胞内钙参与低渗性膜牵引起豚鼠胃窦环行肌细胞毒蕈碱受体门控电流增加的过程

目的：研究在低渗性膜牵张引起豚鼠胃窦环行肌细胞卡巴胆碱诱发的毒蕈碱受体门控电流（ICCh)增加过程中胞内钙的作用。方法：采用传统全细胞膜片箝技术,对以胶原酶急性分离的单细胞进行低渗灌流,观察ICCh的变化。结果：低渗性膜牵张明显增强ICCh;ICCh阻断剂奎尼丁3μmol/L完全抑制ICCh和低渗膜牵张引起的ICCh增强效应;胞外无钙状态下低渗膜牵张引起的ICCh增强效应完全被抑制,但是单纯钙通道阻断剂尼卡地平5μmol/L或牵张刺激敏感阳离子通道阻断剂氯化钆100nmol/L不能阻断;同时用尼卡地平和氯化钆处理能够完全阻断低渗膜牵张引起的ICCh增强效应;用钙引发钙释放受体激动剂ryanodine处理也完全阻断低渗膜牵张引起的ICCh增强效应。结论：低渗性膜牵张增强ICCh,这种增强效应与胞外钙进入胞内并诱发钙引起的钙库释放有关。     

胞内钙参与低渗性膜牵张引起豚鼠胃窦环行肌细胞毒蕈碱受体门控电流增加的过程(英文)

目的:研究在低渗性膜牵张引起豚鼠胃窦环行肌细胞卡巴胆碱诱发的毒蕈碱受体门控电流(I_(CCh))增加过程中胞内钙的作用.方法:采用传统全细胞膜片箝技术,对以胶原酶急性分离的单细胞进行低渗灌流,观察I_(CCh)的变化.结果:低渗性膜牵张明显增强I_(CCh);I_(CCh)阻断剂奎尼丁3 μmol/L完全抑制I_(CCh)和 低渗膜牵张引起的I_(CCh)增强效应;胞外无钙状态下低渗膜牵张引起的I_(CCh)增强效应完全被抑制,但是单纯钙通道阻断剂尼卡地平5μmol/L或牵张刺激敏感阳离子通道阻断剂氯化钆100 nmol/L不能阻断;同时用尼卡地平和氯化钆处理能够完全阻断低渗膜牵张引起的I_(CCh)增强效应;用钙引发钙释放受体激动剂ryanodine处理也完全阻断低渗膜牵张引起的I_(CCh)增强效应.结论:低渗性膜牵张增强I_(CCh),这种增强效应与胞外钙进入胞内并诱发钙引起的钙库释放有关.     

低渗膨胀增加豚鼠胃窦环行肌细胞钙激活钾电流和延迟整流型钾电流

目的:观察低渗膨胀对豚鼠胃窦环行肌细胞钙激活钾电流和延迟整流型钾电流的影响。方法:采用传统全细胞膜片箱技术,对以胶原酶急性分离的单细胞进行低渗灌流,观察钾电流的变化。结果:低渗 灌流液(200 Osmmol/kg)可增加钙激活钾电流和延迟整流型钾电流,钙激活钾电流的增加可被四乙基胺4mmol·L~(-1)和Charybdotoxin 200nmol·L~(-1)完全抑制;延迟整流型钾电流的增加可被四乙基胺4mmol·L~(-1)部分抑制,可被4-氨基吡啶10mmol·L~(-1)完全抑制。两种钾电流的增加幅度无显著性差异(P>0.05)。钙激活钾电流在施加低渗灌流(17.0±4.8)s后增加;延迟整流型钾电流在(30.7±13.7)s后增加,两者的潜伏期存在显著性差异(P<0.05)。结论:低渗膨胀可增加钙激活钾电流和延迟整流型钾电流,这种增加效应可能与细胞容积调节有关。     

羧甲基甲壳胺对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流的作用

全细胞膜片钳制观察了羧遐发对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流（Ｉｃａ）的作用。实验结果显示：羟甲基甲壳胺能抑制心室肌细胞的Ｃａ＾２＋内流,Ｉｃａ减小,此作用具有明显的电压依赖性,对其反转电位无明显影响。羟甲基甲壳胺对Ｉｃａ的民具有明显的浓度依赖关系,浓度为０．０５％、０．１％、０．２％的羧甲基甲胺使Ｉｃａ分别减小１１．８％、３０％和４８．１％,最大效应浓度接近０．２５％。此外,停止给予羧甲基甲壳胺后,     

