血必净注射液对脓毒症大鼠组织肿瘤坏死因子-α及凝血功能的影响

目的:探讨血必净注射液对脓毒症大鼠凝血功能及组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症动物模型。96只健康Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和血必净治疗组,后两组分别于CLP后0.5、12、24、36、48和60 h经大鼠阴茎背静脉注射生理盐水或血必净注射液4 ml/kg,分别于CLP后2、8、24、48和72 h 5个时间点各处死8只动物。各组大鼠取腹主动脉血检测血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)及纤维蛋白原(Fbg)含量;取肝、肺组织测定TNF-α蛋白水平。结果:CLP后2 h模型组动物肝、肺组织TNF-α蛋白水平迅速升高(P均<0.01),8 h达到高峰,分别为正常对照组的2.57倍(P<0.01)和4.77倍(P<0.01)。血必净注射液治疗后可显著降低肝、肺组织TNF-α蛋白水平(P<0.05或P<0.01),于CLP后24 h均恢复至伤前正常范围。模型组CLP后2~72 h,PT、APTT有不同程度的缩短,血浆Fbg水平显著降低(P<0.05或P<0.01);血必净治疗组CLP后2~24 h PT、APTT均较模型组明显延长(P<0.05或P<0.01),血浆Fbg含量回升。结论:血必净注射液可显著降低脓毒症大鼠组织TNF-α蛋白水平,防止凝血功能异常,从而有效防止脓毒症的发生发展。     

姜黄素对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1 水平的影响

目的 观察姜黄素对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平和120 h 存活率的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔术建立大鼠脓毒症模型.脓毒症大鼠随机分为对照组和姜黄素处理组,后者以100 mg/kg 剂量盲肠结扎穿孔术(CLP)后0、12、24、36、48 h 分别于腹腔注射姜黄素,观察姜黄素处理后脓毒症大鼠于CLP 后3、6、12、24、48、72 h 时间点肺组织HMGB1 的表达水平和盲肠结扎穿孔术后120 h 两组大鼠存活率的比较.结果 脓毒症大鼠经姜黄素处理后肺组织HMGB1 表达水平显著降低(P ＜0.05),术后120 h 存活率较对照组明显增高(61% vs.33%,P ＜0.05).结论 姜黄素能够降低脓毒症大鼠肺组织HMGB1 水平并提高存活率.     

大承气汤对脓毒症大鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 通过观察大承气汤对脓毒症大鼠HMGB1表达的影响,进一步揭示大承气汤治疗脓毒症的分子机制.方法 将96只SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、低剂量大承气汤组(LDT组)、高剂量大承气汤组(DT组),盲肠结扎穿刺法复制大鼠脓毒症模型.LDT组和DT组分别以不同浓度的大承气汤灌胃,假手术组和脓毒症组以生理盐水对照灌胃.各组大鼠分别于术后2、8、24、48 h四个时间点随机处死6只大鼠,经腹主动脉取血,离心去上清,用ELISA方法检测血浆TNF-α、IL-6、HMGB1的表达.术后24 h,取大鼠末端回肠,用RT-PCR法检测回肠组织HMGB1 mRNA表达,用免疫组织化学方法观察肠组织HMGB1蛋白表达,在光镜下观察大鼠肠组织的病理变化.结果 与假手术组比较,脓毒症组血浆HMGB1在术后8、24、48 h显著增高,脓毒症组回肠组织HMGB1 mRNA及蛋白表达在术后24 h显著增高(P<0.05).与脓毒症组比较,DT组、LDT组血浆HMGB1在术后8、24、48 h显著降低,DT组、LDT组回肠组织HMGB1 mRNA及蛋白表达在术后24 h显著降低(P<0.05).上述指标在LDT与DT组之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 大承气汤治疗脓毒症的机制可能包括:①抑制肠组织HMGB1的表达,进而保护肠黏膜屏障;②降低血浆HMGB1水平,进而抑制HMGB1的某些受体(如TLR4)介导的炎症介质释放.     

