TRIM32在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的：探讨TRIM32在肝细胞癌（HCC）组织中的表达和预后价值,及其对HCC细胞恶性生物学行为的影响。方法：使用癌症基因组图谱（TCGA）的测序数据评估HCC中TRIM32的表达是否有差异。qPCR和Western Blot分别检测TRIM32在HCC组织中的mRNA和蛋白表达水平。进一步分析TRIM32的表达水平与HCC患者临床病理特征的关系。使用Kaplan-Meier Plotter网站和Cox回归分析评估TRIM32在HCC中的预后价值。向HCC细胞中转染si-TRIM32,分别采用细胞增殖实验、划痕实验和Transwell侵袭实验检测敲低TRIM32对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。利用Linkedomics数据库分析与TRIM32相关的基因并进行KEGG分析。结果：TRIM32在HCC组织高表达（P<0.05）。TRIM32表达的上调与HCC患者的病理分期、组织学分级、血清甲胎蛋白（AFP）表达升高和不良预后显著相关（P<0.05）。功能实验表明,敲低TRIM32可以抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭（P<0.05）。KEGG分析表明,TRIM32及其相关...     

PRPF18对肝癌的影响及药敏分析

目的：分析PRPF18对肝癌细胞株MHCC97H增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及药敏分析。方法：通过生物信息学来分析PRPF18在肝细胞癌中的表达、预后及药物敏感性。qRT-PCR验证PRPF18在肝癌细胞与正常肝细胞中的表达情况。通过瞬时转染在MHCC97H细胞中敲低PRPF18,qRT-PCR验证敲低效果。CCK-8实验和克隆形成实验分析敲低PRPF18对MHCC97H细胞增殖的影响。Transwell实验和划痕实验分析敲低PRPF18对MHCC97H细胞迁移和侵袭的影响。Hoechst 33342染色和线粒体膜电位测定分析敲低PRPF18对MHCC97H细胞凋亡的影响。结果：PRPF18在HCC中高表达，且与患者预后显著相关。PRPF18高表达的患者对替吡法尼和舒尼替尼有更高的敏感性。敲低PRPF18后MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭能力相比对照组明显降低。敲低PRPF18降低线粒体膜电位，促进细胞凋亡。结论：PRPF18在肝癌中有较好的预后价值。敲低PRPF18能抑制MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡。     

Ezrin在肝癌中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系

目的　探讨细胞骨架连接蛋白 (ezrin)在肝癌组织和细胞系中的表达及其与肿瘤黏附、侵袭和门静脉癌栓的关系。方法　 4 1例肝细胞肝癌及其癌旁肝组织标本按肿瘤大小、有无播散灶及远处转移、包膜、门静脉癌栓等分为高侵袭和低侵袭 2组并与同期 9例良性肝病肝组织作比较 ,分别采用RT PCR和免疫组化技术检测ezrin表达。另选MHCC97L、MHCC97H和LM 33株肝癌细胞系并检测ezrin表达 ;同时运用脂质体转染反义寡核苷酸抑制MHCC97H细胞ezrin表达 ,比较转染前后细胞黏附、侵袭能力的改变。结果　高侵袭肝癌ezrin表达显著高于低侵袭肝癌 (P <0 .0 5 ) ,癌栓组织ezrin表达强度更高 (P <0 .0 5 )。MHCC97L、MHCC97H和LM33株细胞系均表达ezrin ,其强度随侵袭性增加依次增强。脂质体转染反义寡核苷酸能显著抑制MHCC97H的ezrin表达以及黏附、侵袭能力。结论　Ezrin在肝癌、门静脉癌栓和MHCC97L、MHCC97H、LM3细胞系中均表达 ,其表达强度随侵袭性增强而增加 ;Ezrin可能主要通过影响肿瘤黏附、侵袭能力 ,从而在肿瘤侵袭及门静脉癌栓形成中起重要作用。     

胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低wnt2的表达下调PI3K/AKT信号通路的体内外研究

