蒿甲醚诱导日本血吸虫雌虫总抗氧化能力下降(英)

目的 观察蒿甲醚对日本血吸虫成虫总抗氧化能力的影响。 方法 体外将血吸虫在含蒿甲醚和氯化血红素的培养液内培养24 h后,或体内感染小鼠经蒿甲醚300mg/kg治疗6～24 h后,测定虫体的总抗氧化能力。 结果体外50μmol/L的蒿甲醚与氯化血红素伍用引起雌虫总抗氧化能力明显下降。体内蒿甲醚作用血吸虫6 h,即见雌虫的总抗氧化能力明显下降。体内、体外试验中,蒿甲醚对雄虫的总抗氧化能力均无影响。 结论 蒿甲醚诱导雌虫总抗氧化能力下降。     

谷胱甘肽抑制蒿甲醚的抗血吸虫作用

目的　观察还原型谷胱甘肽 (GSH)对蒿甲醚伍用氯化血红素抗日本血吸虫作用的影响。　方法　将蒿甲醚、氯化血红素、GSH及谷胱甘肽耗竭剂 2 ,4 -二硝基氯苯 (CDNB)单一或伍用加入含 5周龄血吸虫的培养液内 ,温育2 4 h后 ,测定虫体的丙二醛含量 ,并观察培养至 96 h虫体存活情况。感染小鼠经蒿甲醚 30 0 mg/kg治疗后 6、12或 2 4h,测定虫体的 GSH水平。　结果　体外 ,蒿甲醚伍用氯化血红素作用血吸虫 2 4 h后 ,虫丙二醛含量明显升高。培养时间延长 ,虫陆续死亡。GSH对蒿甲醚伍用氯化血红素诱导血吸虫脂质过氧化及杀虫作用具有拮抗作用 ,CDNB则有增强作用。体内 ,蒿甲醚作用血吸虫 6～ 2 4 h,虫体内 GSH水平先降低再明显升高。　结论　 GSH可能在血吸虫防御蒿甲醚衍生的毒性过氧化物和自由基攻击中起重要作用。     

蒿甲醚诱发日本血吸虫脂质过氧化

目的　观察蒿甲醚 (Art)对日本血吸虫的脂质过氧化损伤。方法　小鼠感染血吸虫尾蚴 5周后 ,1次灌服Art30 0mg/kg ,于治疗后 6～ 2 4h剖杀 ,收集雄虫 ,用硫代巴比妥酸 (TBA)比色方法测定其TBA反应物 (TBARs)水平。并取未经药物治疗的合抱虫 ,置于含Art和 /或氯化血红素 (hemin)的培养液内培养 2 4h后 ,作TBARs分析。结果　小鼠体内的血吸虫雄虫经Art作用后 12和 2 4h ,其脂质过氧化物水平均有明显升高。体外 ,Art或hemin单一作用血吸虫 2 4h ,对其TBARs水平无影响 ,但Art(15～ 6 0 μmol/L)与hemin(10～ 5 0 μmol/L)伍用可导致虫体的TBARs水平明显升高。结论Art具有血红素依赖的诱发日本血吸虫脂质过氧化作用。     

蒿甲醚对感染小鼠体内埃及血吸虫超微结构的影响

目的 观察蒿甲醚对小鼠体内埃及血吸虫成虫超微结构的损害。 方法 8只小鼠于感染埃及血吸虫尾蚴后81 d用单剂蒿甲醚400 mg/kg口服治疗。治后24 h、3 d、7 d和14 d各剖杀2只小鼠，用灌注法收集血吸虫，并按常规方法固定和处置虫体，作透射电镜观察。从另2只未治疗的感染小鼠体内取虫作对照。 结果 蒿甲醚对血吸虫皮层超微结构的损害主要是皮层基质的肿胀、溶解和空泡变化，基底膜消失和部份受损皮层破裂；在感觉器和皮层结节中，常见其内部结构广泛溶解。在肌层、实质组织、合体细胞和肠管上皮细胞中，查见局灶性或广泛的溶解、粗面内质网减少及线粒体空泡变化和变性。雌虫卵黄细胞的严重变化是空泡变化、粗面内质网减少、卵黄球融合以及受损卵黄细胞破溃等。上述雌、雄虫变化于感染小鼠用蒿甲醚治疗后24 h即可见到，并逐渐加重，3~7 d后最重。治后14 d，部分雌、雄虫仍示有超微结构的损害，但同时亦观察到受损虫组织的恢复。 结论 蒿甲醚对埃及血吸虫成虫的皮层和皮层下组织具有广泛和严重的超微结构损害。     

