结核杆菌特异性抗原对结核病诊断价值研究

目的从人血清提取结核杆菌早期分泌性抗原靶6、培养滤液蛋白、结核杆菌分泌蛋白38KD进行标测,探讨结核病诊断新方法。方法选择我院2007年1月～2008年1月间住院肺结核病人和健康查体者,应用结核分枝杆菌相关性抗原ESAT-6、CFP10、38KD检测试剂盒测定血清结核菌抗原水平,同时对所有入选者均行结核菌培养。结果活动性肺结核患者血清中检测到结核分枝杆菌特异性抗原ESAT-6、CFP10、38KD的阳性率高,与健康对照组有统计学差异（P〈0．005）;结核分枝杆菌抗原可区分结核感染和非感染,与结核菌素试验比较有显著的统计学差异（P〈0．001）。结论血清结核杆菌特异性抗原能够作为诊断结核病的依据,对鉴别活动性肺结核、非活动性肺结核、非结核病具有重要的价值。     

结核杆菌分泌抗原蛋白对结核性脑膜炎诊断的研究

结核是一个通过呼吸道传播的具有高度传染性的疾病,全世界每年大概有九百万的新发结核患者和一百七十万的死亡患者。在某些地域,如非洲,受到艾滋病的影响,结核病更是泛滥。而我国,是仅次于印度的世界第二的结核大国,传统用来诊断结核感染的方法如PPD试验因BCG(卡介苗)的接种会     

血清结核杆菌抗体对结核病的诊断意义

目的：早期诊断结核病。方法应用以脂阿拉伯甘露糖（ＬＡＭ）为抗原的ＥＬＩＳＡ法检测８９３例患者,并对１１５例结核病患者同时进行了腺苷脱氨酸（ＡＤＡ）测定。结果在各类结核病患者中,该试验的敏感性和特异性分别为７０．６％、９１．３％,结核病人血清结核抗体与胸腔积液、腹水／血清ＡＤＡ两种测定结果的符合率为７３％,结论结核抗体测定对结核病有一定参考价值。同时进行胸腔积液、腹水／血清ＡＤＡ比值测定对结核病的诊     

前列腺特异性抗原对前列腺疾病的诊断价值

笔者采用电化学发光免疫法对105例前列腺疾病患者和30例健康成年男性血清中前列腺特异性抗原(PSA)含量进行了测定,结果表明血清PSA检测对前列腺疾病的诊断有重要意义,现报告如下。1材料和方法1.1检测对象疾病组:105例,均为男性,年龄49~85岁,其中前列腺炎35例,前列腺增生症(BPH)     

前列腺特异性抗原对前列腺癌早期诊断的价值

目的 探讨血清前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(FPSA)、前列腺特异性抗原密度(PSAD)对经前列腺癌早期诊断的价值.方法 对128例[其中确诊为前列腺癌32例,非前列腺癌患者中28例有前列腺上皮内瘤形成(PIN)]经直肠前列腺穿刺活检诊断的患者PSA、FPSA、FPSA/PSA比值、PSAD等计量资料以及分区域计数资料与病理诊断结果进行分析,探讨PSA、FPSA、FPSA/PSA、PSAD与前列腺癌的关系.结果 前列腺癌和非前列腺癌患者PSA(P＜0.001)和PSAD都存在显著差异(P＜0.01),FPSA/PSA存在差异(P＜0.05);将无前列腺癌及癌前病变、非前列腺癌存在PIN改变、前列腺癌患者分别作为第一、二、三组分组进行比较,第一、三组患者PSA(P＜0.001)和PSAD存在显著差异(P＜0.01),FPSA/PSA存在差异(P＜0.05);第二、三组患者PSA(P＜0.01)和PSAD都存在显著差异(P＜0.01),FPSA/PSA无显著差异(P＞0.05);第一、二组患者之间无显著差异.结论 PSA是早期诊断前列腺癌的重要线索,结合 FPSA/PSA比值对早期诊断前列腺癌有较大意义,PSAD可以作为前列腺癌早期诊断的辅助指标.     

结核杆菌免疫保护性抗原Ag85A的基因克隆与表达研究

目的 为结核病新型疫苗研制提供靶基因和鞭抗原。方法 根据结核杆菌H37Rv株免疫保护性抗原Ag85A的基因序列自行设计一对寡核苷酸引物，以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板，通过PCR扩增获得具有完整开架读码框（ORF）的Ag85A抗原基因，并将其正向插入真核和原核穿梭表达型载体pBK-CMV构建重组质粒，重组质粒转入大肠杆菌后IPTG诱导表达，并对其表达产物进行Western-blotting分析。结果 PCR扩增获得了具有完整开架读码框的Ag85A抗原基因；构建了Ag85A抗原基因真核和原核穿梭表达型载体；Ag85A抗原基因在大肠杆菌中实现了稳定表达，结论 成功地对结核杆菌免疫保护性抗原Ag85A进行了基因克隆与表达，为进一步研究其在结核病新型疫苗研制中的应用奠定了基础。     

结核分枝杆菌特异性抗原重组蛋白研究进展

结核病是一种由结核分枝杆菌(mysobacterium tubercu-losis,MTB)引起的人畜共患慢性传染病.由于耐药株出现、人类免疫缺陷病毒(HIV)合并MTB感染以及大规模高危人群流动,因而造成全球流行,其发病率、病死率呈上升趋势,已形成全球范围的流行.疫情呈三高一低,即患病率高、病死率高、耐药率高、年递降率低.要控制结核病的发生与流行必须加强对结核病的诊断学研究,目前研究快速、准确、敏感、特异以及简便的诊断方法是有效地控制结核病蔓延的关键.     

