养阴清肺方对钴60照射后肺成纤维细胞周期和凋亡的影响

目的：探讨养阴清肺方对钴60照射后肺成纤维细胞的生长周期及凋亡的影响。方法：制备实验用含药血清：空白组、中药组、激素组、中药加激素组;采用钴60射线照射肺成纤维细胞后,用不同含药血清培养细胞,分别于24、48、72 h后用流式细胞技术检测各组的细胞周期及细胞凋亡。结果：24 h,各药物组的细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）,中药组的作用最突出。各药物组的细胞周期主要阻滞在G2/M期;空白组与各药物组的S期有显著差异（P〈0.05）。48 h,各药物组细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）,而各药物组之间没有差异（P〉0.05）。72 h,各药物组细胞凋亡与空白组均有差异（P〈0.05）;各药物组之间亦有差异（P〈0.05）。48、72h各组出现了以G0/G1期比例增高为主的G0/G1期和G2/M期同时阻滞的现象。结论：养阴清肺方能够影响细胞生长周期,减少细胞合成期,诱导G2/M期阻滞,促进肺成纤维细胞的凋亡。     

半枝莲醇提物含药血清对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的:研究半枝莲醇提物(EESB,ethanol extract from Scutellaria barbata)含药血清对人结肠癌HT-29细胞株体外诱导其凋亡和周期的变化。方法:体外常规培养人结肠癌HT-29细胞株,制备含药血清,设置空白血清组、含有不同浓度EESB含药血清组、5-FU组,1应用MTT法评价EESB含药血清对HT-29细胞24 h、48 h、72 h的生长抑制率,2Annexin V-PE/7-AAD双染色分析在流式细胞仪上观察EESB含药血清处理HT-29细胞48 h后的细胞凋亡率,3PI法检测细胞周期变化。结果:1与空白组比较,MTT法显示EESB低、中、高剂量含药血清都能抑制HT-29细胞增殖(P0.05),抑制率与作用时间及血清含药浓度相关,72 h时其达到39%。2同空白组比较,低、中、高剂量含药血清处理HT-29细胞48 h后凋亡率显著高于对照组(P0.05),同时低、中、高剂量含药血清处理HT-29细胞48 h后,3与空白组比较,G0/G1期细胞明显较对照组增加(P0.05),提示半枝莲可促进细胞凋亡,并且将细胞生长周期阻滞于G0/G1期,并且S期减少。结论:半枝莲对人结肠癌HT-29细胞有抑制作用,作用机制可能不光与抑制细胞生长有关,还和阻滞细胞生长周期及诱导细胞凋亡有关。     

四君子汤含药血清对SGC-7901细胞株凋亡及其相关蛋白表达的影响

目的:研究四君子汤含药血清对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞凋亡及其凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。方法:应用体外培养方法和流式细胞技术,检测四君子汤含药血清对人胃癌SGC-7901细胞的细胞凋亡率及其凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的阳性标记率。结果:用药后应用流式细胞仪检测胃癌SGC-7901的细胞凋亡,发现6 h2、4 h4、8 h后四君子汤含药血清高、中剂量组与两对照组相比较细胞调亡率显著增加,其中48 h高、中剂量组凋亡率增加最为显著(P<0.01)。并且随着时间的延长凋亡率增高,呈时间剂量依赖性,48 h高剂量组与中低剂量组比较,有明显增加(P<0.05)。48 h后细胞周期分布,随着四君子汤含药血清剂量的增加,G0/G1期细胞增多,而S期及G2/M期细胞则相应减少。细胞培养48 h后,高、中剂量四君子汤含药血清可促进凋亡诱导Bax表达和下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,呈现量效关系。结论:四君子汤含药血清可影响Bax基因及Bcl-2基因的表达而诱导胃癌细胞凋亡。     

半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响

目的:探讨半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及其机制。方法:体外常规培养人卵巢癌SKOV3细胞,倒置显微镜下观察半枝莲含药血清作用后SKOV3细胞形态的改变,MTT法检测细胞增殖抑制率,应用流式细胞技术检测细胞周期及凋亡率。结果:与空白对照组比较,给药后细胞状态变差,形态和贴壁情况等发生改变。半枝莲含药血清可有效抑制SKOV3细胞生长,低、中、高剂量组抑制率呈递增趋势,同剂量组24 h、48 h、72 h抑制率递增。流式细胞仪检测结果显示,与空白对照组比较,半枝莲含药血清组G0/G1期细胞所占比例增多,空白对照组、半枝莲含药血清低、中、高剂量组48 h细胞凋亡率分别为7.94%、8.36%、17.82%、21.12%。结论:半枝莲含药血清对人卵巢癌SKOV3细胞的增殖有抑制作用,其机制与影响细胞周期和诱导细胞凋亡有关。     