双苯氟嗪对豚鼠心室肌细胞L-钙电流的影响

目的:观察双苯氟嗪(Dip)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(I_(Ca-L))的影响。方法:酶解法制备单个心室肌细胞。应用全细胞膜片箝技术记录豚鼠单个心室肌细胞钙电流。结果:在0.3-30μmol/L范围内,Dip可浓度依赖性地降低电压依赖性激活I_(Ca-L)峰值,被Dip 3μmol/L所抑制的I_(Ca-L)在冲洗5min后可得到部份恢复。但Dip对I_(Ca-L)的电压依赖特征,最大激活电压,以及I_(Ca-L)稳态激活无明显影响。在Dip3μmol/L存在下,半数激活电压(V_(0.5))和斜率参数(к)与对照组相比,差异均无显著性。V_(0.5)分别为(-12.8±1.7)mV和(-13.2±2.4)mV,к分别为(7.1±0.4)mV和(7.5±0.5)mV(P>0.05)。Dip3μmol/L可明显使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性稳态失活。V_(0.5)分别为(-19.7±2.4)mV和(-31±6)mV,к分别为(3.6±0.3)mV和(1.8±0.2)mV(P<0.05).Dip 3μmol/L还使I_(Ca-L)从失活状态下的恢复明显减慢。结论:Dip主要作用于L-型钙通道的失活状态,加速钙通道失活,并使其从失活状态下恢复减慢,从而抑制I_(Ca-L)。     

胞内钙动员在硝普钠增加豚鼠胃窦环行肌细胞钙激活钾电流中的作用

AIM: To investigate the role of calcium mobilization in the calcium-activated potassium currents [IK(ca)] increasedby sodium nitroprusside (SNP), a nitric oxide (NO) donor, in gastric antral circular myocytes of the guinea pig.METHODS- A perforated patch-clamp technique was used, and the myocytes were isolated by collagenase.RESULTS: SNP 100 lamol/L significantly increased IK(Ca), and enhanced the spontaneous transient outward currents (STOC). SNP-induced increase of IK(Ca) was not blocked by extracellular calcium-free solution (containingegtazic acid 10μmol/L and nicardipine 5μmol/L, an L-type calcium channel blocker. And SNP 100μmol/Lsuppressed the L-type calcium currents (Ica). SNP-induced increase of STOC was inhibited by heparin 3g/L, apotent inhibitor of inositol triphosphate receptor (InsP3R). However, ryanodine 10μrnol/L, an inhibitor of calciuminduced calcium release (CICR), did not inhibit the effect of SNP-induced increase of STOC. Methylene blue (1μmol/L), an inhibitor of soluble guanylate cyclase, also inhibited such an effect. CONCLUSION: The increase ofIK(Ca) caused by SNP may be mediated by cGMP via IP3-sensitive calcium pools, however, extracellular Ca^2^ maynot be involved in the process.     

乙醇对豚鼠心室肌细胞钙钠离子通道电流的影响

目的：观察乙醇对豚鼠心室肌细胞L-型钙离子通道电流（IGLL）和电压依赖性钠离子通道电流（INa）的影响，并探讨两者在乙醇致心肌损伤中的意义。方法：采用蛋白酶消化的成年豚鼠单个心室肌细胞及膜片钳全细胞技术，记录不同浓度乙醇对ICal.和INa的作用。结果：（1）乙醇抑制ICaL峰值，24mmol/L和240mmol/L乙醇抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）24、80、240mmol／L乙醇使ICaL的电流-电压（I-V）曲线上移，在各测试电压下，电流均减小，但不影响曲线形状，用乙醇后最大激活电压仍在0mV左右。（3）24mmol／L乙醇基本不影响I、峰值，80、240mm01]L乙醇抑制I。峰值，与24mmol／L乙醇的抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）。（4）24mmol／L乙醇对INa的I-V曲线无明显影响。80、240mmol／L乙醇使INa的I-V曲线上移，在各测试电压下，电流均减小，曲线形状无明显改变，用药后最大激活电压仍在-30mV左右。结论：致毒浓度（24mmol／L）的乙醇对ICal.具有明显抑制作用，可导致心肌产生负性肌力作用，动作电位时程缩短，诱发心律失常。但致毒浓度（24mmol／L）的乙醇不影响INa，而致死浓度（80mmol／L）对INa有明显抑制作用。     

