转移力不同的肺癌克隆细胞中nm23—H1基因产物NDPK的表达

目的 比较转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１表达产物核苷酸二磷酸激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｄｉｐｈｓｏｐｈａｔｅ ｋｉｎａｓｅ,ＮＤＰＫ）在转移力不同的肺癌克隆株中的表达。方法 通过单细胞克隆技术及裸鼠接种筛选出高转移及低转移的人肺巨细胞克隆细胞株及高思考多的人肺腺癌克隆细胞株,用ＬＳＡＢ免疫组化法检测ｎｍ２３－Ｈ１基因产物ＮＤＰＫ的表达。结果 ＮＤＰＫ在高转移及低转移的人肺巨细胞癌克隆细胞移植瘤及转移     

人肺癌不同程度免疫缺陷小鼠的移植及其高转移模型的建立

将不同转移特性的人肺巨细胞癌PLA-801C、PLA-801D、PLA-801DL及人肺腺癌Anip973四株裸鼠皮下移植瘤作为瘤源．分别移植于^60Co-r辐射裸鼠、单纯脾切除或复合^60Co-r辐射脾切除裸鼠、SOID小鼠．观察移植瘤转移情况。结果表明：脾切除或复合^60Co-r脾切除裸鼠更有利于移植瘤转移表型表达，在裸鼠及SCID小鼠体内未发现转移的PLA-801C移植瘤在脾切除裸鼠出现淋巴结转移，提示高转移瘤株与低转移瘤株是一个相对概念．肿瘤转移表型的表达是肿瘤与宿主相互作用的结果。     

不同转移特性人肺癌裸鼠移植瘤模型的建立及复制

以人肺巨细胞癌细胞纱ＰＬＡ－８０１的两个细胞克隆Ｃ株及Ｄ株，建立了ＰＬＡ－８０１Ｃ及ＰＬＡ－８０１Ｄ裸鼠皮下移植瘤模型，以人肺腺癌腺鼠植移瘤培养细胞Ａｎｉｐ９７３，复制了Ａｍｉｐ９７３裸鼠皮下移植瘤及腹水瘤模型，对其生物学特性进行了研究，这４株移植瘤模型的淋巴结及肺转移率由低高依次为ＰＬＡ－８０１Ｃ皮下瘤（０％，０％），Ａｎｉｐ９７３皮下瘤（８．６％，４．３％）Ａｎｉｐ９７３腹水瘤（１００％，１２     

不同转移潜能的人前列腺癌细胞原位转移模型的建立与比较

目的 建立不同转移潜能的人前列腺癌细胞转移模型，并比较其结果。方法 利用人前列腺癌细胞系PC3单克隆细胞株裸鼠皮下移植瘤，通过外科原位移植技术植入BALB／c-nu／nu雄性裸小鼠，建立人前列腺癌高、低转移细胞株转移模型；并观察比较两细胞株转移模型的原位成瘤率、自发转移率、两细胞株形态学特征和转移抑制基因CD44s的表达。结果 人前列腺癌高转移细胞株裸鼠原位种植后原位成瘤率100％，主动脉旁淋巴结转移率为100％，低转移细胞株裸鼠原位种植后原位成瘤率100％，主动脉旁淋巴结转移率为40％，两者主动脉旁淋巴结转移率差异有显著性（P〈0．05）。高、低转移细胞株形态学特征亦不同。CD44s蛋白在人前列腺癌高转移性单克隆细胞株PC3-H中的表达强度低于低转移性单克隆细胞株PC3-L。结论 遗传背景相似的人前列腺癌高、低转移细胞株原位移植转移模型为研究人前列腺癌转移机制提供了有力工具。     

转移力不同的肺癌细胞株对表皮生长因子和受体的表达

通过单细胞克隆技术及裸鼠接种从人肺巨细胞癌和腺癌细胞中筛选出高低转移力的克隆株（Ｊ１，Ｊ６，Ｘ１，Ｘ７），观察并比较其生物学特性，结果表明：转移力不同的细胞株形态学特征不同，且细胞的生长速度和移动能力和体内转移力不存在必然的联系。     

