在人胎盘、胎膜中水通道蛋白8 mRNA的表达

目的初步探讨水通道蛋白8（AQP8）mRNA在人胎盘、胎膜中的表达。方法采用RT—PCR检测10例选择性剖官产的足月单胎正常孕妇胎盘、胎膜中AQPSmRNA的表达。结果在人胎盘、胎膜中，AQP8mRNA均有表达。结论AQP8可能参与人羊水循环及其调节，并且为羊水量异常的治疗提供了新的思路。     

膳食补锌对胎盘及母鼠小肠金属硫蛋白MT-1和MT-2mRNA表达的影响

目的:探讨孕期膳食补锌对大鼠胎盘及小肠中MT-1和MT-2mRNA表达的影响。方法:18只SD孕鼠随机分为正常对照组(ZC)和补锌组(ZS)。两组进食常规饲料,ZC组(n=9)饮用去离子水,ZS组(n=9)饮用补锌水(含1.26mmol/L锌)。分别于孕9.5d和孕17.5d时,取血、胎盘和母鼠小肠。以原子吸收分光光度法测定血清锌浓度;以半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定胎盘及小肠中MT-1和MT-2mRNA的表达。结果:孕9.5d和孕17.5d时,ZS组血清锌浓度均显著高于对照组。胎盘组织中MT-1和MT-2mRNA的表达均呈现出发育性改变趋势;ZS组各时间点MT-1和MT-2mRNA的表达均显著高于ZC组。ZS组母鼠小肠中,在孕9.5d时,ZS组和ZC组MT-1mRNA的表达无差异;孕17.5d时补锌组MT-1及各时间点MT-2的mRNA表达均显著增高。结论:膳食补充锌上调胎盘及母体小肠组织中MT-1和MT-2mRNA的表达。     

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2基因单核苷酸多态性与痛风发病的相关性

尿酸代谢异常被看作是高尿酸血症和痛风的主要病因之一,尿酸盐转运蛋白的功能异常是导致尿酸代谢异常的最主要原因,其影响了肾脏对尿酸的重吸收和排泄功能。近年来三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)作为最受关注的尿酸盐转运蛋白,得到国外国内学者的较多研究报道。ABCG2定位在细胞膜,表达在近曲小管上皮细胞刷状缘侧,可以转运尿酸。其功能性障碍阻碍了肾脏和肠道对尿酸的排泄,从而引起高尿酸血症并引发痛风。本文就ABCG2基因单核苷酸多态性与痛风发病相关性的研究进展作一综述。     

子痫前期滋养细胞ABCG2表达的研究

目的探讨正常及子痫前期胎盘滋养细胞分化前、后胎盘表达的主动转运因子ATP结合匣式转运子G2 (ABCG2)mRNA及蛋白的表达变化。方法酶消化法原代培养正常及子痫前期胎盘绒毛滋养层细胞,经传代与纯化后免疫鉴定滋养细胞及其纯度。收集培养后72 h (未分化状态)及培养后6 d (分化状态)的细胞,裂解后应用实时荧光定量PCR及Western Blot检测各组细胞ABCG2 mRNA及蛋白的表达水平。结果成功自正常及子痫前期胎盘中原代培养人绒毛滋养层细胞,未分化状态下子痫前期滋养细胞ABCG2mRNA及蛋白的表达平均值为正常的2. 54及2. 06倍,分化状态下子痫前期滋养细胞ABCG2mRNA及蛋白的表达为正常的1. 65及1. 53倍;正常胎盘滋养细胞分化后ABCG2 mRNA及蛋白表达增高3. 55及4. 06倍,子痫前期组仅增加2. 31及3. 03倍。结论自子痫前期及正常胎盘原代培养滋养细胞区分不同分化状态,实时荧光定量PCR及Western Blot检测子痫前期滋养细胞不同分化时期ABCG2 mRNA及蛋白的表达均高于正常,但滋养细胞分化后子痫前期ABCG2 mRNA及蛋白表达增长的程度低于正常。     