白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞钠电流的影响

目的 研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对豚鼠心室肌细胞钠电流(INa)的影响,探讨其心肌保护机制.方法 用全细胞膜片钳技术记录RES对单个心室肌细胞INa的作用.结果 RES(10,30,100 μmol·L-1)浓度依赖性的抑制豚鼠心室肌细胞INa,其中30 μmol·L-1对INa的抑制率为(17.3±3.1)%(P<0.005),100 μmol·L-1抑制率(52.7±10.2)%(P<0.01),抑制作用迅速,用药后3 min左右即开始起效,洗脱后均可以完全恢复;100 μmol·L-1使半数最大失活电压(V1/2)由(-89.3±2.0)mV变化到(-100.7±3.3)mV(P<0.005),RES未改变S和半数最大激活电压(V1/2).结论 RES浓度依赖性的抑制INa,作用出现快,并且可逆.     

甲基黄酮醇胺对豚鼠单个心室肌细胞膜钙通道电流的影响

用蛋白酶Ｅ急性分离豚鼠心室肌细胞，采用先进的膜片钳技术，观察甲基黄酮醇胺对心室肌细胞膜钙离子通道的影响，结果发现：甲基黄酮醇胺１μｍ、５０μｍ及１００μｍ剂量依赖性地抑制心室肌细胞膜钙离子电流，进而从细胞膜通道水平直接证实了甲基黄酮醇胺的钙拮抗作用。     

硝普盐、3-吗啉-悉尼酮亚胺和精胺对豚鼠胃窦环行肌钙敏感钾电流的影响(英文)

目的:探讨一氧化氮对豚鼠胃窦环行肌钙敏感钾电流的影响。方法:采用全细胞式的膜片箝方法,用精胺、硝普盐、3-吗啉-悉尼酮亚胺(SIN-1)作为一氧化氮供体。结果:外向钾电流被四乙铵(1 mmol·L~(-1))和ChTx(200nmol·L-1)显著抑制。在穿孔膜式条件下,精胺(100 μmol·L~(-1))、SIN-1(200 μmol·L~(-1))、硝普盐(100 μmol·L~(-1))均增加钙敏感钾电流。1μmol·L~(-1)亚甲蓝完全阻断硝普盐与SIN-1导致的增加效应。结论:一氧化氮增加豚鼠胃窦环行肌钙敏感钾电流,该效应可能通过环磷酸鸟苷介导。     

C型钠尿肽抑制大鼠胃窦环行肌自发性收缩活动

目的：研究钠尿肽对胃动力的作用及其可能的机制．方法：用四道记录仪记录胃窦环行肌条的自发性收缩活动;利用放射免疫技术测定cGMP的产生量;利用放射自显影技术分析钠尿肽受体在胃内的分布情况．结果：钠尿肽受体在大鼠胃的不同部位均有分布,但在胃窦部最多。ANP、BNP和CNP均能抑制胃窦环行肌条的自发性收缩,其中,CNP的作用尤为明显并呈剂量依赖关系．CNP的这种抑制性作用被鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583所削弱,而用cGMF敏感的磷酸酯酶抑制剂zaparinist预处理时CNP的抑制作用明显增加．CNP明显提高胃窦环行肌cGMP的浓度．用非选择性钾通道阻断剂TEA预处理后发现CNP对胃窦环行肌自发性收缩活动的抑制作用明显减弱．结论：钠尿肽受体在大鼠的胃窦分布最多．CNP明显抑制大鼠胃窦环行肌的自发性收缩活动．CNP对大鼠胃窦环行肌自发性收缩活动的抑制效应是通过cGMP途径实现的．钾通道也参与CNP对大鼠胃窦平滑肌的舒张过程。     