前列腺特异性抗原对前列腺疾病的诊断价值

目的：探讨前列腺特异性抗原（PSA）在前列腺疾病中的诊断价值。方法：将150例前列腺疾病患者经直肠镜、B超、CT或活检分为前列腺癌（Pca）14例，前列腺增生（BPH）115例．前列腺炎21例，非前列腺疾病（对照组）36例。采用放射免疫分析法（RIA）检测PSA并进行比较分析；结果：血清PSA以4．0μg／L作为分界点时，14例Pca血清PSA水平为53.09±28．36μg,／L，显著高于其他各组（均P〈0．01），115例BPH患者、21例前列腺炎患者和36例非前列腺疾病组分别有64例（55．7％）、4例（19．0％）和3例（8．3％）PSA超过阳性界值。结论：血清PSA测定对前列腺疾病诊断有重要意义。     

结核分枝杆菌抗原及其研究进展

结核病是危害人类健康的最大传染病之一。结核分枝杆菌抗原遗传背景较复杂,且个体差异较大,应用单一抗原和单一的诊断方法无法对结核病进行及时、准确的诊断。近年来国内外学者发现了一些新的结核分枝杆菌菌属抗原和特异性抗原,并逐渐完善了结核病的诊断方法,对结核病的诊断具有重大意义。现就这些抗原的生物学特性及其在结核病诊断中的研究进展进行综述。     

结核病血清诊断中HSP65的应用前景分析

目的：通过评价HSP65抗原表达在结核病血清诊断中的效果,分析其应用前景。方法取活动期结核病患者63例纳入观察组,选取体检健康志愿者60例纳入对照组,就HSP65分别与38 kDa、16 kDa、LAM联合检测诊断对照组与观察组结核病。结果Western-blot结果显示,表达产物在相对分子量65 kμ处有一条表达带,在健康人血清阴性中则无表达带;特异度、敏感度与38 kPa基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSP65在结核病血清诊断中可作为备选标志物,反应强度与38kDa基本相当,联合诊断有助于提高诊断符合率;HSP65对结核病X线空洞影敏感度较高。     

腺苷脱氨酶、结核抗体及DNA联合检测在结核性积液的临床诊断价值

目的:探讨腺苷脱氨酶( ADA)、结核抗体(TB-Ab)、TB-DNA联合检测在结核性积液的临床诊断价值.方法:选择87例胸腔积液进行分析,其中结核组38例,非结核组49例,比较3种检测方法的检测情况及单独检测和联合检测的方法学指标.结果:两组别3种检测方法的阳性率经卡方检验分析,有统计学差异(P＜0.05),在结核组中3种检测方法阳性率经卡方检验分析比较,有统计学差异(P＜0.05),3种检测方法以TB-DNA阳性率最高,3种方法联合检测灵敏度为92.1％,特异度以TB-DNA最高为97.9％.结论:3种方法联合检测可提高灵敏度,提高结核杆菌的检出率,方法学指标综合分析,以TB-DNA检测为优.     

分枝杆菌培养中同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)的临床应用价值

目的 分析探讨培养分枝杆菌时同步筛检依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)临床意义及价值. 方法 2011年3月—2015年3月所采集530例临床标本进行培养使用利福平浓度100μg/mL罗氏(L-J)培养基建立依R菌筛查系统,将待分离培养分枝杆菌平行接种于罗氏对照空白培养基(L-J)与L-J R100培养基中分别培养,依照培养基选用种类分别分成L-J R100、L-J、BD960 3组, 并对结果 进行分析统计. 结果 L-J R100培养基检出76例阳性结核分枝杆菌,且皆为依R菌,菌株粗大,生长良好,L-J R100阳性菌株所占比例为14.34%,L-J阳性菌株所占比例23.21%, BD960阳性菌株所占比例为52.83%. 结论 培养分枝杆菌时同步筛查依R菌能得到绝对依赖菌株,可提高分枝杆菌阳性检出率,可最快速度判断阳性菌株耐药性及是否对利福平具依赖性,该方法 可靠易行,具有临床推广价值.     

噬菌体裂解法在肺结核快速诊断中的应用

目的 建立结核分枝杆菌检测的噬菌体裂解法并探讨其在肺结核快速诊断中的应用.方法 215份临床痰标本分别用荧光法,L-J培养法和噬菌体裂解法进行检测.结果 与L-J培养法相比,噬菌体裂解法的敏感性和特异性分别为71.0%,97.9%,而普通荧光法的敏感性和特异性分别为55.7%,91.2%.结论 噬菌体裂解法可以快速鉴定结核分枝杆菌,用其检测痰标本中的结核分枝杆菌具有很高的特异性和较高的敏感性,可以用于肺结核的快速诊断.     