纤维粘连蛋白基因多态性与尘肺易感性的研究

目的 探讨纤维粘连蛋白(FN)4个基因位点多态性与尘肺发病的关系.方法 以确诊的128例汉族男性Ⅰ期尘肺患者作为病例组,选择与病例组年龄相差不超过5岁、同性别、同民族、开始接尘时间及累积接尘工龄相差不超过2年、在同一车间或同一采掘工作面工作的非尘肺接尘工人为对照.采Ⅲ聚合酶链反应-限制性片断长度多态件分析(PCR-RLFP)的方法 检测FN基因HaeⅢb、Msp Ⅰ、HindⅢ、Taq Ⅰ b位点的基因型.结果 病例组携带Msp Ⅰ野牛基因型(CC)频率和等位基C的分布频率分别为10.9%和41.8%,明显高于对照组(分别为3.9%和31.2%),差异有统计学意义(P<0.05).病例组携带HaeⅢb野生基因型(AA)的频率为24.2%,明显高于对照组(17.9%),差异行统计学意义(P<0.05);病例组HaeⅢbA等位基因频率为51.9%,明显高于对照组(42.2%),差异有统计学意义(P<0.05).病例组和对照组Taq Ⅰb位点基因型和Hind Ⅲ位点基因型的分布频率比较,筹异均无统计学意义(P>0.05).病例组同时携带Msp Ⅰ cc和HaeⅢbAA基因型的频率明显高于对照组,差异行统计学意义(P<0.05).结论 携带FN Msp Ⅰ cc和Hae Ⅲ b AA基冈型的接尘工人患尘肺的危险性增加,同时携带这2种基因型的接尘工人更易患尘肺.未发现FN Taq Ⅰ b和HindⅢ位点基因多态性与尘肺易感性有关.     

系统评价妊娠期糖尿病胎盘差异表达蛋白对胎儿的影响

目的系统评价妊娠期糖尿病胎盘差异表达蛋白对胎儿的影响。方法于2019年6月计算机检索PubMed、Web of Science、Cochrane Library、EMBase、Medline (Ovid)、Scopus、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据知识服务平台、维普中与妊娠期糖尿病胎盘蛋白表达有关的文献,检索时限为2010年1月-2019年6月。采用主题词与自由词结合的方式进行检索,同时手工检索相关文献的参考文献。运用纽卡斯尔渥太华量表评价纳入研究的方法学质量,进行描述性分析。结果最终纳入15篇文献,均为病例对照研究,共包含844名研究对象。系统评价结果显示:胎盘差异表达蛋白通过干扰葡萄糖、脂质代谢与转运,影响氨基酸转运和蛋白质合成,调整胎盘屏障,增加水、甘油和铁转运4个途径影响胎儿生长发育和妊娠结局。结论胎盘蛋白表达失调可能介导胎盘营养转运能力的改变和影响胎盘屏障,参与胎儿宫内生长发育和增加不良胎儿结局的风险。但其因果关系及调控机制尚不明确,有待进一步深入研究。     

核因子E2相关因子2基因启动子多态性对酒精性肝病小鼠感染创伤弧菌的影响

目的 探讨核因子E2相关因子2(nrf2)基因启动子336位点多态性对酒精性肝病小鼠感染创伤弧菌的影响.方法 取C57B6雄性小鼠,简单随机抽样法分为正常喂养组(A组,10只)、酒精性肝病组(B组,10只)、正常喂养且腹腔注射感染创伤弧菌组(C组,8只)、酒精性肝病感染创伤弧菌组(D组,110只),以基因测序法检测D组小鼠nrf2基因启动子336位点多态性,分为非突变组(336T)(D1组,7只)及突变组(336C)(D2组,10只).应用RT-PCR、Western-blotting、ELISA检测各组小鼠肝组织nrf2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的基因及蛋白水平,观察小鼠肝组织病理变化.结果 A、B、C、D1、D2组小鼠在感染创伤弧菌48 h后肝组织nrf2基因的mRNA表达量中位数分别为0.115、0.173、0.211、0.764、0.352 (χ2=40.64,P<0.05);IL-10基因的mRNA表达量中位数分别为0.338、0.637、1.002、1.825、1.403(χ2=41.05,P<0.05);TNF-α基因的mRNA表达量中位数分别为0.140、0.254、0.372、0.399、0.699(χ2=38.16,P<0.05);HMGB1基因的mRNA表达量中位数分别为0.230、0.410、0.668、0.508、1.021(χ2=31.45,P<0.05).A、B、C、D1、D2组小鼠在感染创伤弧菌48 h后肝组织nrf2基因的蛋白表达量中位数分别为0.908、1.461、2.061、3.982、2.243(χ2=33.72,P<0.05);IL-10基因的蛋白表达量中位数分别为13.97、22.54、30.14、57.98、41.53(χ2=37.31,P<0.05);TNF-α基因的蛋白表达量中位数分别为114.07、142.94、175.44、174.60、266.11(χ2=32.29,P<0.05);HMGB1基因的蛋白表达量中位数分别为2.01、6.05、9.62、6.24、12.89(χ2=36.94,P<0.05).与A组比较,B组可见大量散在脂肪滴,呈空泡样改变,C组可见炎症细胞浸润,肝细胞条索紊乱,D组可见肝细胞充血水肿,肝小叶完整性破坏,汇管区可见扩张的肝管和静脉.结论 nrf2基因启动子336位点T→C突变使酒精性肝病C57B6小鼠体内nrf2表达明显降低,并加剧酒精性肝病C57B6小鼠在感染创伤弧菌时的炎症反应及脏器损害.

