多药耐药基因MDR1在大肠癌的表达及意义

目的探讨多药耐药基因（MDR1基因）在大肠癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法应用RT—PCR方法检测了93例手术切除大肠癌组织中的MDR1 mRNA．结果MDR1 mRNA的阳性率为37.63％，MDR1基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移及Dukes分期等无关。结论化疗前大肠癌组织中MDR1基因即存在较高的表达率，且独立于病理形态学之外。提示化疗前要区别对待，对MDR1基因表达阳性者应合理选择化疗。     

大肠癌CHD5基因的表达及其与临床病理、预后的关系

目的探讨CHD5基因在大肠癌组织和相应正常大肠组织标本中的表达情况;CHD5表达与大肠癌患者临床病理参数和大肠癌生存率和无瘤生存率的关系。方法应用SYBR G reen I实时定量RT-PCR技术检测38例手术切除的大肠癌及相应癌外正常大肠组织标本中CHD5 mRNA的表达,研究CHD5基因检测结果与临床病理参数和预后的关系。结果CHD5 mRNA表达阳性率在癌组织和癌外组织间无差异(100%vs100%,p>0.05)。大肠癌组织CHD5 mRNA的表达水平显著低于癌外正常组织(p<0.05)。大肠癌浸润越深,癌组织CHD5 mRNA的表达量越少。随访病例中,480天的积累生存率为(92.03±4.41)%,无瘤生存率为(77.80±6.97)%。以中位数为界,将癌组织CHD5分为高、低表达组,CHD5 mRNA高、低表达组间无瘤生存率差异无统计学意义(88.89%vs66.67%,p>0.05)。结论CHD5基因与大肠癌有关,其表达水平可能成为判断大肠癌恶性潜能的指标。大肠癌组织CHD5 mRNA的表达水平对患者生存期和无瘤生存期无显著影响。     

先期化疗对卵巢癌癌组织、腹水及外周血中MDR1表达的影响及临床疗效研究

目的:探讨先期化疗对晚期卵巢癌患者癌组织、外周血及腹水中多药耐药基因MDR1表达的影响,进一步探讨癌组织、外周血及腹水三者中耐药基因表达是否具有一致性,同时评价先期化疗的临床疗效。方法:采用RT-PCR技术检测25例晚期卵巢癌患者先期化疗后癌组织、外周血及腹水中的MDR1表达情况,取同期手术的晚期卵巢癌患者31例作为对照;观察肿瘤细胞减灭术满意率及手术后CA125的下降情况。结果:先期化疗组MDR1在癌组织、外周血及腹水中表达率分别为40.0%、28.0%和32.0%;术前未化疗组MDR1表达率分别为35.5%、25.8%及29.0%,两组MDR1表达比较差异无统计学意义(P>0.05),两组组内比较差异亦无统计学意义(P>0.05);同时得出癌组织、外周血及腹水三者中耐药基因表达的一致性;先期化疗组肿瘤细胞减灭术满意率高于未化疗组,差异有统计学意义(P<0.05),先期化疗组手术后CA125水平下降明显,与未化疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:晚期卵巢癌先期化疗后MDR1表达未见明显增高;癌组织、外周血白细胞及腹水癌细胞中MDR1表达具有一致性。先期化疗提高了晚期卵巢癌患者的肿瘤细胞减灭术满意率,加快了CA125水平的下降。     

多药耐药基因表达的检测在肺癌治疗中的意义

目的 研究肺癌患者化疗前与化疗后外周血中多药耐药(Multidrug Resistance,MDR)基因的表达,并探讨其临床意义.方法 取肺癌患者化疗前及化疗结束一周后的外周血,用流式细胞仪检测MDR的表达水平,进行定量分析.结果 肺癌患者化疗前MDR明显低于化疗后(t值分别为:19.45、21.84、10.43、17.40、8.22,均P<0.01).随着化疗次数的增多,MDR逐渐升高,手术后可使MDR再次降低(P<0.01).结论 肺癌患者在化疗期间监测其外周血中MDR表达水平,有助于判断化疗效果及患者的预后.     

