金银花中3种有机酸的反相高效液相色谱法定量分析

目的 :建立用反相高效液相色谱内标法梯度洗脱同时测定金银花中绿原酸、咖啡酸、 3,5 -二咖啡酰奎尼酸含量的方法 ,并对 4个产地 3种金银花中上述 3种化合物进行定量分析。方法 :采用岛津CLC -ODS柱 (6 0mm× 15 0mm) ,甲醇 - 10 %的磷酸氢二钠和醋酸缓冲液流动相不同比例进行梯度洗脱 ,内标物为水杨酸 ,检测波长 30 4nm。结果 :西南地区金银花药材主流商品灰毡毛忍冬、细毡毛忍冬干燥花蕾中绿原酸、咖啡酸、 3,5 -二咖啡酰奎尼酸含量高于山东、河南产金银花。结论 :本法灵敏快速 ,准确可靠     

HPLC-Q-TOF-MS技术在预知子配方颗粒指纹图谱建立和化学成分归属中的应用

目的 建立预知子配方颗粒的HPLC指纹图谱，并使用Q-TOF-MS技术鉴定共有峰成分。方法 采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×50 mm，2.7 mm），以乙腈-0.05%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，检测波长210 nm，柱温30℃，流速0.5 mL·min^-1。采用相似度分析软件对指纹图谱进行分析。以标准物质和文献数据为参照，使用Q-TOF-MS负离子检测模式对特征峰进行质谱分析并指认。结果 建立了预知子配方颗粒的HPLC指纹图谱，以4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸峰为参照峰，标定了14个共有峰，样品间相似度范围为0.943~0.994，样品与对照指纹图谱相似度范围为0.976~0.988。使用Q-TOF-MS对共有峰进行了指认，确定了8个峰成分，分别为新绿原酸、绿原酸、木通苯乙醇苷B、3，4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、川续断皂苷Ⅵ、α-常春藤皂苷。结论 该方法灵敏、准确、可靠，可用于预知子配方颗粒的质量评价。     

中药大血藤的酚性化合物

目的对中药大血藤干燥藤茎的化学成分进行研究。方法采用现代色谱技术分离化合物，运用现代波谱技术(IR，MS，¹H NMR，¹³C NMR，²DNMR)对所得化合物的结构进行鉴定。结果从大血藤的藤茎中分得10个酚类化合物，分别鉴定为1-O-(香草酸)-6-(3″,5″-二-O-甲基-没食子酰基)-β-D-葡糖苷(I)、(-)-表儿茶素(II)、阿魏酸-对羟基苯乙醇酯(III)、3-O-咖啡酰奎宁酸(IV)、3-O-咖啡酰奎宁酸甲酯(V)、罗布麻宁(VI)、香草酸(VII)、原儿茶酸(VIII)、3,4-二羟基-苯乙醇(IX)、4-羟基-苯乙醇(X)。结论化合物I为新化合物，化合物III～VI和VIII～X为首次从该植物中分得。     

3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的制备及其对HeLa细胞的抗增殖活性研究

目的 制备高纯度3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸，并评价其对人宫颈癌HeLa细胞的抗增殖活性。方法 采用柱色谱提取法和中压液相色谱法从奇蒿花中分离、纯化得到高纯度的3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸。采用MTT法评价该化合物对人宫颈癌HeLa细胞的体外抗增殖活性。结果 柱色谱提取的提取率和中压液相色谱法的回收率分别为99.0%，61.2%，总回收率为54.0%。随着3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸浓度升高，HeLa细胞存活率下降，细胞形态损伤增加，受试药物的IC₅₀值为26.5µg·mL^-1。结论 本研究提供了一种简单、高效、节能的3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸制备方法。3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸对HeLa细胞具有一定的体外抗增殖活性。     