3种青蒿素衍生物对日本血吸虫吡喹酮抗性株童虫的体内作用效果观察

目的观察3种青蒿素衍生物双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚对日本血吸虫吡喹酮抗性株童虫的体内作用效果。方法以经11轮亚治疗剂量吡喹酮筛选的日本血吸虫为吡喹酮抗性株,以未暴露于吡喹酮的日本血吸虫作为吡喹酮敏感株,收集2虫株尾蚴感染小鼠,以300mg/kg双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚对感染后7~8 d童虫分别进行2次灌服用药(总剂量600 mg/kg),所有小鼠于感染后45 d解剖,收集小鼠体内成虫并计数,计算减虫率和减雌率。结果 300 mg/kg双氢青蒿素、蒿甲醚和青蒿琥酯2日疗法(总剂量600 mg/kg)对日本血吸虫吡喹酮敏感株7~8 d童虫的减虫率为69.8%~71.0%,减雌率为75.4%~79.8%;对日本血吸虫吡喹酮抗性株7~8 d童虫的减虫率为64.6%~66.1%,减雌率为69.3%~71.1%,差异均无统计学意义(均p0.05)。结论 日本血吸虫吡喹酮抗性株对青蒿素类衍生物双氢青蒿素、青蒿琥酯和蒿甲醚依然敏感,青蒿素衍生物与吡喹酮在日本血吸虫中不存在交叉抗药性。     

蒿甲醚对感染小鼠体内埃及血吸虫皮层的损害

目的 评价蒿甲醚对小鼠体内埃及血吸虫皮层的损害作用。 方法 8只小鼠于感染埃及血吸虫尾蚴后81 d，用单剂蒿甲醚400 mg/kg口服治疗。治疗后1、3、7和14 d各剖杀2只小鼠，用灌注法收集血吸虫，并按常规方法固定和处置虫体，作扫描电镜观察。从另2只未作治疗的感染小鼠取虫作对照。 结果 用蒿甲醚治疗后24 h，雄虫的皮层结节肿大、破溃或从皮层上剥落; 在雄虫和雌虫的体表可查见有局灶性或广泛的皮层肿胀、融合、空泡变化、糜烂和剥落，以及感觉结构的破坏。治疗后3 d，雌、雄虫的皮层损害加重，最严重的损害为口吸盘肿胀和破溃，并查见皮层褶嵴有广泛和严重的肿胀、糜烂和剥落，以及雌虫盘状感觉结构的破坏。治疗后7至14 d，有些虫仍示有中或重度皮层损害，而有些仍存活的虫则示其大部分皮层已有明显恢复。 结论 蒿甲醚对埃及血吸虫的皮层具有广泛和严重的损害作用。     

蒿甲醚对日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶、醛缩酶、磷酸甘油酸变位酶和烯醇化酶的影响

[目的 ]观察蒿甲醚 (Art)对小鼠体内日本血吸虫磷酸葡萄糖变位酶 (GPM )、醛缩酶 (ALD)、磷酸甘油酸变位酶 (PGM)和烯醇化酶 (ENO)的影响。 [方法 ]小鼠感染血吸虫尾蚴 4～ 5wk后 ,1次灌服Art10 0mg/kg或 30 0mg/kg ,并于 2 4～ 48h后剖杀 ,收集日本血吸虫雌虫和雄虫 ,按NADPH的生成量或NADH的耗用量测定虫体的上述 4种酶活力。 [结果 ]经Art 10 0mg/kg作用 2 4h后 ,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO活力分别较对照组下降 15 %、 19%、 5 0 %和 46 % ,其间差别均具有显著意义 ,而雄虫仅PGM和ENO活力分别下降 2 2 %和 32 % ;48h后 ,雄虫的GPM和ALD活力亦分别下降 2 1%和 18% ,雌虫的GPM、ALD、PGM和ENO及雄虫的PGM和ENO活力则进一步下降。经Art 30 0mg/kg作用后 2 4～ 48h ,雌虫和雄虫的上述 4种酶活力均明显下降 ,且呈一定的时间效应关系。 [结论 ]Art对日本血吸虫尤其是雌虫的上述 4种酶有抑制作用。     

