自由基氧化致线粒体DNA损伤与细胞凋亡

细胞凋亡与自由基氧化密切相关,自由基氧化可致线粒体DNA损伤而发生突变,引起细胞裹老甚至死亡;细胞死亡包括坏死和调亡,线粒体DNA损伤突变与细胞凋亡间有无关系？本文就此对自由基氧化、线粒体DNA损伤以及细胞凋亡相关基因及其与细胞凋亡之间的关系作一综述。     

酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼对K562细胞的DNA损伤修复功能的影响

目的 建立人类慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562细胞在伊马替尼(Imatinib mesylate)处理前、后的DNA损伤模型,探讨伊马替尼对K562细胞的DNA损伤修复功能的影响.方法 用噻唑蓝(MTT)法确定伊马替尼预处理K562细胞的浓度;用免疫印迹法(Western blot)检测伊马替尼处理后K562细胞BCR/ABL的磷酸化状态,以反映BCR-ABL酪氨酸激酶活性受抑制情况;用彗星实验检测不同浓度过氧化氢(H2O2)诱导的K562细胞、伊马替尼预处理K562细胞的DNA损伤模型;用彗星实验对各组细胞在DNA损伤后的修复进行动态观测.结果 MTT实验结果显示,伊马替尼预处理K562细胞的最佳终浓度为1 μmol/L,作用时间24 h;Western blot实验结果显示,该浓度的伊马替尼可有效抑制BCR/ABL融合蛋白第177位酪氨酸激酶磷酸化,密度比为0.100±0.018,与对照组(0.425±0.039)相比,降低了(77.11±5.59)%,差异有统计学意义(t=4.57,P＜0.05);彗星实验确定了各组细胞DNA损伤模型的建立条件,采用10 μmol/L终浓度的H2O2对K562细胞和伊马替尼预处理后K562细胞进行染毒,H2O2作用温度和时间为4℃、10 min.修复结果显示,经伊马替尼预处理的K562细胞修复时间为120 min,与未处理组修复时间60 min相比,前者DNA损伤修复时间明显延长(F=97.79,P＜0.05).结论 本研究建立了伊马替尼处理前、后的白血病K562细胞的DNA损伤模型,BCR/ABL融合蛋白的酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼能减弱K562细胞的DNA损伤后修复能力.     

奥沙利铂对结肠癌细胞DNA损伤修复类抗药基因表达的影响

目的观察奥利沙铂对结肠癌细胞DNA损伤修复类基因表达的影响。方法采用奥利沙铂处理结肠癌细胞株HCT116 48 h。以Western blot免疫印迹法检测奥利沙铂诱导的DNA损伤。采用CCK-8方法探讨奥利沙铂对HCT116细胞生长的影响。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测奥利沙铂处理后相关DNA损伤修复基因的表达。结果奥利沙铂处理后,HCT116细胞中DNA损伤标志基因γ-H2AX表达明显上升。DNA损伤切除修复相关基因XPC表达在奥利沙铂处理后出现显著上升,其他DNA损伤修复基因mRNA表达无明显上调。结论 XPC基因可能在临床应用奥沙利铂治疗结肠癌时肿瘤细胞产生抗药性的过程中起到了关键作用。     

ATM/ATR在DNA损伤反应中的作用

DNA损伤反应(DNA damage response)是细胞应对基因毒压力所产生的反应,包括DNA修复、细胞周期阻滞(cell cycle ar-rest)、细胞凋亡等,真核生物细胞的遗传物质能够正确复制并被精确传到下一代,主要是由于细胞拥有一套有效的DNA损伤反应机制。共济失调-毛细血管扩张     