脓毒症大鼠肝脏缺氧诱导因子-1α的表达及其与肝脏损伤的关系

目的 分析脓毒症大鼠肝脏缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平的表达、血清乳酸水平、转氨酶水平及肝脏病理损伤的变化;探讨HIF-1α与乳酸、肝脏转氨酶及病理损伤是否存在相关性.方法 将清洁SD大鼠150只分为正常组50只,假手术组50只,盲肠结扎术(CLP)手术组50只.CLP组于手术成功后的第6、12、24、48及72小时分别取10只处死,并于每个时间点取10只正常组大鼠和10只假手术组大鼠作为相应时间点的对照.在各时间点取肝脏组织进行病理学分析,测定血HIF-1 α、乳酸及转氨酶水平.比较各时间点血乳酸、转氨酶及HIF-1α水平的表达是否存在差异,并探讨HIF-1α与肝脏损伤指标及病理变化间的联系.结果 CLP组大鼠肝细胞6h组开始出现损伤,12 h、24h和48 h损伤逐渐加重,损伤在CLP后48 h最重;CLP组6h、12 h和24 h HIF-1α水平的表达与正常组和假手术组相比明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05);CLP 12 h和24h乳酸、ALT及AST水平均明显升高,与正常组和假手术组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);HIF-1α水平与乳酸水平、血清ALT水平均存在正相关性(r值分别为0.631、0.436,P＜0.05).结论 脓毒症大鼠血HIF-1α与乳酸及谷丙转氨酶水平存在相关性,与肝脏病理损伤时间基本相同,HIF-1α可作为预测脓毒症肝脏损伤的主要指标.     

脓毒症大鼠心肌内皮素-1、肿瘤坏死因子-α表达与心肌损伤的关系

目的:研究脓毒症时心肌损伤与心肌内皮素-1(ET-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的关系.方法:24只雄性SD大鼠随机均分为3组,正常对照组、假手术组、脓毒症组,每组8只.采取盲肠结扎穿刺术(CLP)建立脓毒症模型,24 h后动脉采血及分离左心室心肌,检测大鼠血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn Ⅰ)、心肌匀浆上清液中TNF-α、ET-1浓度.并分别观察心肌显微及超微结构改变.结果:脓毒症组大鼠血清cTn Ⅰ较正常时照组及假手术组明显升高(P<0.01),心肌出现典型变性及超微结构损伤;心肌TNF-α、ET-1较正常对照组及假手术组明显升高(P<0.01).脓毒症组血清cTn Ⅰ与心肌TNF-α、ET-1水平正相关(γ值分别为0.967和0.958,P<0.001).结论:脓毒症时心肌损伤与心肌TNF-α、ET-1水平上调有关.     

乌司他丁对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 通过观察乌司他丁注射液对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1 (HMGB1)表达的影响,探讨乌司他丁对脓毒症大鼠肺保护的作用机制.方法 90只健康的雄性SD大鼠随机分为假手术组(A组)、阳性对照组(B组)、乌司他丁治疗组(C组),每组30只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作大鼠脓毒症模型.分别采用生理盐水或乌司他丁注射液每12 h重复腹腔注射,并于术后0、6、12、24、48、72 h随机处死大鼠.分别采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组织化学法(IHC)检测肺组织中HMGB1的表达.结果 A组各时间点变化不明显;B组12 h开始升高,至24 h达到高峰,显著高于组内0、6、12、72 h及A、C组对应时间点水平(P＜0.01).B组在48 h略有下降,72 h接近12 h水平;C组各时间点的变化趋势同B组相似,但在24、48 h显著低于B组同期水平(P＜0.05);RT-PCR法与IHC法表现一致.肺泡上皮细胞水肿亦较B组明显减轻.结论 乌司他丁对脓毒症大鼠肺组织有明显的保护作用,其机制可能与抑制肺组织HMGB1的表达有关.     