坎地沙坦对豚鼠心房肌细胞钾通道电流的影响

目的研究坎地沙坦对正常豚鼠心房肌细胞内向整流钾电流（Ikl）和延迟整流钾电流（Ik）的影响，旨在为临床上应用坎地沙坦预防房颤发作和复发提供理论依据。方法酶解法分离豚鼠单个心房肌细胞，应用全细胞膜片嵌技术，在不同嵌制条件下，记录并分析坎地沙坦对豚鼠单个心房肌细胞Ikl及Ik的影响。结果坎地沙坦对Ikl无影响，但可明显抑制Ik。结论坎地沙坦抑制Ik，使动作电位时程（APD）和有效不应期（ERP）延长，改善房颤电重构及它的现在已明确的抑制结构重构的作用共同参与房颤发作和复发预防的机制。     

痛啡肽抑制豚鼠气道兴奋性非肾上腺素能非胆碱能反应

目的:研究痛啡肽(Nociceptin,NC)及U-50488H对豚鼠离体支气管环的非肾上腺素能非胆碱能兴奋(eNANC)所致收缩的抑制作用。方法:记录电场刺激及辣椒素引起标本eNANC反应的收缩张力,了解NC及U-50488H的作用。结果:NC 0.001-0.1μmol·L~(-1)可抑制标本的eNANC收缩。与对照组相比,NC 0.01μmol·L~(-1)抑制收缩达(43±31)％;预用纳洛酮0.1μmol·L~(-1)后,NC仍抑制收缩达(46±28)％。IC_(50)(95％可信限)是6.12(3.8-9.9)nmol·L~(-1)。U-50488H 0.01 -1μmol·L~(-1)可抑制eNANC收缩,其IC_(50)(95％可信限)为1.08(0.5-2.2)μmol·L~(-1),但是U-50488H 0.1μmol·L~(-1)的抑制作用可被纳洛酮0.1μmol·L~(-1)完全取消。辣椒素0.01-1μmol·L~(-1)可引起eNANC收缩,NC 0.01μmol·L~(-1)和U-50488H 0.1μmol·L~(-1)均不能明显影响辣椒素的作用。外源性神经激肽A 0.01μmol·L~(-1)引起的收缩不受NC和U-50488H 0.1μmol·L~(-1)的影响。结论:NC非纳洛酮敏感地抑制电场刺激引起的豚鼠气道eNANC反应;U-50488H通过激动阿片受体而抑制电场刺激引起的豚鼠气道eNANC反应。     

氢化可的松琥珀酸钠对人和豚鼠心肌细胞钠电流的影响氢化可的松琥珀酸钠对人和豚鼠心肌细胞钠电流的影响

目的研究氢化可的松琥珀酸钠对人心房肌细胞和豚鼠心室肌细胞钠电流的影响。方法应用酶解法分离单个心肌细胞,应用全细胞膜片钳技术记录氢化可的松琥珀酸钠对钠电流的作用。结果氢化可的松琥珀酸钠(1,3,10 μmol·L^-1)浓度依赖性地抑制人心房肌细胞和豚鼠心室肌细胞钠电流,IC₅₀分别为6.97和8.74 μmol·L^-1。氢化可的松琥珀酸钠不改变i_Na的最大激活电压。氢化可的松琥珀酸钠对钠电流的抑制作用起效快,见于用药后1～3 min。结论氢化可的松琥珀酸钠浓度依赖性地抑制钠电流,此作用出现快,提示可能与非基因组效应有关。     

蜂毒肽对离体豚鼠心房的双向作用(英文)

目的:研究蜂毒肽(Mel)对离体豚鼠心房的作用。方法:累积浓度法测定Mel给药前后左房收缩幅度及右房频率,观察量效曲线及时效曲线。观察钙离子通道阻滞剂Ver对Mel作用的影响。结果:低浓度Mel(0.1-0.8μmol·L~(-1))对左心房产生正性肌力作用;高浓度Mel(1.6-12.8μmol·L~(-1))产生负性肌力作用。Mel对右心房产生正性频率作用。Mel的双向作用可被Ver 0.3μmol·L~(-1)压低。结论:Mel对离体豚鼠左心房收缩具双向作用,对右心房具正性频率作用。Mel对左心房收缩的双向作用可被Ver压低,提示Mel对心房的作用可能通过电压依赖性钙通道。