不同转移潜能骨肉瘤细胞株的建立与生物学性质的分析

目的:获得不同转移潜能的骨肉瘤细胞株. 方法:从我室建立的人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中通过有限稀释法获得不同的单细胞克隆,经过侵袭试验初筛后获得5株转移潜能不同的细胞株,再通过裸鼠体内连续传代法筛选出具有不同转移能力的细胞系.并利用细胞生长曲线测定,软琼脂克隆形成试验,流式细胞仪,裸鼠体内自发转移试验分析了他们的生物学性质. 结果:获得两株转移潜能不同的骨肉瘤细胞株.其中,H9为具有低转移潜能的骨肉瘤细胞株, E10为具有高转移潜能的骨肉瘤细胞株,其染色体众数分布特征与母系SOSP-9607基本相似,保持人类染色体核型;所至皮下移植瘤及肺转移瘤均符合人成骨肉瘤组织学特征,它们具有差异明显的体外生长速度,软琼脂克隆形成率H9(22±5)明显高于E10(98±12) ,裸鼠体内试验性自发肺转移率分别为10%和100%,流式细胞仪测定H9和E10的S期细胞分别为16.8%和21.0%. 结论:这两株细胞株来源于同一亲本,他们之间的差异集中在转移表型上,为今后利用分子生物学的方法筛选出转移相关基因从而为成骨肉瘤的转移机制及临床研究奠定基础.     

癌基因H－ras、P53、C－erbB－2蛋白产物在克隆化肝癌裸鼠模型的表达

在建立不同克隆化肝癌裸鼠移植瘤株模型的基础上，用ＡＢＣ免疫酶标记法研究了癌基因Ｈ－ｒａｓ、Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在不同克隆化肝癌裸鼠移植模型瘤组织中的表达，同时也检测了ＡＦＰ、ＣＥＡ、ＨＢｓＡｇ等的表达。结果表明：具有较强侵袭力和转移力的ＣＳ克隆株肝癌裸鼠移植瘤组织对Ｈ－ｒａｓ，Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白产物呈阳性反应，对ＡＦＰ、Ｐ５３呈弱阳性反应；而侵袭力弱的ＣＢ克隆株肝癌裸鼠移植瘤组织仅对Ｃ－ｅｒｂＢ－２呈弱阳性反应；其母系肝癌细胞株对上述癌基因蛋白产物呈弱阳性表达。提示Ｈ－ｒａｓ和突变型Ｐ５３基因的异常表达确实与肿瘤转移有一定相关性。     

人肝癌细胞株HCC-9724-P中转移相关基因的表达

目的研究人肝癌淋巴结转移性细胞株HCC-9724-P在裸鼠体内的转移特性,并观察转移相关基因nm23和PC NA的表达。方法将人肝癌淋巴结转移性细胞株HCC-9724-P及其母系细胞HCC-9724分别接种裸鼠,采用肝脏原位接种、尾静脉接种和皮下接种的方法,观察裸鼠体内成瘤时间,瘤体大小以及肝脏和淋巴结转移状况,采用免疫组化ABC的方法检测肝脏肿瘤标本中nm23和PCNA的表达。结果与母系细胞HCC-9724相比较,淋巴结转移性细胞株HCC-9724-P采用肝原位和尾静脉接种均可形成广泛的肝内侵袭和淋巴结转移,用裸鼠皮下接种成瘤时间短,瘤体大,但两种细胞形成的肿瘤均未发生转移,肿瘤转移相关基因PCNA在HCC-9724-P形成的肿瘤中均呈阳性表达,而肿瘤转移抑制基因nm23在HCC-9724-P中呈阴性表达。结论肝脏原位移植和裸鼠尾静脉注射是细胞株HCC-9724-P建立转移模型的良好途径,nm23和PCNA的表达水平进一步确定了细胞株HCC-9724-P的高转移特性。     

膀胱癌细胞CAR的表达对E1B缺失腺病毒抗瘤活性的影响

【目的】观察不同组织类型膀胱癌细胞株表达柯萨奇病毒腺病毒受体（coxsackie and adenovirus receptor，CAR）与E1B缺失腺病毒（H101）体外感染力及体内抗瘤活性的关系。【方法】体外通过流式细胞仪法（FCM）检测不同组织类型膀胱癌细胞株表面CAR表达，用MTT法测定病毒对它们的抑制率，以观察CAR表达与H101感染力的关系；利用裸鼠移植瘤模型，观察H101对不同移植瘤的抗瘤活性。【结果】膀胱癌细胞上CAR的表达量与H101的感染力呈正相关（r=0．952）；动物移植瘤实验结果显示，H101对CAR表达高的SCaBER移植瘤的抑制率较高，有效持续的时间也较长。【结论】膀胱癌细胞株上不同的CAR表达可直接影响H101的体内外抗瘤活性。     

罗格列酮活化PPARγ促进顺铂抑制人肺腺癌裸鼠移植瘤生长作用研究

观察过氧化酶体增殖物激活受体,配体罗格列酮与顺铂联合应用时人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤的作用,探讨ROZ活化PPAR γ.下调NFκB,从而诱导人肺腺癌细胞凋亡的作用机制.方法体外培养人肺康癌A549细胞,建立人肺腺癌(A549)细胞裸鼠移植瘤模型,28只荷瘤裸鼠随机分组进行实验.结果罗格列嗣,顺铂及两药合用均能抑制裸鼠移植瘤的生长.结论罗格列酮通过上调PPAR γ蛋白表达,下调NFκB蛋白表达,增强顺铂抑制人肺癌裸鼠移植瘤生长.     

