顺铂对人鼻咽癌CNE-2Z细胞端粒酶活性和细胞周期及凋亡的影响

目的研究顺铂对人鼻咽癌CNE-2Z细胞端粒酶活性、细胞周期及凋亡的影响,以探讨顺铂诱导CNE-2Z细胞凋亡与端粒酶活性水平的关系以及顺铂诱导鼻咽癌细胞凋亡的可能机制。方法分别以不同的药物浓度作用于体外培养的CNE-2Z细胞不同的时间,用TRAP-ELISA的方法定量检测CNE-2Z细胞在顺铂处理前后的端粒酶活性水平,同步进行细胞形态观察,流式细胞仪分析细胞周期的改变并检测凋亡。结果CNE-2Z细胞端粒酶呈阳性。用不同浓度的顺铂不同的时间作用于CNE-2Z细胞,结果细胞周期被阻滞在G1期,出现细胞凋亡,下调端粒酶活性,且呈时间依赖性及剂量依赖性。结论化疗药物顺铂可能是通过改变细胞周期分布(G1期阻滞)并同时诱导细胞凋亡、下调其端粒酶活性而发挥抗癌作用的,故可将化疗前后细胞端粒酶活性的变化作为鼻咽癌化疗敏感性指标之一。     

奥沙利铂对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞生长抑制和凋亡作用的研究

目的:观察奥沙利铂对人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞的生长抑制和凋亡作用,为其临床应用提供理论依据.方法:将浓度为0、10、20、40、80μg/ml的奥沙利铂与CNE-2细胞作用24、36、48h,用SRB法检测奥沙利铂对CNE-2细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞形态学变化.结果:奥沙利铂对CNE-2细胞的生长抑制率随药物浓度和作用时间的增加而增大.流式细胞仪分析显示奥沙利铂主要将CNE-2细胞阻滞于G2/M期.奥沙利铂浓度为80μg/ml 作用48小时,CNE-2细胞生长抑制率为(97.46 ± 1.76)%,CNE-2细胞的早期凋亡率为(4.48 ± 1.23)%、晚期凋亡和继发坏死率为(9.48 ± 2.30)%.荧光显微镜下观察用药组有凋亡细胞存在.结论:奥沙利铂能够抑制人低分化鼻咽癌细胞株CNE-2细胞的增殖,能使CNE-2细胞阻滞于G2/M期,可诱导CNE-2细胞发生一定的凋亡.     

顺铂诱导鼻咽癌CNE-2细胞自噬和凋亡的体外研究

目的:研究顺铂在体外应用对人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡与自噬的影响,并探讨其可能机制。方法:采用流式细胞术检测细胞周期分布、细胞凋亡率和MDC阳性率;RT-PCR法检测Mcl-1、Bcl-2、Bad、Bax、Caspase-3、Beclin1和LC3 mRNA表达。结果:在实验浓度范围内,顺铂作用CNE-2细胞48h后,2、4、8μg/ml各干预组总凋亡率分别为(8.71±1.03)%、(11.34±1.17)%、(15.30±2.24)%;MDC阳性率分别为(5.36±0.48)%、(7.52±0.32)%、(10.65±0.70)%;与0μg/ml组比较,G2/M期阻滞率分别增加45.97%、73.99%、267.34%;Bcl-2和Mcl-1 mRNA表达剂量依赖性降低,Bax、Bad、Caspase-3、Beclin1和LC3 mRNA表达剂量依赖性增加,且4μg/ml和8μg/ml与0μg/ml组比较,以上研究指标差别均有统计学意义(P<0.05)。结论:顺铂可诱导鼻咽癌CNE-2细胞发生G2/M期阻滞、细胞凋亡和自噬性细胞死亡,对CNE-2细胞具有杀伤作用,其分子机制可能与Bcl-2表达下调和Caspase-3、Beclin1表达上调有关。     

细梗香草皂甙对鼻咽癌CNE-2细胞的体外抗瘤作用

[目的]观察细梗香草皂甙抗人鼻咽癌CNE-2细胞的效应。[方法]细梗香草皂甙与CNE-2细胞共培养,采用MTT法检测细胞增殖,软琼脂实验检测细胞集落形成情况,流式细胞仪检测细胞凋亡。[结果]不同浓度细梗香草皂甙作用于CNE-2细胞后,细胞存活率显著性降低,48h细梗香草皂甙IC50为7.4μg/ml。CNE-2细胞经8μg/ml细梗香草皂甙处理后,软琼脂集落形成能力下降,集落形成数为119±11个,比对照组（297±24个）低;细梗香草皂甙组的凋亡率达16.43%±3.1%,而对照组为9.34%±2.3%。[结论]细梗香草皂甙对鼻咽癌CNE-2细胞株有抑制增殖和诱导凋亡的作用。     

塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2细胞放疗的增敏作用

目的:探讨塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用及其可能机制。方法:四唑盐比色法（MTT）测定塞来昔布对人鼻咽癌CNE-2细胞株的抑制率。采用克隆形成实验检测塞来昔布处理的CNE-2细胞经不同剂量X 线(0、2、4、6、8 和10Gy)照射后的存活分数(SF),并通过单击多靶模型拟合细胞存活曲线,计算增敏比(SER)。流式细胞仪（FCM）分析细胞周期分布及凋亡率。结果:MTT实验显示塞来昔布在（10～80）μg/ml范围内对CNE-2细胞有抑制作用,抑制率与浓度、时间呈依赖关系;在2～10Gy照射范围内,10、20、40、80μg/ml塞来昔布处理后的SF均低于0μg/ml(P<0.05),且SF随塞来昔布浓度的增加而降低;相对于0μg/ml,10、20、40、80μg/ml塞来昔布处理后的SER分别为1.06、1.79、2.29 和3.34;流式细胞仪测得塞来昔布可呈浓度依赖的方式诱导CNE-2细胞凋亡(P<0.05),S期细胞比例降低,G2/M期细胞比例升高。结论:塞来昔布能抑制人鼻咽癌CNE-2细胞增殖,诱导CNE-2细胞细胞周期阻滞,促进细胞凋亡,具有放疗增敏作用。     

靶向干扰Spy1表达增强食管癌化疗敏感性的研究

[目的]探讨抑制Spy1表达后食管癌细胞对化疗药物顺铂敏感性的变化。[方法]在食管癌Eca-109细胞中转染靶向Spy1的si RNA,采用RT-PCR和Western Blot检测Spy1的表达情况;MTT法检测抑制Spy1表达后对Eca-109细胞生长和对顺铂化疗敏感性的影响;流式细胞术检测干扰Spy1对细胞周期的影响。[结果]转染Spy1 si RNA后,食管癌Eca-109细胞中Spy1的m RNA和蛋白水平明显下降;MTT结果显示顺铂对Eca-109细胞的半数抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50)由4.56±1.23μg/ml降至1.12±0.09μg/ml;转染Spy1 si RNA联合顺铂IC50处理使细胞存活率由(64.7±3.8)%降至(46.8±4.2)%;细胞周期更多阻滞于G0/G1期(P<0.05)。[结论]靶向干扰Spy1表达可抑制食管癌细胞的生长,增强顺铂对肿瘤细胞的杀伤作用,其机制与细胞阻滞于G0/G1期有关。     

高温合并顺铂对人肺腺癌细胞株H1299的协同杀伤作用

目的:观察高温合并顺铂对人肺腺癌细胞株H1299的协同杀伤作用。方法:用CCK-8法检测高温处理或未处理的细胞对顺铂的敏感性。单独42℃作用2h、顺铂10μg/ml作用24h和两者联合作用后,采用CCK-8法检测细胞抑制率和流式细胞仪分析细胞各时相DNA含量,观察两者对细胞毒性和细胞周期的影响。结果:高温作用后,细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)从9·51μg/ml降低至6·07μg/ml;高温和顺铂联合作用对细胞有明显的协同杀伤作用,流式细胞检测也显示高温对细胞周期有明显的影响,G0/G1期细胞比例明显增加,S期细胞比例明显下降。结论:高温可以明显提高H1299细胞对顺铂的敏感性。     

