儿童神经节成神经细胞瘤CT表现

儿童神经节成神经细胞瘤(又称节细胞成神经细胞瘤、节母细胞瘤，简称节母)是一种起源于交感神经系统较少见的恶性神经源性肿瘤。以往文献报道均认为它与成神经细胞瘤在病理和形态学均相似，但两者临床表现及预后明显不同。现将我院3例经手术与病理证实的节母细胞瘤临床表现及CT征象报告如下。     

成神经细胞瘤骨转移的X线诊断(附13例报告)

目的探讨成神经细胞瘤骨转移的X线表现及分型。方法分析13例成神经细胞瘤骨转移的X线表现，并根据X线表现将其分为溶骨型和成骨型。结果13例患者中，溶骨型9例，成骨型4例，各型病例均有其特征性的X线表现。结论根据患者年龄及特征性的X线表现，对成神经细胞瘤骨转移可作出诊断。     

Wilms瘤和腹膜后成神经细胞瘤的X线分析

Ｗｉｌｍｓ瘤和成神经细胞瘤均为小儿腹部常见的恶性肿瘤。本文报告了２０例Ｗｉｌｍｓ瘤和１０例腹膜后成神经细胞瘤，并从三个方面讨论了这二种肿瘤的ｘ线区别。（１）ＩＶＰ：前者肾盂肾盏破坏多见，显影延迟，密度较淡．肾盂肾盏受压移位，主要向内下方或上方．腹膜后成神经细胞瘤对肾盂肾盏破坏较前者次之，肾盂肾盏受压移位主要向外下方，无向上移位。（２）肿瘤转移：前者多发生肺转移，后者则以骨转移为多。（３）钙化：Ｗｉｌｍｓ瘤钙化率较低，可呈环形，蛋壳状或小斑点状，而后者钙化较多见，多为细砂样，颗粒状或斑块状。     

延迟整流钾通道在人AGS胃癌细胞的表达及Kv1.5对AGS细胞生长的影响

目的观察9种延迟整流钾通道在人AGS胃癌细胞的表达及下调Kv1．5表达对AGS细胞生长的影响。方法用RT-PCR方法检测Kv1．1、Kv1．2、Kv1．3、Kv1．5、Kv1．6、Kv2．1、Kv2．2、Kv3．1和Kv3．2d亚单位在AGS细胞的表达；用间接免疫荧光法证实Kv1．5的蛋白表达后，采用小干扰RNA（siRNA）下调Kv1．5表达，用MTT及流式细胞术观察其对细胞生长、细胞周期分布的影响。结果在AGS细胞中可检测到7种延迟整流钾通道的表达，其中Kv1．3、Kv1．5和Kv2．1的mRNA水平较高，Kv1．6和Kv3．1的水平较低。间接免疫荧光法证实Kv1．5主要表达于AGS的细胞膜上。用siRNA下调内源性Kv1．5的表达后，AGS细胞生长明显减慢，细胞阻滞于G1期，细胞增殖指数明显降低。结论在AGS细胞中有多种延迟整流钾通道的表达，Kv1．5可能通过对细胞周期的影响而参与胃癌细胞的增殖调节。     

增强MRI对小儿成神经细胞瘤分期的应用价值

目的：探讨增强MRI对成神经细胞瘤分期的应用价值和限度。方法：分析12年经手术或骨髓针吸检查证实的成神经细胞瘤的增强MRI表现。年龄7个月至5岁，平均3.7岁。全部病例行MR平扫与双倍剂量增强、三维增强MR血管造影（3D CEMRA）检查，其中6例同期行CT检查。参照国际成神经细胞瘤分期方案标准对本组病例进行影像分期。结果：平扫MRI与CT判断原发肿瘤大小和区域淋巴结转移的能力相近似。10例骨髓转移中，CT扫描6例均显著阴性，平扫MRI显示1例1个病灶，增强MRI显示10例46个病灶。6例CT分期：Ⅰ-Ⅱ期2例；Ⅲ期4例；无Ⅳ期病例。12例平扫MRI分期：Ⅰ-Ⅱ期2例；Ⅲ期9例；Ⅳ期1例。12例增强MRI分期：Ⅰ-Ⅱ期1例；Ⅲ期1例；Ⅳ期10例。结论：增强MRI是成神经细胞瘤最好的单一影像学检查方法，对显示远隔转移、椎管内生长的哑铃形肿瘤、骨髓针吸检查不能探及的转移病灶有明显优势。     

