慢性低氧性肺动脉高压大鼠肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

目的：探讨慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建时肾上腺髓质素前体N端20肽（PAMP）的变化。方法:将18只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和低氧组，每组各9只。常压低氧2周后，以右心导管法测定肺动脉平均压（mPAP），检测右心室与左心室加室间隔比值 ［RV/(LV+S)］，观测肺血管显微和超微结构的变化。并且以放免法测定血浆中PAMP含量，以免疫组化法检测肺组织中PAMP表达，以原位杂交检测肺组织中肾上腺髓质素（ADM） mRNA的表达。结果: 低氧组大鼠mPAP及RV/（LV+S）均明显高于对照组（均P<0.01）。光镜下，肺小血管肌化程度明显增强，肺中、小型肌型动脉相对中膜厚度明显增加。电镜下，肺腺泡内动脉内皮细胞增生、肿胀，内弹力层粗细不均，平滑肌细胞肥厚、向合成表型转化。并且低氧组大鼠血浆PAMP含量明显高于对照组（P<0.01），肺动脉PAMP表达和ADM mRNA表达均明显增强。结论：低氧后肺动脉PAMP表达和血浆PAMP含量的上调可能参与了慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建的形成。     

雌激素及其受体对低氧性肺血管重建的作用

 目的：探讨雌激素及其受体对低氧性肺血管重建的作用。 方法:采用间断常压低氧法建立大鼠低氧性肺动脉高压模型。将30只雄性SD大鼠随机分成：对照组、雌激素预防组、低氧组、雌激素治疗组、治疗对照组。以右心导管法测定平均肺动脉压(mPAP)；测定右心室肥厚指数［RV/(LV+S)］；图像分析技术测定肺小血管管壁厚度；用放射免疫法测定血清17-β雌二醇浓度。用RT-PCR方法检测肺组织中ERβ mRNA的表达，用免疫组化染色法检测肺小血管壁的ERβ蛋白表达。 结果:①低氧组、治疗对照组大鼠mPAP、RV/(LV+S)、WT%和WA%均高于对照组；雌激素预防组、雌激素治疗组大鼠mPAP、RV/(LV+S)、WT%和WA%均低于低氧组、治疗对照组。②低氧组、治疗对照组大鼠ERβ mRNA表达量和ERβ蛋白表达与正常对照组无差异。经雌激素干预后，雌激素预防组、雌激素治疗组的ERβ mRNA表达和ERβ蛋白表达显著高于低氧组、治疗对照组。 结论:17-β雌二醇能有效降低低氧性肺动脉高压大鼠的肺动脉压力、阻抑右心室肥厚,对低氧性肺动脉高压血管重建具有一定的预防和治疗作用，其作用可能是通过雌激素受体β实现的。     

低氧对大鼠肺组织中介素及其受体系统表达的影响

目的探讨低氧对大鼠肺组织中介素/肾上腺髓质素2(IMD/ADM2)及其受体系统[降钙素受体样受体(CRLR)和受体活性修饰蛋白(RAMPs)]的变化及意义。方法清洁级雄性SD大鼠20只随机均分成对照组和低氧组。采用放免法检测血浆与肺组织中IMD/ADM2及其横向同源物ADM的含量,RT-PCR技术检测肺组织中IMD/ADM2、ADM及其受体系统mRNA的表达。结果①低氧组大鼠平均肺动脉压、右心室与左心室加室间隔重量比[RV/(LV S)]显著高于对照组(P<0.01);②低氧组大鼠肺组织中IMD/ADM2含量显著低于对照组(P<0.01),而ADM含量却显著高于对照组(P<0.01);血浆IMD/ADM2浓度低氧组显著高于对照组(P<0.01);③低氧组大鼠肺组织中IMD/ADM2和ADM mRNA水平均显著高于对照组(P<0.05),而RAMP1 mRNA水平显著低于对照组(P<0.01)。结论在大鼠低氧性肺动脉高压的形成过程中的早期阶段,IMD/ADM2蛋白和基因的表达存在差异性,而RAMP1基因表达下调。     

