期细胞数量显著增加,S期细胞数量显著降低(P＜0.05);细胞凋亡率分别为13.7%±0.8%、20.8%±2.4%、33.6%±2.6%,与对照组2.8%±0.4%相比P均＜0.05;与对照组比较,丁酸钠处理后p21WAF1 转录水平上调.结论 丁酸钠可显著抑制人胃癌MKN-28细胞的生长,其可能的机制是通过上调p21WAF1基因的表达,诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期.     

重组DNA甲基化酶1表达质粒对结肠癌细胞相关基因表达的影响

目的 分析DNA甲基化酶1(DNMT1)基因的真核表达质粒对人结肠癌细胞肿瘤相关基因的表达影响。方法 分别构建并转染含有人正义和反义DNMT1的真核表达质粒入结肠癌SW1116细胞，PCR和限制性内切酶证实转染结果，以Western印迹法分析各组细胞DNMT1蛋白的表达情况。定量PCR检测hMLH1、hMSH2及c—myc、p16^INK4A基因的表达。结果 经G418筛选得到稳定转染DNMT1基因的结肠癌细胞系，且分别在该转染有正义和反义质粒的细胞系中，DNMT1蛋白表达上调和下调。同时发现转染正义DNMT1的细胞中hMLH1、hMSH2及c—myc的表达降低，而转染反义DNMT1的细胞中hMSH2的表达明显增强。各组细胞p16^INK4A基因的表达差异不明显。结论 DNMT1基因调控人结肠癌细胞中肿瘤相关基因的表达。     

结直肠癌中CDX2、p21~(H-ras)、p21~(WAF1)表达的临床意义

背景:CDX2与肠源性肿瘤的发生密切相关,而p21表达减低或缺失可能是结直肠癌发生、发展中的一个普遍事件。目的:探讨结直肠癌中CDX2、p21~(H-ras)、p21~(WAF1)表达的相关性和临床病理意义。方法:收集45例临床病理资料完整的结直肠癌手术切除标本,以免疫组化方法检测癌组织和相应癌旁组织中的CDX2、p21~(H-ras)、p21~(WAF1)蛋白表达。结果:结直肠癌组织中CDX2、p21~(H-ras)、p21~(WAF1)阳性率分别为86.7%、68.9%和35.6%,相应癌旁组织中阳性率分别为100.0%、37.8%和51.1%,CDX2和p21~(H-ras)在癌组织和癌旁组织中的阳性率差异有统计学意义(P=0.026和P=0.006);半定量分析结果显示CDX2和p21~(WAF1)在癌组织和癌旁组织中的表达水平差异有统计学意义(P=0.007和P=0.005)。癌组织中CDX2与p21~(H-ras)的表达存在相关性(r_s=0.501,P=0.000)。Dukes A、B期患者癌组织p21~(WAF1)阳性率显著高于C、D期患者(P=0.016),有淋巴结转移者p21~(WAF1)阳性率显著低于无淋巴结转移者(P=0.048),CDX2、p21~(H-ras)的表达与结直肠癌各临床病理特征均无相关性。结论:CDX2、p21~(H-ras)、p21~(WAF1)表达改变可能与结直肠癌的发生、发展相关。     

衰老对肿瘤的影响及其作用机制

<正>衰老,即生物在生存期间自身机体形态、结构与功能朝着衰退方向发展的现象,衰老过程中由于基因突变增多、炎性反应加剧、免疫功能被削弱,进而诱发肿瘤的发生、发展及转移^[1-2]。首先,细胞周期的永久停滞称为细胞衰老,主要由端粒侵蚀、癌基因激活、氧自由基、化学物质和电离辐射等压力刺激引起^[3]。衰老细胞通过合成的白介素、生长因子、     