太白米的酚酸类成分研究

目的： 研究太白米Notholirion bulbuliferum(Lingelish.) Stearn干燥小鳞茎的化学成分。方法： 采用硅胶柱色谱分离化学成分,IR,¹HNMR,¹³CNMR,MS等方法进行结构鉴定。结果： 从正丁醇萃取物中分离鉴定了6个酚酸类成分,分别为对香豆酸甲酯(methyl p-coumarate,I)、对甲氧基肉桂酸(p-methoxy cinnamic acid, II)、对香豆酸(p-coumaric acid, III)、阿魏酸(ferulic acid, IV)、咖啡酸乙酯(ethyl caffeate, V)、1-O-咖啡酰甘油酯(1-O-caffeoyl glycerol, VI);另外,从其石油醚萃取物和氯仿萃取物中分离鉴定了β-谷甾醇(VII)、β-谷甾醇葡萄糖苷(IX)和正二十八酸(VIII)。结论： 化合物VI为新化合物,其它化合物均为首次从本植物中分离得到。     

不同产地野菊花中绿原酸、4, 5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定

目的建立不同产地野菊花中绿原酸、4,5-二咖啡酰奎尼酸的含量测定方法。方法采用HPLC,色谱柱为DiamonsilC18(4.6 mm×250 mm,5μm);采用梯度洗脱;检测波长327 nm;柱温30℃;流速1.0 mL.min 1。结果绿原酸、4,5-二咖啡酰奎尼酸的线性范围分别为0.011～0.22μg,0.017 5～0.35μg。加样回收率分别为99.1%和98.8%;RSD分别为1.93%和1.54%(n=9)。结论本方法操作简便,分析速度快,结果准确,重复性好,可用于野菊花中绿原酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸含量的测定。     

基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技术咳喘宁颗粒化学成分分析及多指标定量测定

目的 采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱技术（HPLC-Q-TOF-MS/MS）对咳喘宁颗粒化学成分进行分析,并建立 HPLC 多成分含量测定方法。方法 采用 HPLC-Q-TOF-MS/MS 技术,色谱柱 Agilent ZORBAX C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）,柱温 35 ℃,体积流量 1.0 mL·min^-1,进样量 10 μL,流动相 A：0.1% 甲酸,流动相 B：乙腈,梯度洗脱;电喷雾离子源（ESI）,正、负离子模式扫描,结合对照品和文献数据鉴定咳喘宁颗粒中的化学成分,并建立HPLC法同时测定新绿原酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、异绿原酸B、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、柚皮苷的含量。色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Waters AtlantisTM T3色谱柱,250 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱：0～20 min,3%～15% 甲醇;20～25 min,15%～18% 甲醇;25～26 min,18%～23% 甲醇;26～45 min,23%甲醇;45～46 min,23%～38% 甲醇;46～60 min,38% 甲醇;60～61 min,38%～42% 甲醇;61～70 min,42% 甲醇 ;70～80 min,42%～90%甲醇;体积流量1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃;进样量10 μL,检测波长324、283 nm。结果 共鉴定咳喘宁颗粒中86个化合物,20个来自生麻黄、15个来自白屈菜、30个来自金银花、22个来自枇杷叶、12个来自金沸草、14个来自化橘红,其中有26个化合物经与对照品比对确认,选择新绿原酸、绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、异绿原酸B、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和柚皮苷作为含量测定的质控指标,6种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 9）,精密度、稳定性及重复性良好,加样回收率为99.48%～103.39%,RSD为1.29%～1.98%。对3批咳喘宁颗粒进行多成分含量测定,方法可行。结论 在质谱成分解析的基础上,建立咳喘宁颗粒6种化学成分的含量测定方法,为咳喘宁颗粒的药效物质基础和质量标准研究提供参考。     

3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的稳定性和抗氧化活性研究

目的 考察影响化合物3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸稳定性的因素并对3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的体外抗氧化活性进行初步研究。方法 采用HPLC考察3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸在不同溶剂、pH、温度、光照条件下的稳定性;采用UV测定3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的体外抗氧化活性（清除DPPH自由基）。结果 溶剂的种类、pH值、温度、光照条件对3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸稳定性具有一定影响。3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸具有较强的体外清除DPPH自由基活性,其活性与Vc相当[3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和Vc的IC₅₀值分别为（372.56±1.04）μg·mL^-1和（294.54±1.03）μg·mL^-1]。结论 在该化合物的分离纯化及其分析检测时,不能采用纯有机溶剂为溶剂,应在中性或酸性条件下,低温、避光操作。3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸作为抗氧化剂在制药、食品、化妆品以及精细化工行业具有广阔的应用前景。     

