D-半乳糖诱导大鼠肾脏损害的糖基化机制及药物干预作用

目的 D-半乳糖(D-galactose)诱导大鼠体内不同糖基化水平,研究其肾脏损伤发生的机理及药物对其干预作用.方法 采用不同剂量D-半乳糖[150、75、37.5 mg/(kg·d)]分别腹腔注射(ip)处理大鼠8周,诱导糖基化状态和肾脏损伤,同时D-半乳糖高剂量[150 mg/(kg·d)]分别给与氨基胍[150 mg/(kg·d)]和维生素E[150 mg/(kg·d)]处理8周.采用葡萄糖氧化酶法测定大鼠血糖,硫代巴比妥酸(TBA)比色法测定糖化血红蛋白,硝基四氮唑蓝(NBT)比色法测定血清果糖胺;按文献方法分别测定血红细胞醛糖还原酶活性和晚期糖基化终末产物(AGEs)含量及肾脏组织中AGEs含量,羟胺法和比色法分别测定SOD和GSH-Px活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量;采用CBB法测定尿蛋白含量,二乙酰-肟法测定血尿素氮,苦味酸法测定血肌酐;流式细胞仪检测肾脏细胞凋亡情况.结果 D-半乳糖高、中剂量处理8周后,大鼠2 h血糖明显升高,血红细胞醛糖还原酶活性升高,糖化产物形成增多(P<0.01,P<0.05);肾组织中AGEs含量明显升高,SOD及GSH-Px活性下降,MDA含量升高(P<0.01,P<0.05),尿蛋白、血尿素氮和血肌酐量明显增加,肾脏细胞凋亡率明显增加(P<0.01,P<0.05).而氨基胍和维生素E处理后,可明显抑制高剂量D-半乳糖引起的糖基化反应,减少上述物质的生成,并减轻对肾脏组织的损伤作用,尤其是氨基胍作用更为明显.结论 D-半乳糖通过诱导体内蛋白糖基化和肾组织AGEs大量生成,降低抗氧化能力,诱致肾脏细胞凋亡;氨基胍和维生素E对D-半乳糖诱致的肾脏损伤作用具有保护作用.     

小檗碱抑制D-半乳糖致大鼠蛋白糖基化的实验研究

目的：采用D-半乳糖诱导大鼠糖基化模型，观察小檗碱（Berberine，Ber）对蛋白糖基化反应的抑制作用。方法：D-半乳糖（150mg／kg，i．P．）给药8周，诱导糖基化模型大鼠，并于第2周开始给予小檗碱高（30mg／kg）、中（150mg／kg）、低（75mg／kg）剂量处理6周。测定红细胞醛糖还原酶活性、糖化血红蛋白含量和血清果糖胺、晚期糖基化终末产物含量。结果：小檗碱高、中剂量明显降低D-半乳糖引起的模型大鼠血糖升高（P〈0．01，P〈0．05）。降低红细胞醛糖还原酶的活性，并显著抑制糖基化产物的形成（P〈0．01，P〈0．05）。结论：小檗碱对D-半乳糖诱致的大鼠糖基化反应具有明显的抑制作用。     

小檗碱抑制D-半乳糖致大鼠蛋白糖基化的实验研究

目的:采用D-半乳糖诱导大鼠糖基化模型,观察小檗碱(Berberine,Ber)对蛋白糖基化反应的抑制作用。方法:D-半乳糖(150mg/kg,i.p.)给药8周,诱导糖基化模型大鼠,并于第2周开始给予小檗碱高(30mg/kg)、中(150mg/kg)、低(75mg/kg)剂量处理6周。测定红细胞醛糖还原酶活性、糖化血红蛋白含量和血清果糖胺、晚期糖基化终末产物含量。结果:小檗碱高、中剂量明显降低D-半乳糖引起的模型大鼠血糖升高(P<0.01,P<0.05),降低红细胞醛糖还原酶的活性,并显著抑制糖基化产物的形成(P<0.01,P<0.05)。结论:小檗碱对D-半乳糖诱致的大鼠糖基化反应具有明显的抑制作用。     

黄芩苷联合二甲双胍对多囊卵巢综合征大鼠内分泌、炎症因子和胰岛素抵抗的影响及其机制

目的:探讨黄芩苷(BAL)联合二甲双胍(DMBG)对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠内分泌指标和炎症因子表达、子宫内膜情况和胰岛素抵抗的影响及其机制.方法:将32只大鼠随机分为对照组(给予生理盐水)、模型组[(给予脱氢表雄酮(DHEA)]、二甲双胍组(给予DMBG)和联合组(给予BAL+DMBG),每组8只.除正常组外,...     

