再狭窄的细胞和分子生物学(三)

癌基因与抗癌基因癌基因是一类能编码生长因子、生长因子受体、细胞内生长信息传递分子以及转录调节因子的基因，亦称原癌基因，现有100多种，它们是一类编码关键性调控蛋白质的正常细胞基因，其主要功能是调节细胞的增殖与分化。1．几类常见的癌基因1．1src癌基因族：c－src由17个外显子组成，人的c－src分布于第20号染色体，其转录产物全长3．9-4．0kb。大多数正常细胞或组织中c－src表达水平很低，但细胞增殖时表达增高。src编码分子量为60kDa的蛋白质，称PP60src，具有酪氨酸蛋白激酶（tyrosineproteinkinase，TPK）活性。除src外，…     

癌基因

癌基因(oncogene)是存在于病毒或细胞基因组中的一类在一定条件下能使正常细胞转变为恶性细胞的核苷酸序列。根据其来源的不同可分为病毒癌基因(viral oncogene)和细胞癌基因(cellular oncogene)。病毒癌基因根据其来自RNA肿瘤病毒或DNA肿瘤病毒或DNA肿瘤病毒,又分为RNA病毒癌基因和DNA病毒癌基因。细胞癌基因在正常细胞内以未活化的形成存在,称     

乙型肝炎病毒X蛋白在原发性肝癌中的作用

乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)是一种由HBV X基因编码的多功能蛋白,参与调节基因转录、细胞信号转导、细胞增殖转化、细胞周期和细胞凋亡。目前HBx蛋白被认为在HBV诱发原发性肝癌的过程中发挥重要作用。介绍了HBx蛋白与癌基因、抑癌基因、细胞增殖、细胞凋亡、肝癌侵袭转移和肝癌干细胞的关系,探讨了HBx蛋白在肝癌发生发展中的作用。     

癌基因与心血管疾病

<正> 癌基因(Oncogene)为一类引起癌瘤的基因。近年来的研究表明,癌基因的活化不仅与肿瘤形成有关,某些心血管疾病的发生与发展也有癌基因的参与。一、癌基因的基本概念癌基因本质上是脱氧核糖核酸(DNA)片段,至今已发现50余种,它可分成两大类,一类是病毒癌基因(V-one),另一类是细胞转化基因(Cellular transforming gene)。正常细胞中存在着V-onc同源的DNA序列,总称细胞癌基因,又常称为原癌基因(Proto-oncogene)。很多研究证明:(1)各种动物     

细胞癌基因和转化癌基因的功能:与心脏病的关系

细胞癌基因(Cellular oncogene,C-onc)是一组与细胞生长、分化有关,在失控时可使正常细胞转化为恶性细胞的基因。原先,癌基因指病毒基因组(Viral oncogene,V-onc)中可诱发肿瘤的反录病毒系统(retroviral system)。随后,把在正常细胞中发挥重要功能的此类基因称为原癌基因(Proto-oncogene)或C-one。所有脊椎动物、果绳和酵母都具有与哺乳动物细胞DNA中相似的原癌基因,这一现象说明原癌基因在生物进化过程中被保留下来,并为保持正常功能发挥重要作用。 (一)病毒介入转化和癌基因反录病毒诱发转化的机理有三(图1)。(1)带有经修饰的C-onc(或V-onc)的病毒插入宿主基因组中,(2)反录病毒启动子     

p53抗癌基因和消化系肿瘤

癌基因概述癌基因显性作用与抗癌基因的失活是肿瘤发生的分子基础．现认为，肿瘤是多种癌基因多阶段途径协同作用的结果［１－４］．癌基因（ｏｎｃｏｇｅｎｅ）是指细胞内或病毒内存在的，能诱导正常细胞发生转化，使正常细胞获得一个或多个新生物特性的基因，１９６８年...     

Ras蛋白与肝细胞癌变过程中的信号转导

细胞信号转导(signal transduction)是指胞间通讯的激素以及外界环境因子作用于细胞表面(或胞内受体),跨膜形成胞内第二信使,通过信息分子级联传递,诱导基因表达和引起生理反应的过程。细胞信号转导在应答环境因素和调节基因表达、生理反应的同时,不仅维持着细胞的正常代谢,而且最终决定了细胞增殖、生长、分化、衰老和死亡等生命的基本现象。 肝细胞癌变的主要特征是肝细胞异常增殖,癌基因的激活和抑癌基因失活是引起肝细胞癌变的原因,而癌基因和抑癌基因的变异引起细胞内信号转导途径异常激活则是肝细胞癌变的主要机制之一。 RasP21是肝细胞增殖信号传导的关键因子,分子量约     

细小病毒NS基因表达对胃癌细胞的作用及NS转基因小鼠模型建立

细小病毒ＮＳ基因表达对胃癌细胞的作用及ＮＳ转基因小鼠模型建立沈锡中，萧树东，丛笑倩，江绍基细小病毒能抑制肿瘤病毒、癌基因、化学致癌物等诱导的细胞转化，能裂解多种转化细胞和肿瘤细胞，具有明显的抗肿瘤作用［１］。有关细小病毒抗肿瘤机制尚不十分清楚，目前认...     

