miR-130b-3p和其靶基因在PCOS患者颗粒细胞中的表达研究

目的:探讨miR-130b-3p和其靶基因在多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞中表达的意义.方法:选取2019年10月至2020年6月于我院就诊且行体外受精/卵泡浆内单精子显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治疗的35例PCOS患者作为PCOS组.另招募年龄、体质量指数(BMI)等相匹配的卵巢功能正常因...     

狼疮肾炎患者循环miRNA表达谱研究及循环miR-130b-3p的临床意义

目的：研究探讨狼疮肾炎患者外周循环miRNA表达变化及其可能存在的临床意义,为狼疮肾炎的临床治疗提供更多的客观依据。方法方便选取2013年9月-2015年9月于该院诊治的50例狼疮肾炎患者,同时另选同期于该院体检的50名健康者作为对照组。在100例研究对象中随机选取15例患者做循环miRNA的表达谱检测筛选(检测组),85例患者做循环miRNA的表达谱验证筛选(验证组),同时应用循环miR-130b-3p为验证对象,观察与比较狼疮肾炎患者与对照组患者的血清总RNA水平及检测组中两组患者的血清miRNA水平、验证组中miR-130b-3p的水平,并进行数据统计学分析及相关性分析。结果在验证组中,与对照组相比较(3.7±1.6)ng/μL,狼疮肾炎组患者的循环血清中miR-130b-3p的表达水平(9.8±1.4)ng/μL显著上升,其差异有统计学意义(P<0.05);在检测组中,与对照组相比较(28.6±2.4)ng/μL,狼疮肾炎组患者循环表达的miRNA水平(46.8±5.6)ng/μL明显上升,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论狼疮肾炎患者循环miRNA表达水平可能随着肾功能的进一步下降而出现表达下调,其循环miR-130b-3p的表达与肾脏功能、血脂水平呈现明显的相关性,这在狼疮肾炎的疾病发生发展中可能起着重要的作用。     

糖尿病肾病相关miR-130b-3p靶点的生物信息学预测

目的：预测miR-130b-3p靶基因,并对靶基因的分子功能、生物学进程和信号通路进行富集分析,为深入研究糖尿病肾病相关miR-130b-3p的靶基因功能提供理论基础。方法：通过NCBI和miRbase数据库检索基因。应用Vector NTI软件进行miR-130b-3p序列分析,应用TargetScan,picTar,RNA22,PITA和miRanda软件预测靶基因,通过DAVID 和KEGG 数据库进行靶基因功能与信号通路富集分析。结果：已知成熟的不同物种miR-130b-3p核酸序列高度保守。靶基因主要富集在核质和细胞溶质,分子功能主要富集在蛋白绑定和转录因子激活。经典的miR-130b-3p靶基因集合明显富集于KEGG数据库中的TGF-β、AMPK和内吞作用等7个信号转导通路。疾病富集分析与糖尿病高度相关。结论：成功预测miR-130b-3p靶基因,部分靶基因参与的功能及信号通路与糖尿病肾病发生发展过程密切相关。     

miR-34b-3p和miR-491-3p在早期诊断儿童脓毒血症中的价值研究

目的：检测并分析微小RNA(miRNA)-34b-3p和miR-491-3p在脓毒血症患儿外周血中的表达及其诊断儿童脓毒血症中的临床价值。方法：选取咸宁市第一人民医院2018年2月～2021年10月疑似脓毒血症患儿130例,根据最终诊断分为脓毒血症组82例和非脓毒血症组48例。检测所有研究对象入院当天的外周血中miR-34b-3p和miR-491-3p的相对表达水平,同时运用受试者工作特征(ROC)曲线计算miR-34b-3p和miR-491-3p在儿童脓毒血症的诊断价值。结果：脓毒血症组外周血中miR-34b-3p和miR-491-3p含量均显著高于非脓毒血症组,差异有统计学意义(P<0.05)。且miR-34b-3p和miR-491-3p在脓毒血症组患儿外周血中的相对表达含量呈显著正相关(r=0.632,P=0.027)。miR-34b-3p、miR-491-3p及联合区分脓毒血症与非脓毒血症的ROC下面积和最佳横断值分别为0.678、3.121(95%CI:0.582～0.774,P<0.05)、0.654、2.050(95%CI:0.318～0.853,P<0...     

肌球蛋白重链7基因来源的miR-208b-3p促进心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达

【目的】探究肌球蛋白重链7基因来源的微小RNA-208b-3p(miR-208b-3p)对心肌成纤维细胞纤维化表型的调控作用。【方法】通过miRNA表达谱芯片分析18周龄的糖尿病db/db小鼠和db/m对照小鼠心肌中差异的miRNAs。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-208b-3p在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和高糖/葡萄糖氧化酶（G/Go）处理的C57BL/6乳小鼠心肌细胞（NMVCs）和心肌成纤维细胞（mCFs）中的表达;利用CCK8细胞增殖实验、流式细胞术和纤维化相关蛋白（包括COL1A1、COL3A1和α-SMA）表达检测来了解miR-208b-3p对mCFs纤维化表型的影响;双萤光素酶报告基因实验检测miR-208b-3p与潜在靶基因Mtf2和Pgrmc1 3′端非翻译区（3′-UTR）的结合作用;利用RT-qPCR和Western blot法分别检测miR-208b-3p转染的mCFs中Mtf2和Pgrmc1表达;通过小干扰RNA(siRNA)抑制Mtf2和Pgrmc1表达,并检测对mCFs中纤维化相关蛋白表达的作用。【结果】miRNA表达谱和RTqPCR结...     

