一例输入性三日疟的实验室诊断报告

目的分析一例输入性三日疟病例的实验室检测确诊病例。方法对病例的流行病学病史作回顾分析,采集血样作血涂片镜检和疟疾快速诊断(RDT),由浙江省疾病预防控制中心通过巢式PCR检测确诊。结果该病例在本次就诊前一个月,刚从尼日利亚疟疾流行区务工返家,在国外务工期间曾有"疟疾"发病史,回国前后发病间隔2周左右。本次就诊外周血涂片镜检显示为恶性疟感染,RDT结果排除恶性疟感染,巢式PCR检测扩增出三日疟原虫条带后确诊为三日疟。结论疟疾实验室诊断需要综合判断,血涂片镜检和RDT可初步提示疟疾的类型,巢式PCR检测有助于不同疟种感染的鉴别确诊。     

湖北省首例输入性疟疾混合感染的实验室诊断分析

目的应用多重巢式PCR技术对一例输入性疟疾混合感染病例进行诊断和鉴定。方法采集镜检初诊为输入性卵形疟患者血样,进行疟疾快速诊断试剂检测、显微镜镜检复核、多重巢式PCR检测及测序分析。结果该患者经快速诊断试剂检测结果为非恶性疟原虫阳性;镜检复核查见寄生于红细胞内的疟原虫环状体、大滋养体和配子体,根据形态鉴定为卵形疟;多重巢式PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,在760bp和205bp处有特异性扩增条带,测序后经Blast比对,分别与Gen Bank数据库中卵形疟原虫变异亚种和恶性疟原虫部分序列的一致性为99.00%。结论该患者经多重巢式PCR和序列分析确诊为湖北省首例输入性卵形疟原虫变异亚种与恶性疟原虫混合感染病例。     

一例输入性恶性疟和卵形疟混合感染病例调查

目的调查黄岩区一例输入性恶性疟和卵形疟混合感染病例,为疟疾防控提供参考。方法收集病例诊治和流行病学调查资料,采集病例抗凝血作镜检和巢式PCR检测。结果该病例在赤道几内亚务工期间有疟疾发作史和治疗史,在回国后第1天即出现寒战、发热、头痛等疟疾典型临床症状,镜检确诊为恶性疟;给予青蒿琥酯针剂和双氢青蒿素哌喹片治疗后,症状消失。此后在距上次发作的第110天又再次发病,疟疾快速诊断试纸(RDT)检测阴性,镜检误诊为间日疟;后经浙江省疾病预防控制中心巢式PCR检测,判定前后两次发病分别为恶性疟原虫和卵形疟原虫感染。结论该病例是一例输入性恶性疟和卵形疟混合感染病例,今后应加强疟疾类型的鉴别诊断能力,防止漏诊误诊。     

1例输入性卵形疟原虫实验室检测

目的对1例输人性疑似疟疾患者的血样进行实验室确诊。方法首先制备血涂片,吉姆萨染色后镜检疟原虫;其次对血样进行RDT检测;最后利用疟原虫属特异性（通用型）和4种疟原虫种特异性的巢式PCR和多重PCR检测方法,对该血样进行分子生物学检测及分型。结合分子生物学检测结果,再对血片进行镜检复核。结果初次镜检结果为间日疟原虫,RDT结果为阴性。巢式PCR检测结果,仅扩增出预期大小约800bp的卵形疟条带;多重PCR（Pf／Pv）检测无特异性条带产生。重新对薄血膜复核镜检,改判为卵形疟原虫。结论综合巢式PCR、多重PCR、RDT和镜检等检测结果,确诊该患者为卵形疟原虫感染。     

1例输入性三日疟原虫病例实验室检测

目的:对1例输入性疑似疟疾患者的血样进行实验室检测。方法:首先制备血涂片,吉姆萨染色后镜检疟原虫;其次对血样进行RDT检测;最后利用疟原虫属特异性(通用型)和4种疟原虫种特异性的巢式PCR,对该血样进行分子生物学检测及分型。结果:镜检结果为三日疟原虫,RDT结果为非恶性疟感染。巢式PCR检测结果,仅扩增出预期大小约140 bp的三日疟条带。结论:综合巢式PCR、RDT和镜检等检测结果,确诊该患者为三日疟原虫感染。     