Abstract：

Objective To investigate the influence of genetic polymorphism in NF-E2-related factor-2(nrf2) gene promoter locus at 336 in alcoholic liver disease(ALD) with Vibrio vulnificus(VV) sepsis.Methods Through the simple random sampling method,C57B6 male mice were divided into normal feeding group(group A,10 mice),alcoholic liver disease group(group B,10 mice),normal feeding group infected with VV through intraperitoneal injection(group C,8 mice),alcoholic liver disease group infected with VV(group D,110 mice).Through gene sequencing method,nrf2 gene promoter 336 polymorphism in D group was analyzed and grouped into: non-mutation group(336T)( group D1,7 mice) and mutation group(336C)( group D2,10 mice ).Through RT-PCR,Western-blotting and ELISA method,expressions of nrf2,tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-10(IL-10),high mobility group protein 1(HMGB1)gene and protein of liver were measured.The pathological changes in liver were recorded with light microscope.Results After infected with VV for 48 hours for A,B,C,D1,D2 group,the expression medians of nrf2 mRNA in liver were 0.115,0.173,0.211,0.764,0.352,respectively(χ2=40.64,P<0.05),the expression medians of IL-10 mRNA in liver were 0.338,0.637,1.002,1.825,1.403,respectively(χ2=41.05,P<0.05),the expression medians of TNF-α mRNA in liver were 0.140,0.254,0.372,0.399,0.699,respectively(χ2=38.16,P<0.05),the expression medians of HMGB1 mRNA in liver were 0.230,0.410,0.668,0.508,1.021,respectively(χ2=31.45,P<0.05).After infected with VV 48 hours for mice in A,B,C,D1,D2 group,the expression medians of nrf2 protein in liver were 0.908,1.461,2.061,3.982,2.243,respectively(χ2=33.72,P<0.05),the expression medians of IL-10 protein in liver were 13.97,22.54,30.14,57.98,41.53,respectively(χ2=37.31,P<0.05),the expression medians of TNF-α protein in liver were 114.07,142.94,175.44,174.60,266.11,respectively(χ2=32.29,P<0.05),the expression medians of HMGB1 protein in liver were 2.01,6.05,9.62,6.24,12.89,respectively(χ2=36.94,P<0.05).Compared with group A,there were large amount of fat drops,fatty changes in group B,inflammatory cell infiltration,disorder of hepatic cell in group C,and extension of hepatic duct and vein,edema of liver cells and disorder of hepatic cells in group D.Conclusion The nrf2 gene promoter of T336C mutation in C57B6 mouse of ALD can significantly decrease the expression of nrf2,and intensify organ inflammation and damage when they were infected by VV.     

ABCG8 T400K基因多态性与高脂血症的关系

目的探讨ABCG8 T400K基因多态性与高血脂症的相关性。方法采用酚-氯仿法提取370例高脂血症患者及303例健康志愿者DNA,用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测ABCG8 T400K基因多态性,用χ2检验检测基因多态性与高脂血症的关系。结果ABCG8 T400K基因多态性与高脂血症患病风险间显著相关,ABCG8 400K等位基因为患高脂血症的高风险因素(OR=1.870,P=0.002)。结论ABCG8 T400K基因多态性与高脂血症患病风险间显著相关,ABCG8 400K等位基因携带者患高脂血症的风险较高。     