丁酸钠和1，25-（OH）2D3对人结肠癌细胞增殖和hTERT表达的影响

背景：端粒酶在肿瘤细胞永生化过程中起重要作用．人端粒酶逆转录酶（hTERT）是调节端粒酶活性的关键因素。有研究发现生物活性制剂丁酸钠和1n,25-二羟维生素D3[1．25-（OH）,D3]具有潜在抗肿瘤效应。目的：观察丁酸钠和1,25-（OH）：D3对人结肠癌细胞增殖的影响及其可能机制。方法：以不同浓度丁酸钠（0．5～2．0mmol／L）、1,25-（0H）2D3（10^-6～10^-6mol/L）或两者联合[1．0mmol／L丁酸钠＋10^-7mol／L1,25-（OH）2D3]诱导人结肠癌细胞株HT29,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,RT—PCR检测hTERTmRNA表达。结果：丁酸钠和1,25-（OH）2D3能剂量和时间依赖性地抑制HT29细胞生长：1．0mmol／L丁酸钠和10^-7mol／L 1．25-（OH）2D3能诱导HT29细胞G0／G1期阻滞和细胞凋亡,抑制hTERTmRNA表达。联合用药组的上述作用较两者单用更为明显（P〈0．05）。结论：丁酸钠和1,25-（OH）2D3抑制人结肠癌细胞增殖的作用与其通过下调hTERT基因表达而抑制端粒酶活性、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡有关：两者联合可产生协同作用．     

p33ING1转染HepG2肝癌细胞对p21WAF1/ CIP1表达的影响

目的 探讨p33ING1对pcDNA3.1-p33ING1转染后的HepG2肝癌细胞p21WAF1/CIP1表达的影响.方法 实验分为对照组和转染组;将pcDNA3.1-p33ING1及空载质粒pcDNA3.1转染到HepG2细胞中,最终建立稳定转染的细胞株,RT-PCR检测p33ING1表达;RT-PCR和免疫组化检...     

MiR-451作用于MIF对大肠癌细胞株LoVo的影响

目的:研究MicroRNA-451(MiR-451)作用于巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)对人大肠癌细胞株LoVo的影响.方法:构建包含有MiR-451过表达的慢病毒(hsa-mir-451a),感染LoVo细胞株,采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测MIF mRNA及蛋白在人大肠癌细胞LoVo及人大肠上皮细胞FHC中的表达变化情况,MTT法检测各组细胞的增殖能力.结果:与未感染组及对照组相比,感染组中MIF在mRNA及蛋白水平的表达均显著降低,感染组细胞的增殖活性明显受到抑制.结论:MIF可能是miR-451的直接作用靶点,高表达miR-451可以有效抑制LoVo中MIF的表达,进而抑制了LoVo的增殖.     

miR-485-5p对结肠癌细胞顺铂耐药的影响

目的:探讨miR-485-5p通过PI3K/Akt-PAK1信号通路对结肠癌细胞顺铂耐药的影响。方法:构建LoVo/DDP细胞株,将建LoVo/DDP细胞株分为NC组(未做转染处理)、miR-485-5p mimics组(转染miR-485-5p mimics)、miR-485-5p inhibitors组(转染miR...     

半夏泻心汤抑制DMH/DSS诱导的结肠炎相关性结肠癌的发生

目的:观察半夏泻心汤对DMH/DSS诱导的结肠炎向结肠癌转变的抑制作用.方法:♂ICR小鼠65只,随机分为正常组、模型组和半夏泻心汤3个剂量(100,200,400 mg/ kg)给药组.采用腹腔注射1,2-二甲肼20 mg/kg及饮用含20 g/L的右旋葡聚糖苷钠复制结肠炎相关的小鼠结肠癌.除模型组20只小鼠,其余30只存活小鼠在出现第二次便血时分别口服给予半夏泻心汤100,200和400 mg/kg进行治疗,1次/d,共11 wk.实验第20周,乙醚麻醉处死小鼠,截取结肠,称重;记录结肠肿瘤数目,取结肠做HE染色:摘取脾脏、胸腺称重.结果:在实验第20周,40%的模型组小鼠出现脱肛,成癌率为85%.半夏泻心汤3个剂量组则未见脱肛小鼠,100 mg/kg组成癌率为20%,200和400 mg/kg成癌率为10%.DMH/DSS诱导的结肠癌小鼠脾脏指数显著升高(6.50±4.08 mg/g vs 4.25±3.39 mg/g,P<0.01),而胸腺指数则明显降低(0.60±0.33 mg/g vs0.71±0.29 mg/g,P<0.05),与对照组相比有显著性差异.半夏泻心汤可明显的对抗结肠癌小鼠胸腺的萎缩(P<0.05),而对脾脏的增大也有明显的治疗作用(P<0.01).病理结果表明,半夏泻心汤成功的将小鼠结肠停留在炎症状态,阻止了结肠炎向结肠癌的转变.结论:半夏泻心汤能够显著地抑制结肠炎向结肠癌的转变,结肠炎的有效治疗是防止结肠癌发生的重要措施.     