快速检测试剂条、镜检和PCR在疟疾诊断中的应用研究

目的采用快速检测试剂条（rapiddiagnostictest,RDT）、镜检及聚合酶链反应（polymerasechainreac-tion,PCR）,3种检测方法进行疟原虫检测,比较3种方法在疟疾诊断中的敏感性、特异性,为科学分析检测结果和探究RDT能否在基层替代疟原虫镜检提供依据。方法收集安徽省2012年1月～2013年3月确诊以及疑似病例抗凝血148份,血片148张,采用RDT进行检测,并与镜检法和PCR的结果对比分析其敏感性与特异性。结果148份血样采用RDT、镜检和PCR3种方法检测结果阳性率分别为43．24％、36．49％、37．84％,经配对x2检验RDT阳性率高于镜检和PCR;镜检和PCR均检出2例卵形疟,而RDT结果为阴性;以镜检为标准,对间日疟和恶性疟进行分析得出,RDT的敏感度为100％,特异度87％,阳性预测值81％,阴性预测值100％;以PCR为标准,对间日疟和恶性疟进行分析得出,RDT的灵敏度为100％,特异度89％,阳性预测值84％,阴性预测值100％。3种方法均检出间日疟16例,而对恶性疟分别为RDT检出48例,镜检检出36例,PCR检出38例。结论RDT对间日疟和恶性疟敏感性较高,可以覆盖全部阳性病例,在今后疟疾低流行时期RDT有望取代基层镜检对疟疾进行诊断。     

越秀区首例输入性猴诺氏疟疾病例报告

目的报告一例越秀区首例输入性猴诺氏疟疾病例。方法经流行病学调查与实验室诊断确诊。结果患者到马来西亚旅游,回国10d后因发热、全身肌肉关节痛、头晕、头痛、乏力就医,医院以"间日疟"收治。血膜镜检见双核或多核环状体,大滋养体呈阿米巴样,胞浆致密,类三日疟"带状"滋养体,裂殖体不占满红细胞,疟色素颜色较深。经广东省疾控中心疟原虫基因检测(PCR法),确证为猴诺氏疟疾。患者经规范化治疗后痊愈出院。结论人感染猴诺氏疟疾后并无特有的临床表现,其镜检诊断时红内期形态与三日疟基本一致,需结合PCR检测鉴别。     

2015年大连市疟疾病例实验室检测结果分析

目的:分析大连市疟疾病例实验室检测结果,为疟疾诊断方法的选择提供理论依据。方法 :收集2015年大连市疟疾患者的血片和血液样本,应用镜检,RDT和巢氏PCR(Nest-PCR)分别对血片和血样进行检测。结果:17份样品镜检检出恶性疟原虫10例,卵形疟原虫1例,阴性6例;RDT检出恶性疟原虫13例,共同抗原阳性者1例,阴性3例,与镜检结果一致率为82.4%(14/17);巢式PCR检出恶性疟原虫13例,阴性4例,与镜检结果一致率为82.4%(14/17),与RDT结果的一致率为94.1%(16/17)。结论:采用镜检和RDT联合应用的方法,能够提高检测的敏感性,巢式PCR可提高虫种鉴定的准确性。     

江西口岸首例输入性卵形疟原虫wallikeri亚种感染的PCR鉴定及序列分析

目的对江西口岸1例输入性疟疾病例的血样本进行检测、确认。方法利用普通PCR检测全血样本中疟原虫18S r RNA基因,将得到的测序结果在NCBI数据库进行比对,并结合吉姆萨染色镜检、胶体金快速检测和荧光定量PCR加以验证。结果血涂片镜检并未发现疟原虫,但胶体金快速检测结果为阳性。普通PCR扩增到18S r RNA基因特异性片段,卵形疟原虫特异性引物扩增到阳性条带,而恶性疟、间日疟和三日疟原虫特异性引物没有扩增到目的条带。用卵形疟不同亚型引物特异性扩增发现卵形疟原虫wallikeri亚种阳性,序列与卵形疟原虫wallikeri亚种(Gen Bank号:KF219564.1和KF696359.1)18S r RNA同源性达99%。荧光定量PCR检测亦确认为卵形疟阳性。结论该病例确认为江西口岸首例输入性卵形疟wallikeri亚种感染。     

输入性三日疟原虫的实验室诊断

目的 分析输入性三日疟疾的实验室诊断,减少三日疟的误诊与漏诊。 方法 采用厚薄血膜涂片形态学检查、巢氏PCR对疟原虫18S rRNA基因进行扩增等方法确诊输入性三日疟疾病例。 结果 经过形态学和巢氏PCR检测发现首诊结果为未检出、检出未分型和诊断为恶性疟的7例患者感染三日疟原虫,有一例为间日疟原虫和三日疟原虫混合感染。 结论 在消除疟疾的地区,应当持续的进行疟原虫显微镜镜检技术的培训和分子生物学技术的推广应用,以满足现阶段输入性疟疾病例正确诊断和分型要求,尤其是罕见和少见虫种鉴定要求。     