构建P16慢病毒载体永生化心肌干细胞的探讨

目的：构建P16慢病毒载体,为修复坏死心肌干细胞提供理论基础。方法构建 pLVX p16ink4a ZsGreen、pLVX P16INK4a慢病毒载体,将P16目的基因转导入目标细胞。利用倒置免疫荧光显微镜观察携带绿色荧光蛋白的 pLVX p16ink4a ZsGreen阳性转导细胞的变化,并通过β半乳糖苷酶染色鉴定观察 pLVX P16INK4a 转导阳性细胞即衰老细胞的变化。利用Western blotting法测定P16目的基因转导成功后蛋白变化水平。结果携带绿色荧光蛋白的 pLVX P16ink4a ZsGreen阳性转导细胞传代增殖受到抑制,β半乳糖苷酶染色鉴定观察 pLVX P16INK4a转导阳性细胞即衰老细胞增殖受到抑制,上述两种阳性转导细胞在细胞培养传代过程中被稀释。Western blotting法测定p16INK4a蛋白水平也存在稀释变化。结论构建P16慢病毒载体转导目标细胞传代培养过程中,目的基因P16在细胞传代增殖过程中存在抑制作用,并可导致转导阳性细胞稀释。     

原癌基因在心室重构中的作用

心室重塑 (ventricularremodeling)即由多种因素引起的心室肥大和心腔扩大伴心脏功能异常是心脏疾病终末性心脏病 慢性心力衰竭演变的共同的病理生理过程。近年的研究表明 ,原癌基因与多种心脏疾病的发病密切相关 ,其在心室重塑中的作用已经引起国内外医学界的广泛关注。本文就原癌基因在心室重塑中的作用进行综述。1　原癌基因的生物学特性1.1　原癌基因的含义 :癌基因原来定义为一类能引起癌瘤发生发展的基因 ,也称为转化基因。它首先发现于Rous肉瘤病毒 ,后来在多种RNA逆转录病毒和动物细胞中发现相近的核酸序列 ,分别称为病毒癌基因(…     

胰腺癌的癌基因治疗

胰腺癌癌基因治疗尚处于实验阶段 ,主要包括自杀基因、反义基因、免疫基因及抑癌基因替代治疗。1　自杀基因治疗将自杀基因 (Suicide gene)导入人肿瘤细胞 ,使其产生酶并将无毒性的药物前体代谢成毒性产物而杀伤肿瘤细胞 ,这种疗法称为肿瘤的自杀基因治疗。大肠杆菌的胞嘧啶脱氨酶能将 5 -氟胞嘧啶 (5 - FC)代谢成 5 -氟脲嘧啶 (5 - fleorouracil,5 -FU) ,5 - FU抑制 RNA和 DNA的合成而导致细胞死亡。有人证实尚未转导的细胞与转导细胞混合培养或接种于裸鼠时 ,也被 5 - FC通过旁观者效应 (bystander effect)的机制杀伤 ,使该方法在肿…     

EB病毒潜伏膜蛋白1致癌机制的研究进展

EB病毒（Epstein-Barrvirus，EBV）是一种人类r-疱疹病毒，也是最早被识别的人类肿瘤病毒，它与许多淋巴增生性疾病如传染性单核细胞增多症以及恶性肿瘤如伯基特淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、鼻咽瘤等的病病有关。它是在全球广泛分布的双链DNA病毒，EBV感染人群后通常在人体内终身潜伏，亦可导致感染的宿主细胞不断发生恶性转化，形成肿瘤。已证实EBV与Burking淋巴瘤（BL）、肺癌、胃癌和鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）有关。随着研究的不断深入，人们发现EBV不仅与上述肿瘤的发生相关，同时也与潜伏感染基因有关，其中潜伏膜蛋白1（1atent membrane protein1，LMP1）并诱导B细胞转化，如纤维母细胞系癌基因转化。LMP1在肿瘤的发生、发展中起主要的作用，目前被证实有促进细胞转化甚至恶变的性质。但是LMP1是唯一被发现的EBV相关的B细胞恶性肿瘤产生的EBV编码蛋白，     

原癌基因与动脉粥样硬化

自1976年发现第一个细胞癌基因(Oncogene)以来,生物医学界对此进行了广泛的研究,并进一步发现,正常的机体细胞中亦存在与癌基因高度同源的细胞基因。但这些细胞基因必须经过活化后才能成为有转化能力的癌基因,因而被称为原癌基因(Proto-oncogene)。原癌基因能编码正常细胞中关键的调控蛋白,还可表达生长因子、某些受体、细胞内信息分子等等,在细胞的生长、增殖、应答和功能调节中占有重要地位。通常,原癌基因处于低水平表达或静止状态,只有在某些因素刺激下发生活化后,才会出现异常高表达,引起细胞过度增殖。     