异常黑胆质成熟剂对D-半乳糖致衰老模型大鼠p16蛋白、β-半乳糖苷酶表达的影响

目的探讨异常黑胆质成熟剂（ASMq）对D-半乳糖致衰老模型大鼠P16蛋白、β-半乳糖苷酶表达的影响,以此阐明异常黑胆质成熟剂延缓衰老作用的部分机制。方法选取3个月龄雄性 SD 大鼠60只,体质量180～220 g,采用 D-半乳糖制作亚急性衰老模型,随机分为衰老模型组及 ASMq高、中、低剂量组各15只（ASMq高、中、低剂量分别为6．0、3．0、1．5 g·kg-1·d-1）,连续给药21 d。另取15只正常雄性大鼠作为正常对照组。采用免疫组织化学方法检测各组大鼠心、脑、肝组织中 P16蛋白、β-半乳糖苷酶的表达。结果各组大鼠心、脑、肝脏组织中 p16蛋白、β-半乳糖苷酶表达阳性的细胞表现为细胞浆染成黄褐色。与正常对照组比较,衰老模型组心、脑、肝组织中的P16蛋白、β-半乳糖苷酶的表达明显升高,差异有统计学意义（P ＜0．05～0．01）;与衰老模型组比较, ASMq高、中、低剂量组心、脑、肝组织中 P16蛋白、β-半乳糖苷酶的表达明显下降,差异有统计学意义（P ＜0．05～0．01）。结论 ASMq可降低衰老大鼠P16蛋白、β-半乳糖苷酶的表达,从而发挥抗衰老作用。     

二至丸对D-半乳糖诱导大鼠肾细胞衰老的保护作用

目的 探讨二至丸对D-半乳糖(D-galactose, D-gal)诱导的大鼠肾(NRK)细胞衰老的保护作用。方法 使用不同浓度D-gal（1、5、10、20、40 g/L）作用不同时间（24、48、72 h）诱导NRK细胞衰老,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)染色法鉴定细胞衰老;荧光素二-β-D-吡喃半乳糖苷(Fluorescein di-β-D-galactopyranoside, FDG）法检测衰老相关的β-半乳糖苷酶活性;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力;以GSH-PX、SOD活力与MDA含量检测细胞氧化应激水平;构建体外NRK细胞衰老模型。根据FDG的结果来评估不同浓度二至丸(0.01、0.1、1 g/L)处理对衰老NRK细胞的影响,检测GSH-PX、SOD活力与MDA含量的变化来探讨二至丸对衰老NRK细胞的保护作用。结果 与对照组相比,模型组(20 g/L D-gal处理48 h)β-半乳糖苷酶染色阳性率明显增加,β-半乳糖苷酶活性明显增加;GSH-PX、SOD活力下降,MDA含量增加（P<0.05~0.01）,细胞活性无明显变化。与模型组相比,给药组β-半乳糖苷酶含量明显降低,阳性染色率显著下降,GSH-PX、SOD活力升高,MDA含量明显降低（P<0.05~0.01）。结论 建立D-gal诱导的NRK细胞衰老模型;二至丸能够减轻D-gal诱导的NRK细胞衰老的程度,其保护效应的产生可能与二至丸抗氧化应激效应相关。     

苦瓜黄芪黄芩苷对2型糖尿病大鼠模型胰岛素抵抗的影响

目的:观察中药苦瓜、黄芪、黄芩苷实验性2型糖尿病大鼠血糖、胰岛素和胰岛素敏感指数的影响.方法:用高热量饲料加小剂量链脲佐菌素(30mg/kg)建立实验性2型糖尿病大鼠模型后,用苦瓜、黄芪、黄芩苷治疗6周,测定空腹血糖,血清胰岛素,计算出胰岛素敏感指数.结果:苦瓜、黄芪、黄芩苷能降低实验性2型糖尿病大鼠空腹血糖、提高胰岛素敏感指数.结论:苦瓜、黄芪、黄芩苷具有改善实验性2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用.     

赤芍总苷改善D-半乳糖诱导衰老大鼠学习记忆能力及机制

目的 观察赤芍总苷(TPG)对D-半乳糖(D-gal)诱导学习记忆功能低下衰老大鼠模型学习记忆能力作用,并探讨与衰老相关的氧化应激-自由基损伤、蛋白非酶糖基化反应及醛糖还原酶(AR)活性等作用.方法 采用SD雌性大鼠,腹腔注射D-gal 500mg/kg,每天1次连续70天,诱导衰老大鼠模型;灌胃TGP 300mg...     

