重组人α干扰素单克隆抗体的研制及其应用

目的　研制抗干扰素的单克隆抗体 (McAb)及其应用。方法　应用杂交瘤技术 ,获得 4 0株抗重组人α干扰素的单克隆抗体细胞株 ;用ELISA方法检测腹水滴度 ,用辛酸法纯化McAb。结果　 4 0株细胞中 2E9、4G1能稳定分泌抗重组人α1b干扰素的单克隆抗体 ,2C9为抗重组新型干扰素 ,2A7、4G10分泌抗重组人α干扰素 (α1b、α2b、α2a、)和重组集成干扰素、重组新型干扰素的单克隆抗体细胞系 ;体外连续传代 6个月 ,分泌抗体能力不变 ,特异性专一。 5株单克隆抗体均为IgG。采用辛酸方法提纯抗体纯度达到 95 %以上。粗制的重组人α干扰素经 4G10单克隆抗体亲和层析柱提纯后 ,获得的干扰素纯度 95 %以上 ,平均收率 93% ,残余鼠IgG含量 <10 0ng 剂量 (5 0 μg)。 2C9单克隆抗体亲和层析柱适用于纯化新型干扰素。结论　 4G10单克隆抗体亲和层析柱可以应用于大规模重组人α干扰素生产。     

重组人α2a型干扰素单克隆抗体的研制、特性鉴定及初步应用

应用常规方法建立了5株稳定分泌抗重组人α2a 型干扰素单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系1B8、2B6、3F1、4G5和5G10,并对其免疫学特性进行了较系统的鉴定.5株单抗均为 IgG1,特异性强,与重组人α1 型、γ型干扰素以及受体菌菌体蛋白成分无交叉反应.间接 ELISA 测定小鼠腹水单抗效价1:320,000～1:10,240,000,其中3F1和5G10单抗对重组人α2a 型干扰素具中和活性(中和效价均为1:10,000)。竞争结合 ELISA 证实5株单抗针对3种不同表位。用3F1和5G10单抗建立的夹心 ELISA 能检测到60pg/ml的重组人α2a 和α2b 型干扰素。3F1单抗用于制备亲和层析柱纯化重组人α2a 型干扰素结果与进口单抗NK2相当。     

用生物传感器测定重组人肿瘤坏死因子—α单克？…

目的 测定重组人肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法 借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果 １０株ＴＮＦ－α单抗的亲和常数介于１０＾５～１０＾７Ｍ＾－１之间，其中所测的５株抗体识别肿瘤坏死因子上３种不同的抗原表位。结论 生物传感器研究抗原抗体相互作用的中确为一个理想的工具，适合于抗原抗体结构与解离的动力学分析及预测表位的构象关系。     

用生物传感器测定重组人α2a-干扰素单克隆抗体的亲和力及抗原识别表位

目的 :测定抗重组人α2a 干扰素单克隆抗体的抗原识别表位及其亲和常数。方法 :借助于生物传感器技术进行抗原抗体相互作用的动力学分析。结果 :抗体的亲和常数介于 10 -5～ 10 -7之间 ,5株抗体识别干扰素分子上 4种不同的抗原表位。结论 :生物传感器在研究抗原抗体相互作用中确为一个理想的工具 ,适合于抗原抗体结合与解离的动力学分析及预测表位的构像关系     

单克隆抗体亲和层析法提纯人重组IL—2

本文用正辛酸沉淀法提纯了四株抗IL-2单克隆抗体(8H7、982、9812、9F5),并与溴化氢活化的Sepharose4B 偶联制成亲和层折柱纯化人重组IL-2(rhIL-2)。结果表明四根单抗亲和层析柱均可有效地纯化rhIL-2,其中9B12柱和9F5柱的提取率分别达到49.2%和37.5%,提取物纯度在95%以上,并具有较高的生物活性。     

用单克隆抗体3F1亲和层析纯化rHuIFN—α2a的研究

采用淋巴细胞杂交瘤技术，制备了针对ｒＨｕＩＦＮα２ａ的单克隆抗体（ｍＡｂ）杂交瘤细胞系３Ｆ１，对ｍＡｂ３Ｆ１识别ｒＨｕＩＦＮα２ａ表位、中和活性等特点进行了研究，并与ＣｅｌＴｅｃｈ公司的ｍＡｂＮＫ２做了平行比较。发现ｍＡｂ３Ｆ１与ｍＡｂＮＫ２均具有中和ｒＨｕＩＦＮα２ａ活性的作用，但二者识别ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子的表位不同，表明在ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子上至少有２个中和性表位。进一步研究发现，ｍＡｂ３Ｆ１具有良好的用于亲和层析纯化ｒＨｕＩＦＮα２ａ的性能，每毫升湿胶可回收０．８ｍｇ１．０ｍｇｒＨｕＩＦＮα２ａ，纯度达９５％以上，生物学活性达２×１０１１ｕ／ｇ，且ｍＡｂ３Ｆ１有助于ｒＨｕＩＦＮα２ａ的复性。提示ｒＨｕＩＦＮα２ａ分子上的中和性表位，在与ｍＡｂ３Ｆ１的结合和解离过程中，对于ｒＨｕＩＦＮα２ａ的进一步复性起到促进作用     