目的:研究人脑胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低wnt2的表达对PI3K/AKT信号通路的影响。方法:向U251细胞转染靶向Wnt2的siRNA后,免疫印记及免疫荧光检测转染后,Wnt2、Frizzled2、β-catenin、PI3K、磷酸化AKT的表达变化。建立裸鼠胶质瘤皮下动物模型,瘤内注射Wnt2siRNA观察以上指标的表达变化。结果:体外应用RNA干扰敲低Wnt2的表达后,frizzled2、β-catenin、PI3K、p-AKT的表达均下调。结论:胶质瘤细胞U251中RNA干扰敲低Wnt2的表达后,PI3K/AKT信号通路活性受到抑制。     

siRNA干扰相互作用蛋白1表达抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移

目的探讨小干扰RNA（siRNA）干扰降低PC4和SFRS1相互作用蛋白1（PSIP1）的表达对人胶质瘤U87细胞侵袭和迁移 的影响并初步探讨其机制。方法采用化学合成靶向PSIP1的siRNA,脂质体法转染U87细胞,用Real-time PCR检测RNA干 扰效率;Transwell侵袭实验测细胞侵袭能力;划痕实验检测其迁移能力;干扰PSIP1表达后,Western blot 检测间质细胞来源的 N-cadherin、β-catenin蛋白和转录因子Slug的表达。结果PSIP1-siRNA 转染胶质瘤U87细胞后,PSIP1的mRNA水平及蛋白 水平明显下降（P<0.001）,U87 细胞侵袭和迁移能力下降,与阴性转染组及未转染组相比差异有统计学意义（P<0.001,P< 0.001）,Western blot 显示,间质细胞来源的N-cadherin、β-catenin 蛋白表达量降低,同时与上皮间质转化（EMT）相关的转录因 子Slug 的表达降低。结论在胶质瘤中,抑制PSIP1 的表达可抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移,N-cadherin、β-catenin 蛋白和转录 因子Slug的表达量降低,提示PSIP1 可通过调控经典Wnt/β-catenin 信号通路来调节Slug 的表达,进而调控EMT,从而参与胶 质瘤U87 细胞的侵袭及迁移。     

Lnc RNA CUDR敲低对肝癌侵袭、增殖和凋亡的影响

目的 探讨LncRNA CUDR敲低对肝癌细胞侵袭、增殖和凋亡的影响。方法 采用CUDR shRNA慢病毒质粒转染SMMC-7721肝癌细胞系,分别设CUDR敲低组、对照组和空质粒组,采用RT-PCR方法检测CUDR shRNA转染效率;Transwell检测3组细胞的侵袭能力;瘤球成形实验检测细胞聚集、增殖能力;流式技术检测肝癌细胞凋亡率。结果 RT-PCR检测结果显示,CUDR shRNA转染SMMC-7721肝癌细胞系后,与对照组、空质粒组相比,敲低组CUDR mRNA表达量显著下降(P<0.001);Transwell、瘤球成形实验和细胞凋亡实验结果显示,与对照组和空质粒组相比,CUDR敲低组肝癌细胞的侵袭与聚集能力显著下降且凋亡率提高(P<0.001)。结论 敲低LncRNA CUDR表达可抑制HCC的侵袭和增殖,并促进肝癌细胞的凋亡,LncRNA CUDR具有成为治疗HCC潜在靶点的价值。     

长链非编码RNA HCG18对肝癌细胞生物学活性的影响

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)人类白细胞抗原复合体(HCG18)在肝癌细胞中的表达及作用。方法选取23对来自郑州大学第一附属医院的肝癌、癌旁组织和购自中国科学院细胞库的人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H和正常肝细胞LO2作为研究对象。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌和癌旁组织及肝癌细胞系和正常肝细胞中HCG18的表达。采用小干扰RNA(siRNA)技术沉默MHCC97H和Hep3B细胞中HCG18的表达,同时分别设置阴性对照组,采用si-NC对其进行转染。采用克隆实验、Transwell体外迁移实验、流式细胞周期和凋亡实验检测细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡率。结果肝癌组织中HCG18表达量较癌旁组织高,差异有统计学意义(P<0.001),肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H中HCG18表达量均较正常肝细胞LO2高,差异有统计学意义(均P<0.01)。转染HCG18 siRNA后,肝癌细胞MHCC97H和Hep3B的增殖、侵袭能力均低于转染si-NC的阴性对照组。HCG18 siRNA转染的MHCC97H和Hep3B细胞被阻滞在G_0/G_1期,凋亡率高于转染si-NC的阴性对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 HCG18在肝癌细胞中高表达,其可促进肝癌细胞的增殖和侵袭,有望成为肝癌治疗的新靶点。     