莪术油对鼻咽癌CNE-2细胞的凋亡及放疗增敏机制的影响

目的 探讨莪术油、莪术油联合γ-射线照射对鼻咽低分化鳞癌细胞株CNE-2的增殖抑制和诱导凋亡作用;分析莪术油是否具有放疗增敏的作用,并研究其机制.方法 体外培养CNE-2细胞,莪术油以体外直接加药的方式作用于CNE-2细胞,采用MTT、流式细胞术、电镜等分子生物学手段,检测莪术油单用或联合γ-射线对CNE-2的诱导凋亡作用、放疗增敏作用.结果 莪术油单独使用,对CNE-2细胞有确切的增殖抑制及诱导凋亡作用,并与常规化疗药物5-Fu有相近的抑制作用(P>0.05).莪术油的药物抑制作用呈现浓度依赖性,最低起效浓度为10μg/ml,最佳作用时间为48小时;5μg/ml、100μg/ml、300μg/ml的莪术油联合100 cGy的γ-射线作用2天后凋亡率由0.5%、2.15%、10.2%显著提高到8.6%、14%和26%,细胞的死亡率均在5%以下有明显的协同增效作用(P<0.01);联合作用96h后试验组的细胞主要以死亡为主,凋亡较少;500μg/ml的莪术油主要导致细胞死亡,有明显的细胞毒性.流式细胞仪结果显示较高浓度时,莪术油使CNE-2细胞阻滞在G1期.电子显微镜观察细胞凋亡的超微结构可以看到凋亡小体.结论 莪术油可以抑制鼻咽癌细胞CNE-2的增殖并诱导其凋亡;莪术油和100 cGy的γ-射线联合作用有明显的增敏作用;其作用机制与诱导肿瘤细胞发生凋亡及影响细胞生长周期有关.     

盐酸米托蒽醌通过PI3K途径诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡

目的:探讨盐酸米托蒽醌对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:采用CCK-8法观察盐酸米托蒽醌对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响;AO/EB染色法观察凋亡细胞形态;流式细胞术检测细胞内线粒体膜电位;Western blot法检测PI3K/Akt信号相关蛋白表达。结果:盐酸米托蒽醌可明显抑制鼻咽癌细胞CNE-2的增殖,且呈时间和剂量依赖性。24h和48h半数抑制浓度IC50值分别为1.9μg/ml和0.1μg/ml。凋亡染色显示细胞在药物作用48h后出现细胞核染质浓缩、边缘化以及凋亡小体形成等细胞凋亡的形态特征;流式检测到药物处理后的细胞线粒体膜电位明显降低(P<0.05);Western blot显示药物呈剂量依赖地抑制p-Akt、Bcl-2蛋白的表达,上调Bax和Caspase-3蛋白的表达。结论:盐酸米托蒽醌可显著抑制鼻咽癌细胞CNE-2的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与其降低细胞线粒体膜电位,并抑制PI3K/Akt信号通路有关。     

反义Snail转录因子诱导MG-63细胞凋亡增加顺铂化疗敏感性的研究

[目的]探讨反义Snail转录因子对人骨肉瘤细胞株MG-63顺铂化疗敏感性的影响。[方法]用脂质体转染法将高转移性骨肉瘤细胞株MG-63分别转染反义Snail质粒（pGenesil-snailAS）和空载体质粒（pGenesil）。MG-63组（对照组）、MG-63/pGenesil组和MG-63/pGenesil-snailAS组细胞分别与浓度为0、0.5、1、5、10、15、20μg/ml顺铂作用72h。MTT法测定各组细胞的存活率并计算IC50,FCM检测细胞凋亡,Westernblot检测各组细胞Snail蛋白表达。[结果]细胞稳定转染pGenesil-snailAS后,细胞内Snail蛋白表达明显被抑制。MG-63、MG-63/pGenesil和MG-63/pGenesil-snailAS组细胞的顺铂IC50分别为14.0±1.8、12.6±1.6和2.8±0.5μg/ml,MG-63/pGenesil-snailAS组细胞对顺铂作用的敏感性增加了5倍。顺铂对MG-63/pGenesil-snailAS组细胞所诱导的凋亡比MG-63组和MG-63/pGenesil组显著。[结论]反义Snail转录因子能诱导人骨肉瘤细胞株MG-63凋亡并抑制其生长,增加其对顺铂化疗敏感性。     