抗重组人γ干扰素单克隆抗体的纯化研究

取本实验室制备的抗重组人γ干扰素单克隆抗体(rHu IFN-γ/McAb)A_3和B_3E_7粗制品(BALB/c小鼠腹腔分泌液),分别用饱和硫酸铵盐析法和葡萄球菌A蛋白(SPA)亲和层析法进行纯化。结果发现,虽两者都能部分纯化A_3和B_3E_7-McAb,但后者(SPA亲和层析法)的纯化效果比前者(硫酸铵盐析法)好。纯化后的产品经冷冻干燥后置低温贮存,其活性(抗体滴度)不受影响.     

重组人α2b干扰素胶囊抗小鼠阴道HSV-2感染的研究

目的 研究新剂型重组人干扰素(interferon,IFN)α2b胶囊抗小鼠疱疹病毒性阴道炎的效果.方法 人工建造阴道感染HSV-2的小鼠模型,以不同剂量的IFNα2b对小鼠阴道局部用药,以阿昔洛韦(acyclovir,ACV)为阳性对照.观察药物干扰对模型小鼠发病率、死亡率及病程进展的影响.结果 试验药物能减少小鼠的病死数、发病数,减慢小鼠的病程进展,其中16000IU/天高剂量组效果最好,类似于ACV组的用药效果,4000IU/天的低剂量用药组效果最弱,8000IU/天中剂量组效果居中.结论 受试药物在小鼠体内具有良好的抗HSV-2感染所致阴道炎的作用.     

重组人干扰素α2b喷雾剂在治疗小儿手足口病的护理应用及体会

目的 探讨重组人干扰素α2b喷雾剂在治疗小儿手足口病的护理应用及体会.方法 对46例手足口病患儿采用α2b喷雾剂直接喷于患处.结果 46例患儿中有效率为67.39％和显效率32.61％.结论 重组人干扰素α2b喷雾剂是治疗手足口病的有效外用药.     

抗重组人干扰素-α2b单克隆抗体的制备与应用

<正> 人α型IFN治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎及白血病有显著疗效。rHuIFN-α2b因其副作用小,疗效高,因而更为广泛使用。其生产过程中亲和层析纯化至关重要。为此我们制备了高特异性单克隆抗体3D9McAb用于分离纯化重组人干扰素α-2b(rHuIFN-α2b),现报道如下。1 材料和方法1.1 rHuIFN-α2b抗原制备 本所自制,用亲和层析柱纯化,比活2.0×10~8IU/mg,SDS-PAGE纯度达99％。1.2 单抗的筛选和制备 取8周龄雌Balb/c小鼠,用适当处理过的抗原免疫5次后进行细胞融合。ELISA法筛选,有限稀释法4次克隆后获得3D9细胞扩大培养,诱生腹水。     

重组人干扰素α2b阴道泡腾胶囊治疗 宫颈人乳头瘤病毒感染的临床研究

目的 研究重组人干扰素α2b阴道泡腾胶囊治疗宫颈人乳头瘤病毒感染的临床疗效。方法 选取我院2016年3月~2017年3月收治的96例HPV感染患者,采用随机数字表法将其分为实验组与参照组,各48例。实验组患者采用重组人干扰素α2b阴道泡腾胶囊治疗,参照组患者采用复方沙棘籽油栓治疗,对比两组患者的HPV转阴率、治疗有效率及HC2值,并观察不良反应。结果 实验组患者的HPV转阴率为87.23%,高于参照组的33.33%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。实验组患者的宫颈糜烂面治疗总有效率为91.67%,高于参照组的75.00%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。疗程结束1个月时,两组的HC2值比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;实验组患者在3个月、6个月后的HC2值低于参照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。两组患者的不良反应比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 应用重组人干扰素α2b阴道泡腾胶囊治疗HPV感染,对促使HPV转阴、缩小宫颈糜烂面均有积极作用,且不良反应少、安全性高。     

重组人γ－干扰素单克隆抗体的制备及初步应用

应用常规方法制备了４株能稳定分泌抗人重组γ－干扰素单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系：３Ｄ３、３Ｄ１２、３Ｆ９和３Ｂ８．经免疫琼脂双扩散法鉴定，其分泌的ＭｃＡｂ的亚类分别为：ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ１和１ｇＧ１．相对亲和常数前两株ＭｃＡｂ为６．２５×１０－１１、后两株ＭｃＡｂ为６．２５×１０－１３．问接ＥＬＩＳＡ法测培养上清的效价为２×１０２～１．２８×１０５．由小鼠腹水提取的４株ＭｃＡｂ与天然γ－干扰素均产生交叉反应，对重组的人γ－干扰素均具有中和活性．其中３Ｆ９和３Ｄ３培养上清对重组人γ－干扰素亦有明显的中和活性。用３Ｆ９ＭｃＡｂ与溴化氢活化的ＳｅＰｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制备了亲和层析柱，用其纯化粗提的γ－干扰素纯度达到９５％以上，比活性达１．９×１０７ＩＵ／ｍｇ蛋白．     

