人体感染刚地弓形虫的循环抗原检测

目前,急性弓形虫病大多通过血清学方法检测抗体来诊断,然而特异抗体的出现可以延迟或不全,尤其是先天性弓形虫病和免疫受损的患者,甚至可能不出现特异抗体。另一种方法是检测虫体的细胞组分或代谢产     

刚地弓形虫以成纤维细胞和单核细胞培养检测的比较

本文观察了刚地弓形虫ＲＨ株和Ｐｒｕｇｎｉａｕｄ株速殖子在成纤维细胞ＭＲＣ５和单核细胞ＴＨＰ－１培养以ＩＦＡ检测的结果，表明以两种细胞系培养在较大接种量时（５００速殖子／ｍｌ）其检测敏感性相当，而在少量接种（５０／ｍｌ和５／ｍｌ速殖子）则单核细胞培养较成纤维细胞敏感，检出率分别为６０．０％和２５．０％，前者尚有６例ＩＦＡ阴性者以流式细胞仪（ＦＣＭ）检获阳性，因而ＴＰＨ－１组总阳性率为７５．０％。提示以细胞培养进行弓形虫病原分离时ＴＨＰ－１是较适宜的宿主细胞。     

刚地弓形虫感染对宿主细胞信号转导的影响

刚地弓形虫在入侵和寄生于宿主细胞,引起急性与慢性感染的过程中,对宿主细胞进行精细的、整体的调控,在激发和抑制宿主免疫反应之间保持一个精细的平衡,保证弓形虫在宿主细胞内成功地生存增殖,并有机会传播给终末宿主;在此过程中宿主细胞的信号转导发生广泛的应激变化,在弓形虫入侵、寄生过程中及与弓形虫-宿主相互关系中起着重要作用。本文拟从5个方面综述弓形虫感染对宿主细胞信号通路的调控作用:①弓形虫分泌蛋白调控宿主细胞信号转导,②弓形虫调节宿主天然免疫、保护性免疫相关的细胞信号通路,③弓形虫调控与抗凋亡及细胞周期相关的宿主细胞信号转导,④弓形虫调节宿主细胞钙离子信号通路,⑤弓形虫调节与细胞结构重组相关的宿主细胞信号转导。     

刚地弓形虫感染致胎盘损伤作用的研究进展

孕期感染弓形虫可经不同途径侵犯胎盘组织,影响母体健康和胎儿生长发育,重者可致胎儿先天性弓形虫病。本文综述了弓形虫感染致胎盘结构破坏、内分泌功能紊乱、细胞凋亡等方面的研究进展。     

刚地弓形虫感染猫肠上皮细胞的初步观察

取新生猫空肠和回肠段,以胶原酶/中性蛋白酶消化后分离培养,采用免疫组化法检测细胞角蛋白,结果表明成功分离和培养了猫肠上皮细胞。以PRU株刚地弓形虫缓殖子感染猫肠上皮细胞,第72 h可至细胞破裂,但镜检未见弓形虫转化成有性期阶段。     

刚地弓形虫表面抗原研究进展

刚地弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种细胞内寄生原虫,可感染任何有核细胞,无论人或动物,感染率都很高。和其它细胞一样,弓形虫的表膜具有重要的作用,既是虫体与外界环境进行物质交换的界面,也是宿主免疫系统识别并杀伤虫体的主要部位。Handman,Goding和Remington(1980)首先对弓形虫表面抗原进行了分析,其后Johnson(1983)、Dubremetz(1985)、Rodriguez(1985)、Kasper(1982,1984,1987)亦对一些表面抗原进行了研究,虽然已发现的抗原种类很多,但由于技术方法差异,命名很混乱。G.Couver(1980)利用单克隆抗体技术对表面抗原进行了确认。随着分…     

刚地弓形虫蛋白质组学研究进展

近10年,蛋白质组学技术广泛应用于刚地弓形虫研究中,研究结果为全面深入揭示该虫体的生命活动本质奠定了基础。目前,关于刚地弓形虫的整体蛋白质组学研究仅限于速殖子和卵囊阶段的蛋白质组学;亚蛋白质组学研究包括一些重要抗原,如可溶性速殖子抗原、糖蛋白和免疫蛋白质组学研究等;差异蛋白质组学研究着眼于阐明不同虫株或不同虫种的差异蛋白。本文综述了弓形虫蛋白质组学的研究现状,详细阐述了弓形虫整体蛋白质组学、亚蛋白质组学和差异蛋白质组学的主要研究进展。此外,本文还概述了弓形虫蛋白质组学的生物信息学平台,并对弓形虫蛋白质组学的应用前景进行了展望。     