RP-HPLC法同时测定防暑清热饮中5种活性成分的含量

目的 建立RP-HPLC法同时测定防暑清热饮中绿原酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷和广藿香酮含量的方法。方法 采用ZORBAX-SB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以0.2%磷酸溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为327 nm,柱温为30 ℃。结果 绿原酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷和广藿香酮线性关系良好（r≥0.999 6）,平均加样回收率（RSD）分别为102.03%（1.63%）、102.38%（1.51%）、102.39%（1.23%）、103.14%（1.87%）和104.01%（2.33%）。结论 本实验建立的测定方法简单、准确、重复性好,能够有效控制该制剂的质量。     

不同产地加工方法对野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分含量的影响

目的：建立测定野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分含量的方法,并比较不同产地加工方法对其含量的影响,为确定其较佳加工方法提供依据。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为DiamonsilC18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为0．1％磷酸溶液。甲醇（梯度洗脱）,检测波长为326nm,柱温为25℃,流速为0．8ml／min。结果：3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5．二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸的进样量分别在87．36~873．60、65．81~658．10、32．00~320．00ng范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系（,分别为0．9999、0．9999、0．9998）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2％;平均加样回收率分别为99．59％、99．65％、99．50％,RSD分别为1．53％、1．78％、2．27％（n均为6）。结论：该方法操作简便、结果准确、重复性好,可用于野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分的含量测定。野菊花中二咖啡酰奎尼酸类成分的含量除与温度有关外,还与烘晒时间长短有一定的关系。     

RRLC-Q-TOF/MS分析金银花的化学成分

目的 采用快速液相-高分辨四极杆飞行时间串联质谱对金银花化学成分进行分离鉴别.方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm),乙腈(含0.1％甲酸)和0.1％甲酸溶液梯度洗脱,流速0.4mL·min-1,进样量为5μL,检测器为高分辨四极杆飞行时间质谱,ESI离子源,质量数扫描范围m/z100～1500.结果 根据正、负离子模式下获得的各色谱峰的质谱数据,共检测到33个化学成分,其中6个咖啡酰奎尼酸类、7个黄酮类和7个环烯醚苷类成分通过与文献对照或根据质谱裂解规律得到进一步确认.结论此方法灵敏准确,有利于化合物结构鉴别,可作为中药金银花的咖啡酰奎尼酸类、黄酮类和环烯醚苷类成分的鉴定方法.     

指纹图谱和主成分分析法评价杜仲叶的质量

目的采用主成分分析法(PCA)和指纹图谱法,对4个不同产地20个批次杜仲叶的质量进行评价。方法采用Aichrom AQ C18色谱柱(250 mm×4.5 mm,5μm),流动相为甲醇与0.1%甲酸的梯度洗脱系统,检测波长323 nm;检测并确定了20个批次药材指纹图谱的14个共有峰,采用二维双指标评价法和PCA统计分析法,统计出杜仲叶组分的分布特点。结果 2号(绿原酸)、3号(咖啡酸)、7号(未知)、10号(未知)组分为显著贡献的主成分组分。结论不同产地杜仲叶样品中指纹组分各异,确定的主组分能显著区别药材的不同产地,可为杜仲叶药材质量的整体控制及其制剂的质量研究提供依据。     

GC-MS/SIM法测定不同产地杜仲叶中的氨基酸

目的 建立杜仲叶中氨基酸含量测定的GC-MS/SIM方法,并用此方法测定不同产地杜仲叶中氨基酸含量.方法 杜仲叶采用6 mol·L-1盐酸提取,提取液经BSTFA+ 1％ TMCS衍生化后进样,全扫描定性,选择离子监测内标法定量.色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25 μm×0.25 mm),初始柱温为100℃,保持3 min,程序升温8℃·min-1至300℃,保持6 min,分流比为10∶ 1.结果 各氨基酸在相应的范围内线性关系良好(r＞0.999),平均回收率在89.6％～106.3％ (n=5),RSD在1.7％～6.0％.采用该法对4个不同产地的杜仲叶进行氨基酸的含量测定,结果表明杜仲叶中含有氨基酸15种,湖北恩施产杜仲叶氨基酸含量较高,为9.95％;重庆长寿产杜仲叶氨基酸含量较低,为5.80％.结论 本法简便灵敏、重现性好、准确度高,适用于杜仲叶中氨基酸的分离检测.     