注射用重组人干扰素α2b联合黄芪注射液治疗小儿病毒性心肌炎的疗效研究

目的 探讨注射用重组人干扰素α2b联合黄芪注射液治疗小儿病毒性心肌炎的临床疗效.方法 将我院收治的86例病毒性心肌炎患儿,随机分为对照组和观察组,每组各43例.对照组患儿给予常规治疗,观察组患儿在常规治疗的基础上使用注射用重组人干扰素α2b联合黄芪注射液治疗.结果 观察组总有效率为93.02％,对照组总有效率65.12％,其差异具有统计学意义(P＜0.01).观察组患儿症状、体征恢复时间均少于对照组患儿症状、体征恢复时间,其差异具有统计学意义(P＜0.01).治疗后,观察组患儿的LDH(57.48±10.37) U/L、CK(151.83±75.63) U/L、CK-MB(23.69±11.26) U/L都低于对照组患儿的LDH(70.53±14.51) U/L、CK(204.27±95.64) U/L、CK-MB(45.15±18.47) U/L,差异具有统计学意义(P＜0.01).观察组的心电图恢复率为95.35％,高于对照组心电图恢复率74.42％,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 注射用重组人干扰素α2b和黄芪注射液联合治疗小儿病毒性心肌炎疗效显著.     

阴道镜下高频电灼术联合α-2a干扰素凝膏治疗尖锐湿疣疗效分析

目的探讨阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a治疗尖锐湿疣（CA）的效果。方法将165例CA分为3组，A组应用阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a；B组单纯采用阴道镜下高频电灼治疗；C组应用NS-FII型多功能光谱治疗仪联合肌注重组人干扰素α-2a。结果治疗后3-6个月A、B、C组复发率分别为0％、4．4％、65．4％：半年后人乳头瘤病毒（HPV）转阴率分别为93．5％、85．4％、43．8％，A组明显优于B组，B组明显优于C组，3组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论阴道镜下高频电灼术联合重组人干扰素α-2a治疗CA可明显降低CA复发率和提高HPV转阴率。     

重组人干扰素α1b治疗小儿手足口病的临床疗效观察

目的 观察重组人干扰素α1b治疗小儿手足口病的临床疗效。方法 选择我院2018年6月~8月儿科门诊收治的手足口病患儿60例,随机分为治疗组和对照组,各30例。对照组患儿给予一般抗病毒对症治疗,治疗组在此基础上加用重组人干扰素α1b注射液治疗。观察两组患儿治疗后热退时间、咽部充血程度改善时间、口腔溃疡愈合时间及皮疹消退时间,比较两组患儿的临床疗效。结果 治疗组总有效率为93.33%,高于对照组的70.00%,差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗组的热退时间、咽峡部充血程度改善时间、口腔溃疡愈合时间及皮疹消退时间均短于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 重组人干扰素α1b注射液治疗小儿手足口病疗效确切,可有效加快患者临床症状改善,缩短患儿病程。     

聚乙二醇干扰素α-2a与干扰素α-2b治疗慢性丙型肝炎疗效分析

丙型肝炎病毒(HCV)感染可导致肝脏炎症坏死和纤维化,抗病毒治疗是丙型肝炎治疗的根本疗法。我们对慢性丙型肝炎(CHC)患者分别采用聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)和干扰素α-2b(IFNα-2b)治疗,并对两种干扰素的临床疗效进行对比分析。1资料与方法1.1病例选择43例CHC患者为20     

重组人干扰素α-2b喷雾剂对疱疹性咽峡炎患儿炎症因子水平的影响

目的:探讨重组人干扰素α-2b喷雾剂治疗儿童疱疹性咽峡炎的效果。方法:选取2017年02月至2019年01月于我院进行治疗的88例疱疹性咽峡炎患儿进行研究。所有患儿依据随机对照原则分为2组（n=44）,其中对照组患儿进行开喉剑治疗,1～2喷/次,每隔4h喷1次,治疗5d;观察组患儿采用重组人干扰素α-2b喷雾剂进行治疗,1～2喷/次,每隔2h喷1次。治疗5d。根据体温和临床体征评价治疗疗效,记录相关时间指标、采用免疫比浊法和酶联免疫吸附（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法测定干预前后C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、白介素-10（Interleukin 10,IL-10）、肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor,TNF-α）水平。结果:观察组总有效率明显高于对照组（P<0.05）;观察组体温恢复正常时间、食欲恢复时间、疱疹消退时间短于对照组（P<0.05）;观察组CRP、IL-10、TNF-α水平降低程度大于对照组（P<0.05）。结论:对于儿童疱疹性咽峡炎的治疗,经重组人干扰素α-2b喷雾剂干预,可以提高治疗效果,快速改善患儿临床症状,改善炎症因子水平。