小儿腹膜后成神经细胞瘤影像学与病理的对照研究

目的 探讨ＣＴ、ＭＲＩ对小儿腹膜后成神经细胞瘤的诊断价值和限度。方法 对３２例中２０例术前同时行ＭＲＩ、ＣＴ检查者与术中所见对照,并对其中１９例术后离体肿瘤的ＭＲＩ、ＣＴ影像与病理大切片对照。结果 ＭＲＩ表现一般为Ｔ１Ｗ１中低信号,Ｔ２Ｗ１明显高信号,且可见低信号网格及肿瘤对血管的包绕。组织学基础：原始成神经细胞核大密集,无间质;瘤巢周围有神经纤维。ＣＴ表现肿瘤为不均匀低密度,可见钙化。术前判断肿     

钾通道阻断剂四乙铵对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究钾通道阻断剂四乙铵(TEA)对卵巢癌细胞(SKOV3)凋亡的影响.方法 将浓度为2×104/ml的卵巢癌细胞分别设对照组和不同浓度(1、5、10、20mmol/L)TEA组.将TEA作用于卵巢癌细胞,用MTT法检测细胞活性,采用Hoechest33258染色检测细胞凋亡,同时通过碘化丙啶(PI)染色,采用流式细胞仪检测细胞凋亡比率.结果 在TEA浓度为1、5、10、20mmol/L时,对SKOV3细胞增殖的抑制率分别为8.61%、18.86%、46.63%和65.22%,表明TEA对SKOV3细胞的增殖有抑制作用并呈现明显的剂量依赖性,当TEA浓度=5mmol/L时,对SKOV3细胞增殖的抑制效应明显;Hoechst33258染色结果显示,TEA能诱导SKOV3细胞凋亡;流式细胞仪检测结果表明,SKOV3细胞经TEA浓度为1、5、10、20mmol/L处理后48h,其细胞凋亡率分别为9.23%、21.57%、54.22%和71.06%,与对照组(2.08%)比较,差异有显著性(P＜0.01),提示TEA可诱导SKOV3细胞凋亡,且TEA促进SKOV3细胞凋亡作用具有一定的剂量依赖性.结论 钾通道对SKOV3细胞增殖具有重要调控作用,钾通道阻断剂TEA阻断钾通道后可促进细胞凋亡.     

气管平滑肌细胞钾通道与麻醉药

气管平滑肌(airway smooth muscle,ASM)上主要分布有4种钾通道:钙激活性钾通道、电压依赖性钾通道、内向整流钾通道、ATP敏感性钾通道。钾通道参与调节ASM细胞的膜电位水平和兴奋性以及ASM的张力、气道反应性等多种生理功能。在手术麻醉期间可因病人的气道高反应性及麻醉药物等因素影响气道平滑肌(ASM)的钾通道,从而对ASM的舒缩功能带来严重干扰。本文对ASM上的钾通道的基本特性及相关联的信号传导通路,麻醉药对钾通道的作用进行综述。     

人胎盘血管钾通道研究进展

对细胞正常生物功能有重要作用的钾通道已成为细胞电生理学研究的热点,然而胎盘组织上关于钾通道的相关研究还比较少,这可能就导致一些妊娠并发症没有被归为“通道病”。其它器官的血管研究中发现钾通道的功能状态可能与平滑肌细胞和内皮细胞关系密切,在胎儿胎盘循环中也可能存在此现象。本文主要通过胎盘血管钾通道的表达和功能与其它组织的基本对照概括正常妊娠和病理妊娠中胎盘血管钾通道的表达和功能的研究进展。     

儿童腹膜后成神经细胞瘤侵犯肾脏与肾母细胞瘤的鉴别诊断

目的评价儿童腹膜后成神经细胞瘤侵犯肾脏与肾母细胞瘤的CT表现鉴别要点。方法分析经手术证实的有明确肾脏侵犯13例腹膜后成神经细胞瘤的CT征象，并与同期经手术证实的15例肾母细胞瘤进行对照。结果13例成神经细胞瘤中12例表现为不规则肿块，11例边界不清，10例包含钙化，9例腹膜后血管受侵犯，12例有腹膜后和膈脚后淋巴结转移；15例肾母细胞瘤中，12例呈圆形肿块，2例边界不清，2例有钙化，2例腹膜后血管受侵犯，3例有腹膜后淋巴结转移；无膈脚后淋巴结转移表现。其中神经母细胞瘤的肿瘤分叶征、钙化、腹膜后和膈脚后淋巴结转移、腹主动脉和下腔静脉包埋均较肾母细胞瘤常见。其中膈脚后淋巴结转移和腹膜后血管包埋对于诊断神经母细胞瘤具有较高价值。结论膈脚后淋巴结转移和腹膜后血管包埋是成神经细胞瘤的特征性表现，对于鉴别腹膜后成神经细胞瘤与肾母细胞瘤具有重要的意义。     