紫外辐射引起DNA损伤的修复

学术背景:紫外线辐射可造成机体表皮细胞DNA损伤,亦可诱发表皮细胞酶活性进行损害DNA的修复系统的启动.目的:概述近年来关于紫外辐射引起DNA损伤的修复机制研究成果.检索策略:应用计算机检索PubMed中1991-01/2007-08关于DNA损伤修复和DNA紫外线损伤的文章,在标题和摘要中以"UV-induced DNA damage and DNA repair"为检索词进行检索, 限定文章语言种类为"English".选择文章内容与DNA损伤修复和DNA紫外线损伤有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章.文献评价:初检得到561篇文献,根据纳入标准选择关于紫外辐射引起DNA损伤及其修复的42篇文章进行综述.资料综合:环境污染使得紫外辐射增强,而紫外线辐射对机体表皮细胞的DNA具有损害作用,可导致环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物的形成.紫外光可激活光解酶来识别并黏附于环丁烷嘧啶二聚体,进行光酶性修复;还可以在受损的DNA中激活紫外线修复酶,启动剪切修复.光酶性DNA修复主要存在于原核生物或植物体中,紫外线修复酶系统则主要存在于细菌体内,高等生物体中由于缺乏光解酶,修复方式以核酸切除修复为主.结论: 紫外辐射导致DNA损伤的产物以环丁烷嘧啶二聚体和6-4光产物为主.在多数生物体中,光复活作用用来清除环丁烷嘧啶二聚体产物,而核苷酸切除修复途径则用于6-4光产物的修复.人类DNA的损伤修复主要依赖于核苷酸切除修复途径.     

乏氧组织显像剂研究进展

所有哺乳类动物机体组织都需要氧气供应来满足自身代谢的需求,供应机体的氧气是通过毛细血管弥散进入细胞内环境,一般细胞内氧分压３～５ｍｍＨｇ就可以维持正常的细胞代谢。当供氧不足时,就会限制细胞的代谢能力,不能满足细胞的能量需求,进而使组织损伤,器官功能失调。短暂的一过性缺氧,细胞自身还能代偿修复;但是缺氧状态时间太长,氧亏耗过大,将危及细胞结构的完整性,损伤细胞功能,导致细胞死亡。通常生理状态下,机体正常组织有一种保护机制能调节氧气供应量与组织需求量之间的动态平衡,而在病理状态下,组织对于氧的供需关…     

长链非编码RNA LINP1抑制DNA损伤促进非小细胞肺癌电离辐射抗性

目的 探索长链非编码RNA LINP1对电离辐射下非小细胞肺癌DNA损伤效应的影响,为非小细胞肺癌的肿瘤治疗提供相关的新思路。方法 使用siRNA在非小细胞肺癌细胞系H1299细胞中敲减LINP1,8.0 Gy电离辐射照射后,采用CCK-8增殖实验和克隆形成实验检测肺癌细胞的增殖和克隆形成能力;照射后4 h采用彗星电泳和Western blot检测H1299细胞中DNA损伤效应。结果 电离辐射照射后,H1299细胞中LINP1明显上调（P <0.001）。与对照相比,8.0 Gy电离辐射照射后其增殖和克隆形成能力显著下降（P <0.001）,DNA损伤明显增加（P <0.001）。沉默LINP1后,在电离辐射条件下,敲减组与对照相比增殖能力、克隆形成能力明显下降（P <0.01）,DNA损伤明显增加（P <0.001）。结论 LINP1可抑制电离辐射下非小细胞肺癌细胞增殖能力的下降和DNA损伤效应从而增强电离辐射抗性。     

脱氧核糖核酸修复基因与人类恶性肿瘤

多种物理或化学因素,如紫外线、电离辐射、化学诱变剂和内源性致突变物质等均可损伤细胞脱氧核糖核酸(DNA).如果DNA损伤得不到及时和有效的修复,细胞将发生基因突变和癌变等严重后果.人体内的DNA损伤修复机制包括碱基切除修复、核苷酸切除修复、错配修复、同源重组和非同源末端连接以及直接修复等[1].这些修复系统的遗传性或获得性缺陷,均会引起相应的DNA损伤修复功能低下和基因组稳定性降低,进而导致基因突变和细胞癌变.     