欧洲的刚地弓形虫研究

西方介绍了欧洲刚地弓形虫的研究计划，流行病学、免疫学、分子生物学研究的现状。     

刚地弓形虫热激蛋白70对宿主抗弓形虫感染的作用

感染弓形虫的小鼠在死前可检出弓形虫的热激蛋白70(TgHSP70)的表达迅速增加,表明该分子可作为弓形虫急性致死性感染的危险信号。对经口感染10个Fukaya株包囊的小鼠在感染的0、1、2、3d分别腹腔注射100、300、600和1000μg重组TgHSP70,对照组注射载体蛋白。弓形虫感染3d的小鼠腹腔注射1000μg重组TgHSP70后,在9d内全部死亡。而感染0、1、2d腹腔注射相同剂量重组TgHSP70的小鼠存活超过6个月(P<0.01)。TgHSP70是表达在速殖子上的毒力分子,按照该毒力分子的不同,把速殖子分成2类:表达低水平TgHSP70的破坏型速殖子和表达高水平TgHSP7…     

刚地弓形虫热激蛋白70对宿主抗弓形虫感染的作用

感染弓形虫的小鼠在死前可检出弓形虫的热激蛋白70（TgHSP70）的表达迅速增加，表明该分子可作为弓形虫急性致死性感染的危险信号。对经口感染10个Fukaya株包囊的小鼠在感染的0、1、2、3d分别腹腔注射100、300、600和1000μg重组TgHSP70，对照组注射载体蛋白。弓形虫感染3d的小鼠腹腔注射1000μg重组TgHSP70后，在9d内全部死亡。而感染0、1、2d腹腔注射相同剂量重组TgHSP70的小鼠存活超过6个月（P〈0、01）。TgHSP70是表达在速殖子上的毒力分子，按照该毒力分子的不同，把速殖子分成2类：表达低水平TgHSP70的破坏型速殖子和表达高水平TgHSP70的毒力型速殖子。     

刚地弓形虫感染对鼠胚胎神经干细胞的影响

目的探讨大鼠孕早期感染刚地弓形虫对鼠胚胎神经干细胞增殖、分化和迁移的影响。方法12只SD孕鼠随机分为对照组和感染组,每组6只。感染组孕鼠于妊娠第1天(E1天)腹腔注射弓形虫RH株速殖子1×105/只,对照组注射等体积生理盐水。于E5天尾静脉取血,吉氏染色查找虫体。分别于E9、E10和E11天处死孕鼠,每组每次2只,逆转录PCR(RT-PCR)检测羊水中弓形虫B1基因,确认胚胎鼠是否感染弓形虫。体外原代培养鼠胚胎神经干细胞,噻唑蓝(MTT)法检测2组细胞增殖水平。分化培养神经干细胞,免疫荧光法检测巢蛋白(nestin)、微管相关蛋白2(MAP2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,计算对照组和感染组分化为神经元和星形胶质细胞的百分率。取E9、E10和E11天的2组胚胎鼠神经组织作冰冻切片,免疫荧光法检测神经细胞黏附分子(NCAM)在胚胎不同发育时期神经组织中的表达情况。结果血涂片和RT-PCR结果证实,感染组孕鼠和胚胎鼠均感染弓形虫。体外培养神经干细胞,镜下见细胞形态符合神经干细胞特点,神经干细胞标志物nestin蛋白染色呈阳性。MTT结果显示,感染组细胞传代后增殖水平均低于对照组,其中传代后第3和第4天两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。MAP2和GFAP荧光染色结果显示,对照组和感染组神经元分化百分率分别为15.15%(55/363)和8.73%(31/355),两者间差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和感染组星形胶质细胞分化百分率分别为53.35%(199/374)和67.48%(249/369),两者间差异无统计学意义(P>0.05)。E9、E10和E11天2组胚胎神经组织均检测到NCAM蛋白表达,荧光随时间逐渐增强,对照组表达水平均显著高于感染组(P<0.01)。结论大鼠孕早期感染刚地弓形虫可抑制神经干细胞的增殖、分化和迁移。     