万孚疟原虫检测试剂盒(RDTs)在湖北省输入性疟疾检测中的应用研究

目的评价湖北省级疟疾参比实验室应用万孚疟原虫检测试剂盒(RDTs)诊断输入性疟疾的效果。方法收集2015年1月至2018年6月湖北省网报疟疾病例和阴性删卡病例的完整血标本,进行回顾性分析,以省级疟疾参比实验室确诊结果为标准,分别与RDTs检测结果、镜检检测结果和巢式PCR检测结果进行比较分析。结果省级疟疾参比实验室共收集完整血标本440份,确诊阳性疟疾病例418例,阴性病例22例。在恶性疟原虫的鉴定能力上,RDTs最佳,符合率为100.00%;巢式PCR次之,符合率为97.49%;镜检法的符合率为91.40%。对于其他3种疟原虫(间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫)的种特异性鉴定能力,RDTs为最低,巢式PCR为最优,镜检法次之。根据12项单因素指标的综合分析,RDTs得分为32分,综合推广率最高,镜检法和巢式PCR得分分别为24分和19分。结论 RDTs在疟疾检测中具有一定优势,但对虫种的特异性鉴定能力较低,可以作为镜检法的辅助工具,在湖北省消除疟疾后的监测工作中广泛推广应用。     

广州市白云区1例输血性恶性疟疾调查

目的对1例感染不明的恶性疟病例进行实验室检测分析并确诊。方法 2017年10月18日收集该病例临床资料,并开展流行病学溯源调查,采集患者和疑似传染源(供血者)的血样,采用血片镜检、快速疟疾诊断试剂条(RDT)和PCR三种方法进行疟疾病原检测。结果该患者无疟疾流行区外出史,因治疗白血病有大量输血史。输血后出现畏寒、发热症状和外周血涂片镜检诊断为恶性疟原虫感染,RDT检测恶性疟原虫阳性。经溯源调查,疑似传染源的供血者为非洲籍留学生,在献血前曾有疟疾病史,PCR检测供血者血站留存血样恶性疟原虫阳性。结论该病例为输血性恶性疟,因输入非洲籍留学生血液而感染恶性疟。     

上海市浦东新区1例输入性恶性疟二次再燃的调查

【目的】通过对1例输入性恶性疟二次再燃的发病与治疗情况调查,寻证输入性恶性疟出现再燃的原因,采取有效的治疗方法,进一步推进消除疟疾工作。【方法】对患者进行流行病学个案调查和疫点调查,患者血样制作血涂片进行疟原虫镜检、疟疾快速诊断实验检测恶性疟原虫特异性抗原(RDT)、巢式PCR检测恶性疟原虫。【结果】该患者从2008年始有明确的多次的非洲和东南亚出差史,具有寒战、高热、出汗后退热等典型疟疾症状,实验室RDT、血涂片、PCR检测均为恶性疟阳性,被确诊为输入性恶性疟;患者2016年12月19日首次发病,经青蒿琥酯治疗后体温正常,但3周后再燃发病,继续青蒿琥酯抗疟治疗后体温正常,本次发病是患者第2次再燃发病,经联合抗疟用药后痊愈。【结论】输入性疟疾比例逐年上升及其再燃病例增多,严重威胁着患者的生命安全,加强输入性疟疾的管理,根治传染源防止传播,已成为当前消除疟疾阶段的主要任务。     

锦州市2017年输入性恶性疟个案实验室检测及分析

目的调查锦州市境外输入性恶性疟病例流行病学特征和实验室检测能力,为疾控部门防治和快速检测恶性疟原虫提供依据。方法分析患者的临床病历和流调信息,采用镜检、快检实验(rapid diagnostic test,RDT)及荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,qPCR)3种方法对患者血样进行检测。结果患者在喀麦隆疟疾高度流行区务工期间感染疟疾,经青蒿素类复方治疗8 d;回国后1个月以持续性发热、头痛、畏寒、腹泻等症状入院治疗。镜检见疟原虫环状体、配子体,恶性疟RDT抗原和qPCR基因检测均为阳性,确诊为恶性疟原虫感染。结论应加强务工归国人员的管理,并通过镜检联合RDT及qPCR检测以提高疟原虫血检效率,对患者进行早期诊断和治疗提供实验室依据。     