莪术油对鼻咽癌CNE22 细胞的凋亡及放疗 增敏机制的影响

 目的　探讨莪术油、莪术油联合γ2射线照射对鼻咽低分化鳞癌细胞株CNE22 的增殖抑制和诱 导凋亡作用;分析莪术油是否具有放疗增敏的作用,并研究其机制。方法　体外培养CNE22 细胞,莪术 油以体外直接加药的方式作用于CNE22 细胞,采用MTT、流式细胞术、电镜等分子生物学手段,检测莪 术油单用或联合γ2射线对CNE22 的诱导凋亡作用、放疗增敏作用。结果　莪术油单独使用,对CNE22 细胞有确切的增殖抑制及诱导凋亡作用,并与常规化疗药物52Fu 有相近的抑制作用( P > 0. 05) 。莪术 油的药物抑制作用呈现浓度依赖性,最低起效浓度为10μg/ ml ,最佳作用时间为48 小时; 5μg/ ml 、100 μg/ ml 、300μg/ ml 的莪术油联合100 cGy 的γ2射线作用2 天后凋亡率由0. 5 %、2. 15 %、10. 2 %显著提高 到8. 6 %、14 %和26 % ,细胞的死亡率均在5 %以下有明显的协同增效作用( P < 0. 01) ;联合作用96h 后 试验组的细胞主要以死亡为主,凋亡较少;500μg/ ml 的莪术油主要导致细胞死亡,有明显的细胞毒性。 流式细胞仪结果显示较高浓度时,莪术油使CNE22 细胞阻滞在G1 期。电子显微镜观察细胞凋亡的超微 结构可以看到凋亡小体。结论　莪术 油可以抑制鼻咽癌细胞CNE22 的增 殖并诱导其凋亡;莪术油和100 cGy 的 γ2射线联合作用有明显的增敏作用; 其作用机制与诱导肿瘤细胞发生凋亡 及影响细胞生长周期有关。     

紫草素衍生物SYUNZ-7的抗肿瘤作用及其机制的初步研究

背景与目的:实验证明天然紫草素类化合物及其衍生物具有不同程度的细胞毒作用和抗肿瘤作用。本实验研究紫草素萘茜类衍生物[2或3,11-双苯硫基-6-异己萘茜]代号为SYUNZ-7的体内外抗肿瘤作用,并探讨其作用机制。方法:应用MTT法检测SYUNZ-7对多种肿瘤细胞的体外抗增殖作用,并计算IC50值;用小鼠移植肿瘤模型和人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型进行SYUNZ-7的体内抗瘤实验;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化;免疫组化法检测SYUNZ-7对血管生成的影响。结果:SYUNZ-7对人肺癌细胞GLC-82、人鼻咽癌细胞CNE2、人口底癌细胞KB、人胃癌细胞MGC-803和人肝癌细胞HepG2的IC50值分别为(2.18±0.04)μg/ml、(4.17±0.09)μg/ml、(5.41±0.10)μg/ml、(6.41±0.14)μg/ml和(9.99±0.21)μg/ml。SYUNZ-7对GLC-82细胞的体外抗增殖作用最强。小鼠艾氏腹水癌EAC(实体型)抗瘤实验结果显示,在1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg和8mg/kg的剂量下SYUNZ-7的抑瘤率分别为(40.5±0.1)%、(50.9±2.3)%、(61.3±1.8)%和(65.6±7.4)%(P<0.01)。1mg/kg、2mg/kg和4mg/kg的SYUNZ-7对CNE2细胞裸小鼠移植瘤的抑瘤率分别为24.7%、38.3%和41.2%(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,SYUNZ-7能浓度依赖性和时间依赖性诱导CNE2细胞的凋亡;随着作用时间的延长或处理浓度的增加,SYUNZ-7可以阻滞CNE2细胞由S期向G2/M期转化。免疫组化结果显示:SYUNZ-7能够呈浓度依赖性抑制CNE2细胞裸小鼠移植瘤的血管生成。结论:紫草素萘茜类衍生物SYUNZ-7具有较强的体内外抗瘤作用,其抗瘤机制与诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期和抑制血管生成有关。     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂ZD1839对鼻咽癌细胞系的作用

ZDl839是一种喹唑啉类化合物,它是一种口服的选择性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,已被美国食品药品管理局批准用于治疗晚期非小细胞肺癌。鼻咽癌是一种存在表皮生长因子受体表达的上皮源性的恶性肿瘤,ZDl839对其作用如何还未见有报道。本实验通过体外研究初步探讨ZDl839在鼻咽癌治疗中的可能价值。     