高血压前期患者5-羟色胺2A受体基因多态性分析

目的研究高血压前期患者5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)基因多态性并随访观察不同基因型患者的原发性高血压(EH)患病率。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测42例健康对照者及41例高血压前期患者的5-HT2AR 1438A/G、102T/C基因多态性,并采用高效液相色谱-紫外光检测法测定血清5-HT水平。全部受试者在第6、12个月随访,观察不同基因型患者的EH患病率。结果 5-HT2AR基因1438A/G基因型高血压前期组及对照组差异有统计学意义,高血压前期组GG基因型频率显著高于对照组(P<0.05),并具有较高的血清5-HT水平(P<0.001)。6、12个月后GG基因型患者的EH患病率显著高于AA和AG型者(P<0.001)。102T/C基因型2组差异有统计学意义,同期随访不同基因型患者EH患病率差异无统计学意义。结论 5-HT2AR 1438A/G基因多态性与EH的患病显著关联;1438A/G位碱基纯合突变可导致高血压患者血清5-HT水平升高;102T/C基因多态性与EH无关。     

bax蛋白/bcl-2蛋白及凋亡细胞在甲状腺功能减退症合并子痫前期胎盘组织中的表达趋势

目的 探讨甲状腺功能减退症(甲减)合并子痫前期产妇胎盘组织中bax蛋白/bcl-2蛋白及凋亡细胞表达趋势.方法 采用免疫组织化学SP法检测6例正常妊娠产妇、6例子痫前期产妇、6例甲减合并子痫前期产妇的胎盘组织bax、bcl-2蛋白,原位末端转移酶标记技术检测凋亡细胞.结果 甲减合并子痫前期产妇bax蛋白/bcl-2蛋白、凋亡细胞[1.68±0.08、(12.31±1.05)个]均高于子痫前期产妇[1.43±0.77、(8.11±0.55)个]和正常妊娠产妇[1.13±0.05、(3.01±0.09)个],子痫前期产妇高于正常妊娠产妇,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 bax蛋白与bcl-2蛋白在甲减合并子痫前期产妇表达失衡,胎盘细胞凋亡可能起着重要作用.     

丝氨酸苏氨酸激酶-15和基质金属蛋白酶-2基因多态与蒙古族人食管癌易感性相关

目的 探讨中国汉族人群中食管癌遗传易感性相关的功能性单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)与蒙古族人群中食管癌发病风险的关系,并比较这些遗传变异在汉族人群和蒙古族人群中的等位基因频率分布差异.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-based restriction fragment length polymorphism assay,PCR-RFLP)方法,检测了188例蒙古族食管癌患者和324名蒙古族正常对照者的FAS-670G/A、FAS-1377G/A、FASL-844T/C、COX-2-1290A/G、COX-2-1195G/A、STK15 Phe31lie、MMP-2-1306C/T和MMP-2-735C/T共8个多态位点的基因型频率.采用多因素logistic回归模型计算各基因型携带者食管癌的发病风险.并将以上结果 与已报道的汉族人群中的结果 进行比较.结果 在蒙古族人群中,与携带STK1531Ile/Ile基因型者相比,携带STK15 31Phe/Phe者罹患食管癌的相对危险性增加(校正OR=2.20,95%C/值:1.12～4.31).携带MMP-2-735TT基因型者罹患食管癌的危险性明显高于携带-735CC基因型者(校正OR=4.82,95%C/值:1.59～14.60),未发现其他遗传变异与食管癌的患病风险相关.我国蒙古族和汉族人群间FASL-844 T/C[0.264(171/648)/0.736(477/648),0.323(418/1296)/0.677(878/1296)]、COX-2-1195G/A[0.431(279/648)/0.569(369/648),0.492(1250/2540)/0.508(1290/2540)]、MMP-2-1306C/T[0.869(563/648)/0.131(85/648),0.835(1298/1554)/0.165(256/1554)]和MMP-2-735C/T[0.789(511/648)/0.211(137/648),0.748(1163/1554)/0.252(391/1554)]等位基因频率分布差异有统计学意义(x2值分别为7.03、7.84、3.94、4.05,P值均<0.05).结论 STK15 Phe31Ile多态和MMP-2-735C/T可能是我国蒙古族人群食管癌的遗传易感因素.我国蒙古族和汉族人群的遗传差异导致不同SNP与食管癌发病风险关联情况存在差别.     