CX3CL1/fractalkine在肺动脉高压过程中的表达变化及葛根素的干预作用

目的: 观察趋化因子CX₃CL1/fractalkine(FKN)在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型中的变化并探讨葛根素的干预效应。方法: 复制大鼠肺动脉高压模型,随机分为溶剂对照组(C组)、野百合碱造模组(M组)和葛根素干预组(M+P组)。测量并比较各组肺动脉平均压(mPAP)、右心室平均压(mRVP)、颈动脉平均压(mCAP)、右心室游离壁(RV)和左心室加室间隔(LV＋S)重量比。观察肺细小动脉显微结构变化,测定肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、肺细小动脉中膜厚度(PAMT),测定血浆可溶性fractalkine(sFKN)浓度,肺细小动脉FKN蛋白,肺组织FKN mRNA的表达。结果: M组mPAP、mRVP、RV/(LV+S)、WA/TA和PAMT显著高于C组(P<0.01),M+P组RV/(LV+S)、WA/TA和PAMT较M组显著降低(P<0.01),M组血浆sFKN、肺组织FKN mRNA和肺动脉壁FKN含量显著大于C组(P<0.01),M+P组显著降低(P<0.05),sFKN与PAMT呈正相关(r＝0.719,P<0.01),与RV/(LV+S)呈正相关(r＝0.685,P<0.01)。结论: 葛根素具有抑制FKN表达、肺动脉高压发展和肺血管结构重建的作用。     

三七总皂苷对低氧大鼠肺动脉压和肺组织p38 MAPK表达的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对低氧大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)表达的影响,及预防低氧性肺动脉高压(HPH)的作用和机制。方法:将30只SD大鼠随机分为3组:正常对照组、低氧组和低氧+PNS组。观察各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、平均颈动脉压(mCAP)和右心室/(左心室+室间隔重量)比[RV/(LV+S)],免疫组化法和RT-PCR法分别检测肺小血管壁磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白和肺组织中mRNA的含量。结果:与对照组相比,低氧组大鼠mPAP、RV/(LV+S)明显升高,肺小动脉p-p38 MAPK及肺组织p38 MAPK mRNA含量显著升高(P0.05)。低氧+PNS组mPAP、RV/(LV+S)、肺小动脉p-p38 MAPK及肺组织p38 MAPK mRNA含量明显低于低氧组(P0.05)。结论:PNS具有显著预防HPH的作用,其机制可能与其降低p38 MAPK mRNA的表达有关。     

慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸

目的:探讨慢性低氧对大鼠肺血管L-精氨酸/一氧化氮(L-Arg/NO)途径的影响。方法:采用慢性低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺血管孵育,测定慢性HPH对大鼠肺动脉L-Arg转运,一氧化氮合酶(NOS)活性和NO生成释放的影响。结果:(1)低氧4周大鼠肺动脉平均压(mPAP)比对照组高33.7%(P＜0.01),右心室(RV)和左室加室间隔(LV+S)重量比值(RV/LV+S)高44.2%(P＜0.01)。(2)低氧对血浆L-Arg含量无明显影响。(3)低氧大鼠离体孵育的肺动脉摄取低浓度(0.2mmol/L)和高浓度(5.0mmol/L)[³H]-L-Arg分别低于对照组15.8%(P＜0.05)和27.2%(P＜0.01)。(4)低氧大鼠肺动脉tNOS、iNOS和cNOS活性较对照组高38.0%、32.8%和53.0%(P＜0.01)。(5)低氧大鼠血浆NO含量低于对照组,与mPAP和RV/LV+S呈负相关(P＜0.01)。结论:慢性HPH时NOS活性代偿性增强,但L-Arg转运受损使血浆NO生成仍减少,说明L-Arg转运是NO生成的重要限速步骤。     