TRIM21调控人结直肠癌细胞增殖分子机制研究

目的:探讨TRIM21通过正调控转化生长因子-β1(TGF-β1)-Smad2/3信号通路影响人结直肠癌细胞增殖的分子机制。方法:在人结直肠癌细胞HCT116中转染TRIM21 siRNA沉默TRIM21的表达,采用荧光定量PCR和Western blot检测转染效果;采用MTT法检测转染后24 h、48 h、72 h和96 h时的细胞增殖情况,Western blot检测增殖相关蛋白CyclinD1的表达;采用Annexin V/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡情况;荧光定量PCR检测TGF-β1、Smad2和Smad3在mRNA水平上的表达,Western blot检测TGF-β1、Smad2/3在蛋白水平上的表达及Smad2/3的磷酸化,验证TRIM21 siRNA转染后对TGF-β1—Smad2/3通路的影响。结果:TRIM21 siRNA转染组HCT116细胞中的TRIM21表达量明显下降(P<0.01),转染后24 h、48 h、72 h和96 h的细胞活力显著高于阴性对照组(P<0.05),Cyclin D1表达量上调(P<0.01)。TRIM21 siRNA转染后的凋亡细胞比例显著下降(P<0.01)。TRIM21 siRNA转染组TGF-β1的表达降低(P<0.01),Smad2和Smad3的表达量基本不变(P>0.05),但Smad2/3的磷酸化水平显著下降(P<0.01)。结论:干扰TRIM21的表达促进人结直肠癌细胞HCT116细胞增殖、抑制凋亡,其作用机制可能与影响TGF-β1—Smad2/3信号通路的激活和CyclinD1表达有关。     

TRIM22通过PI3K/AKT信号通路调控胶质母细胞瘤增殖、侵袭和迁移的研究

目的：探讨基因TRIM22在人脑胶质母细胞瘤中的表达及对增殖、侵袭和迁移等生物能力的影响。方法：通过TCGA数据库分析胶质母细胞瘤组织和正常脑组织中TRIM22表达水平,采用实时定量PCR（qRT?PCR）和Western blot 两种方法分别检测胶质母细胞瘤细胞系U87和U251中TRIM22 mRNA和蛋白表达水平。应用Lipofectamine 3000将2种TRIM22?siRNA分别转染至U87及U251细胞中,再分别通过qRT?PCR和Western blot检测胶质母细胞瘤细胞中TRIM22敲低效率。 应用CCK?8法、细胞平板克隆形成实验来评估TRIM22敲低后对于细胞增殖能力的影响;应用细胞划痕实验和Transwell实验检测TRIM22敲低后细胞侵袭和迁移能力的变化。应用Western blot检测TRIM22敲低对PI3K/AKT信号通路蛋白和上皮间质化标记蛋白（N?cadherin、Vimentin、E?cadherin）表达的影响。结果：在U87及U251细胞中敲低TRIM22后,细胞增殖、侵袭和迁移都明显减弱,p?AKT（S473）、N?cadherin、Vimentin表达水平则明显降低,E?cadherin表达水平明显升高。结论：TRIM22可能通过调节PI3K/AKT信号通路调控胶质母细胞瘤增殖、侵袭和迁移能力。     

补中益气汤协同Siβ-catenin调控Wnt/β-catenin信号通路干预肺腺癌顺铂耐药性的分子机制研究

目的 探讨补中益气汤含药血清协同Siβ-catenin调控Wnt/β-catenin信号通路干预A549/DDP细胞顺铂耐药性的分子机制研究。方法 采用siRNA干扰沉默β-catenin的表达,Western blot检测正常血清组、顺铂组、siCTNNB1-235组、siCTNNB1-510组、siCTNNB1-547组A549/DDP细胞的β-catenin蛋白的相对表达量;干扰β-catenin后,Western blot检测各组A549/DDP细胞β-catenin和Survivin的蛋白表达量,MTT法检测各组A549/DDP细胞对顺铂的IC₅₀,Annexin V/PI染色法检测各组A549/DDP细胞顺铂诱导的凋亡率。结果 相较于正常血清组（1.00）,siCTNNB1-235组（0.323±0.021）对β-catenin表达抑制率达67%（P=0.000）。RNAi技术沉默β-catenin后,与正常血清组（1.00）相比,补中益气汤联合顺铂组的Survivin（0.247±0.015）和β-catenin（0.257±0.015）蛋白的表达下调更为明显（P=0.000,P=0.000）。IC50和正常血清组（28.330±1.029） μmol/L相比,单独补中益气汤含药血清（20.350±1.155） μmol/L或单独瞬时转染siCTNNB1-235组（15.577±1.535） μmol/L均可降低A549/DDP细胞顺铂的IC₅₀（P=0.000,P=0.000）,2者联合（10.453±0.999） μmol/L使用可进一步降低顺铂的IC₅₀（P=0.000）。与正常血清组（9.130±0.384）%相比,瞬时转染siCTNNB1-235联合顺铂组（64.393±0.244）%和补中益气汤联合顺铂组（70.120±0.400）%的总凋亡率均升高（P=0.000,P=0.000）。结论 补中益气汤含药血清和瞬时转染siβ-catenin在抑制Wnt/β-catenin信号通路改善肺腺癌顺铂耐药性方面具有协同效应,且补中益气汤具有siβ-catenin瞬时转染样效应。     