P2X7R基因rs1621388多态性与痛风易感性的关联研究

目的 分析嘌呤受体P2X配体门控离子通道7（purinergic receptor P2X ligand-gated ion channel 7,P2X7R）基因多态性与痛风易感性的关联。方法 通过对P2X7R基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点的连锁分析,确定具有代表性的rs1621388为研究位点。提取114例痛风患者（实验组）及93例高尿酸血症患者（对照组）外周血单个核细胞DNA,采用TaqMan探针法进行rs1621388基因分型,分析不同等位基因或基因型与痛风易感性的关系。结果 rs1621388基因型AA、AG和GG在痛风组中频率分别为10.5%、49.1%和40.4%,高尿酸血症组中分别为3.2%、28.0%和68.8%,两组基因型分布差异具有统计学意义（χ²=17.369,P<0.001）。等位基因A和G在痛风组中频率分别为35.1%和64.9%,高尿酸血症组分别为17.2%和82.8%;等位基因A是痛风的易感基因（OR=2.601,95%CI：1.629~4.154,P<0.001）。显性模型（AA+AG vs GG）基因型频率分布在痛风和高尿酸血症组间的差异具有统计学意义（OR=3.262,95%CI：1.833~5.807,P<0.001）。结论 P2X7R基因单核苷酸位点rs1621388多态性与痛风易感性存在关联。     

凋亡信号通路基因多态性与煤工尘肺易感性

目的 探讨凋亡信号通路基因细胞凋亡基因(FAS)、FAS配体基因(FASL)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白质酶(CASP8)及CASP3单核苷酸多态性(SNP)与煤工尘肺易感性的关系.方法 采用病例-对照的研究方法,选择511例煤工尘肺患者为病例组,530例同单位、同工种、且工龄相近、未患尘肺的煤尘接触者为对照组;聚合酶链反应-限制性片段长度多态性( PCR-RFLP)法检测5个SNP位点的基因型;CASP3 rs 6948位点用荧光定量PCR法进行基因分型.结果 煤工尘肺组和对照组6个多态性位点的各基因型的分布频率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).CASP8-652位点的6个碱基缺失(DD型)可明显增加煤工尘肺患病的危险性(调整后OR=1.96,95％ CI=1.15～3.33,P=0.013),其他各基因型对煤工尘肺患病危险性没有明显的影响;对CASP8-652 I＞D基因多态性进行分层分析发现,工龄≥28年组、吸烟组及1期煤工尘肺携带CASP8-652 DD基因型者煤工尘肺的患病危险性明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05).6个多态性位点不同基因型之间的相互作用与煤工尘肺患病的关联性分析发现,携带FAS-1377GG/CASP8-652DD型者、携带FAS-670AG/CASP8-652DD型者和携带FASL-844CT/CASP8-652DD型者煤工尘肺患病危险性明显增加;携带FAS- 1377GA/CASP8-652ID型者煤工尘肺患病危险性明显降低.对Ⅰ期煤工尘肺患者中CASP8-652位点II、ID、DD 3种基因型携带者发病前的粉尘暴露时间进行回归分析,差异无统计学意义(P＞0.05).Ⅰ期煤工尘肺患者中不同基因型携带者发病前的粉尘暴露时间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CASP8-652缺失基因型在煤工尘肺病变的发展过程中可能起一定的作用,并且与FAS- 1377、FAS-670及FAL-844存在基因相互作用.     

β3-肾上腺素能受体及UCP2基因多态性与儿童单纯性肥胖的关系

目的研究β3-肾上腺素能受体基因的Trp64Arg变异与UCP2基因Ala55Val变异对儿童单纯性肥胖的影响是否存在交互作用,为儿童单纯性肥胖的防治提供理论依据。方法用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测UCP2基因Ala55Val及β3-AR基因Trp64Arg的多态性,比较病例组与对照组各基因型的发生频率以及不同基因型之间BMI、血液生化指标的差异。结果β3-AR的变异频率在单纯性肥胖组和对照组差异有统计学意义(P=0.038),UCP2基因的变异频率在2组之间差异也有统计学意义(P=0.045)。当只有单一的UCP2或β3-AR变异基因型时,病例组与对照组的频率分布差异无统计学意义;但当UCP2和β3-AR基因同时发生变异时,病例组的变异基因频率明显高于正常组(OR=4.002,95%可信区间为1.636～9.884)。结论UCP2基因Ala55Val变异与β3-AR基因Trp64Arg变异同时发生时,会明显增加儿童单纯性肥胖症发生的危险性。     