羽扇豆醇对鼻咽癌细胞生物学功能和放、化疗敏感性的影响及凋亡机制研究

目的:探讨羽扇豆醇对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、周期及对放、化疗敏感性的影响,同时探讨其凋亡机制。方法:CCK-8法检测羽扇豆醇对CNE2细胞增殖的影响以及联合顺铂对CNE2细胞的增殖抑制作用有无增强;细胞划痕、Transwell实验、流式细胞术分别用于检测羽扇豆醇对CNE2细胞迁移、侵袭、凋亡及周期的影响;平板细胞克隆形成实验检测羽扇豆醇联合X线放射处理对CNE2细胞克隆形成能力的影响;Western blot法检测羽扇豆醇对CNE2细胞凋亡信号通路中关键蛋白Bcl-2、Bax及Cleaved caspase-3的影响,探究羽扇豆醇的抗肿瘤机制。结果:羽扇豆醇呈药物浓度和时间依赖性地抑制CNE2细胞的增殖,选取羽扇豆醇40、60、80 μmol/L用于后续实验。羽扇豆醇显著降低了CNE2细胞的迁移、侵袭能力,出现典型的凋亡特征,G1期延长,S期、G2期缩短,提高了顺铂或X线放射对CNE2细胞增殖及克隆形成的抑制能力,同时引起CNE2细胞中Bax、Cleaved caspase-3蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达下调（所有结果均P＜0.001或P＜0.000 1）。结论:羽扇豆醇抑制CNE2细胞的增殖、迁移、侵袭,诱导CNE2细胞的凋亡,引起细胞周期阻滞在G1期,同时可提高顺铂及X射线对CNE2细胞的敏感性。证实了羽扇豆醇诱导CNE2细胞凋亡可能与调控凋亡信号通路中凋亡蛋白Bax、凋亡启动因子Cleaved caspase-3升高及抗凋亡蛋白Bcl-2降低有关。     

川芎嗪对人肺腺癌 A549细胞增殖、迁移和侵袭的作用与机制

目的：探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）对人肺腺癌 A549细胞增殖及侵袭的影响。方法：川芎嗪治疗组分别用0.1μg/ ml、1μg/ ml、10μg/ ml、100μg/ ml、250μg/ ml 浓度的川芎嗪干预 A549细胞,同时设无药的阴性对照组及加顺铂的阳性对照组。24、48、72、96小时后,MTT 法检测川芎嗪对 A549细胞株增殖的抑制作用,划痕实验和 Transwell 法观测川芎嗪对 A549细胞株迁移侵袭能力的影响,采用细胞流式术检测川芎嗪对 A549细胞周期和凋亡的干预作用。结果：川芎嗪显著抑制 A549细胞的增殖,抑制 A549的迁移和侵袭,流式细胞术显示川芎嗪诱导 A549细胞发生 G1期阻滞和早期凋亡（P <0.05）。结论：川芎嗪对非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用可能是通过诱导 G1期细胞阻滞和早期凋亡引起的。     

Inhibition of cyclin D1 expression by cyclin D1 shRNAs in human oral squamous cell carcinoma cells is associated with increased cisplatin chemosensitivity

Cyclin D1 is a well-known cell cycle regulator. Recently, its pro-survival function has been revealed in several tumors. Because increasing expression of cyclin D1 is a common event in oral squamous cell carcinoma (OSCC) and has been correlated with cisplatin resistance, we investigated if cyclin D1 inhibition could increase cisplatin chemosensitivity of OSCC. Five cyclin D1 shRNAs were prepared and 3 were selected for subsequent experiments. IC50 values for cisplatin were determined by an MTT assay. Cisplatin-induced apoptosis and cell cycle block were investigated. A tumor transplantation model was generated to examine the cisplatin sensitivity of Tca/cisplatin after in vivo cyclin D1 silencing. The role of nuclear factor-kappaB (NF-kappaB) and cyclin-dependent kinase 4 (CDK4) in cyclin D1-mediated cisplatin resistance was also examined. The most effective shRNA resulted in 84.51% knockdown of the cyclin D1 protein level. After the transfection with the 2 most effective shRNAs, the cisplatin IC50 decreased from 5.88 microg/ml to 1.36 microg/ml and 2.47 microg/ml, although overexpression of cyclin D1 rendered OSCC cells more resistant to cisplatin treatment (IC50 increased from 6.43 microg/ml to 12.24 microg/ml). This decreasing IC50 was correlated with the down-regulation of cisplatin-induced NF-kappaB activity in cyclin D1 knockdown cells, and was independent of CDK4 function. In vivo tumor transplantation models also confirmed a cisplatin-sensitizing effect of cyclin D1 shRNA in OSCC. A TUNEL assay validated the increase in apoptosis as induced by cisplatin in cyclin D1 knockdown cells. Cyclin D1 may be an important target for future therapy in patients with OSCC.     