篙甲醚对日本血吸虫糖代谢酶的影响’

目的 观察篙甲醚(Art)对日本血吸虫糖代谢酶活性的影响.[方法〕小鼠感染日本血吸虫尾坳4-5wk后;1 次灌服Art3 00mg/kg,于治疗后24h ,48h 或72h 剖杀收集雌虫和雄虫,制备虫匀浆上清液,然后进行平板淀粉凝胶电泳,以对9种糖代谢酶活性作定性观察。〔结果〕经Art作用24^48h 后,雌虫的己糖激酶、苹果酸脱氢酶、苹果酸酶和磷酸葡萄糖异构酶活性均有所下降;72h 后,上述4种酶以及醛缩酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、6-磷酸葡糖酸脱氢酶和6-磷酸甘露糖异构酶的活性均明显降低,甚至完全被抑制。在上述观察时间内,雄虫的醛缩酶、6-磷酸甘露糖异构酶和6-磷酸葡萄塘脱氢酶活性受一定的影响。【结论」Art对日本血吸虫雌虫的糖代谢具有广泛的影响     

蒿甲醚对曼氏血吸虫的作用:剂量与效应的关系和虫的形态学和组织病理学的变化

目的　应用感染曼氏血吸虫 (利比里亚株 )的小鼠观察蒿甲醚单剂量与效应的关系,虫体肝移及蒿甲醚所引起的虫的形态学和组织病理学变化。　方法　感染21d童虫的小鼠一次口服蒿甲醚12.5mg/kg至600mg/kg不同剂量 ,治后28d剖检观察各组虫数。感染46d或70d成虫的小鼠一次口服蒿甲醚40 0mg/kg后8～14d ,观察虫体肝移及其形态和组织病理学变化。　结果　蒿甲醚对21d童虫的最低有效剂量为200mg/kg ,减虫率为 81%。用蒿甲醚治疗后8h成虫开始肝移,3～7d全部肝移,14d有31%的虫返回肠系膜静脉。成虫虫体萎缩,咽部扩大,肠管膨胀及其色素减少。雌虫局部体表受损,白细胞附着,卵巢及卵黄腺变性退化,以及雄虫睾丸萎缩等。在肝内的虫体被嗜酸粒细胞为主的炎细胞包围和浸润。　结论　蒿甲醚对小鼠曼氏血吸虫21d童虫的最低有效剂量为200mg/kg ,可引起曼氏血吸虫成虫萎缩、退化或死亡。在肝内受损的虫体主要是被嗜酸粒细胞包围和侵袭所致。     

蒿甲醚对日本血吸虫体表抗原显露的作用

感染日本血吸虫的小鼠一次口服蒿甲醚混悬液100、300和600mg/kg治疗后,应用间接荧光抗体法(IFA)检测其体内血吸虫体表抗原显露情况。结果,300mg/kg组小鼠于服药后1天和5天,分别有部分雌虫和雄虫显露体表抗原。雌虫和雄虫分别出现荧光的虫数以服药后5天和9天为最多,荧光程度亦较强;至服药后12天,仍有部分虫出现荧光。600mg/kg组雌、雄虫显露体表抗原的时间和荧光程度较100mg/kg组出现得较早且强。     