细胞缺氧调控关键因子miR-210研究进展

miR-210是一个重要缺氧诱导基因,在多种细胞内表达,参与调控多种细胞功能,如抑制细胞增殖、抑制线粒体呼吸作用、抑制DNA损伤修复、促进血管生成。本文对miR-210缺氧调控机制及病理生理作用作一综述。     

hOGG1基因高表达A549细胞株的构建及其对氧化应激的影响

目的 构建人8-羟基鸟嘌呤-DNA糖苷酶(hOGG1)基因高表达细胞株,并初步探讨该细胞株对DNA氧化损伤与修复作用的影响.方法 提取人血液淋巴细胞总RNA,设计hOGG1特异性引物,RT-PCR扩增后构建pcDNA3.1(+)/Myc-His A/hOGG1载体.经EcoRI和KpnI酶切,凝胶电泳及DNA测序证实建立成功后,稳定转染A549细胞,Western blot法检测转染阳性细胞hOGG1蛋白表达的改变.以构建的hOGG1基因高表达细胞株为研究对象,H2O2为受试物,彗星试验检测比较各组细胞对抗损伤和修复能力的情况.结果 成功构建pcDNA3.1(+)/Myc-His A/hOGG1质粒并转染目的 细胞,Western blot法检测转染靶细胞中hOGG1蛋白表达比空白组和阴性对照组明显增加(P<0.05).相同H2O2浓度下,转染细胞彗星细胞率和Olive Tail Moment明显低于空白组和阴性对照组,且修复完成率高,修复时间缩短(P<0.05),提示细胞对抗DNA损伤和修复能力均显著增高P<0.05).结论 hOGG1基因的高表达可确切减轻细胞氧化损伤敏感性并提升DNA的修复能力.hOGG1基因高表达细胞株的成功构建,为基因水平的靶向治疗研究提供了一种有效手段.     

氧化应激状态下2BS细胞DNA损伤与修复能力的增龄性变化

衰老是发生在分子、细胞及整个机体的多因素协同引起的生命弱化过程.可靠易测的衰老生物学指标的确立,对衰老机制的研究、衰老相关疾病的诊断及亚健康状态的评估、延缓衰老药物的筛选等至关重要.自1995年Chen等[1]提出氧化DNA损伤导致复制性衰老以来,众多研究提示,DNA损伤修复能力可能具有细胞衰老标志物的潜在条件[2].     

DNA修复能力与癌症易感性

癌症的发生是一个多因素、多阶段、长期相互作用的过程 ,与DNA修复能力密切相关。致癌引起DNA损伤是癌症发生的重要步骤。DNA修复能力低下 ,不能及时和有效的修复DNA损伤 ,表现为基因突变率和癌症易感性增加。本文对DNA修复基因缺陷引起癌症易感、DNA修复能力的生物标记及DNA修复的研究展望等问题作一综述     

XRCC1基因多态性与胃癌易感性关系的研究进展

胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤,胃癌发生发展与其他恶性肿瘤一样属多因素、多步骤、多阶段和多基因改变过程,研究显示许多基因在肿瘤的发生发展中起着关键性的作用,DNA作为一种遗传物质,承担着传递遗传信息的重要任务,必须保持相对的稳定性。然而DNA是一种相对比较活跃的物质,会发生自发性的损害,另外,DNA还必须承受来自内外环境的一些伤害,这些损伤打破了DNA的相对稳定性,就会导致一些突变的积聚,进而可能导致肿瘤的发生[1]。DNA修复系统通过逆转DNA损伤,在维持正常的细胞进程和基因的稳定性方面发挥着关键的作用,从而保证了生命系…     

PC12细胞缺氧培养后DNA损伤和修复相关基因表达的研究

目的:探讨PC12细胞缺氧后细胞凋亡与DNA损伤和修复的关系,进一步阐明缺氧导致PC12细胞凋亡的机制。方法:采用TUNEL法,结合应用流式细胞术观察PC12细胞缺氧培养不同时间点细胞凋亡现象,以及DNA损伤修复相关基因表达的改变。结果:在缺氧0.5h时,开始出现凋亡细胞,此时P53、P21waf1/cip1蛋白表达也开始增高,GADD45蛋白表达达到高峰(P<0.01)。至缺氧1h凋亡细胞达高峰,此时P53、P21蛋白表达最高(P<0.05),而GADD45表达则明显下降(P<0.05)。至缺氧6—12h,则以坏死为主,此时以上的基因表达均减弱。结论:PC12细胞缺氧早期(0.5—1h),主要出现凋亡为主的细胞死亡,伴随着DNA损伤相关基因表达的动态改变,提示缺氧后PC12细胞凋亡部分是由于DNA损伤严重,损伤不能及时修复所致。     

