冠心病猝死鉴定中VEGF的免疫组化染色观察

目的:探讨血管内皮生长因子(Vascular EndothelialGrowth Factor,VEGF)在人体冠心病猝死(sudden coronarydeath,SCD)尸检心肌组织中的表达及其意义,从而提高SCD法医学鉴定的可靠性和准确性。方法:运用改良的免疫组织化学方法观察20例冠心病猝死组和20例非冠心病猝死对照组尸检心肌组织中VEGF的表达情况。结果:20例SCD组中有3例VEGF染色为阴性,另17例心肌梗死局部均有VEGF阳性表达,而20例非冠心病猝死组仅4例局部散在VEGF弱阳性表达,其余16例均为阴性表达。SCD组VEGF阳性表达率明显高于对照组。结论:VEGF的表达可作为法医病理学诊断SCD较为客观的病理形态学指标之一。     

慢性心房颤动患者血清及心肌热休克蛋白27/60/70的表达及其意义

目的探讨慢性心房颤动患者血清及心肌中热休克蛋白(HSP)的表达及其意义。方法选取瓣膜置换手术患者40例,其中20例为房颤持续时间超过36个月,另20例为窦性心律,以ELISA法检测血清HSP27/60/70含量,以Western斑点印迹法检测右心房心肌组织中HSP27/60/70的表达水平。结果(1)两组患者血清中HSP27/60/70含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)两组心肌组织中均见HSP27表达,但表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)慢性房颤组心肌中HSP70表达与窦性心律组比较差异有统计学意义(861.02±246.77vs1 068.51±332.18,P<0.05)。(4)HSP60表达水平两组比较差异也有统计学意义(5 965.03±1 564.92vs3 159.80±1 055.41,P<0.05)。(5)两组患者血清与心肌中HSP27/60/70作相关分析,只有窦性心律组的血清与右心房心肌HSP27表达水平呈低度相关(r=0.54,P<0.05)。结论右心房心肌中HSP60及HSP70的表达在慢性心房颤动的发生和发展中起重要作用。     

HSP70与TNF-α在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理分期关系的研究

目的:探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系?方法:采用RT-PCR以及Western blot技术检测对比40 例甲状腺癌组织?20例甲状腺良性病变组织以及15例正常甲状腺组织中HSP70?TNF-α的表达情况,并分析HSP70表达水平与甲状腺癌临床病理学特征的关系?结果:3组人群组织中HSP70 mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.001),甲状腺癌组织中HSP70 mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05);HSP70 mRNA的表达水平与甲状腺癌组织病理分级显著相关(rs = 0.810,P < 0.05);甲状腺癌组织中HSP70 蛋白水平显著高于正常甲状腺组织(P < 0.05);3组人群组织中TNF-α mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.05),甲状腺癌组织中TNF-α mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05)?结论:HSP70?TNF-α在甲状腺癌组织中的表达升高,且HSP70与甲状腺癌组织病理分级明显相关,提示HSP70在甲状腺癌发生发展中发挥重要的作用?     

急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsf1和HSP70改变的意义

目的探讨急性心肌梗死猝死者梗死区心肌细胞内热休克转录因子1(hsf1)和热休克蛋白70(HSP70)改变的临床意义。方法分别用RT-PCR和免疫组化法检测(IHC)18例急性心肌梗死猝死者(研究组)和15例心脏正常因车祸快速死亡者(对照组)心肌细胞中hsf1和HSP70基因的mRNA和蛋白表达量。结果急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsf1和HSP70的mRNA表达量都显著高于正常对照组(P<0.01),且hsf1和HSP70 mRNA的表达量之间呈显著的正相关关系(P<0.001)。急性心肌梗死猝死者心肌细胞hsf1和HSP70蛋白在细胞浆和细胞核表达较对照组显著增强(P<0.01),其中hsf1蛋白主要在心肌细胞核内表达,HSP70蛋白主要在心肌细胞浆内表达。结论急性心肌梗死猝死者心肌细胞内hsf1和HSP70可能共同参与了急性心肌梗死的病理生理过程,这一过程可能是热休克反应的另一调节途径。     

RGS17在冠状动脉粥样硬化中的表达

目的通过免疫组织化学染色来验证RGS17在人冠心病猝死者冠状动脉管壁组织中的表达情况。方法收集冠心病猝死案例41例(实验组)及非心源性死亡10例(对照组),根据冠脉狭窄程度分为实验组1 (Ⅰ～Ⅱ级),实验组2 (Ⅲ级),实验组3 (Ⅳ级)。通过免疫组化来检测RGS17在冠心病冠脉组织中的表达情况。每张切片取四个视野,测定平均光密度值后采用SPSS23.0进行单因素方差分析。结果 41例冠心病猝死案例中以男性多见,多位于41～50岁;冠状动脉狭窄以Ⅳ级多见;免疫组化染色显示RGS17在冠心病猝死者冠状动脉管壁中膜表达明显高于对照组(P<0.05),且RGS17在冠状动脉狭窄Ⅲ、Ⅳ级的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ级的管壁组织中的表达。结论 RGS17在冠心病猝死者冠状动脉管壁中呈高表达;RGS17在冠状动脉狭窄Ⅲ、Ⅳ级的表达明显高于狭窄Ⅰ、Ⅱ级的管壁组织。     