丙型肝炎病毒感染人端粒酶逆转录酶基因转导后细胞的研究

用丙型肝炎病毒阳性血清感染人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转导后人外周血单个核细胞(PBMC),以 期建立长期存活的HCV体外复制细胞模型。将hTERT基因导入正常人PBMC,丙型肝炎阳性血清直接感染转导后 的细胞,RT-PCR检测细胞内HCV RNA正、负链的表达。hTERT基因转入PBMC内,RT-PCR测定其在mRNA水平 有表达,丙肝阳性血清感染后,检测到细胞内HCV RNA正链持续出现,负链问断出现。hTERT基因转导后的。PBMC, 用丙型肝炎阳性血清感染后,病毒在细胞内持续存在并复制,初步建立了长期存活的HCV体外复制细胞模型。     

通过腺相关病毒载体导入树突状细胞的HBV基因可诱导CTL的活性

乙型肝炎已是一个越来越重要的全球问题，但是还很难治疗。不过免疫学治疗提供了新的有效的治疗措施。3种重组性腺相关病毒（AAV）2型载体分别将HBV基因S，C或X中的任何一个导入专职抗原提呈树突状细胞（DC），可刺激体内细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的活性。研究发现这3种携带重组性AAV／HBV抗原病毒的DC其转导有效率为90％。更为重要的是，这3种AAV转导树突状细胞都刺激了快速的，抗原特异性的MHCCTL活性。     

肝癌与细胞内信息传递

细胞生长和分化等生命基本活动所必需的蛋白质酪氨酸磷酸化过程是由蛋白质酪氨酸激酶(protein tyrosine kinases PTKs)和蛋白质酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs)之间的协调作用所决定。细胞信息传递过程中,根据细胞的反应不同,PTKs和PTPs相互间发生拮抗和协同作用,而两者之间的平衡失调,可影响正常细胞的生长并与细胞发生恶性转化有关。自1980年Hunter研究Rous肉瘤病毒致痛机理时发现癌基因Src的表达产物具有PTKs活性以来,认识到蛋白质酪氨酸磷酸化过程对细胞的增殖、分化和癌变有直接的关系。肝细胞各种促分裂因子的受体大部分是通过酪氨酸激酶传递信息,就此对酪氨酸介导的细胞内信息传递与肝细胞的增殖、癌变的关系作一概述。     

蛋白磷酸酶2A调节亚基PR55-γ基因克隆及真核细胞表达

目的:构建蛋白磷酸酶2A(PP2A)调节亚基PR55-γ(PPP2R2C)慢病毒过表达质粒,并在U87细胞株中稳定过表达PPP2R2C,探讨PPP2R2C对PP2A活性的影响。方法:通过反转录(RT)-PCR扩增PPP2R2C的编码序列并克隆至慢病毒载体PWPIR-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)中,获得PWPIR-EGFP-PPP2R2C载体,通过酶切鉴定、质粒测序确定质粒克隆成功,用磷酸钙沉淀法将质粒转导至U87细胞中,流式细胞分析术检测U87细胞转导效率,蛋白质印迹法检测目的蛋白表达,通过PP2A蛋白免疫共沉淀法检测PP2A活性。结果:PWPIR-EGFP-PPP2R2C载体构建及U87细胞株稳转过表达PPP2R2C成功,并且细胞转导效率超过90%,外源性PPP2R2C表达率上升近23倍,过表达PPP2R2C能够增强PP2A活性。结论:PWPIR-EGFP-PPP2R2C载体构建成功,并通过慢病毒转导细胞U87细胞株表达PPP2R2C成功,过表达PPP2R2C能够增强PP2A活性,为进一步研究PPP2R2C功能奠定基础。     

TSLC1与肺癌的关系

TSLC1是最近发现的一种抑癌基因,它的缺失、低表达与肺癌的发生、侵袭、转移及患者的预后密切相关。TSLC1的失活机制主要表现为甲基化和杂合性缺失;其抑癌机制与TSLC1的胞质区有很大关系,TSLC1所编码的蛋白质不仅与抑癌蛋白相结合发挥抑癌作用,而且还参与细胞之间的黏附作用和细胞信号的转导,对细胞周期进行了负调控,对肺癌的产生和发展起抑制作用,其抑癌作用机制不是完全清楚。     

结肠癌中PTEN和PTTG1的表达及临床意义

癌基因的激活和抑癌基因的缺失或基因突变是结肠癌发病机制中的重要因素[1-2].垂体肿瘤转化基因( pituitary tumor transforming gene,PTTG)是发现并克隆的一种新的癌基因,PTTG1是其中的一个重要成员.我们利用免疫组织化学法检测其在结肠癌组织中的表达,旨在了解PTTG1表达与结肠癌临床病理特征之间的关系,探讨PTTG1在结肠癌发生中的作用,以及抑癌基因( PTEN)与PTTG1表达的相互关系.