刚地弓形虫感染致小鼠生殖细胞DNA损伤的作用

目的 探讨刚地弓形虫感染对小鼠睾丸细胞DNA的损伤作用.方法 选用9～10周龄雄性BALB/c小鼠20只,随机分为4组,每组5只,分为正常对照组(CG)和3个染虫组(G1,G2,G3).采用腹腔注射法建立小鼠刚地弓形虫感染的动物模型,CG组每只注射PBS 0.2 ml;染虫G1,G2,G3组注射纯化的刚地弓形虫速殖子悬液,每只注射刚地弓形虫速殖子的量依次为2.5×10 3、5×10 3、1×10 4,注射体积均为0.2 ml,应用单细胞凝胶电泳检测睾丸细胞DNA的损伤. 结果 正常对照组和染虫组的尾距分别为10.94±7.57、40.37±6.25、69.76±3.97、79.16±6.36,olive尾距分别为10.57±6.72、31.39±4.59、48.66±4.60、53.87±6.55,G1-G3组与CG组比较,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 弓形虫感染可导致小鼠睾丸生殖细胞DNA不同程度的损伤.     

刚地弓形虫感染对孕鼠细胞凋亡的影响

目的 探讨刚地弓形虫对孕鼠胎盘细胞凋亡及其相关基因bax、bcl-2表达的影响。方法 建立刚地弓形虫感染的孕鼠模型，采用胎盘组织压片及病理切片，观察胎盘组织的损伤情况；采用DNA缺口末端标记技术（TUNEL）检测胎盘细胞的凋亡情况；采用免疫组织化学法（SP法）观察细胞凋亡调控基因bax和bcl-2在胎盘细胞中的表达。结果 与对照组相比，随着感染时间的延长，感染组胎盘组织压片中可见弓形虫虫体逐渐增加，HE染色可见有大量的淋巴细胞浸润及凋亡小体；TUNEL证实感染组胎盘滋养层细胞凋亡显著增强（P〈0．05）；免疫组织化学结果显示，感染组胎盘滋养层细胞凋亡相关基因bax表达显著增强、bcl-2表达减弱（P〈0．05）。结论 刚地弓形虫侵入胎盘组织，可通过上调滋养层细胞bax基因表达，下调bcl-2基因表达而诱导胎盘滋养层细胞凋亡增加，从而影响胎盘组织结构和功能，导致不良妊娠。     

孕妇感染弓形虫后细胞因子水平的变化

弓形虫是人类和动物体内的专性细胞内机会寄生原虫,呈世界性分布。孕妇感染弓形虫后可影响胎儿生长发育、严重的可致畸或引起胎儿死亡。我院进行的孕妇感染弓形虫后胎儿生长发育的跟踪研究,提示随访孕妇感染弓形虫后的妊娠结局,与正常孕妇比较弓形虫感染胎儿致畸率及低...     

不同生长条件下刚地弓形虫毒力的变化型

取死亡播散型弓形虫病野兔的肝、肺匀浆作体外培养或小鼠腹腔接种,分别分离到虫体后转染小鼠。结果观察到直接用野兔脏器及体外培养虫体接种的小鼠均无急性弓形虫感染的症状与体征,小鼠存活也基本不受影响。接种野兔器官的第一批小鼠中只有2     

刚地弓形虫种株研究进展

弓形虫是寄生于人和哺乳动物组织细胞内的广泛性分布的机会性致病原虫。弓形虫对人类危害严重,先天感染弓形虫可造成畸胎、死胎等,在免疫缺陷和免疫抑制病人合并感染弓形虫可导致脑炎的发生［１、２］。由于在临床上弓形虫病的症状表现多样［１、３］,给诊断治疗及预防...     

刚地弓形虫蛋白质组研究进展

随着基因组学的发展和完善,在基因组学的基础上,蛋白质组学作为一门新兴的前沿科学已经显示出了其巨大的发展前景.将蛋白质组学技术应用于弓形虫研究,在蛋白质水平上全面认识弓形虫的生理、病理等过程是目前弓形虫研究领域的热点之一.该文就弓形虫蛋白质组的研究进展进行综述,以期从蛋白质组学研究的角度为弓形虫研究提供新的思路.