大肠癌组织端粒酶活性的检测及其意义

目的探讨端粒酶活化在大肠癌发生及发展中的作用。方法采用ＰＣＲ为基础的ＴＲＡＰ技术对３２例大肠癌的手术切除标本及４例大肠腺瘤组织的端粒酶活性进行检测。结果３２例大肠癌患者组织有２５例检出端粒酶活性，阳性率为７８１％。２例绒毛状腺瘤检出端粒酶活性，２例管状腺瘤为阴性。端粒酶活化与肿瘤部位、大小、组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及Ｄｕｋｅ分期无显著相关。结论检测大肠癌组织端粒酶活性对阐明大肠癌的发病机制、癌变危险性的预测及早期诊断均可能有重要意义。     

结直肠癌线粒体脱氧核糖核酸拷贝数与患者预后的关系

目的 探讨结直肠癌(CRC)线粒体DNA(mtDNA)拷贝数异常与患者预后的关系.方法 选取60份CRC及相应癌旁组织标本,分别提取基因组DNA.对线粒体ND1基因进行荧光定量PCR,计算mtDNA拷贝数,采用t检验进行统计分析.Kaplan-Meier生存分析判断患者的预后.结果 CRC组织的mtDNA平均拷贝数/细胞数为108.60±20.11,而相应的癌旁组织为153.68±25.72,前者显著低于后者(t=10.69,P＜0.01).淋巴结转移阳性者mtDNA低拷贝率高于阴性者(x2=4.022,P＜0.05),但与性别、年龄、病理分型、TNM分期无明显相关性.mtDNA高拷贝组生存率高于低拷贝组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CRC的mtDNA拷贝数明显低于癌旁组织,但拷贝数的改变与患者的预后无关.     

The role of cell-free DNA in predicting colorectal cancer prognosis

Introduction: Colorectal cancer is a cancer of the digestive system with poor prognosis. Cell-free DNA has received much attention with its unique predominance, especially in colorectal cancer.

Areas covered: This study has summarized recent advancements and challenges regarding cell-free DNA in predicting CRC prognosis. Furthermore, the authors make predictions on the potential developments concerning cell-free DNA in future prognosis prediction techniques.

Expert commentary: Cell-free DNA has the value of predicting CRC prognosis as an important biomarke. Further clinical trials should be performed to promote translating cell-free DNA into clinical applications.     

DNA甲基转移酶1在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 收集手术切除的30例胰腺癌组织和配对癌旁组织.采用实时定量PCR法检测DNMT1 mRNA的表达;免疫组织化学法检测DNMT1蛋白的表达;分析胰腺癌组织DNMT1蛋白表达强度与临床病理参数之间的关系.结果 胰腺癌组织中DNMT1 mRNA的表达量为2.32(1.17～5.17),显著高于配对癌旁组织的0.78(0.07～3.14,P＜0.05).胰腺癌组织中导管细胞DNMT1蛋白表达阳性率为(54.5±21.2)%,显著高于癌旁组织(10.9±15.0)%的表达阳性率(P＜0.01).以胰腺癌导管细胞DNMT1阳性率54.5%为界,分为高表达组(19例)和低表达组(11例).DNMT1表达强度和临床分期(x2=6.897,P=0.029)、淋巴结转移(x2=4.739,P=0.029)、神经浸润与否(x2=5.44,P=0.020)相关,而与年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤大小、肿瘤分化、血清CEA和CA19-9浓度无关.结论 胰腺癌组织DNMT1 mRNA和蛋白表达明显增加,DNMT1蛋白表达强度与胰腺癌的侵袭力、淋巴结转移和神经浸润相关.     