结肠腺癌患者血清miR-551b-3p和miR-143表达水平及临床意义

【摘要】 目的 探讨结肠腺癌患者血清miR-551b-3p和miR-143的表达水平及临床意义。 方法 选取2018年1月～2019年4月解放军第四五四医院手术活检病理确诊的87例结肠腺癌患者作为病例组,选取同期结肠息肉患者106例作为对照组,记录患者基本信息并使用qPCR方法对两组患者循环血中miR-551b-3p和miR-143表达水平进行检测,并与结肠腺癌的分期和分级的关系进行分析。 结果 病例组患者循环血中miR-551b-3p和miR-143水平明显低于对照组患者(P均＜0.05);结肠腺癌分化差、TNM分期晚、有淋巴结转移和远处转移的患者循环血中miR-551b-3p和miR-143水平下降更加明显(P均＜0.05)。 结论 miR-551b-3p和miR-143可能参与了结肠腺癌肿瘤的增殖、分化及转移过程,循环血中miR-551b-3p和miR-143有望成为诊断和预测结肠腺癌预后的指标,但仍需扩大样本量进一步研究证实。     

miR-27b-3p对脓毒症肺内皮细胞YAP信号表达的调控机制研究

目的 探讨微小RNA 27b-3p(miR-27b-3p)对脓毒症模型小鼠肺内皮细胞Yes相关蛋白(YAP)信号的调控机制.方法 将40只C57BL/6雄性小鼠按照随机数字表法分为四组,对照组、盲肠结扎穿孔(CLP)组、miRNA类似物(mimic NC)组、miR-27b-3p类似物(miR-27b-3p mimic...     

miR-133b-3p对大鼠脑缺血/再灌注损伤的影响及其作用机制

目的:探讨miR-133b-3p对脑缺血/再灌注(I/R)损伤大鼠的影响.方法:将36只雄性SD大鼠随机分为6组,每组6只,分别为假手术组、I/R组、I/R+miR-133b-3p激动剂(agomir)组、I/R+miR-133b-3p抑制剂(antagomir)组、I/R+agomir阴性对照(NC)组、I/R+an...     

增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达.将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor 转染MIA PaCa-2 细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化.结果 与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织.同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍).结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中 miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关.     

阿尔兹海默症患者外周血miR-19b-3p和PTEN的表达及临床意义

目的 探究阿尔兹海默症(Alzheimer′s disease, AD)患者外周血微小RNA-19b-3p(miR-19b-3p)和磷酸酶及张力蛋白同源物(Phosphate and tension homology deleted on chromsome ten, PTEN)的表达及临床意义。方法 选取2020年2月-2023年2月新疆医科大学第一附属医院健康管理中心和新疆维吾尔自治区第四人民医院重症医学科收治的97例AD患者纳入AD组,选取同期63例体检健康老年人纳入对照组,检测并比较对照组与AD组血清miR-19b-3p和PTEN mRNA表达水平。根据AD患者不同病情程度分为轻度组和中重度组,采用Logistic回归分析AD病情严重程度的影响因素。采用Spearman相关性分析血清miR-19b-3p、PTEN mRNA水平与AD病情严重程度的相关性。采用ROC曲线分析血清miR-19b-3p、PTEN mRNA水平对AD病情严重程度的预测价值。结果 与对照组比较,AD组血清miR-19b-3p、PTEN mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。97例...     

MiR-29b-3p在膀胱癌化疗耐受机制中的作用

目的:探讨miR-29b-3p在膀胱癌化疗耐受机制中的作用。方法:通过对多药敏感的膀胱癌细胞株5637及多药耐受的膀胱癌细胞株H-bc进行microRNA测序分析,miR-29b-3p作为表达差异较为明显的候选microRNA被挑选进行下一步研究。分别合成并转染miR-29b-3p的mimic或antagomiR序列以提高或抑制其细胞中的表达水平。应用MTT法检测膀胱癌细胞中miR-29b-3p及其下游基因DNMT3A表达水平改变后对于多种化疗药物杀伤敏感性的改变。结果:qRT-PCR验证表明miR-29b-3p在5637中表达水平低于H-bc(1.00∶4.41)。5637细胞中转染mimic提高其表达后,细胞对于丝裂霉素诱发的死亡比例上升了37%,而H-bc细胞中转染antagomiR后,对于IC50剂量的丝裂霉素诱发的死亡比例下降了19%。作为miR-29b-3p的下游基因,DNMT3A的表达抑制也可以受到miR-29b-3p的调控。在5637细胞中转染其siRNA抑制表达后,同样可以提高细胞对于丝裂霉素的耐受。结论:miR-29b-3p可能通过抑制其靶基因DNMT3A促进了膀胱癌对于丝裂霉素的耐受。     

miR-200b-3p/NBR1轴对乳腺癌细胞自噬及生长的影响

目的 miR-200b-3p靶向NBR1调控乳腺癌自噬的作用仍未完全探索,文章旨在探讨miR-200b-3p是否靶向NBR1影响乳腺癌细胞自噬及生长.方法 介绍些分组选择人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)为研究对象,分为阴性对照组(转染mimic NC或inhibitor NC)、miR-200b-3p mimic ...     