2型糖尿病易感基因单核甘酸多态性的研究进展

2型糖尿病是多基因复杂病,具有高度遗传异质性,不同地区、不同种族人群的遗传背景不同,参与2型糖尿病发生的易感基因也不同。近年来单核苷酸多态性与2型糖尿病发病相关性研究的取得了一定的进展,但尚未发现任何一个SNP在所有人群中均与2型糖尿病相关联。本文拟就2型糖尿病相关易感基因单核苷酸多态性及其发病机制研究进展进行综述。     

环氧化酶2遗传变异与吸烟交互作用影响肺癌易感性

目的 探讨环氧化酶2(COX2)启动子区-1195G＞A遗传变异与肺癌遗传易感性的关系以及与吸烟的交互作用.方法 以2000年1月至2008年12月在中国医学科学院肿瘤医院就诊的956例肺癌患者作为病例组;健康对照来自同期北京市健康体检个体,以无肿瘤病史和体征者作为对照组,共994名.研究对象均为汉族,无年龄、性别限制.对照组与病例组相匹配.经知情同意,每名研究对象均采集2 ml外周血,以PCR-限制性片断长度多态性方法对研究对象进行基因分型,并且调查了对象的吸烟情况.以logistic回归法计算COX2-1195G＞A变异各基因型影响肺癌发病风险的OR值及95％ CI.结果 对照组、病例组基因分型为COX2-1195AA者分别占24.9％ (247/994)、28.3％ (271/956).与-1195GG基因型携带者相比,-1195AA基因型携带者肺癌的发病风险增加1.36倍(95％ CI:1.03～ 1.79).以吸烟进行分层分析,在吸烟人群中,携带COX2-1195AA基因型者,肺癌的发病风险明显增高,其OR(95％ CI)为1.56(1.08 ～2.25);在非吸烟组,未发现肺癌发病风险在不同基因型之间的差异(OR=1.17;95％ CI:0.77 ～ 1.61).在重度吸烟者(＞20包/年)中,-1195AA和-1195AG基因型携带者发生肺癌风险分别是-1195GG携带者的1.85倍(95％ CI:1.16 ～2.95)和1.62倍(95％CI:1.08 ～2.43);在轻度吸烟者(≤20包/年)中,-1195AG和AA基因型携带者发生肺癌风险的OR(95％ CI)分别为0.78(0.47 ～ 1.30)和1.08(0.60～1.94).结论 COX2启动子区遗传变异对肺癌发病风险的相关性和环境因素密切相关.     

IL-2（rs6822844）和IL-2Ra（rs2104286）单核苷酸多态性与原因不明复发性流产的相关性研究

目的：探讨白细胞介素2基因（IL-2）及其受体α（IL-2Rα）单核苷酸多态性（SNPs）与原因不明复发性流产（URSA）的相关性。方法：采用病例对照研究,应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）技术,对中国浙江地区145例URSA患者及220例健康对照IL-2（rs6822844）G/T及IL-2Rα（rs2104286）A/G进行分析。结果：URSA组IL-2Rα（rs2104286）AA基因型及A等位基因频率均高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。A等位基因携带者URSA患病风险是G等位基因携带者的2倍（OR=2.06,95%CI：1.34～3.16,P=0.001）,AA基因型较AG+GG基因型URSA患病风险增加约1倍（OR=2.27,95%CI：1.40～3.68,P=0.001）。URSA组及对照组IL-2（rs6822844）GG基因型频率均为100%,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：IL-2Rα（rs2104286）A等位基因可能是浙江地区URSA的遗传易感基因,IL-2（rs6822844）基因多态性与浙江地区URSA无相关性。     

人类辅助生殖技术来源胎盘全基因组表达谱研究

目的:通过比较辅助生殖技术(ART)来源和自然妊娠来源胎盘全基因组表达谱的差异,研究ART技术对胎盘功能和胎儿发育的影响,借此评估ART子代的安全性。方法:胎盘组织取自因输卵管因素行体外受精-胚胎移植和自然妊娠足月产妇各3例。利用AffymetrixHG-U133 Plus 2.0基因芯片对2组胎盘组织进行芯片杂交分析。用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)验证其中10个差异表达基因,根据其涉及的不同功能进行生物信息学分析。分为6类:免疫应答、跨膜转运、代谢、氧化应激、细胞分化及其他功能。用免疫组织化学对其中5个差异表达基因产物进行细胞定位研究。结果:ART来源胎盘组织中共鉴定出26个差异表达基因,其中17个上调,9个下调。其中涉及免疫应答的基因,如ERAP2和STAT4;涉及细胞分化的基因如MUC1,经qRT-PCR验证2组间确实存在差异表达。基因产物主要表达在胎盘绒毛组织中,分布在合体滋养层细胞的细胞质和(或)细胞膜中。结论:ART来源胎盘和自然妊娠胎盘存在全基因组表达谱差异。差异表达基因涉及到多种胎盘关键功能,ERAP2,STAT4及MUC1等差异表达基因可能作为评估胎盘与ART子代安全性关联的分子...     