太原市1例输入性卵形疟的处置及分析

目的 对太原市1例输入性卵形疟病例进行流行病学调查、处置和分析，探讨赴疟疾流行区的出入境重点人群疟疾防控策略，为口岸疟疾防控工作提供参考。方法 对1例疑似疟疾病例进行流行病学调查，采集外周血制作血涂片镜检和血常规检测，用快速检测试剂条检测疟原虫抗原，实时荧光PCR方法对样本中疟原虫进行分型。结果 该病例有低热、头痛症状，有高疟区工作、多次罹患疟疾流行病学史，血涂片镜检可见疟原虫配子体、环状体，疟原虫抗原快速检测为阳性，荧光定量PCR检测结果为卵形疟。根据WS 259—2015《疟疾的诊断》，诊断为输入性卵形疟。结论新冠肺炎疫情常态化背景下，须重视疟疾高流行区出入境重点人群的疟疾防控与宣教工作，加强口岸多病共防，巩固消除疟疾成果，防止输入再传播。     

西湖区首例输入性卵形疟病例诊疗分析

目的分析杭州市西湖区首例输入性卵形疟病例诊疗过程。方法收集病例资料和流行病学资料,采集患者抗凝血样,结合镜检和巢式PCR检测结果确诊后规范治疗。结果该患者曾在非洲尼日利亚务工6年,有疟疾发作史,回国后30 d出现发热等症状,经外周血涂片镜检和PCR检测诊断为卵形疟,随后给予磷酸氯喹片3 d加磷酸伯氨喹片8 d疗法治疗后,患者痊愈。结论根据镜检和PCR检测结果,确诊该病例为卵形疟原虫感染。     

疟疾四重巢式PCR检测方法的建立

目的建立一种能同时检测4种疟疾的多重巢式PCR检测方法。方法以4种疟原虫为研究对象,提取全血样本核酸,采用疟原虫18SSU r RNA作为分子标记,合成通用引物和4种疟原虫特异性引物,建立和优化四重巢式PCR反应体系。结果建立的方法在原虫之间无交叉反应,检测敏感性可达102copies/μl,经对随机选取的口岸发热样本进行检测,35份血液样本中,检出恶性疟13例、间日疟7例、卵形疟1例、以及恶性疟和间日疟的混合感染2例,阳性率为65.7%;比镜检的阳性率54.3%高,尤其是检出混合感染病例比例高,并对检测结果进行测序验证。结论建立的四重巢式PCR能同时检测4种不同疟原虫引发的疟疾,具有较高的特异性和敏感度,适合于口岸输入性疟疾的快速检测。     

上海市1例境外输入卵形疟复发病例调查

目的 对上海市1例境外输入卵形疟复发病例进行调查和处置,为防控输入性疟疾疫情提供参考.方法 对该病例进行流行病学调查,收集临床资料及流行病学史,并采用镜检、现场快速诊断试纸条检测法(RDT)和荧光定量PCR检测疟原虫;对病例周围人群进行RDT筛查;对病例学习和生活环境开展蚊媒监测.结果 该病例2019年7月在尼日利亚曾...     

两种染色方法疟原虫镜检效果比较

疟疾是一种严重危害人类健康的寄生虫病。人体疟原虫有4种:间日疟原虫、恶性疟原虫、三日疟原虫和卵形疟原虫。我国间日疟较常见,恶性疟次之,但对人体危害较间日疟严重,三日疟偶尔发现,卵形疟已无病例报告。随着人口流动性加大,我国输入性疟疾病例也不断增加,及早的通过镜检发现疟原     

济南市1例恶性疟疾的调查

目的通过流行病学调查和实验室检测,早期确认经输血传播的疟疾病例,为疟疾防控提供依据。方法对济南市1例因输血感染恶性疟疾的病例进行流行病学调查,收集相关资料;采集患者血液进行疟疾快速诊断(RDT)和疟原虫镜检,追踪献血者发病就诊经过。结果患者无国外旅行史和既往疟疾感染史,发病前6 d有输血史。采集患者抗凝全血制作血涂片,检测恶性疟原虫阳性。经复核供血者献血时留存血样本,镜检和PCR结果均为恶性疟。经同源性检测,测序结果经过DNAstar软件进行比对,符合率为100.00%。结论该恶性疟病例为输血感染病例,献血员为境外感染病例。