HERG编码的钾离子通道与新药评价

由人类ether--àgo-go相关基因(HERG)编码的钾离子通道在人类生理、病理过程中扮演着十分重要的角色。在心肌细胞中,HERG钾通道影响心脏动作电位的复极过程,是绝大多数能引起心肌细胞QT间期延长药物的作用靶标,它已成为新药研发早期,评价候选化合物心脏毒性的分子靶标。     

动脉平滑肌细胞和心肌细胞钾通道的膜片钳全细胞记录技术

目的：介绍一种动脉平滑肌、心室肌细胞急性酶分离方法，并在该分离技术的基础上采用膜片钳全细胞记录方式研究细胞钾离子通道的特性。方法：采用胶原酶Ⅰ(1mg／ml)、木瓜蛋白酶(5mg／ml)消化分离大鼠肺内动脉平滑肌细胞；用链霉蛋白酶E(1mg／ml)、胶原酶Ⅰ(1mg／ml)消化分离大鼠尾动脉平滑肌细胞；用链霉蛋白酶E(0．5mg／ml)灌流消化、分离得到豚鼠心室肌细胞。结果：以上分离的细胞数量多，形态正常，胞壁光滑完整，活性好。于4℃无钙液中保存，8h内可用于膜片钳全细胞记录。记录出的外向电流可被钾通道阻断剂CsCl及TEA所阻断。结论：用酶急性分离的动脉平滑肌和心室肌细胞应用于膜片钳研究中具有快速、经济、简便易行等优点。     

慢病毒介导的siRNA靶向CD47基因对人喉癌细胞Hep-2增殖、凋亡的影响

目的 探究慢病毒载体介导siRNA抑制CD47基因表达后对人喉癌细胞株Hep-2体外增殖凋亡的影响.方法 构建慢病毒载体,将靶向CD47基因的siRNA慢病毒转染至Hep-2细胞;用荧光显微镜行细胞形态学变化观察;RT-PCR检测细胞CD47 mRNA表达的变化;Western blotting检测CD47蛋白表达的变化情况;MTT法检测细胞的增殖凋亡情况.结果 CD47-siRNA慢病毒转染Hep-2细胞后,形态学观察显示CD47-siRNA能有效抑制Hep-2细胞增殖,细胞变形明显,体积变小,可见细胞坏死及凋亡.RT-PCR和Western blotting检测显示,CD47的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),使CD47 mRNA表达减少76％～82％,CD47蛋白表达减少77％;慢病毒转染细胞在48h后MTT检测细胞凋亡率明显提高(P＜0.01).结论 慢病毒介导的siRNA干扰CD47基因表达后,明显抑制了喉癌Hep-2细胞CD47的表达并且诱导了Hep-2凋亡.     

RNA干涉抑制NIH3T3细胞中外源PC-1基因表达

目的：获得能有效抑制PC—1基因表达的RNAi靶标，用RNAi技术研究PC-1基因表达在前列腺癌中的作用。方法：用DNA重组技术构建了可表达短发夹RNA的重组质粒，将重组质粒与表达PC-1-EGFP融合蛋白的质粒共转染NIH3T3细胞，通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达差异，从5个候选靶标中初筛出最合适的RNAi靶标，再通过RT—PCR和Western印迹从mRNA水平和蛋白质水平检测该RNAi靶标抑制PC-1基因表达的效果。结果：利用RNA干涉有效靶点抑制了NIH3T3细胞中外源PC-I基因表达。结论：这一策略适合大量筛选：RNAi有效靶标序列，其结果为研究RNAi技术降低PC-1基因的表达对前列腺癌细胞的影响奠定了基础。     