人类辅助生殖技术来源胎盘全基因组表达谱研究

目的:通过比较辅助生殖技术(ART)来源和自然妊娠来源胎盘全基因组表达谱的差异,研究ART技术对胎盘功能和胎儿发育的影响,借此评估ART子代的安全性.方法:胎盘组织取自因输卵管因素行体外受精-胚胎移植和自然妊娠足月产妇各3例.利用Affymetrix HG-U133 Plus 2.0基因芯片对2组胎盘组织进行芯片杂交分...     

锰超氧化物歧化酶及其C47T变异对耳蜗毛细胞氧化损伤作用的影响

目的 探讨锰超氧化物歧化酶(SOD2)及其C47T变异在耳蜗毛细胞氧化损伤中的作用.方法 用Ala16型(突变克隆)和Val16型(野生克隆)SOD2转染HEI-OC1细胞,同时设立未转染和空质粒转染对照.噻唑兰(MTr)法检测细胞的增殖情况;黄嘌呤氧化法检测胞内SOD2活力.100 μmol/L叔丁基过氧化氢(t-BHP)对其染毒12 h后,2'-7'-二氯荧光黄双乙酯(DCFH-DA)法检测胞内活性氧(ROS)水平;Annexin V/PI双标记后通过流式细胞仪检测细胞早期凋亡率和坏死率或晚期凋亡率.结果 SOD2表达质粒和空质粒转染不影响HEI-OC1细胞的增殖;Ala16SOD2和Val16 SOD2转染组SOD2活力分别是转染对照组的3.51和3.71倍,差异有统计学意义(P＜0.01),2种不同基因型间SOD2活力的差异无统计学意义(P＞0.05).染毒后,DCFH-DA方法 显示,未转染和空质粒对照组绝大部分细胞均发出++级明亮荧光,Ala16型和Val16型SOD2转染组中均只有约50%细胞发出±～+级别的模糊荧光.HEIOC1细胞早期凋亡率和坏死率或晚期凋亡率均下降,差异有统计学意义(P＜0.01),但是,其在SOD2 2种基因型之间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SOD2 3.71倍以下高水平的表达可以降低氧化应激耳蜗毛细胞胞内ROS水平,而SOD2 C47T变异则对之无影响.SOD2为NIHL易感基因,rs4880多态性位点则与NIHL遗传易感性无直接功能性的相关.

Abstract：

Objective To study the effect of SOD2 and its C47T mutation on oxidative injury in cochlea hair cells. Methods HEI-OC1 cells were transfected with the SOD2 of Ala16 and Vla16. Cells' proliferation ability was determined by MTT assay. The intracellular SOD2 activities were detected by xanthine oxidase method. Intracellular ROS were determined by DCFH-DA after exposure to 100 μ mol/L t-BHP and the early apoptotic and necrotic rate or late apoptotic rate were quantified by flow cytometry (FCM) using Annexin V/PI double staining. Results MTT method showed the transfection of SOD2 gene and empty plasmid did not affect the proliferation capacity. SOD2 vitality in Ala16 and Val16 SOD2 transfected cells increased 2.51 and 2.71 times respectively (P＜0.01), but the difference between the two transfection groups was not statistically significant (P＞0.05). After exposed to t-BHP, the majority of the untransfected and empty plasmid transfected cells sent '++' class bright fluorescence, while in Ala16 and Val16 SOD2 transfected groups, only about half cells sent '± '～'+' level fuzzy fluorescence, determination of FCM suggested the early apoptotic and necrotic rate or late apoptotic rate decreased after SOD2 transfection (P＜0.01), but the difference between the two genotypes of SOD2 was not statistically significant (P＞0.05). Conclusion High expression of SOD2 below 3.71 times can reduce intracellular ROS level in HEI-OC1 cells, while SOD2 C47T mutation had no effect on them. SOD2 can be considered as NIHL susceptibility gene and its rs4880 SNP may be not directly related to NIHL genetic susceptibility.