肺癌nm23基因产物核苷二磷酸激酶的表达及其临床意义

为了探讨肺癌中ｎｍ２３基因产物核苷二磷酸激酶的表达及其临床意义，应用免疫组化方法（Ｓ Ｐ法）检测肺癌组织标本中ｎｍ２３基因产物核苷二磷酸激酶的表达．结果，ｎｍ２３基因产物核苷二磷酸激酶在肺癌中表达阳性率为５４％，其中鳞癌４２％，腺癌６９％，两者有显著差别．ｎｍ２３基因产物核苷二磷酸激酶表达与肺鳞癌有无淋巴结转移显著相关，与肺腺癌有无淋巴结转移无显著相关性．ｎｍ２３基因可能在不同类型肺癌的形成和转移过程中起不同的调节作用，在肺鳞癌淋巴结转移过程中发挥负性调控作用     

肿瘤转移相关基因mts1及nm23-H1在肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的探讨转移相关基因mts1及nm23-H1在人肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法对手术切除后新鲜的26例肺鳞癌和13例肺腺癌组织标本采用地高辛标记的mts1及nm23-H1 cDNA探针进行原位杂交.结果26例鳞癌中,淋巴结转移组11例,mts1 mRNA阳性表达9例,阳性率82%,nm23-H1 mRNA阳性表达8例,阳性率73%;无淋巴结转移组15例,mts1 mRNA阳性表达4例,阳性率27%,nm23-H1 mRNA阳性表达10例,阳性率67%.13例肺腺癌中,淋巴结转移组5例,mts1 mRNA阳性表达4例,阳性率80%,nm23-H1 mRNA阳性表达4例,阳性率80%;无淋巴结转移组8例,mts1 mRNA阳性3例,阳性率38%,nm23-H1 mRNA阳性表达6例,阳性率75%.结论mts1 mRNA表达在肺鳞癌的淋巴结转移与非转移组之间相差显著,在肺腺癌的淋巴结转移组与非转移组之间差异性无统计学意义;nm23-H1 mRNA表达在肺鳞癌、腺癌的淋巴结转移组与非转移组之间差异性不显著.     

nm23在人肺癌中表达的意义

为研究抑制基因ｎｍ２３表达产物二磷酸核甘激酸在人肺癌中的表达及其意义，应用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法对１２１例人非小细胞癌进行了分析。结果显示：ｎｍ２３在人吕中有较高的表达，阳性率为７４．２７％，在鳞癌的表达随着肿瘤的增大临床分期的进展而减弱，Ⅰ＋Ⅱ高于Ⅲ＋Ⅳ，中一高分化的高于低分化的。在腺癌的表达中一高分化的高于低分化的。鳞癌、腺癌及腺鳞癌３组中ｎｍ２３原发灶的表达水平明显高于转移灶（淋巴结），癌     

Expression of the Tumor Metastatic Suppressor Gene in Mouse Melanoma Model: Inverse Association to Metastatic Potential

Cancermetastasisisacomplexprocessinwhichtumorcellsofaprimaryneoplasminvadenormaltissues,enterandescapethevascularture,andgeneratesecondarytumorsormetastasessequentialsteps,eachofwhichislikelytoentailtheactivationand(or)repressionofspecificgenesorgeneproducts,dependingontileoriginandtypeoftumor[1'2].Atleast10differentoncogenshavebeenshowntoaugmentthetnetastasesofavarietyoftumorsinexperimentalam--.inals.The"m23isonesuchgenereportedtobedown--regulatedinmetastaticcellsofdifferentrodenttumorsL3].Th…     