Hsulf-1介导PI3K/AKT信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的作用机制研究

目的探讨人硫酸酯酶-1（Hsulf-1）基因介导磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路抑制肝癌细胞侵袭转移的作用机制。方法将构建成功的pcDNA3.1（+）-Hsulf-1质粒及Hsulf-1siRNA质粒分别转染肝癌细胞系SMMC7221细胞,应用PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理,分为Hsulf-1过表达组、Hsulf-1siRNA组、抑制剂组及空白组;采用RT-PCR法及Westernblot法检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）和β连环蛋白（β-catenin）的mRNA及蛋白表达水平,采用Transwell小室实验法检测细胞迁移能力。结果Hsulf-1过表达组E-cadherin和β-cateninmRNA表达水平均明显高于空白组（均P＜0.05）;Hsulf-1siRNA组、抑制剂组E-cadherin和β-cateninmRNA表达水平均明显低于空白组（均P＜0.05）。与空白组比较,Hsulf-1过表达组Hsulf-1、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为高,p-AKT均明显为低（均P＜0.05）;Hsulf-1siRNA组p-AKT蛋白表达水平明显为高,Hsulf-1、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为低（均P＜0.05）;抑制剂组p-AKT、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为低（均P＜0.05）。与Hsulf-1siRNA组比较,抑制剂组p-AKT、E-cadherin和β-catenin蛋白表达水平均明显为低（均P＜0.05）。与空白组比较,Hsulf-1过表达组、Hsulf-1siRNA组SMMC7221细胞迁移数均明显为高,抑制剂组SMMC7221细胞迁移数明显为低（均P＜0.05）;与Hsulf-1siRNA组比较,抑制剂组SMMC7221细胞迁移数明显为低（P＜0.05）。结论Hsulf-1基因可通过PI3K/AKT信号通路刺激E-cadherin,β-catenin的表达,抑制肝癌细胞侵袭转移,是肝癌侵袭转移的重要机制。     

HOXA5在原发性肝细胞肝癌发生发展中的作用

目的：探讨转录因子HOXA5在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）发展中的作用。方法：利用qRT?PCR、蛋白质免疫印迹实验和免疫组化探究HOXA5在HCC组织和对应癌旁组织中的表达水平。构建敲低HOXA5的稳转人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H后应用平板克隆、CCK8、EdU检测细胞增殖能力;流式细胞术检测H2O2诱导的HCC细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭能力。蛋白质免疫印迹实验检测HOXA5敲低及过表达后对PI3K?AKT信号通路的影响。结果：HCC组织中的HOXA5表达量高于对应癌旁组织,敲低HOXA5后减弱HCC细胞增殖、侵袭以及对凋亡的抵抗能力,减弱PI3K?AKT信号通路的激活,而过表达HOXA5增强PI3K?AKT通路激活。结论：HCC组织中的HOXA5表达水平高于癌旁组织。HCC细胞中HOXA5表达水平改变可以影响其增殖、凋亡、侵袭能力,以及PI3K?AKT信号通路的状态。     

MiR-3200-3p调控Wnt/β-catenin通路影响肝癌细胞的迁移和侵袭

目的 探讨miR-3200-3p对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法 采用RT-qPCR方法检测miR-3200-3p在正常肝细胞系HL-7702与肝癌细胞系Bel-7402中的表达;构建miR-3200-3p的慢病毒低表达载体,转染Bel-7402细胞,倒置荧光显微镜及RT-qPCR检测敲低效果;根据转染病毒质粒的不同将Bel-7402细胞分为2组：LV-control组及LV-inhibitor组。Transwell迁移和侵袭实验检测2组细胞的迁移和侵袭能力;Western blot法检测2组细胞中β-catenin、MMP2、E-cadherin蛋白的表达水平。结果 与HL-7702细胞比较,Bel-7402细胞中miR-3200-3p的相对表达量显著升高(P<0.001);成功建立miR-3200-3p低表达的Bel-7402稳转细胞系;与LV-control组比较,LV-inhibitor组肝癌细胞迁移和侵袭能力均明显受到抑制(均P<0.001),β-catenin(总、胞核和胞质)和MMP2蛋白表达均显著下调,E-cadherin的表达明显上调(均P<0.05)。结论 miR-3200-3p在肝癌细胞中发挥促癌作用,敲低其表达可抑制肝癌细胞的迁移和侵袭,其机制可能是通过影响Wnt/β-catenin通路的活化而下调MMP2表达,上调E-cadherin而实现的。     