丙酮酸乙酯对脓毒症大鼠血清HMGB1表达的影响及其作用的研究

目的 观察丙酮酸乙酯(EP)对脓毒症大鼠血清高迁移率族蛋白1表达水平的影响,及其对动物多器官功能的干预作用.方法 采用雄性Wistar大鼠,以盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症大鼠模型.80只大鼠随机分为假手术组(n=20)、脓毒症组(n=20)、EP早期治疗组(n=20)和EP晚期治疗组(n=20).各组分别于模型建立后24 h和48 h颈动脉置管留取标本后活杀,检测血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平以及24 h丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)及动脉氧分压(PaO2)等各器官功能指标的变化.结果 脓毒症组、EP治疗组各时相点血清HMGB1水平均较假手术组高(P<0.01);EP早期组和EP晚期组HMGB1均较同时相点脓毒症组显著降低(P<0.01).与脓毒症组相比,EP治疗组血清ALT、AST、BUN、Cr、CK、PaO2水平均明显改善(P<0.01);脓毒症组24 h血清HMGB1与血清ALT、AST、BUN、Cr、CK、PaO2水平的变化之间存在显著相关性(P<0.01).结论 EP对脓毒症大鼠的重要器官功能具有保护作用,其机制可能与EP抑制HMGB1的释放有关.     

盐酸戊乙奎醚对脓毒症肺损伤大鼠炎症因子表达的影响

目的 观察盐酸戊乙奎醚对脓毒症肺损伤大鼠的治疗效果.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症肺损伤大鼠模型,90只SD大鼠被随机均分为假手术组、模型组和盐酸戊乙奎醚(0.45 mg/kg肌肉注射)治疗组.各组分别于术后24、48、72 h检测血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)浓度、肺湿/干重(W/D)比值以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中水通道蛋白5(AQP5)的浓度,并进行肺组织病理观察.结果 与模型组比较,治疗组血清HMGB1、MIF水平及肺W/D比值明显下降,BALF中AQP5水平明显升高,差异均有统计学意义(P均<0.01).结论 盐酸戊乙奎醚通过抑制血清HMGB1、MIF的表达,增加BALF中AQP5表达,对脓毒症肺损伤大鼠肺组织具有保护作用.     

辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠凝血功能及肝脏C-反应蛋白的影响

目的 观察辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠凝血功能及肝脏C-反应蛋白(CRP)的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型.清洁级雌性Wistar大鼠80只被随机分为正常对照组(8只)、假手术组(6、24、48 h各8只)、脓毒症模型组(6、24、48 h各8只)和辛伐他汀预处理组(6、24、48 h各8只),除正常对照组外,其余各组于CLP术前给予生理盐水或辛伐他汀20 mg/(kg·d)(溶于1 mL蒸馏水),灌胃连续2周,各组分别于CLP术后6、24、48 h后活杀动物8只,留取血液及肝组织标本.观察脓毒症大鼠一般表现并测定脓毒症大鼠白细胞计数(WBC)及血小板计数(PLT)、组织因子(TF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、肝脏CRP等指标.结果 辛伐他汀预处理可以降低脓毒症大鼠TF、PAI-1水平,减少PLT消耗,同时降低肝脏组织CRP水平的表达.结论 辛伐他汀预处理能够改善脓毒症大鼠的凝血功能;减轻肝脏炎症反应,保护肝脏功能.     

大黄对肠源性感染致早期肺损伤防治作用的机制探讨

目的:探讨大黄对大鼠腹腔感染致早期肺损伤防治作用的机制.方法:132只SD大鼠随机分为感染组(48只)、治疗组(48只)和对照组(36只),各组又分为6小组.采用大鼠盲肠结扎并穿孔(CLP)造成腹腔感染,治疗组每日在麻醉下经胃管灌注大黄1次.分别在术后0、24、48、72、96和120 h处死一小组大鼠,检测肺毛细血管通透性、肺湿/干质量比值及肺组织的内毒素和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析.结果:肺毛细血管通透性、肺湿/干质量比值、BALF的中性粒细胞百分率、肺组织的内毒素和TNF-α逐渐增加,时间越长越明显,但治疗组比感染组增加较慢、幅度较小.结论:大黄可防止内毒素进入肺组织,抑制肺内中性粒细胞的积聚和TNF-α释放,减轻肺的炎性反应.