蒿甲醚对日本血吸虫核苷摄入和核酸含量的影响

目的： 观察蒿甲醚（ Ａｒｔ） 对日本血吸虫核苷摄入和核酸含量的影响。方法： 感染小鼠１ 次灌服（ｉｇ） Ａｒｔ ３００ ｍｇ／ｋｇ 后２４ ｈ 或４８ ｈ ， 分别测定雌虫（ ♀） 、雄虫（ ♂） 的 Ｒ Ｎ Ａ 和 Ｄ Ｎ Ａ 含量。另取经 Ａｒｔ 作用２４ ｈ 后的♀及♂虫体， 作体外培养２ ｈ 或４ ｈ ， 测定虫体对３ Ｈ 腺苷、［５ ３ Ｈ］ 尿苷和［ 甲基 ３ Ｈ］ 胸苷的摄入量以及上述３ Ｈ 标记核苷摄入虫体核酸的量。结果： 经 Ａｒｔ 体内作用４８ ｈ 后， 血吸虫♀虫的 Ｒ Ｎ Ａ 和 Ｄ Ｎ Ａ 含量分别较对照组减少５１６ ％ 和２３５ ％ ， 差异均显著， 而♂虫 Ｒ Ｎ Ａ 含量减少４２４ ％ 。♀及♂虫体经 Ａｒｔ 作用后移置体外培养２ｈ 或４ ｈ ， ♀虫对３ 种３ Ｈ 标记核苷的摄入量均较对照组的明显为少， 减少率达３５２ ％ ～５０１ ％ 。体外培养２ ｈ ，［ 甲基 ３ Ｈ］ 胸苷掺入♀虫 Ｄ Ｎ Ａ 的量较对照组减少７１４ ％ ， 培养４ ｈ 后， ［３ Ｈ］ 腺苷掺入♀虫 Ｒ Ｎ Ａ 和 Ｄ Ｎ Ａ 的量较对照组减少６５２ ％ 与５００ ％ 。结论： Ａｒｔ 对日本血吸虫， 尤其是♀虫的核酸代谢有抑制作用。     

蒿甲醚对小鼠体内日本血吸虫的己糖激酶、磷酸葡萄糖异构酶和磷酸果糖激酶的影响

目的：研究蒿甲醚（Ａｒｔ）对血吸虫己糖激酶（ＨＫ）、磷酸葡萄糖异构酶（ＧＰＩ）和磷酸果糖激酶（ＰＦＫ）的影响。方法：感染血吸虫小鼠１次ｉｇＡｒｔ１００或３００ｍｇｋｇ－１,并分别于２４ｈ和４８ｈ剖杀取虫。按生成ＮＡＤＰＨ和耗用ＮＡＤＨ的方法测定上述３种酶活力。结果：感染鼠ｉｇ．Ａｒｔ３００ｍｇｋｇ－１后２４ｈ,♀、虫体ＨＫ活力抑制率分别为３３．３％和１３．７％,ＧＰＩ活力则分别抑制１４．７％和１７．５％,４８ｈ后,♀、虫体的ＧＰＩ活力抑制率分别为４６．２％和３２．９％。但Ａｒｔ剂量为１００或３００ｍｇｋｇ－１时,给药后２４ｈ和４８ｈ的♀虫ＰＦＫ抑制率分别为６４．９％和７１％,均明显高于虫的１６．３％和５４．２％。结论：ＰＦＫ可能是Ａｒｔ作用于血吸虫糖酶解途径的靶酶之一。     

白头翁总皂苷对日本血吸虫糖原、蛋白质及酶的作用

摘 要：目的 观察白头翁总皂苷 (Pulsatilla chinensis (Bunge) Regel saponins,PRS) 对小鼠体内日本血吸虫(Schistosoma japonicum) 的糖原、蛋白质、碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,AKP)、酸性磷酸酶 (acid phosphatase,ACP)、超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽还原酶 (glutathione reductase,GR) 的影响。方法 小鼠感染日本血吸虫尾蚴后42天,尾静脉一次性注射25mg/kg PRS药液,24h后灌注冲虫收集虫体,检测糖原、蛋白质的含量及AKP、ACP、SOD、GR的活性。结果 感染日本血吸虫尾蚴的小鼠给药24h后,体内雌虫和雄虫的糖原含量较对照组减少45.52%、23.2%,蛋白质含量较对照组减少9.84%、10.66%,药物作用后,AKP、ACP、SOD、GR的活力均明显下降,雄虫的抑制率分别为33.89%、29.25%、17.15%、60.77%; 雌虫的抑制率各为43.5%、47.78%、36.68%、63.24%。结论 PRS对日本血吸虫的代谢有一定的影响。     

不对称二甲基精氨酸对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响

目的 观察不对称二甲基精氨酸（ADMA）对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响.方法 THP-1单核细胞给予160nmol/L佛波酯（PMA）孵育48h,诱导分化成巨噬细胞,与80mg/L氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育24h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,用油红O染色在光镜下鉴定泡沫细胞形态及变化.再以不同浓度ADMA（1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L）作用泡沫细胞24h,以20μmol/L ADMA作用泡沫细胞不同时间（0h,6h,12h,24h,48h）,酶比色法检测泡沫细胞内胆固醇的含量.结果 ①单核细胞加人PMA诱导48h后,分化为巨噬细胞,再经ox-LDL诱导24h后转化为泡沫细胞.②与对照组相比,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L,30μmol/L的ADMA作用于,THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞24h后,细胞内胆固醇含量均明显增加（P＜0.01）,③与对照组相比,20μmol/L的ADMA作用于THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞12h,24h,48h,细胞内胆固醇含量均明显增加（P＜0.01）.结论 ①单核细胞株THP-1经PMA诱导后,可分化为巨噬细胞,再经ox-LDL诱导后,可转化为泡沫细胞.②ADMA可以增加THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇的含量.     