尖叶假龙胆醇提物含药血清对A549细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:探讨尖叶假龙胆醇提物(EEGA,ethanol extract from Gentianella acuta)含药血清对人肺癌A549细胞株诱导凋亡和影响细胞周期的作用。方法:采用四甲基偶氮盐(MTT)比色法检测EEGA含药血清对A549细胞作用24 h、48 h、72 h的增殖抑制率,使用流式细胞仪观察EEGA含药血清处理A549细胞48 h后,细胞凋亡率和细胞周期阻滞率变化的检测。结果:MTT显示EEGA低、中、高剂量含药血清都能抑制A549细胞增殖(P0.05),其抑制率与作用时间相关。低、中、高剂量含药血清处理A549细胞48 h后凋亡率显著高于空白组(P0.05),同时低、中、高剂量含药血清处理A549细胞48 h后,G0/G1期细胞明显较空白组增加(P0.01),提示EEGA含药血清可促进细胞凋亡,并且将细胞生长周期阻滞于G0/G1期。结论:尖叶假龙胆对人肺癌A549细胞有抑制作用,机制可能与抑制细胞生长、阻滞细胞生长周期及诱导细胞凋亡有关。     

减味寿胎丸及其君药菟丝子提取物对人早孕滋养层细胞影响的实验研究

目的探讨减味寿胎丸提取物、菟丝子总提物的含药血清对正常人早孕细胞滋养层细胞(CTB)增殖及凋亡的调节作用。方法制备减味寿胎丸提取物、菟丝子总提物的含药血清,研究其对CTB细胞增殖、分化潜能及凋亡的影响。结果除5%菟丝子总提物高剂量组外,不同组别不同浓度的含药血清与空白对照组血清相比,吸光度值均有显著统计学差异(P0.05或P0.01)。菟丝子总提物高、低剂量组5%与20%含药血清吸光度值有显著统计学差异(P0.05)。各提取物10%含药血清分别培养细胞24 h后,S期细胞百分比均较空白对照组显著增加,G2/M期细胞百分比显著减少(P0.05或P0.01);干预48 h后,变化更加明显。结论菟丝子总提物高、低浓度的含药血清均可增加细胞的增殖活性,且呈明显的剂量依赖性。10%含药血清培养细胞24、48 h后,处于S期的细胞明显增多,阻滞在G2-M期细胞减少,表明含药血清可诱导细胞处于DNA合成期及有丝分裂期,促进细胞增殖,降低细胞凋亡的发生率。     

温脾汤对LPS诱导的体外培养系膜细胞增殖影响的研究

目的:探讨温脾汤药物血清对原代培养大鼠系膜细胞增殖的影响.方法:分离培养原代大鼠肾小球系膜细胞,以LPS诱导系膜细胞增殖,设立正常对照组、大剂量含药血清组、uan中剂量含药血清组、小剂量含药血清组.分别以酶标仪和流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期情况.结果:不同浓度的LPS均能刺激大鼠系膜细胞体外增殖,在24h、48h、72h各时相均以LPS3(1μg/ml)刺激强度最高.同时加入温脾汤药理血清后,可见药理血清对LPS诱导的MC增殖具有不同程度的抑制作用,各时相点均以大剂量含药血清抑制效果最为明显.进一步的研究表明,温脾汤药物血清能够增加系膜细胞G1期细胞百分数,降低S期细胞百分数,表明药物作用可使细胞分裂停滞在S期.结论:温脾汤药物血清能够明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖.     

川芎嗪含药血清干预软骨细胞周期作用机制的研究

目的：探讨川芎嗪含药血清干预软骨细胞周期的作用机制。方法：取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第三代软骨细胞随机分为3组,分别加入培养液、空白血清、含药血清继续培养24h、48h后,采用流式细胞仪检测软骨细胞周期的变化。结果：流式细胞仪细胞周期检测显示川芎嗪含药血清能够刺激软骨细胞由G0／G1期进入S期和G2／M期,并呈现时间的依赖性,干预48h后G0／G1期细胞比例降低,S期与G2／M期细胞之和增加,与正常组、空白组有显著性差异（P〈0．05）。结论：川芎嗪含药血清能有效推动软骨细胞周期的进程。     

补肾舒脊颗粒对强直性脊柱炎关节液成纤维细胞周期的影响

目的:观察补肾舒脊颗粒对强直性脊柱炎(AS)患者关节液成纤维细胞周期的影响。方法:运用血清药理学方法共同孵育,选择不同浓度的含药血清与AS患者膝关节液体外培养成纤维细胞,并与空白血清,SSZ血清组作对照。结果:AS成纤维细胞周期中G1、G2期细胞比值均较正常对照组成纤维细胞显著减低,统计学有差异显著(P0.05);AS成纤维细胞周期中S期细胞比值均较正常对照组成纤维细胞显著升高,统计学有差异显著(P0.01)。与空白血清组相比,中药高、中、低剂量组成纤维细胞的S期比例均明显减少,G1、G2期细胞均明显比例增加,统计学均有差异显著(P0.01)。结论:补肾舒脊颗粒可以改变成纤维细胞各期细胞所占百分比,调控成纤维细胞DNA的合成,抑制成纤维细胞的增殖,从而发挥抗炎抗纤维化的作用。     