二甲双胍对胰岛素抵抗大鼠IL-6表达的影响

目的:观察二甲双胍对胰岛素抵抗大鼠IL-6表达的影响,探讨二甲双胍改善胰岛素抵抗的作用机制。方法:29只正常雄性大鼠随机分为:正常饮食对照组(n=9),高脂高糖喂养造模组(n=20)。喂养6周后,将造模成功的17只IR大鼠再随机分为两组:①模型组:继续予高脂高糖饮食;②二甲双胍组:高脂高糖喂养加二甲双胍[300 mg/(kg.d)];6周干预后,观测胰岛素抵抗大鼠IL-6表达的变化。结果:高脂高糖饲养6周后,造模组FBG、FINS均高于对照组,ISI低于对照组(P<0.01)。与模型组比较,药物组血清IL-6、脂肪和肝脏组织IL-6 mRNA的表达均降低(P<0.05),ISI均升高(P<0.05)。结论:下调IL-6的表达可能是二甲双胍改善大鼠胰岛素抵抗的机制之一。     

甘草酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激及醛糖还原酶水平的影响

目的:观察甘草酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激及醛糖还原酶活性、基因表达水平的影响,探讨其保护肾脏、预防糖尿病肾病的可能机制。方法:雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、模型对照组和甘草酸治疗组,腹腔注射链脲菌素(60mg/kg)诱导糖尿病模型,治疗组给予甘草酸(30mg/kg/d)治疗16周。16周后测定各组大鼠24h尿白蛋白量(UP24)、肾脏肥大指数(肾重/体重)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、醛糖还原酶(AR)活性及mRNA水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠UP24、肾指数显著升高(P<0.01),血清SOD活性降低,MDA含量增加(P<0.01),肾脏AR活性及基因表达显著升高(P<0.01)。与模型组相比,甘草酸治疗组UP24、肾指数显著降低(P<0.01),血清SOD活性显著增强(P<0.05),同时MDA含量显著减少(P<0.01),肾脏AR活性显著降低、ARmRNA水平显著下降(均P<0.01)。结论:高血糖可诱导机体氧化应激增强、多元醇代谢途径激活及两者的协同效应,促进糖尿病肾病的发生发展;甘草酸可能通过抗氧化应激、减少肾脏AR活性及基因表达以抑制多元醇通路的激活,发挥肾脏保护作用。     

NADPH oxidase-dependent oxidative stress and mitochondrial damage in hippocampus of D-galactose-induced aging rats

Mitochondrial DNA(mtDNA) common deletion(CD) plays a significant role in aging and age-related diseases.In this study,we used D-galactose(D-gal) to generate an animal model of aging and the involvement and causative mechanisms of mitochondrial damage in such a model were investigated.Twenty 5-week-old male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups:D-gal group(n=10) and control group(n=10).The quantity of the mtDNA CD in the hippocampus was determined using a TaqMan real-time PCR assay.Transmission electron microscopy was used to observe the mitochondrial ultrastructure in the hippocampus.Western blot was used to detect the protein levels of NADPH oxidase(NOX) and uncoupling protein 2(UCP2).We found that the level of mtDNA CD was significantly higher in the hippocampus of D-gal-induced aging rats than in control rats.In comparison with the control group,the mitochondrial ultrastructure in the hippocampus of D-gal-treated rats was damaged,and the protein levels of NOX and UCP2 were significantly increased in the hippocampus of D-gal-induced aging rats.This study demonstrated that the levels of mtDNA CD and NOX protein expression were significantly increased in the hippocampus of D-gal-induced aging rats.These findings indicate that NOX-dependent reactive oxygen species generation may contribute to D-gal-induced mitochondrial damage.     

多囊卵巢综合征患者胰岛素抵抗和氧化应激的关系

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗(IR)状态与氧化应激的关系.方法:PCOS患者80例,包括IR组患者43例和非IR组患者37例,另取因输卵管或男性原因不育而月经规律、内分泌激素正常的对照组患者30例,检测各组患者空腹血糖( FSG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)并检验...     

胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶在重度烫伤大鼠胰岛素抵抗中作用的研究

以３０％体表面积背部皮肤全层烫伤大鼠为模型，通过建立肝细胞膜和骨骼肌细胞膜外源性底物磷酸化的分析方法，观察烫伤后３ｄ胰岛素刺激的胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶海性的改变，探讨创伤后胰岛素抵抗的分子机理。     

Effects of insulin receptor tyrosine protein kinase on insulin resistance after scalding in rats

Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｓｕｌｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｏｎｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｆｔｅｒｓｃａｌｄｉｎｇｉｎｒａｔｓ￥（毛旭虎）（许霖水）ＭａｏＸｕｈｕ，ＸｕＬｉｎｓｈｕｉ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢ...     