腺苷A2a受体在红景天苷调节大鼠低氧性肺动脉高压中的作用

 目的：探讨腺苷A_2a受体（A_2aAR）对低氧性肺动脉高压大鼠的保护作用及红景天苷对大鼠低氧性肺动脉高压的调控作用及其机制。方法：将SD大鼠60只随机分为6组：正常组、低氧组、低氧+红景天苷低剂量组、低氧+红景天苷中剂量组、低氧+红景天苷高剂量组、低氧+A_2aAR激动剂（CGS-21680）组。测定各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、平均颈动脉压（mCAP）和右心室(RV)/（左心室+室间隔）(LV+S),观察各组肺细小动脉显微结构变化;用免疫组化法和原位杂交法测定肺细小动脉管壁A_2aAR含量的变化;用实时荧光定量PCR法和Western blotting法测定肺组织匀浆A_2aAR mRNA和蛋白含量的变化。结果：（1）低氧组大鼠mPAP明显高于正常对照组,A_2aAR激动剂组和红景天苷高剂量组可以明显降低mPAP,红景天苷中、低剂量组mPAP虽有下降趋势,但差异无统计学意义。（2）低氧组大鼠RV/(LV+S)显著高于正常组,A_2aAR激动剂组和红景天苷中、高剂量组RV/(LV+S)显著低于低氧组,红景天苷低剂量组较低氧组有减低趋势,但差异无统计学意义。（3）低氧组大鼠肺细小动脉重构显著, A_2aAR激动剂组及红景天苷低、中、高剂量组肺血管重构较低氧组明显减轻。（4）低氧组肺血管和肺组织A_2aAR mRNA和蛋白表达均明显高于正常组,A_2aAR激动剂组和红景天苷高剂量组肺血管和肺组织A_2aAR mRNA和蛋白水平均较低氧组进一步升高。结论：A_2aAR对低氧性肺动脉高压大鼠具有保护作用;红景天苷能够上调低氧性肺动脉高压大鼠肺血管和肺组织A_2aAR的表达,该通路可能是其减轻低氧性肺动脉高压和肺血管重建的重要机制。     

Losartan对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响

目的：探讨氯沙坦（losartan）对慢性低氧大鼠肺动脉压力及管壁胶原的影响。方法：将二级SD大鼠分为：对照组（A）、低氧组（B）、低氧+losartan组（C），低氧时间为4周。采用透射电镜、免疫组化、原位杂交等方法观察losartan对慢性低氧大鼠肺动脉平均压（mPAP）、右心室重量比（RV/LV+S）、肺细小动脉超微结构、肺动脉管壁Ⅰ、Ⅲ胶原和Ⅰ、Ⅲ前胶原基因的影响。结果：①B组mPAP、RV/LV+S显著高于A组（P<0.01），C组mPAP、RV/LV+S显著低于B组（P<0.01）。②电镜检查显示B组肺动脉胶原纤维较A组明显为多，C组较B组明显为少。③免疫组化、原位杂交显示B组肺细小动脉(直径约100-200μm)Ⅰ型胶原及Ⅰ型前胶原mRNA平均吸光度值显著高于A组（均P<0.01），C组肺细小动脉Ⅰ型胶原及Ⅰ型前胶原mRNA平均吸光度值明显低于B组（均P<0.01），Ⅲ型胶原及Ⅲ型前胶原mRNA平均吸光度值各组间无明显差异（均P>0.05）。结论：losartan可预防慢性低氧肺动脉高压的形成和肺动脉管壁胶原的生成、沉积。     

5-羟基癸酸盐对慢性低氧大鼠肺动脉Kv1.5通道表达的影响

目的: 以大鼠为研究对象,研究线粒体ATP敏感性钾通道(mitoK_ATP)的抑制剂5-羟基癸酸盐(5-HD)对慢性低氧肺动脉高压大鼠的影响及其潜在机制。方法: 24只SD雄性大鼠随机分成对照组、低氧组、低氧+5-羟基癸酸盐干预组,每组8只。将低氧组和5-HD干预组大鼠放入常压低氧舱内 以建立低氧肺动脉高压模型。 4周后测定平均肺动脉压(mPAP)及右心室与左心室及室间隔的重量比 ,并采用RT-PCR及Western blotting技术,分析各组肺动脉Kv1.5 mRNA及蛋白表达。结果: (1) 慢性低氧组大鼠的mPAP及RV/(LV+S)显著高于正常对照组(P<0.05),5-HD干预组mPAP及RV/(LV+S)显著低于低氧组,均P<0.05。(2) 低氧组Kv1.5通道mRNA及蛋白表达显著低于正常组,5-HD组Kv1.5通道表达显著高于低氧组, 均P<0.05。结论: mitoK_ATP通道的抑制剂5-HD通过降低mPAP及RV/(LV+S),在慢性低氧肺动脉高压中起保护作用。mitoK_ATP通道的抑制及Kv1.5通道表达的上调可能与该保护作用有关。     