siRNA靶向抑制生长激素受体对肝癌细胞株SK-HEP-1增殖及侵袭能力的影响

目的观察siRNA技术靶向抑制生长激素受体(GHR)对人肝癌细胞SK-HEP-1增殖及侵袭能力的影响。方法合成靶向抑制GHR表达的siRNA,通过Gen MuteTM体外转染至人肝癌细胞SK-HEP-1中,将细胞分为三组:空白对照组(未转染siRNA)、阴性转染对照组(转染非特异性的siRNA)和特异性转染组(转染靶向抑制GHR表达的siRNA)。分别利用Real-time PCR方法和Western blot技术检测GHR m RNA和蛋白在三组细胞中的表达,采用CCK-8法检测三组细胞的增殖能力,Transwell法检测三组细胞的侵袭迁移能力。结果与阴性转染对照组相比,特异性转染组siRNA下调了肝癌细胞株SK-HEP-1中GHR m RNA及蛋白的表达;特异性转染组肝癌细胞SK-HEP-1中的CCK-8的OD值明显降低(P0.05),Transwell穿透的细胞数明显减少(P0.05)。结论 siRNA靶向抑制GHR表达后,肝癌细胞SK-HEP-1的增殖及侵袭迁移能力减弱。     

TRIM28在胃癌中表达的临床意义及对胃癌细胞侵袭和迁移的影响

目的 分析三结构域蛋白28（tripartite motif-containing protein 28,TRIM28）在胃癌中的表达及与胃癌患者临床预后的关系;探讨TRIM28对胃癌细胞侵袭迁移的影响及机制。方法 结合TCGA数据库和实时荧光定量PCR （quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）,分析胃癌中TRIM28的表达。结合Kaplan-Meier Plotter,探究TRIM28与胃癌患者预后的关系。应用AGS胃癌细胞系,以siRNA干扰TRIM 28表达后,以Transwell和划痕愈合试验探究TRIM28对AGS侵袭和迁移的影响;并用Western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白变化。结果 TRIM28在胃癌组织及细胞中异常高表达;且高表达的胃癌患者预后差。Transwell和划痕愈合试验结果显示,敲低TRIM28表达的AGS细胞侵袭和迁移能力均下降,差异具有统计学意义（P<0.01,P<0.05）。Western blotting检测结果显示,干扰TRIM28使β-catenin和c-Myc蛋白的表达明显下降。结论 TRIM28在胃癌中的表达增加且其表达与胃癌不良预后明显相关,TRIM28促进胃癌细胞的侵袭和迁移。     

β细胞素下调对肝癌细胞增殖能力的影响及其机制探讨

目的:在肝癌细胞系中通过下调β细胞素(BTC)的表达研究其对肝癌细胞侵袭能力的影响并探究其影响机制。方法:通过siRNA转染下调BTC后,通过Transwell侵袭实验检测SMMC7721和MHCC97-H细胞的侵袭能力变化,并用RT-PCR和Western blot检测与肝癌侵袭能力相关的PI3K/AKT-XIAP信号通路的表达变化。结果:与阴性对照组相比,siRNA下调组中SMMC7721和MHCC97-H细胞的侵袭能力明显降低,PI3K/AKT-XIAP信号通路受到明显抑制。结论:下调BTC表达可能通过抑制PI3K/AKT-XIAP信号通路抑制肝癌细胞的侵袭能力。     