DNA甲基化对大肠癌相关基因表达的调控意义

目的:探讨大肠癌发生与演进中p16,Rb,cyclin D1甲基化状态与蛋白表达的关系及意义．方法:提取正常黏膜、腺瘤、癌旁组织及癌组织基因组DNA,应用MSP法检测不同病变阶段组织中各基因的甲基化状态,并对其与蛋白表达及临床病理参数的关系进行分析．结果:在大肠癌发生与演进过程中,p16,Rb 基因甲基化率呈增高趋势,cyclin D1基因甲基化率呈下降趋势,p16(切缘:r=-0．185,P =0．173;腺瘤:r=-0．381,P=0．013:癌旁:r= -0．419,P=0．001;癌:r=-0．516,P=0．000)、 cyclin D1(切缘:r=-0．282,P=0．035;腺瘤:r= -0．329,P=0．033;癌旁:r=-0．298,P=0．026; 癌:r=-0．618,P=0．000)基因甲基化程度分别与其蛋白表达呈明显负相关,且在癌组织分化程度(p16:X2=11.232,P=0．002,cyclin D1:X2 =9．144,P=0．015)、浸润深度(p16:X2=6．229, P=0．013;cyclin D1:X2=8．023,P=0．006)和淋巴结转移(p16:X2=5．707,P=0．016;cyclin D1: X2=7．794,P=0．005)上有显著性差异．Rb基因的甲基化状态在Rb表达抑制上不起主要作用．结论:大肠癌p16高甲基化和cyclin D1低甲基化可能是p16失活和cyclin D1过表达的主要机制,在大肠癌的发生、发展中发挥重要作用, 对于大肠癌的早期诊断、恶性程度及预后判断有重要意义．     

The effects of smoking on the risk of colorectal cancer

PURPOSE: The aim of this study was to assess the effects of smoking on the risk of colorectal cancer according to anatomic subsite. METHODS Between 1979 and 1985 a population-based case-control study of cancer at multiple sites was performed in Montréal, which accrued over 4,000 males in total, including cases of colorectal cancer, other cancers, and population controls. The present analysis was restricted to the 585 cases with histologically proven adenocarcinoma of the large bowel, aged 35 to 70 years, who underwent face-to-face interviews and provided adequate smoking histories. Of these, 176 had cancer in the proximal colon, 179 had cancer in the distal colon, and 230 had rectal cancer. Our control group consisted of 405 cancer controls, whose tumor types were considered unrelated to smoking, and 500 population controls. RESULTS: We observed a positive association between cigar smoking and cancer of the rectum. We also found some suggestion of a weak positive association between cigarette smoking and cancer of the proximal colon, an inverse association with cancer of the distal colon, although neither was statistically significant, and no association with rectal cancer. CONCLUSIONS: Cigar smoking seems to be associated with the development of rectal cancer. If the positive association between cigarette smoking and cancer of the proximal colon is real, it might partially explain the proximal shift in the anatomic distribution of colorectal cancer that has been observed, because of the increasing prevalence of cigarette smoking during the middle of the 20th century.     

DNA index as a significant predictor of recurrence in colorectal cancer

PURPOSE: To clarify the prognostic significance of the DNA content in cases of colorectal cancer, we investigated the relationship between the DNA content, as determined by the DNA ploidy or DNA index, and disease-free survival. RESULTS: This study included 201 cases that were treated by curative surgery between 1989 and 1995 at our hospital. 68 were diploid and 133 were aneuploid. The mean DNA index of these tumors was 1.42. Recurrence occurred in 30 cases (14.9 percent). Tumor site, venous invasion, Dukes stage, DNA ploidy (diploid or aneuploid), and a DNA index (less than or greater than 1.4) correlated well with disease-free survival. A multivariable analysis suggested the DNA index to be a stronger predictor than DNA ploidy. Patients with aneuploid tumors had shorter disease-free survival than those with diploid tumors (P=0.011), especially in Dukes Stage C cases (P=0.0209). Patients with a DNA index greater than 1.4 also had a shorter disease-free survival than those with a DNA index less than 1.4 (P<0.001), especially in Dukes Stage C cases (P=0.0033). CONCLUSIONS: The DNA index value (less than or greater than 1.4) seems to be a stronger predictor than DNA ploidy (diploid or aneuploid), and the combination of Dukes stage, tumor site, and a DNA index is, therefore, considered to be clinically valuable in predicting recurrence in cases of colorectal cancer.Presented at the meeting of the Japanese Society of Gastroenterological Surgery, Yokohama, Japan, July 17 to 18, 1997.