miR-9-5 p和miR-125 b-5 p在膝关节骨性关节炎软骨中的表达及意义

目的 研究miR-9-5p、miR-125b-5p在膝关节骨性关节炎(KOA)软骨中的表达及意义.方法 选取骨科建卡就诊的KOA患者124例为研究对象(KOA组),将KOA组软骨标本(重度退变软骨、中度退变软骨、轻度退变软骨)分为重度组(32例)、中度组(44例)和轻度组(48例);选取同期因交叉韧带断裂、盘状软骨损伤...     

miR-130a-3p在胶质母细胞瘤中的表达与靶基因分析

目的 探索miR-130a-3p在胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)细胞中的表达水平,预测并分析miR-130a-3p的靶基因.方法 采用实时聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测GBM细胞和正常人胶质细胞中miR-130a-3p的相对表达水平.选择miRanda、DIANA、TargetScan和PicTar工具预测miR-130a-3p的靶基因,对靶基因进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和通路富集分析,基于STRING数据库进一步建立蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI)并利用Cytoscape软件进行可视化分析.结果 相对于正常人胶质细胞,miR-130a-3p在GBM细胞中的表达水平显著下调.四种预测工具取交集后共筛选出302个靶基因.GO富集分析表明miR-130a-3p靶基因主要参与转录调控、蛋白泛素化、Wnt信号、miRNA介导基因沉默、DNA损伤反应、细胞迁移等生物学过程和分子功能.通路富集分析发现miR-130a-3p靶基因主要富集于转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号通路、磷脂酰肌醇信号通路、内吞、自噬调节、胶质瘤、FoxO信号通路等.结论 miR 130a 3p在GBM细胞中低表达,其靶基因涉及多个肿瘤发生相关的信号通路,为进一步阐明其在GBM发生过程中的调控机制以及开发靶向治疗提供参考.     

miR-302b-3p对食管癌EC-109细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的：探讨miR-302b-3p对食管癌EC-109细胞增殖和凋亡的影响,阐明miR-302b-3p抑制食管癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的相关机制。方法：选取体外培养的食管癌EC-109细胞和正常食管上皮HET-1A细胞,采用实时荧光定量PCR法检测EC-109细胞和HET-1A细胞中miR-302b-3p表达水平。对EC-109细胞进行瞬时转染,分为空白对照组（未转染）、miR-NC组（转染miR-302b-3p mimics阴性对照）、miR-302b-3p组（转染miR-302b-3p mimics）、anti-miR-NC组（转染miR-302b-3p inhibitor阴性对照）和anti-miR-302b-3p组（转染miR-302b-3p inhibitor）。MTT法检测各组EC-109细胞活性,流式细胞术检测各组不同周期EC-109细胞百分比和细胞凋亡率,Western blotting法检测各组EC-109细胞中CyclinD1、CDK2、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验和Western blotting法检测各组EC-109细胞的荧光素酶活性和细胞中上皮细胞转化序列2（ECT2）蛋白的表达水平。结果：与HET-1A细胞比较,EC-109细胞中miR-302b-3p表达水平明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较,miR-302b-3p组EC-109细胞活性、S期细胞百分比和EC-109细胞中CyclinD1及CDK2蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,而G₀/G₁期细胞百分比、细胞凋亡率和细胞中Bax及Cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-302b-3p组细胞活性、S期细胞百分比和细胞中CyclinD1及CDK2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,而G₀/G₁期细胞百分比、细胞凋亡率和细胞中Bax及Cleaved caspase-3蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与miR-NC+ECT2-WT组比较,miR-302b-3p+ECT2-WT组EC-109细胞的荧光素酶活性降低（P<0.05）;与anti-miR-NC+ECT2-WT组比较,anti-miR-302b-3p+ECT2-WT组EC-109细胞的荧光素酶活性明显升高（P<0.05）。结论：miR-302b-3p可抑制EC-109细胞增殖并诱导凋亡,其作用机制可能与靶向调控ECT2蛋白表达有关。     

肝癌组织miR-146b-5p和miR-134的表达下调及临床意义

目的 探讨微小RNA(miR)-146b-5p和miR-134在肝癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 选取2017年6月～2018年12月我院收治的原发性肝癌患者73例,取患者的原发肿瘤组织为观察组,同时选取相对应的癌旁正常组织标本为对照组.采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测癌组织和癌旁正常组织中miR-...