PPARs激动剂对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响

目的 探讨PPARs激动剂吡格列酮对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响.方法 首先用50 mg/L氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）将体外培养的RAW264.7巨噬细胞诱导分化为泡沫细胞,然后进行油红O染色,并在光镜下鉴定泡沫细胞形态及变化;再以不同浓度吡格列酮（0 μmol/L、5 μmol/L、10μmol/L、20 μmol/L、30 μmol/L）作用泡沫细胞24h,以30 μmol/L的吡格列酮作用0h、6h、12h、24 h、48 h;最后酶法检测泡沫细胞内胆固醇的含量.结果 ①50 mg/Lox-LDL诱导巨噬细胞48 h后分化为泡沫细胞.②与对照组相比,不同浓度吡格列酮作用后泡沫细胞内胆固醇含量均减少,差异有统计学意义（P＜0.01）,且呈剂量依赖性.③与对照组相比,30 μmol/L的吡格列酮作用6h、12 h、24 h、48 h后,泡沫细胞内胆固醇含量均减少,差异有统计学意义（P＜0.01）,且呈时间依赖性.结论 PPARs激动剂吡格列酮能够减少泡沫细胞内胆固醇含量,且呈剂量和时间依赖性。     

Autonomous FSH synthesis in vitro in anterior pituitary glands and grafts from female rats

When pituitary glands from intact female, but not from ovariectomized rats, are incubated for 8 h in medium TC199 without further additives, FSH is synthesized. This LHRH-independent (or autonomous) FSH synthesis is prevented when bovine follicular fluid (bFF) is added to the incubation medium. Results from preliminary experiments, however, indicate no clear autonomous FSH synthesis after long-term absence of LHRH. To investigate the regulatory mechanisms involved in autonomous FSH synthesis and release, pituitary glands (exposed to endogenous LHRH) and pituitary grafts (not exposed to endogenous LHRH) from intact and ovariectomized rats were incubated for 8 h in medium TC199. Total FSH content (FSH released plus FSH remaining in the tissue) was compared with that in non-incubated glands or grafts, giving an indication of FSH synthesis. In addition, some of the animals were given LHRH pulses for 40 h before incubation. When pituitary tissue was taken from intact female rats, FSH synthesis occurred in the animals' own glands and in grafts from LHRH-pretreated rats. No FSH synthesis was seen in ovariectomized rats with or without pretreatment with bFF and/or LHRH. However, when ovariectomized rats had been pretreated with oestrogen, FSH synthesis was measured in vitro after pulsatile LHRH treatment in vivo. The results indicate that autonomous FSH synthesis in vitro is dependent upon previous (in vivo) exposure of the glands to both oestrogen and LHRH.     

青蒿琥酯治疗家犬卫氏并殖吸虫感染的效果观察

目的探讨青蒿琥酯（Art）对双倍体卫氏并殖吸虫病的治疗作用。方法1）卫氏并殖吸虫成虫用含不同浓度Art的RPMI 1640培养基体外培养后作电镜观察;2）实验犬常规感染卫氏并殖吸虫囊蚴,76 d后用青蒿琥酯50和80mg/kg灌胃治疗,103 d解剖犬,作常规病理检查,取出的虫体作电镜观察。结果1）5 mg/kg组体外培养24 h后,虫体萎缩,扫描电镜观察部分体棘消失、倒伏、絮状物附着;透射电镜显示皮层水肿、细胞器及分泌颗粒减少,卵黄腺萎缩,卵巢卵细胞胞浆空泡变等;2）两治疗犬体内虫体萎缩,厚壁囊肿数分别为28和35个,对照犬为16个,差异有显著性（P〈0.05）;透射电镜显示成虫变化与体外培养试验相似。结论青蒿琥酯对卫氏并殖吸虫有损伤作用。