HSP70在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在妊娠期高血压疾病产妇胎盘组织中的表达及其在发病中的作用.方法70例妊娠期高血压疾病产妇为妊娠期高血压疾病组(其中妊娠期高血压组20例、轻度子疒间前期组20例、重度子疒间前期组30例),另选同期健康产妇30例为对照组,用免疫组织化学法(SP法)检测胎盘组织中HSP70表达水平并进行比较.结果①妊娠期高血压疾病组和对照组胎盘组织中都有HSP70表达,主要位于胎盘合体滋养细胞和血管内皮细胞,表达部位为胞质.②合体滋养细胞HSP70表达:妊娠期高血压组、轻度子疒间前期组、重度子疒间前期组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),重度子疒间前期组与轻度子疒间前期组(P<0.05)、妊娠期高血压组(P<0.01)比较差异有统计学意义.③血管内皮细胞HSP70表达:妊娠期高血压组、轻度子疒间前期组、重度子疒间前期组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),重度子疒间前期组与妊娠期高血压组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论 HSP70在妊娠期高血压疾病产妇胎盘组织中表达增强,HSP70可能在妊娠期高血压疾病的病理生理过程中起一定作用.     

热休克蛋白70和bag-1蛋白在恶性肿瘤中的表达

目的观察恶性肿瘤中bag-1蛋白和热休克蛋白70(HSP70)的表达及其与肿瘤间的联系。方法69例临床胃肠道组织标本(54例癌组织,15例为非癌组织),运用RT-PCR及免疫组化的方法检测HSP70和bag-1在癌组织及癌旁正常组织的表达。结果96.3%的癌标本bag-1表达阳性,明显高于正常对照组(P<0.01)。bag-1表达与癌分化程度相关(r=0.887,P<0.05)。同时检测的HSP70发现,大多数癌标本表达HSP70,并明显高于正常组织(P<0.01),实验未发现HSP70与bag-1表达间的差异(P>0.05),也未见HSP70表达水平与癌分化程度间的相关性。结论HSP70和bag-1在胃肠道恶性肿瘤中的高表达与肿瘤的发生有一定的关系,且bag-1与肿瘤的预后有密切关系。     

硫化氢对糖尿病大鼠心肌纤维化以及PKCα 和HSP70 表达的影响

目的：观察硫化氢对糖尿病大鼠心肌纤维化和蛋白激酶C α(PKCα)及热休克蛋白70(HSP70)的表达的影 响。方法：实验大鼠随机分成4组：正常对照组(Control组)、糖尿病模型组(STZ组)、硫化氢干预组(STZ+H2S组)、硫 化氢处理的正常组(H2S组)。以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型;HE染色观察心肌纤维病理形态学变 化;Western印迹检测大鼠心肌组织III型胶原、PKCα和HSP70蛋白的表达。 结果：与对照组相比,STZ组心肌细胞排 列紊乱,III型胶原表达明显升高(P<0.05),而PKCα和HSP70表达也明显上调(P<0.05);与STZ组相比,STZ+H2S组III 型胶原表达明显减少(P<0.05),PKCα和HSP70表达也下调(P<0.05)。结论：硫化氢可改善糖尿病大鼠的心肌纤维化改 变,其机制可能与其抑制PKCα 及HSP70的表达上调有关。     

葡萄胎组织中HSP70的表达及与其预后的关系

目的 :探讨热休克蛋白 70的表达与葡萄胎侵袭恶变的关系。方法 :采用Western免疫组织化学法检测 4 8例葡萄胎组织石蜡标本中HSP70的表达情况。结果 :4 8例观察标本中 ,侵袭组的HSP70表达阳性率显著高于未恶变组 (p <0 .0 1) ;滋养细胞由轻度至重度增生过程中 ,HSP70表达阳性率逐渐增高。中重度组的HSP70表达阳性率显著高于轻度增生组 (P <0 .0 1)。结论 :侵袭性葡萄胎组织的HSP70表达明显高于未恶变的葡萄胎组织。葡萄胎组织中HSP70过度表达者与其恶性程度增高有关。     