温阳化浊通络方对系统性硬皮病成纤维细胞周期和增殖的影响

目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞周期和增殖的影响.方法:通过SSc患者制备强的松、青霉胺及温阳化浊通络方含药血清,分别加入皮肤成纤维细胞培养体系中.培养48 h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别测定细胞增殖和细胞周期.结果:与对照组相比,不同浓度的西药组、中药组、中西医结合组含药血清均能明显抑制正常人和SSc皮损成纤维细胞的增殖(P＜0.05或P＜0.01).与西药组相比,20%中西医结合组血清抑制作用更加明显(P＜0.01).不同浓度的中药组血清能显著提高SSc皮损成纤维细胞的G0-G1期细胞比例(P＜0.01),降低S期细胞和G2-M期细胞比例(P＜0.05或P＜0.01).结论:温阳化浊通络方通过抑制SSc皮损成纤维细胞进入细胞分裂周期,对其增殖具有明显的抑制作用.同时,温阳化浊通络方对体外培养的正常皮肤和SSc皮损成纤维细胞的干预作用不具有选择性.     

常通口服液对大鼠实验性肠粘连的实验研究

目的 :研究常通口服液对实验性肠粘连大鼠的防治效果。方法 :选用SD雄性大鼠 ,手术造成肠粘连模型。各组治疗 7天后取血 ,测定TNF α含量 ,并记录大鼠肠粘连级别。结果 :模型组的TNF α含量与正常组比较有显著性差异 (P <0 0 0 1) ,常通口服液低、中、高剂量组与模型组比较均能显著降低TNF α含量 (P <0 0 0 1)。结论 :常通口服液能降低术后肠粘连级别和血清中TNF α含量。提示常通口服液对大鼠肠粘连具有良好的防治作用     

常通口服液对实验性肠粘连兔纤溶活性的影响

目的:观察常通口服液(CTOL)对实验性肠粘连兔纤溶活性的影响。方法:仿 Thomas and Rhoads方法制作兔肠粘连模型,并以CTOL连续预防给药灌服7天后,兔耳静脉采血检测t-PA和PAI活性的变化,并肉眼观察兔肠粘连的情况。结果:CTOL各剂量组对兔术后肠粘连有明显的预防作用,并使其血中t-PA活性增高,PAI显著下降。结论:CTOL可能是通过调节机体的纤溶系统以达到防治术后肠粘连的作用。     

高三尖杉酯碱和血栓通对人翼状胬肉成纤维细胞周期性变化的影响

目的：研究高三尖杉酯碱和血栓通过对培养人翼状胬肉成纤维细胞周期性变化的影响。方法：对翼状胬肉组织的的成纤维细胞进行培养并传代为第３代－５代,有入三尖杉酯碱及血栓勇分别处理２４ｈ,对照组用生理盐水,应用ＰＩＤＮＡ荧光染色及流式细胞仪检测和分析细胞周期的变化。结果：高三尖杉酯碱组和血栓通组Ｇ１群体细胞明显增多,Ｓ期明显减少,与对照组比较均有明显意义,其中高三尖杉酯碱更为明显。结论：高三尖杉酯碱和血栓通     

丹参对成纤维细胞成骨的扫描电镜观察

目的:阐明丹参对成纤维细胞成骨功能的影响。方法:用皮肤纯化的成纤维细胞作体外培养,分丹参组与对照组,在扫描电镜下观察。结果:0.2%、0.3%浓度的丹参能明显促使成纤维细胞由梭形向鳞片形方向转化,细胞量增多,胶原合成分泌增加,但未见骨结节形成。结论:适当浓度的丹参对成纤维细胞有促增殖、促分化、增加其功能活性的作用,但不能作为诱导因子来诱导成纤维细胞成骨潜能的显示。     