外周血ERCC1表达及基因多态性与局部晚期直肠癌新辅助放化疗疗效的关系

目的 观察外周血切除修复交叉互补基因（ERCC1）表达水平及基因多态性对局部晚期直肠癌患者术前新辅助放化疗/化疗疗效的影响。方法 选取2017年3月～2020年5月在河北北方学院附属第一医院94例术前接受CapeOX方案化疗或新辅助放化疗的中低位直肠癌患者。治疗前留取患者外周血样本,实时荧光PCR检测其mRNA表达水平,PCR-LDR进行基因分型,分析ERCC1mRNA表达量及基因多态性与疗效的关系。结果 肿瘤组织中ERCC1 mRNA相对表达量高于血液中的表达量,肿瘤组织与外周血中ERCC1的表达呈正相关（r=0.619,P=0.004）。肿瘤组织与外周血ERCC1基因型完全一致。以外周血表达量的中位数0.25将患者分为高表达组和低表达组,采用新辅助放化疗的ERCC1低表达组有效率高于高表达组,但组间差异无统计学意义（P> 0.05）,采用新辅助化疗的ERCC1低表达组有效率高于高表达组,组间差异有统计学意义（P <0.05）。新辅助放化疗、新辅助化疗不同基因型疗效差异无统计学意义（P> 0.05）。结论 晚期直肠癌外周血ERCC1mRNA高表达患者CapeOX新辅...     

K-ras基因与DCC基因在大肠癌中的表达及相关性研究

目的:通过研究k-ras基因DCC基因在大肠癌中的表达情况,初步探讨二者在大肠癌发生、发展过程中的作用及可能的分子机制。方法:采用S-P免疫组织化学方法检测80例结直肠癌组织及15例正常大肠黏膜中k-ras基因与DCC基因的表达情况。结果:k-ras基因在正常组织中未见表达,在大肠癌组织中呈阳性表达。DCC阴性表达与大肠癌的临床分期、淋巴结转移密切相关;k-ras基因与DCC基因之间存在明显的相关性。结论:k-ras基因在大肠癌中的表达与细胞分化程度、Dukes分期有密切关系;DCC在大肠癌中的表达与细胞分化程度、Dukes分期及有无淋巴结转移有密切关系。     

MDR1及MDR3基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系

目的:探讨MDR1(Multidrug resistance gene-1)及MDR3(Multidrug resistance gene-3)基因与卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:两种质粒一起瞬时转染A2780/DDP细胞,空载体组及未转染组作为对照。Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术、MTT法、RT-PCR、western blot分别检测A2780/DDP细胞早晚期凋亡、细胞增殖活性、MDR1和MDR3 mRNA表达及caspase-3蛋白水平。结果:两种质粒(pSuppressorNeo MDR1 siRNA,MDR3 siRNA)均未能逆转A2780/DDP细胞顺铂耐药:①流式显示转染MDR1 siRNA组、MDR3 siRNA组和pSuppressorNeo空载体组后相比较未转染A2780/DDP细胞凋亡率无显著改变(P>0.05);②在一定药物浓度范围内,转染MDR1和MDR3小分子干扰RNA均未能增强顺铂对A2780/DDP细胞的细胞毒作用;③与空载体组和未转染细胞相比,A2780/DDP细胞的MDR3及MDR1 mRNA表达均低下(P>0.05);④Caspase-3蛋白表达未见增加。结论:顺铂所致的卵巢癌细胞多药耐药与MDR1及MDR3基因过度表达均无关,卵巢癌细胞顺铂耐药为非P-gp     

大肠癌患者p53基因的表达与预后的关系

目的探讨p53基因在大肠癌组织中的表达及与预后的相关性.方法应用免疫组织化学SP法检测了120例大肠癌组织中p53蛋白的表达.结果p53蛋白在本组大肠癌组织中阳性表达率为62.50%(75/120).p53蛋白的表达与大肠癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、大体分型、肿瘤部位、组织学分级、淋巴结转移、浸润深度、Dukes'分期均无关(P＞0.05).p53蛋白的表达与大肠癌预后有关,p53蛋白阳性表达组术后生存率明显低于阴性表达组(P＜0.000 1).结论p53基因可能是影响大肠癌患者生存的一个重要预后指标.     

胸苷酸合成酶、胸苷磷酸化酶和dUTPase在大肠癌组织中的表达及其临床病理学意义

目的 观察胸苷酸合成酶(TS)、胸苷磷酸化酶(TP)和dUTPase在大肠癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,揭示大肠癌患者对5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗的敏感性.方法 应用免疫组化方法检测33例大肠癌组织及癌旁正常组织中TS、TP和dUTPase的表达情况.结果 33例大肠癌组织中TS、TP和dUTPase阳性表达率明显高于癌旁正常组织;低分化腺癌患者TS、dUTPase高表达病例数其阳性表达率高于中、高分化腺癌患者;有淋巴结转移患者TS、TP和dUTPase阳性表达率高于无淋巴结转移患者;男性患者TS高表达病例数其阳性表达率高于女性患者;TS、TP、dUTPase表达与TNM分期呈正相关;dUTPase在大肠癌中的表达与年龄、性别、分化程度及有无淋巴结转移无关.大肠癌组织中TS、dUTPase表达水平与5-FU化疗患者的预后呈负相关,TP表达水平与5-FU化疗患者的预后呈正相关.结论 大肠癌组织中TS、TP和dUTPase的表达水平可以作为患者对5-FU为主的化疗疗效及预后的判断指标.     