Ag85A、Ag85B和HspX蛋白特异性细胞免疫反应对结核性胸膜炎的辅助诊断价值

目的:探讨3种结核分枝杆菌保守抗原Ag85A、Ag85B和HspX抗原特异性细胞免疫反应对结核性胸膜炎的辅助诊断价值。方法:收集我院收治的胸腔积液患者30例,根据胸水性质,分为结核性胸膜炎组20例,非结核性胸膜炎组10例。收集胸水样本,分离胸水样本中细胞成分。原核表达、纯化并鉴定结核分枝杆菌Ag85A、Ag85B、HspX蛋白。用Ag85A、Ag85B及HspX蛋白分别刺激2组患者的胸水细胞成分,通过ELISA技术检测IFN-γ表达水平并进行组间比较。结果:Ag85A蛋白刺激后,非结核性胸膜炎组IFN-γ为(15.50±2.41)ng/L,结核性胸膜炎组IFN-γ为(1 775.00±362.86)ng/L;Ag85B蛋白刺激后,非结核性胸膜炎组IFN-γ为(14.89±2.30)ng/L,结核性胸膜炎组IFN-γ为(2 442.50±418.94)ng/L;HspX蛋白刺激后,非结核性胸膜炎组IFN-γ为(14.20±2.30)ng/L,结核性胸膜炎组IFN-γ为(3 570.00±496.41)ng/L;两组比较均P<0.01。结核性胸膜炎组中,不同患者对不同抗原刺激所产生的IFN-γ水平有一定差别。结论:结核性胸膜炎患者胸水中的细胞成分经Ag85A、Ag85B及HspX蛋白刺激后,IFN-γ水平均不同程度明显升高,该方法对结核性胸膜炎有一定的辅助诊断价值。     

结核杆菌检测基因芯片的制备研究

目的　建立结核杆菌检测基因芯片的制备技术。方法　制备和标记靶基因 ,用点样仪将靶基因点于玻片介质上 ,并经点样后处理制成基因芯片 ,用扫描仪测定处理前后芯片上荧光强度的变化 ,计算 DNA固定率 ,同时测定和比较两种不同玻片、不同点样液和三种不同点样后处理方法的 DNA固定率。结果　制备结核杆菌检测基因芯片 ,用醛基修饰玻片作为介质 ,用 DMSO溶液作为点样液 ,点样后芯片处理以水合 1小时再干燥 30分钟为佳。结论　本研究所建立的结核杆菌检测基因芯片制备技术具有较高的效率和可靠的实用性能     

荧光定量聚合酶链反应技术检测痰结核分枝杆菌DNA及其临床应用研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)技术在肺结核诊断中的临床价值。方法对144例活动性肺结核的痰及30例健康对照者的痰进行 FQ-PCR 检测,并与痰涂片检查法、改良罗氏培养法结果进行比较。结果 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率、痰涂片抗酸检查法阳性率、改良罗氏培养法阳性率分别为61.1%(88/144)、51.4%(74/144)、55.6%(80/144),以 FQ-PCR 检测痰结核分枝杆菌阳性率为最高,FQ-PCR 检测特异性为100%。结论 FQ-PCR 技术检测痰结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,该方法快速、准确,对肺结核的诊断有一定价值。     

FQ-PCR检查痰中结核杆菌对肺结核诊断的临床价值

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测痰中结核分枝杆菌对诊断肺结核的临床价值。方法选择2007年4月～2010年1月在我院感染科治疗的100例确诊肺结核患者和100例非结核性呼吸道疾病患者,所有患者均分别用FQ-PCR、痰涂片和Bactec MGIT 960结核杆菌快速培养法进行痰结核杆菌检测,比较分析检测结果。结果检测100例确诊肺结核患者的痰标本,FQ-PCR检出率最高(55%),高于快速培养法(43%)(P<0.05)和痰涂片法(29%)(P<0.01)。以痰培养为标准,FQ-PCR对痰菌检测的敏感性、特异性、阳性预期值、阴性预期值分别为97.8%、93.5%、80.0%和99.3%;FQ-PCR与痰培养法的一致性为94.0%(188/200)。结论FQ-PCR是检查痰中结核杆菌快速、敏感、特异、可定量、简便的方法,值得临床推广用于肺结核诊断,可作为结核杆菌培养法的有效补充。     

结核分枝杆菌胞浆蛋白质抗原的制备与检测

将结核分枝杆菌（M．tuberculosis）H37Ra株苏通培养基培养物化学灭活，低温高速离心，超声波裂解，SephadexG－200柱层析，获得3个峰，制备了3种胞浆蛋白质抗原。经与结核分枝杆菌阳性参比血清、阴性参比血清及各种分枝杆菌高免兔血清的ELISA检测，并与PPD、聚合OT及菌体PP等抗原比较，结果表明：第二峰的胞浆蛋白质抗原的特异性最好。