UHRF1调控雌激素受体表达对甲状腺乳头状癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

  目的  观察泛素样含PDH和环指域1 (UHRF1)对雌激素受体（ER）α和ERβ表达比率的影响,探讨UHRF1影响甲状腺乳头状癌BCPAP细胞增殖、侵袭和迁移的机制。  方法  应用Western blot、实时荧光定量（qRT）-PCR检测正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1和甲状腺乳头状癌细胞BCPAP中UHRF1、ERα和ERβ的蛋白及mRNA表达。分别用Scrambled siRNA、UHRF1 siRNA处理BCPAP细胞,qRT-PCR检测各组细胞中ERα和ERβ的mRNA表达;MTT、Transwell分别检测各组细胞增殖、侵袭和迁移。  结果  与Nthy-ori3-1细胞相比,BCPAP细胞中UHRF1和ERα蛋白及mRNA表达水平上调（P<0.05）,而ERβ蛋白和mRNA表达水平下调（P<0.05）。与空白对照组和Scrambled siRNA组相比,转染UHRF1 siRNA的BCPAP细胞中ERα mRNA表达降低（P<0.05）,ERβ mRNA表达升高（P<0.05）;转染UHRF1 siRNA的BCPAP细胞增殖、侵袭和迁移降低（P<0.05）。  结论  UHRF1可上调ERα/ERβ的表达比率,促进甲状腺乳头状癌BCPAP细胞增殖、侵袭和迁移。     

长链非编码RNA-UFC1通过GSK-3β/β-catenin信号轴促进肝癌细胞的侵袭和转移

目的探讨长链非编码RNA-UFC1在肝癌侵袭和转移中的作用及机制。方法应用lincRNA-UFC1慢病毒载体转染人肝 癌细胞株Huh7 构建lincRNA-UFC1 过表达组和对照组;应用lincRNA-UFC1 干扰载体转染人肝癌细胞株BEL-7402 构建 lincRNA-UFC1 干扰组和干扰对照组（scramble）,通过实时定量PCR实验分析两种肝癌细胞中lincRNA-UFC1 的表达水平。 Transwell 及划痕实验检测lincRNA-UFC1 过表达组及干扰组相比对照组侵袭迁移能力的变化。Western blot 检测lincRNAUFC1 过表达组及干扰组相比对照组中GSK-3β/β-catenin蛋白的表达变化。利用GSK-3β/β-Catenin信号通路抑制剂XAV939阻 断后,观察Transwell 及划痕实验中lincRNA-UFC1 过表达对肝癌细胞侵袭迁移能力的影响。结果在肝细胞癌中,过表达 lincRNA-UFC1 相较于对照组,肝癌细胞的侵袭转移能力明显增加（P<0.001）,而沉默lincRNA-UFC1 的表达相较于scramble 组,肝癌细胞侵袭转移能力明显减弱（P<0.001）。Western blot结果显示,过表达lincRNA-UFC1与对照组相比较,侵袭转移相关 蛋白β-catenin和p-GSK-3β表达明显上调（P<0.001）,而lincRNA-UFC1沉默表达后,结果相反。利用GSK-3β/β-Catenin信号通 路抑制剂XAV939 处理肝癌细胞可以逆转lincRNA-UFC1 促进肝癌细胞侵袭转移的功能（P<0.001）。结论在肝细胞癌中 lincRNA-UFC1通过上调磷酸化GSK-3β及β-catenin促进肝癌细胞侵袭转移。     

六味消癥方通过调节TRIM65表达抑制肝癌细胞侵袭和迁移机制研究

目的:研究六味消癥方含药血清对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其作用机制。方法:采用Transwell侵袭实验和划痕迁移实验,考察不同剂量六味消癥方和TRIM65表达对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响;采用RT-PCR实验和Western blot实验,考察不同剂量六味消癥方对肝癌细胞中TRIM65表达的影响,以及六味消癥方和TRIM65表达对Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白表达的影响。结果:六味消癥方含药血清显著抑制肝癌细胞通过基质胶的数量(P0.01)、伤痕愈合率(P0.01)、TRIM65的表达(P0.01),以及β-catenin、c-myc和MMP9的表达(P0.01)。TRIM65基因干扰加强了含药血清对肝癌细胞侵袭迁移能力的抑制,TRIM65过表达则减弱了含药血清对肝癌细胞侵袭迁移能力的抑制,同时减弱了含药血清对β-catenin、c-myc和MMP9的表达的抑制。结论:六味消癥方含药血清能够抑制肝癌细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能是通过调控TRIM65的表达水平,进而抑制Wnt/β-catenin信号通路异常激活。     

长链非编码RNA MCF2L-AS1促进胃癌的增殖、侵袭和迁移

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)MCF2L-AS1在胃癌中的表达情况以及MCF2L-AS1对胃癌增殖侵袭迁移的影响.方法 生物信息学分析MCF2L-AS1在胃癌组织中的表达情况;实时PCR检测MCF2L-AS1在胃癌细胞中的表达情况.siRNA转染敲低胃癌细胞中的MCF2L-AS1,实时PCR检测敲低的结果....