柿叶黄酮对晚期氧化蛋白产物诱导的血管外膜成纤维细胞增殖的影响

目的:观察柿叶黄酮对晚期氧化蛋白产物(AOPP)诱导的血管外膜成纤维细胞增殖的影响.方法:体外培养NIH-3T3细胞,应用柿叶黄酮与晚期氧化蛋白产物共同进行作用并设立对照进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定成纤维细胞的增殖状态.结果:各组的细胞增殖率分别为对照组(1.789±0.299);AOPP 100 μg/ml组(2.064±0.141);AOPP 50 μg/ml组(2.149±0.218);AOPP 10 μg/ml组(2.108±0.165),AOPP 1 μg/ml组(2.124±0.131);AOPP 100 ng/ml组(2.087±0.125);柿叶黄酮50 μg/ml组(1.714±0.179);AOPP 50 μg/ml联用柿叶黄酮50 μg/ml组(1.807±0.105).统计分析显示低至100 ng/ml的AOPP仍能明显刺激成纤维细胞的增殖(P＜0.05).柿叶黄酮单独作用对成纤维细胞增殖率无影响(P＞0.05);柿叶黄酮对AOPP诱导的成纤维细胞增殖有明显的抑制作用(P＜0.05).结论:柿叶黄酮能明显抑制由晚期氧化蛋白产物刺激的血管外膜成纤维细胞增殖.     

培养的人强直性脊柱炎成纤维细胞的超微结构

目的：观察培养的强直性脊柱炎（AS）的成纤维细胞的超微结构。方法：先培养成纤维细胞,用扫描电镜和透射电镜进行观察。结果：扫描电镜观察到AS的成纤维细胞分泌大量的胶原和钙颗粒,透射电镜发现AS的成纤维细胞分泌胶原。结论：AS的成纤维细胞分泌骨基质导致韧带骨化。     

生肌化瘀方及其拆方对大鼠创面成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的：探讨生肌化瘀方及其拆方促进创面修复（呈皮肤修复）的作用机理。方法：采用体外培养创面肉芽组织成纤维细胞，以乳鼠皮肤成纤维细胞作对照，分别加入生肌方、化瘀方及生肌化瘀大小，小剂量药物血清，运用细胞化学ABC法检测成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。：生肌方能够提高创面成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原含量，且均高于模型组（P＜0．01）；化瘀方能够降低创面成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原含量，且低于模型组（P＜0．01）；生肌化瘀方大、小剂量组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量与正常组比较差异均无显著性（P＞0．05）。结论：生肌化瘀方能够促进创面修复，其可能的作用机理是通过调节Ⅰ、Ⅲ型胶原的比值来调控Ⅰ、Ⅲ型胶原代谢。     

太白楤木对成纤维细胞增殖及功能的影响

目的探讨太白楤木对成纤维细胞增殖、活力及对培养上清中透明质酸(HA)产生的影响,研究太白楤木抗肝纤维化机制。方法采用体外培养的NIH3T3(成纤维细胞)作为肝星状细胞(HSC)的替代模型,常规培养,太白楤木中药血清作用于细胞,用MTT法检测太白楤木中药血清对NIH3T3细胞增殖的影响;用放射免疫法测定培养上清中HA的生成。结果太白楤木对细胞无明显毒性,5%浓度太白楤木中药血清可显著抑制细胞增殖(P<0.01),降低NIH3T3细胞培养上清中HA含量,与对照组比较差异显著(P<0.05)。结论太白楤木中药血清可显著抑制NIH3T3细胞增殖和HA的合成,在体外具有一定的抗肝纤维化作用。     

丹参对大鼠粘连成纤维细胞增殖与胶原合成的作用研究

目的:研究中药丹参对大鼠粘连成纤维细胞增殖与胶原合成的影响。方法:利用原代培养获得大鼠粘连组织成纤维细胞(AFB),以地塞米松为阳性对照药,考察丹参对AFB增殖活性与培养液羟脯氨酸含量(HyP)的影响。结果:随着剂量增加,丹参组AFB活性降低趋势大于地塞米松组,丹参组的IC50也显著低于地塞米松组(P<0.01);丹参各剂量组与地塞米松组的HyP水平均低于空白对照组,存在显著性差异(P<0.01);丹参各剂量组与地塞米松组的HyP水平无显著性差异。结论:抑制AFB增殖,减少其胶原合成是丹参防治术后粘连的作用机制。     

川芎嗪、丹参对心肌成纤维细胞胶原合成和细胞增殖的影响

目的 :为了研究川芎嗪、丹参两味中药对体外培养心肌成纤维细胞 (fibroblasts,Fbs)的胶原合成与细胞增殖的影响。方法 :采用胶原酶和胰蛋白酶消化SD大鼠的心肌组织块 ,制备成纤维细胞的单细胞悬液 ,按不同药物及药物的不同浓度分组研究它们对成纤维细胞的胶原合成和增殖影响。结果 :中、高浓度的川芎嗪、丹参能有效地抑制成纤维细胞的胶原合成和增殖。低浓度的川芎嗪、丹参能对抗去甲肾上腺素对成纤维细胞的胶原合成与细胞增殖。结论 :川芎嗪、丹参能抑制成纤维细胞的胶原合成与细胞增殖。这些效应的机制可能与它们的钙离子拮抗有关。