HSP70在胃癌中的表达及意义

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)及其mRNA在胃癌、癌旁组织、慢性胃炎和正常胃黏膜组织中的表达情况及与临床、病理资料之间的关系。方法:采用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测病理诊断明确的60例胃癌组织标本及对应的距胃癌组织边缘1.5cm处的癌旁组织、距胃癌组织边缘5cm以上的正常组织以及胃炎组织中HSP70的表达差异,RT-PCR法对10例患者的胃癌组织及对应的癌旁组织、慢性胃炎组织和正常组织的HSP70mRNA的表达情况进行检测,结合临床病理资料进行统计分析。结果:HSP70的表达:在60例胃癌组织中的阳性表达率为75%,明显高于癌旁组织(P<0.01)、胃炎组织(P<0.01)和正常组织(P<0.01);在mRNA水平,胃癌组织的HSP70表达也明显高于其余3组(P<0.001)。HSP70的表达与患者年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无明显相关性(P>0.05);与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性(P<0.05)。结论:胃癌中HSP70的表达水平明显高于癌旁组织、胃炎组织和正常组织,提示与胃癌发生、发展密切相关;而且与患者年龄、性别、肿瘤组织类型和浸润胃壁深度无明显相关性;与肿瘤分化程度、远处转移和临床病理分期具有相关性。     

HSP70在早期心肌缺血中作用的研究

目的 探讨心肌缺血早期HSP70的作用机制。方法 采用免疫组织化学方法，进行HSP70检测。结果 常规的HE染色很难分辨早期心肌缺血的心肌细胞。Nagar-Olsan特染能鉴别早期心肌缺血心肌细胞的改变。HSP70在缺血的心肌细胞内呈散在的颗粒状分布；在自溶的心肌细胞内呈带状弥漫的强阳性表达。结论 HSP70的大量高表达与心肌细胞缺血溶解坏死呈正相关。     

HSP70在发绀型先天性心脏病人心肌组织中的表达

目的： 探讨发绀型先天性心脏病人心肌细胞中HSP70的表达及其心肌保护作用。方法：非发绀型先天性心脏病人12例(A组)，发绀型先天性心脏病人12例(B组)。两组病人于阻断主动脉前、阻断主动脉后20 min及开放主动脉后20 min,取右房心肌标本，分别进行免疫组化法检测HSP70的含量及化学比色法检测SOD活性、MDA的含量。结果：心肌细胞中HSP70的含量在手术过程中无明显变化(P>0.05)；B组HSP70的含量明显低于A组(P<0.05)。手术过程中B组SOD活性明显降低，MDA含量明显高于A组（P<0.05）。结论：发绀型先天性心脏病人心肌细胞中HSP70呈低水平表达与其抗缺血/再灌注损伤作用减弱有关。     

热休克蛋白70-1基因多态性与冠心病的关联性研究

目的:探讨热休克蛋白70-1(HSP70-1)基因多态性与冠心病的关系。方法:采用病例-对照1:1研究设计。选择湖北省三家综合性医院的217例冠心病患者作为病例组,同时选年龄、性别匹配的217例健康者作为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法检测HSP70-1多态性。结果:HSP70-1基因各基因型及等位基因频率在两组中的分布差异有统计学意义。结论:HSP70-1基因多态性可能是冠心病的易感基因。     

细胞外热休克蛋白70在心肌缺血再灌注中对心肌细胞凋亡的作用

目的 研究细胞外热休克蛋白70(HSP70)在心肌缺血再灌注过程中对心肌细胞凋亡的作用.方法 小鼠20只随机分成对照组及HSP70组,建立缺血再灌注模型,再灌时经颈总动脉插管分别注射0.2 ml灭菌生理盐水和0.2 ml HSP70,检测再灌注5 h后血清中TNF-α浓度、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性以及心肌细胞凋亡率.结果 HSP70组中,CK、LDH和TNF-α浓度较对照组均显著性升高,且心肌组织中细胞凋亡数也较对照组明显升高.结论 加入外源HSP70增加细胞外HSP70的浓度可升高循环中TNF-α水平,加重心肌细胞凋亡和再灌注损伤.     

热应激预适应对H2O2诱发乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的观察热应激预适应对H2O2诱发乳鼠心肌细胞损伤的保护作用.方法用胰蛋白酶消化法分离Wistar大鼠乳鼠心肌细胞,将其分为正常对照组(37℃无H2O2损伤),H2O2损伤组(37℃ H2O2损伤)和热应激组(42℃ H2O2损伤).测定3组细胞线粒体的琥珀酸脱氢酶(SDH)比活力、细胞色素C氧化酶(CCO)比活力;应用免疫组化技术检测热休克蛋白70(HSP70)的表达.结果与正常对照组比较,H2O2损伤组的SDH、CCO比活力显著下降(P<0.05);而热应激组下降不明显(P＞0.05).并且,HSP70仅在热应激组中大量表达.结论 H2O2能够引起乳鼠心肌细胞损伤;而热应激预适应对其具有保护作用,其保护机制可能与热应激时HSP70的大量表达有关.     