DNA修复能力与癌症易感性

癌症的发生是一个多因素、多阶段、长期相互作用的过程，与DNA修复能力密切相关。至癌引起DNA损伤是癌症发生的重要步骤。DNA修复能力低下，不能及时和有效的修复DNA损伤，表现为基因突变率和癌症易感性增加。本文对DNA修复基因缺陷引起癌症易感、DNA修复能力的生物标记及DNA修复的研究展望等问题作一综述。     

循环DNA与恶性肿瘤关系的研究进展

循环DNA是存在于血液 (血清或血浆 ) ,滑膜液等体液中的细胞外DNA ,它与生理和病理状态下的细胞代谢密切相关 ;循环DNA大部分为人源性 ,其中占相当比例的循环DNA核苷酸序列存在于人类基因组DNA中 ;循环DNA水平的检测及其在基因诊断等方面的应用对于恶性肿瘤等疾病的诊断和监测具有十分重要的意义     

坐骨神经损伤动物模型以PLGA导管复合BMSCs 与细胞外基质凝胶移植后坐骨神经蠕变特性分析

<正>目前,用于修复周围神经损伤的手术主要有神经断端吻合、人工神经导管和自体神经移植^[1]。尽管自体神经移植是首选的方案,但由于供体组织不足,且存在形成神经瘤和丧失神经功能的可能,因而在临床应用中受到了限制^[2]。近年种子细胞、神经营养因子、神经支架等生物工程手段的应用,为临床神经组织修复带来巨大突破^[3]。研究发现,骨髓间充质干细胞(BMSCs)能够促进再生神经内功能性血管网的重建,还能够修复长距离的周围神经缺损。Mimura^[4]等将BMSCs诱导分化的细胞移植至神经断端,6个月后发现移植细胞形成髓鞘和郎飞结节,表明BMSCs具有促进神经再生能力。以往BMSC联合神经支架修复大鼠坐骨神经缺损的研究多以组织形态观察、电生理检测居多。鉴于临床实际的需要,本研究对以PLGA导管复合BMSCs与细胞外基质凝胶、以PLGA导管合复合BMSCs移植大鼠坐骨神经损伤后的坐骨神经进行蠕变实验、电生理检测。对比分析二者移植修复大鼠坐骨神经损伤的效果。     

MUS81在DNA修复过程中的作用

DNA常受到内源性细胞代谢产物、外源性化学物质和辐射等损伤。不同修复途径可修复各种损伤的DNA,从而维持基因组的完整性,预防基因突变。近年发现,MUS81基因表达的蛋白质与生物的DNA修复息息相关,在DNA重组修复中起极重要的作用。由于MUS81被发现较晚,目前人们对其研究尚处起步阶段。本文结合近年国内外相关文献报道，综述如下。     

大肠癌相关基因突变与大肠癌遗传易感性的研究

正恶性肿瘤是一种体细胞遗传病,为相关基因结构与功能发生改变的结果,本文就大肠癌与之相关的基因突变及遗传易感性进行综述。1肿瘤的发生与基因突变的关系恶性肿瘤的发生及发展与相关的基因结构及其相关的功能发生改变有关。这些基因参与调控细胞的的正常生长周期、细胞的死亡及DNA的损伤修复。基因的种系突变(germ line mutation)在遗传性恶性肿瘤中起主要作用[1]。突变是生物进化的必要条件之一,没有突变就没有进化,就没有现代的遗     

Gadd45在恶性肿瘤中的研究进展

Gadd45与DNA损伤修复密切相关,全称为生长阻滞与DNA损伤诱生蛋白45（growth arrest anddNA damage inducible protein 45,Gadd45）,其基因家族属于p53和BRCA1的下游靶基因,在细胞生存及细胞凋亡中发挥重要作用。Gadd45家族由Gadd45α、Gadd45β和Gadd45γ三个成员组成,它们的基因排列序列非常相似,通常会在环境损伤因子作用下,随DNA修复过程的启动而诱导产生。