水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠肝脏氧化应激水平的影响

目的 探讨水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响及其作用机制.方法 分别给大鼠静脉输注脂肪乳+肝素、脂肪乳+肝素+水杨酸钠和生理盐水7 h,并在输注的最后2 h行清醒状态高胰岛素-正血糖钳夹试验,观察水杨酸钠对肝葡萄糖生成(HGP)能力的影响,检测肝脏中MDA的含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性.结果 与生理盐水组比较,脂肪乳组HGP增多(P<0.05),肝脏MDA的水平升高,GSH-PX的活性明显降低(P<0.05).水杨酸钠治疗后,HGP减少,肝脏中MDA的水平较脂肪乳组降低了63%(P<0.05),GSH-PX的活性升高了35%(P<0.05).结论 FFA增高引起的肝脏内氧化应激增强及肝葡萄糖生成增多,可能是导致肝脏胰岛素抵抗发生的机制之一.应用水杨酸钠,大鼠肝脏氧化应激程度减弱,肝糖生成减少.抗炎药物水杨酸钠可能通过降低肝脏氧化应激途径而发挥改善肝脏胰岛素抵抗的作用.IKKβ及NF-κB可能是联系炎症和氧化应激的关键枢纽.     

应激对神经内分泌免疫网络的影响与胰岛素抵抗

许多循证医学与基础研究证明应激可引起胰岛素抵抗,其机制可能与神经内分泌免疫网络的紊乱有关。神经内分泌免疫网络内部各系统间交互作用,相互影响。皮质醇、儿茶酚胺、TNF-α和IL-6引起胰岛素抵抗的机制也各不相同。     

内脏脂肪素和二甲双胍对多囊卵巢综合征大鼠胰岛素抵抗和生殖内分泌的治疗作用

目的比较内脏脂肪素（visfatin）和二甲双胍对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠胰岛素抵抗及生殖内分泌紊乱的治疗作用,为
visfatin进一步应用于PCOS治疗的临床研究提供理论依据。方法40只SD大鼠随机平均分为A、B、C、D组4组,A、B、C三组
采用DHEA造模法建模,通过连续阴道液涂片及血清学检测判断建模成功与否,A、B组为实验组,C组为PCOS建模对照组,D
组为空白对照组。建模成功后,A组大鼠予visfatin 10 μg/只单次给药,B组大鼠予二甲双胍14 mg/100 g体质量连续灌胃15 d。
干预前后采血测定T、LH、FSH、FINS 及OGTT各时段血糖,并计算HOMA-IR指数及LH/FSH 比值,最后剖取卵巢行病理切
片。结果（1）干预前后对比,A、B组大鼠血FINS、FPG、T、HOMA-IR及OGTT各时段血糖均显著降低（P<0.05）;（2）干预后,A
组和B组中分别有8只（80%）及7只（77.8%）大鼠恢复规律的发情周期,均可见正常卵泡的发育;（3）visfatin与二甲双胍在改善
PCOS大鼠胰岛素抵抗及高雄激素血症方面的疗效相同。结论visfatin和二甲双胍均能改善PCOS大鼠的胰岛素抵抗及高雄
激素血症,并能促进其规律动情周期的建立及正常卵泡的发育,且两者疗效相同。
     

慢性应激对大鼠葡萄糖耐量及胰岛素抵抗的影响

目的:探讨慢性应激对大鼠葡萄糖耐量及胰岛素抵抗的影响。方法:将40只SD大鼠按体重随机分成应激组和对照组各20只。应激组通过8周的慢性复合应激刺激作为慢性应激动物模型,对照组在此期间正常饲养。在试验4、8周监测大鼠体重、旷场实验、24h尿皮质醇,在实验8周采尾血检测葡萄糖耐量(酶氧化法)、空腹胰岛素(化学发光法),并计算胰岛素抵抗和B细胞功能。结果:慢性应激大鼠4、8周后体重下降显著(P<0.05),有明显的行为学改变。应激组大鼠OGTT曲线高峰前移,下降缓慢,在0、30min时两组血糖差异显著(P<0.05)。应激组大鼠空腹胰岛素、30min胰岛素、胰岛素抵抗、B细胞功能以及24h尿皮质醇与对照组之间差异显著(P<0.01)。结论:慢性应激引起大鼠糖耐量异常,胰岛素抵抗增加。