慢性萎缩性胃炎脾胃湿热证与热休克蛋白60、70及CD44s、CD44v6的相关研究

为探讨慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)脾胃湿热证与热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白70(HSP70),细胞粘附分子标准型CD44蛋白(CD44s)及CD44的变异体(CD44v)之一CD44v6之间的关系,选择CAG患者71例进行胃镜检查,胃窦部活检标本行快速尿素酶试验及13C呼气试验,检测幽门螺旋杆菌(Hp),病理诊断和HSP60、HSP70、CD44s及CD44v6的免疫组织化学染色,分析比较它们的相关性。结果:①脾胃湿热组的萎缩和肠化程度高于脾虚组(P<0．05～0．01);②正常对照组胃粘膜内HSP60主要呈阴性或弱阳性表达,CAG脾胃湿热组及脾虚组患者胃粘膜内HSP60表达增强,且二者Hp的感染率均高于正常对照组(P<0．05～0．01),Hp的感染情况与HSP60的表达呈非常显著相关(P<0．01)。脾胃湿热组HSP60 表达与脾虚组相比无显著性差异,但脾胃湿热组HSP60表达有增强的趋势;③脾胃湿热组HSP70的表达与正常对照组、脾虚组相比无显著性差异(P>0．05),但脾胃湿热组强阳性表达率(71．0％)高于脾虚组(47．5％)(P <0．05);④脾胃湿热组CD44s和CD44v6的表达与正常对照组和脾虚组相比无显著性差异(P>0．05)。说明;①CAG脾胃湿热组胃粘膜的萎缩和肠化程度均重于脾虚组,可能是由于脾胃湿热证与炎症关系密切所致。②CAG脾胃湿热组及脾虚组HSP60的表达均较正常对照组增强,原因可能与Hp感染有关。③CAG脾胃湿热组HSP70的强阳性表达率强于脾虚组。④3组之间CD44s和CD44v6的表达无明显差异,说明CAG作为胃癌前疾病尚未出现CD44s和CD44v6的异常表达。     

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中HIF-1α和HSP70的表达及其意义

目的：探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和热休克蛋白70（HSP70）在妊娠高血压综合征（妊高征）患者胎盘组织中的表达,阐明两者在妊高征患者胎盘组织中表达的临床意义。方法：收集妊高征患者胎盘组织22例（妊高征组）和正常孕妇胎盘组织18例（对组照）,采用免疫组织化学法检测2组孕妇胎盘组织中HIF-1α和HSP70的表达情况,分析两者阳性表达率在妊高征患者和正常孕妇胎盘组织中的差异及其在妊高征患者胎盘组织中的关系。结果：妊高征组患者和对照组正常孕妇胎盘组织中HIF-1α阳性表达率分别为81.8%和38.9%,妊高征组患者胎盘组织中HIF-1α阳性表达率明显高于对照组（χ²=7.785,P=0.005）;妊高征组患者和对照组正常孕妇胎盘组织中HSP70阳性表达率分别为90.9%和55.6%,妊高征组患者胎盘组织中HSP70阳性表达率明显高于对照组（χ²=6.599,P=0.010）。妊高征组患者中18例HIF-1α阳性表达的胎盘组织全部HSP70表达阳性（100.0%）,而4例HIF-1α阴性表达的胎盘组织有2例HSP70表达阴性（50.0%）,两者表达存在明显的正相关关系（r=0.671,P=0.001）。结论：妊高征患者胎盘组织中HIF-1α和HSP70呈高表达,且两者的表达呈正相关关系。     

采用反义寡核苷酸探讨HSP70对活性氧所致心肌细胞损伤的影响

目的探讨HSP70对活性氧所致心肌细胞急性损伤的保护作用.方法用热休克预处理诱导新生大鼠心肌细胞中HSP70的表达,采用HSP70反义寡核苷酸阻断HSP70的表达,乳酸脱氢酶释放率和细胞总蛋白质合成能力来反映H2O2 0.5 mM所致心肌细胞损伤程度.结果H2O2引起心肌细胞乳酸脱氢酶释放率明显升高,而细胞总蛋白质的合成降低.热休克预处理导致心肌细胞中HSP70表达明显增加,并使H2O:所致心肌细胞LDH释放率显著降低,细胞总蛋白质的合成基本恢复正常水平.HSP70反义寡核苷酸很大程度上阻断了HSP70的表达及热休克预处理的心肌细胞保护作用.结论在热休克预处理减轻过氧化氢所致乳鼠心肌细胞急性损伤的作用中,HSP70发挥了最主要的作用.