肺癌中nm23基因的表达及意义

为研究ｎｍ２３基因产物与肺癌临床病理间的关系，应用ＳＡＢＣ免疫组化染色法检测６９例肺癌标本中ｎｍ２３基因产物二磷酸核苷激酶（ＮＤＰＫ）的表达。结果表明，ｎｍ２３在肺癌中有较高表达，阳性率为７９．７％（５５／６９），其中鳞癌１００％（３１／３１），腺癌７１．４％（２０／２８）、小细胞癌４０％（４／１０），在鳞癌中的表达较腺癌及小细胞癌高（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３的表达与肺鳞癌的分化程度无关（Ｐ＞０．０５）；与肺鳞癌、肺腺癌及其他癌有无肺门或纵隔淋巴结转移无关（Ｐ＞０．０５）。提示肺癌的形成与转移和多基因、多步骤的遗传学改变有关，应同时研究ｎｍ２３基因与其他因素，以准确反映肺癌恶性生物学行为的重要特点。     

nm23-H1基因在胃癌中表达及临床意义

目的探讨胃癌组织中转移抑制基因23-H1（nn／23-H1）蛋白表达与胃癌浸润转移的关系。方法采用免疫组化SP法,检测50例胃癌组织中nm23-H1蛋白。结果nm23-H1蛋白的表达与胃癌浸润深度和胃癌组织的分化程度无关,与淋巴结转移及TNM分期有关。结论nm23-H1能够抑制胃癌浸润转移。rim231H1蛋白低表达对判断病变进展及转移和复发有重要参考价值。     

nm23-H1与人卵巢癌转移及预后的关系

目的 探讨人卵巢癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的表达水平与卵巢癌病理组织学类型、转移倾向及患者预后的相关性。方法 分别采用原位杂交及免疫组化方法检测４１例人卵巢癌标本中 ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ及其编码蛋白 ＮＤＰＫ－Ａ的表达水平。结果 ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ及其编码蛋白 ＮＤＰＫ－Ａ在卵巢癌组织中的表达水平与卵巢癌的病理组织学类型无关（Ｐ＞０．０５）,与卵巢癌转移倾向呈负相关（Ｐ＜０．０５;Ｐ＜０．０１）,在原发灶中的表达水平明显高于转移灶（Ｐ＜０．０１）,与卵巢癌患者预后呈正相关（Ｐ＜０.０５）。在被测卵巢癌标本中,ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ与ＮＤＰＫ－Ａ两者间的表达水平具有正相关性。结论ｎｍ２３－Ｈ１基因在人卵巢癌的扩散转移过程中发挥抑制作用,它在卵巢癌组织中的表达水平可作为判断患者预后的重要指标。     

蛋白质组学方法识别nm23-H1为鼻咽癌的转移抑制蛋白和预后因子

目的:筛选鼻咽癌(NPC)转移相关蛋白质,为鼻咽癌防治提供科学依据。方法:采用二维电泳和质谱技术筛选不同转移潜能鼻咽癌细胞系(5-8F和6-10B)的差异表达蛋白质,并应用Western 印迹对部分差异蛋白质进行验证;使用siRNA抑制差异蛋白质nm23-H1的表达,分析nm23-H1表达水平对鼻咽癌细胞体外侵袭能力的影响; 应用免疫组织化学染色分析nm23-H1表达水平与鼻咽癌临床病理特征和预后的关系。结果:在不同转移潜能鼻咽癌细胞系中鉴定了15个差异表达的蛋白质,并选择性证实3个差异蛋白质;siRNA下调nm23-H1的表达能增强6-10B鼻咽癌细胞的体外侵袭能力;淋巴结转移鼻咽癌组织中nm23-H1的水平显著低于原发性鼻咽癌;nm23-H1的表达水平与鼻咽癌淋巴结和远处转移、临床分期和复发正相关;生存分析显示nm23-H1低表达的鼻咽癌患者预后差;多因素分析显示:nm23-H1表达水平是鼻咽癌患者独立的预后因子。结论:nm23-H1是鼻咽癌的转移抑制蛋白和预后因子。     

青年期大肠癌nm23/NDPK蛋白的表达及意义(附30例报告)

采用免疫组织化学S -P方法检测 30例青年期大肠癌癌组织中nm2 3 -H1基因产物 /核苷二磷酸激酶 (nm 2 3/NDPK )的表达。结果青年期大肠癌nm2 3/NDPK表达阳性率为 6 3 .33 % ,在组织分化低、原发灶浸润程度 (T3、T4 )、淋巴结及远处转移 ,DukesC、D期和血清CEA阳性的大肠癌中表达明显减低 (P <0 .0 5 ) ,与其他生物学指标无关 (P >0 .0 5 )。提示青年期大肠癌组织学类型 ,浸润转移程度与nm 2 3/NDPK蛋白的表达有密切相关 ,其有助于对青年期大肠癌生物学特性的进一步了解及对病人预后的判断