贫血对胃癌患者术后化疗耐药的影响

目的本研究通过检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、拓扑异构酶-Ⅱ(topoisomerase-Ⅱ,TOPO-Ⅱ)、谷胱甘肽转移酶-π(glutathione-S-transferase-π,GST-π)及缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-1α)在胃癌组织中的表达情况,探讨贫血在胃癌术后化疗肿瘤的多药耐药[1](multidrugresistance,MDR)中的影响及其可能的内在机制。方法采用免疫组化SupervisionTM二步法检测56例胃癌组织及20例癌旁正常组织中P-gp、TOPO-Ⅱ、GST-π的表达,采用SABC法对检测上述组织中HIF-1α蛋白的表达。结果①胃癌组织P-gp、GST-π、HIF-1α表达水平高于癌旁正常组织,TOPO-Ⅱ表达水平低于癌旁正常组织。②P-gp、GST-π在不同组织学类型之间有显著性差异,HIF-1α在不同癌肿浸润深度及有、无淋巴结转移之间有显著性差异。P-gp、TOPO-Ⅱ、GST-π、HIF-1α表达水平与年龄、性别之间无关。③在胃癌组织中,P-gp、GST-π及HIF-1α表达水平与Hb成正相关,TOPO-Ⅱ表达水平与Hb成负相关,且HIF-1α与P-gp表达水平之间成正相关。结论胃癌患者术后化疗MDR与贫血成正相关,HIF-1α可能是贫血导致胃癌患者术后化疗MDR的介导因子之一。     

大肠癌患者外周血CK20表达及p53基因突变的研究

目的建立高效、快速的外周血中细胞角蛋白20(Cytokeratin 20，CZK20)表达的检测方法，探讨大肠癌患者外周血中CK20的表达与微转移的关系，研究大肠癌与p53基因突变的关系。方法运用荧光监测技术结合RT—PCR，检测36例大肠癌患者术前和术后不同时间外周血中的CK20的表达。用SSCP技术对大肠癌患者进行p53基因的突变检测。结果36例患者的外周血中检出CK20表达的有27例，阳性率为75％，手术后24h患者外周血中检出CK20表达的有30例，阳性率为83.3％，术后早期化疗结束后仅13例为阳性，阳性率为36％。36例患者的p53基因的SSCP突变检测中未检测到突变。结论运用荧光PCR技术检测外周血中CK20的表达可以监测癌症微转移的发生，简便快速，检出率高。     

DJ-1在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的:探讨DJ-1基因mRNA及其蛋白在子宫内膜癌、癌旁组织及正常子宫内膜组织中的表达规律及临床意义。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白印迹(Western blot)及免疫组织化学Elivision法检测100例子宫内膜癌、癌旁组织及30例正常子宫内膜组织中DJ-1基因mRNA及其蛋白的表达情况,分析DJ-1基因在子宫内膜癌组织中的表达与肿瘤的病理类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、期别及患者血CA125水平等临床病理特征之间的关系。结果:子宫内膜癌组织中的DJ-1 mRNA及DJ-1蛋白的表达均明显高于癌旁组织及正常子宫内膜组织,癌旁组织及正常子宫内膜组织间表达无显著差异。DJ-1 mRNA的表达与子宫内膜癌的病理类型、期别及血CA125水平无明显相关性;中低分化的子宫内膜癌组织中DJ-1 mRNA的表达高于高分化者,深肌层浸润的子宫内膜癌组织中DJ-1 mRNA的表达高于局限于黏膜层及浅肌层浸润者,DJ-1 mRNA在有淋巴结转移的患者中的表达高于无淋巴结转移者。结论:DJ-1 mRNA及蛋白在子宫内膜癌组织中高表达,且可能参与了子宫内膜癌的发展、浸润和转移等环节的调控。     

多效生长因子（PTN）mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨结直肠癌组织中多效生长因子（PTN）mRNA及其蛋白的表达情况及临床意义。方法：购买结直肠癌组织芯片标本90例（实验组）,正常结直肠组织芯片70例（对照组）,采用原位杂交和免疫组化染色方法,检测两组PTN mRNA及其蛋白的表达;另选择2009年11月-2013年12月手术治疗的原发结直肠癌患者90例,分析PTN mRNA及其蛋白表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果：实验组PTN mRNA阳性表达率为62.2%,PTN蛋白阳性表达率为58.9%,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;不同年龄、性别及不同肿瘤类型之间,PTN mRNA及其蛋白表达差异无统计学意义（P〉0.05）;不同TNM分期和不同分化程度,PTN mRNA及其蛋白阳性表达差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：PTN mRNA及其蛋白与肿瘤分期和分化程度有密切关系,可作为判断结直肠癌预后的参考依据。     