HIP1基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响

目的研究HIP1基因沉默对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。方法构建靶向HIP1的shRNA表达载体pSilence-shHIP1,应用脂质体转染到PC-3细胞,RT-PCR检测HIP1基因沉默效果,Western blotting确认有效作用靶点。通过细胞划痕实验和细胞生长曲线研究HIP1基因对PC-3细胞增殖的影响。结果转染PC-3细胞后,沉默HIP1基因效率达83%(P<0.01);Western blotting证实该基因片段为抑制HIP1的有效作用靶点。细胞划痕实验和生长曲线显示HIP1基因沉默可抑制PC-3细胞的增殖。结论 pSilence-shHIP1表达载体可特异性地抑制HIP1基因的表达,沉默HIP1基因可抑制PC-3细胞增殖和迁移。     

利用RNAi技术抑制ARPC2基因表达的研究

目的 构建pSUPER-ARPC2表达载体,并在真核细胞中进行表达,验证ARPC2基因表达是否受到抑制。方法 设计特异性针对ARPC2基因的寡核苷酸序列,退火后利用常规酶切、连接方法将其重组至pSUPER basic载体中。对阳性克隆进行酶切和测序鉴定后,转染HEK293细胞,利用RT-PCR和Western blot检测ARPC2基因的表达情况。结果 构建的pSUPER-ARPC2载体导入HEK293细胞时,ARPC2基因的表达受到抑制,蛋白合成减少。结论 成功构建了ARPC2的RNAi表达载体,并证实其能对ARPC2基因的表达产生抑制作用,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料。     

HT29细胞黏着斑激酶表达与其对5-氟尿嘧啶敏感性的关系研究

目的构建人结肠癌细胞株HT29的RNA干扰(RNAi)表达载体以抑制黏着斑激酶(FAK),检测FAK沉默后细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的变化。方法利用针对FAK基因的特异性寡核苷酸序列及对照序列构建重组体,酶切并测序鉴定,用脂质体2000转染细胞,G418筛选。采用RT-PCR和免疫组化检测干扰前后细胞内FAK的表达变化,MTT法检测细胞对5-FU敏感性的变化。结果酶切鉴定和测序证实插入序列完全正确。靶向FAK干扰后,免疫组化显示FAK蛋白表达显著降低,RT-PCR显示FAKmRNA的表达下调了76.94%,MTT显示HT29细胞对5-FU敏感性较其他组显著提高,IC50值明显下降(P<0.05)。结论成功构建靶向FAK的RNAi载体并有效抑制了FAK的表达,后者显著提高了HT29细胞对5-FU的敏感性,为寻求新的基因治疗方法提供了可能。     

大鼠壁细胞K+离子通道特性的研究

目的研究大鼠壁细胞K^＋离子通道的特性，探讨其在生理病理过程中的作用。方法分离大鼠壁细胞，采用膜片钳方法，对大鼠壁细胞K^＋离子通道进行全细胞电生理记录，分析壁细胞K^＋离子通道的基本特性。结果10mM氯化TEA部分阻断壁细胞外向去极化K^＋离子通道电流。10mM乙酸TEA、10mM氯化钡、10mM乙酸钡能使壁细胞外向去极化K^＋离子通道电流增加。结论大鼠壁细胞的全细胞K^＋离子电流具有电压依赖性，兼有外向整流性和内向整流性。     

抑制NRP2表达对淋巴管内皮细胞小管成型的影响

目的 探讨抑制神经纤毛蛋白质2(NRP2)基因表达对人淋巴管内皮细胞(LECs)体外形成小管能力的影响.方法从人新鲜包皮中分离纯化LECs,并进行鉴定.实验设NRP2-RNAi/LECs组、mock/LECs组和hECs组,三组分别转染pGensil-NRP2(携带NRP2 siRNA的真核表达载体)、pGensil-1(空载体)及正常LECs细胞.采用RT-PCR和Western blotting检测NRP2 mRNA和蛋白的表达;绘制细胞生长曲线以观察各组细胞生长的差异.对细胞进行三维胶培养,计数小管样结构的数量,并测量小管外径、内径和管壁厚度.结果 与hECs组和mock/LECs组比较,NRP2-RNAi/LECs组NRP2表达水平明显下调(P<0.05),而前两组间无显著差异(P>0.05).生长曲线显示三组细胞的增殖能力无显著差异,均于接种后3～5d进入对数生长期,6～7d进入停滞期.三维胶培养形成的管样结构在NRP2-RNAi/LECs组很少见,其管样结构的数量及小管外径、内径、管壁厚度都明显低于mock/LECs组和hECs组(P<0.05),而后两组间无显著差异(P>0.05).结论 抑制NRP2的表达可抑制LEGs在体外形成小管的能力,并可能抑制肿瘤淋巴管的生成.