银黄颗粒提取工艺研究

目的 研究银黄颗粒的提取工艺.方法 采用正交实验法,以绿原酸和黄芩苷为指标.结果 金银花最佳提取工艺12倍水,石灰乳浓度为20%,硫酸浓度10%.黄芩最佳提取工艺8倍水,硫酸浓度10%,温度为70℃.结论 该工艺稳定可行,显著优于原工艺.     

忍冬叶的化学成分

目的研究忍冬(Lonicera japonica Thunb.)叶中的化学成分。方法采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20柱色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和波谱分析鉴定了其化学结构。结果从忍冬叶的体积分数为75%的乙醇溶液提取物中分离得到4个化合物,并鉴定其结构为:似梨木双黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(ochnaflavone,1)、似梨木双黄酮(ochnaflavone7-O-β-D-gluco-pyranoside,2)、次大风子素(hydnocarpin,3)、忍冬苷(lonicerin,4)。结论化合物2为一新化合物,化合物3,4为首次从该植物叶中分离得到。     

杜仲水提液对幼鼠睾丸间质细胞睾酮合成和caspase9的影响

目的:探讨杜仲水提液对幼鼠睾丸间质(Leydig)细胞睾酮合成功能和caspase9的影响。方法:原代分离、鉴定幼鼠的Leydig细胞,进行细胞培养。在加入不同剂量杜仲水提液培养24 h后,用化学发光法测定睾酮的浓度;分别在加药24 h、36 h和48 h后,用MTT法检测各组的吸光度;在加药24 h后,用流式细胞仪分析细胞凋亡率、存活率和死亡率;用实时定量反转录聚合酶链反应测定caspase9 mRNA的表达。结果:在Leydig细胞中加入杜仲水提液24 h后,上清液的睾酮浓度明显增加,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01);药物刺激24 h、36 h和48 h后,其吸光度与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.01);药物刺激24 h后,细胞凋亡率和死细胞率明显降低,活细胞率明显提高,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01);药物刺激24 h后,caspase9 mRNA的表达量明显降低,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:杜仲水提液能通过下调caspase9的表达,降低Leydig细胞的凋亡,促进其增殖,而提高其合成睾酮的能力。     

咳喘宁提取工艺研究

研究金银花、苦杏仁、板蓝根等的复方水提的最佳提取工艺。采用水提法，用L9（3^4)正交实验，以其出膏率及绿原酸含量为优选指标，采用高效液相色谱测定绿原酸成分含量，筛选最佳条件。     

毛细管电泳法测定金银花中芦丁、绿原酸、槲皮素和咖啡酸的含量

目的建立同时测定金银花中的芦丁、绿原酸、槲皮素和咖啡酸含量的毛细管电泳分析方法。方法未涂层弹性石英毛细管柱（50.0cm×75μm,有效长度40cm）,pH 9.5的20mmol.L-1硼砂溶液为缓冲液,分离电压20kV,柱温25℃,检测波长220nm,阳极压力进样0.5psi×3s。结果芦丁、绿原酸、槲皮素和咖啡酸在2.5～500μg.mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为103.5%,97.4%,98.7%和102.2%;RSD分别为1.9%,2.3%,1.1%和2.4%。结论该法简便快速,重复性好,各成分分离良好,可用于金银花的质量评价。     

河南产忍冬不同药用部位挥发油成分分析

目的:分析河南产忍冬不同药用部位的挥发油成分。方法:采用固相微萃取法提取忍冬花蕾、叶和枝干中的挥发油,应用气相色谱-质谱联用技术结合保留指数法对其化学成分进行分析和鉴定,并用气相色谱面积归一化法测定各成分的相对百分含量。结果:从河南产忍冬不同部位中共鉴定出85种成分,其中7种是3个部位共有成分。结论:本研究可为进一步开发利用忍冬资源提供科学依据。     

对杜仲叶深度开发的思考与建议

结合当前杜仲叶开发研究实际，提出杜仲种植亟待探索建立新的生产模式;杜仲叶药用开发亟待有新的突破;杜仲叶胶用开发应大力发展;杜仲叶综合利用应深入研究等4点思考与建议，以更好地进行杜仲叶的深度开发。