Notch1在大肠癌中的表达及临床意义

目的研究大肠癌中Noteh1蛋白的表达以及Noteh1蛋白与大肠癌的临床病理关系。方法对30例大肠癌标本组织及18例正常大肠黏膜组织用免疫组织化学S—P方法检测其Noteh1蛋白的表达情况。结果Noteh1蛋白在大肠癌中高表达，其平均阳性率为（45．5±0．7）％，Noteh1蛋白在正常大肠黏膜中低表达，其平均阳性率为（6．8±0．9）％，两者差异有统计学意义（P〈0.05）。Noteh1蛋白在不同年龄，性别，肿瘤部位、有无淋巴结转移及Dukes分期中的表达差异无统计学意义（P〉0．05），但Noteh1蛋白在不同分化程度的大肠癌中的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Noteh1蛋白与大肠癌的发生有关，是潜在的致癌基因。Noteh1有望成为大肠癌治疗新的靶基因。     

结直肠腺癌KIAA1199基因表达与临床病理学相关性

目的 探讨KIAA1199基因在结直肠腺癌中的表达与临床病理特征及预后的相关性及临床意义。方法 采用实时定量PCR法（qPCR）检测手术切除结直肠腺癌及癌旁正常组织KIAA1199 mRNA表达;采用免疫组织化学染色（IHC）检测结直肠腺癌组织蜡块KIAA1199 蛋白原位表达;分别分析KIAA1199 mRNA、蛋白表达水平与患者临床病理特征及预后生存的相关性。结果 结直肠腺癌组织KIAA1199 mRNA水平（2^-△△Ct=42.410 6±1.060 5）明显高于癌旁正常组织（2^-△△Ct=1）（P<0.01）,结直肠腺癌组织KIAA1199 mRNA水平与患者年龄、淋巴结及远处转移、临床分期呈正相关（P<0.01）,与患者生存期呈负相关（P<0.01）;结直肠腺癌组织KIAA1199 蛋白表达水平明显高于癌旁正常组织（阴性）（P<0.01）,结直肠腺癌组织KIAA1199 蛋白表达水平与原发灶浸润深度及临床分期呈正相关（P<0.01）,与患者生存期呈负相关（P<0.01）。结论 KIAA1199基因可作为一种较有价值的评估结直肠腺癌病程进展及预后的标志物。     

肾癌组织中内皮细胞特异性分子ESM-1基因的原位检测和意义

目的确定ESM-1mRNA在肾癌中的定位,探讨其表达在肾癌生物学特性中的意义。方法采用地高辛标记的原位杂交技术检测ESM-1mRNA在50例肾癌、30例癌旁正常肾组织中的表达状况,并分析其与临床病理特征的关系。结果ESM-1mRNA主要定位于血管内皮细胞的胞质伴胞核中,在正常肾组织与肾癌中均有表达,部分表达在肾小管上皮和肾癌细胞。肾癌间质血管内皮的ESM-1mRNA高表达率(52.00%)显著高于正常肾组织的血管内皮(13.33%);肾透明细胞癌与颗粒细胞癌中ESM-1mRNA的表达差异有显著性,而与患者的性别、年龄、肿瘤的组织学分级、淋巴结转移和肿块大小无明显相关。结论ESM-1mRNA表达可作为新生血管内皮的标志物,可能与肾癌的血管生成及发生、发展有关。     

大肠腺癌中Survivin表达及与VEGF的相关性研究

目的 探讨survivin在大肠腺癌发病机制中的作用及其与VEGF在肿瘤转移中的关系。方法 时42例大肠腺癌组织用逆转录PCR方法检测survivin mRNA表达，免疫组织化学SP法检测VEGF蛋白表达。结果 大肠腺癌组织survivin基因表达阳性率为54．8％，癌旁正常组织均无表达。survivin表达与大肠腺癌分化程度、Dukes分期明显相关，而与性别、淋巴结转移无相关关系。VEGF表达与大肠腺癌淋巴结转移显著相关。survivin与VEGF的表达具有一致性，两者同时表达的大肠腺癌更容易发生淋巴结转移。结论 survivin基因表达与大肠腺癌临床病理特征和生物学行为有密切关系，检测survivin的表达水平，对于大肠腺癌的诊断、恶性程度及预后的判断均有一定价值。