ECRG4增强鼻咽癌细胞对顺铂敏感性的初步研究

目的：研究 ECRG4在鼻咽癌细胞对顺铂反应性中的影响。方法：以不同浓度的顺铂分别处理ECRG4稳定转染的 CNE1细胞和对照细胞,MTT 实验检测 ECRG4高表达对鼻咽癌细胞对化疗敏感性的影响。流式细胞术、免疫荧光和 Western Blot 检测 ECRG4高表达对顺铂处理后的鼻咽癌细胞的细胞凋亡和细胞自噬的影响。用抑制细胞自噬的药物预先处理鼻咽癌细胞,观察该药物对 ECRG4高表达增强的鼻咽癌细胞化疗敏感性的影响。结果：和对照细胞相比,ECRG4的高表达显著增强鼻咽癌细胞对顺铂的敏感性。流式细胞术分析和细胞凋亡相关蛋白的 Western Blot 分析显示 ECRG4高表达对顺铂诱导的鼻咽癌细胞的细胞凋亡没有显著影响。免疫荧光和 Western Blot 分析显示 ECRG4的高表达上调自噬微管相关轻链蛋白3（LC3）的含量。同时抑制细胞自噬的药物可以降低 ECRG4高表达对 CNE1细胞对顺铂敏感性的促进作用。结论：ECRG4高表达促进鼻咽癌细胞对顺铂的敏感性,并且该作用是通过诱导细胞自噬的途径实现的。ECRG4有可能用于鼻咽癌个体化治疗方案的分子标记。     

香加皮提取物抗肿瘤活性的研究

背景与目的： 研究中药香加皮提取物的抗肿瘤活性,探讨其抗肿瘤机制。 材料与方法： 采用噻唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyltetrazolium bromide, MTT)法观察香加皮醇提物和水提物对MCF-7、TE-13、QG56、SMMC7721、T24、Hela、K562等肿瘤细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测肿瘤细胞的周期变化和对凋亡的影响。 结果： 香加皮醇提物和水提物均能明显抑制多种肿瘤细胞的增殖,呈浓度依赖性;醇提物的抑瘤作用(IC50<10 μg/ml)强于水提物(IC50<40 μg/ml),并且差异具有统计学意义(P<0.05)。香加皮醇提物可将MCF-7细胞阻滞于G0/G1期,并呈时间依赖性地诱导MCF-7细胞发生凋亡。10 μg/ml香加皮醇提物作用MCF-7细胞24 h,与对照组相比,G0/G1期细胞显著增多,作用48 h,凋亡率从对照组的0.70％±0.13％升高到13.54％±2.12％,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。 结论： 香加皮提取物对体外肿瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用,醇提物强于水提物,其抗瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。     

鲎血细胞多肽诱导HL-60细胞凋亡

目的：研究鲎血细胞多肽（下称鲎血多肽）诱导HL－60细胞凋亡的作用。方法：MTT法测定鲎血多肽对HL－60细胞的毒性和HL－60细胞的相对存活率,荧光显微镜观察HL－60细胞形态的变化,流式细胞仪鉴定细胞凋亡和分析细胞周期,扫描电镜观察细胞膜的改变。结果：鲎鱼多肽对HL－60细胞有明显的细胞毒性,IC50值为24μg/ml;荧光显微镜观察到凋亡细胞主要表现为细胞体积缩小,核染色质固缩,荧光染色增强。50－100μg/ml的鲎血多肽处理6h,HL－60细胞主要表现为细胞凋亡;而鲎血多肽浓度为200μg/ml时的主要为细胞坏死。50μg/ml鲎血多肽处理HL－60细胞0－12h,流式细胞仪检测到凋亡细胞亚二倍体峰出现,细胞周期分析G1期细胞减少,G2期细胞增加。鲎血多肽浓度为25－100μg/ml时,细胞凋亡率随浓度增加而增加,鲎血多肽为200μg/ml时,则主要为细胞坏死,凋亡细胞减少。扫描电镜观察发现,HL－60细胞用鲎血多肽处理后,细胞膜损伤,出现空洞。结论：鲎血细胞多肽能诱导HL－60细胞凋亡;凋亡的发生较早,与细胞膜受损有一定的关系;G1期细胞对鲎血多肽更敏感。