低氧大鼠肾上腺髓质素对其前体N端20肽和肺血管结构重构的影响

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对低氧性肺动脉高压大鼠肺血管结构重构和肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)的影响。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧 ADM组,每组各8只。低氧 ADM组大鼠,通过微量渗透泵皮下持续给予ADM(300 ng/h)。用放免法测定血浆中PAMP含量,用免疫组化法检测肺组织中PAMP表达。结果低氧2周后,大鼠肺动脉平均压、右心室与左心室加室间隔的比值、肺动脉相对中膜厚度和面积较对照组均明显增高(P<0.01),超微结构也发生了明显改变。并且低氧组大鼠血浆PAMP含量明显升高,肺动脉PAMP表达明显增强。而ADM可显著缓解上述变化。结论ADM分子内调控参与了ADM对于低氧性肺动脉高压的干预机制。     

L-精氨酸对缺氧性肺动脉高压大鼠内皮素释放的影响

目的：探讨Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）对缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）大鼠血浆内皮素－１（ＥＴ－１）释放的影响。方法：将Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只分为：对照组,缺氧组,缺氧＋Ｎ＾ω－硝基－Ｌ－精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）组和缺氧Ｌ－Ａｒｇ组。结果：缺氧组的肺动脉平均压（ｍＰＡＰ）显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）,缺氧组＋Ｌ－Ａｒｇ组的ｍＰＡＰ显著低于缺氧组（Ｐ〈０．０５）及缺氧＋Ｌ－ＮＡＭＥ组（Ｐ〈０．０１）,缺     

肾上腺髓质素对高肺血流大鼠肺组织氧化应激的调节作用

目的:研究肾上腺髓质素(ADM)对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺组织氧化应激的调节作用及其机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为对照组、分流组和分流+ADM组。对后2组大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术。8周后,对分流+ADM组大鼠皮下埋微量渗透泵持续予ADM 1.5μg·kg~(-1)·h~(-1)。继续饲养2周后,右心导管法测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室/(左心室+室间隔)重量比值,检测肺中、小肌型动脉相对中膜厚度(RMT),比色法测定肺组织匀浆丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Western blot法检测肺组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶4(NOX4)的表达。结果:与对照组相比,分流组大鼠的mPAP、右心室肥厚程度以及肺中、小肌型动脉RMT均明显增加,肺组织MDA含量明显升高,T-AOC、SOD活性和GSH-Px活性均明显降低,肺组织NOX4表达明显升高。ADM使肺动脉压力明显回降,右心室肥厚程度减轻,肺血管结构改变缓解,肺组织MDA含量明显下降,T-AOC、SOD活性和GSH-Px活性明显升高,肺组织NOX4表达明显降低。结论:ADM能够抑制大鼠高肺血流性肺动脉高压和肺血管结构重构形成中的氧化应激反应,作用机制可能与其下调肺组织NOX4表达以及增强抗氧化活性有关。     

肾上腺髓质素m RNA在慢性缺氧大鼠右心室中的表达

目的:探讨肾上腺髓质素(AM)在慢性低氧性肺动脉高压发病中的作用。方法:16只大鼠随机分为低氧组和对照组,间断常压低氧14d复制肺动脉高压模型,静脉右心导管测定右室收缩压(RVSP)的变化,分离心室检测右室/(左室+室间隔)(RV/LV+SP)比值,原位杂交法检测AMmRNA在右心室中的表达。结果:低氧组大鼠右室压为(63.63±3.42)mmHg,显著高于对照组的(34.13±3.40)mmHg(P<0.01)。低氧组大鼠(RV/LV+SP)比值为0.439±0.039,显著高于对照组的0.23±0.025(P<0.01)。AMmRNA在对照组大鼠的右室心肌细胞也有少量表达,低氧组大鼠其表达显著多于对照组。图像分析表明,低氧组的平均吸光度、平均表达面积分别为0.1061±0.0188,0.1421±0.0165,均显著高于对照组的0.0872±0.0171,0.0967±0.0135。结论:低氧时右心室AMmRNA表达增加,提示可能在肺动脉高压的发病中起保护作用。     

低氧性肺动脉高压大鼠肺内5-HT_(1B)受体的分布和表达变化

目的:观察低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠体内5-羟色胺(5-HT)水平及其肺内5-羟色胺1B(5-HT1B)受体的分布和表达变化,探讨低氧性肺动脉高压的形成机制。方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为正常组(control)、低氧3周组、低氧4周组和低氧5周组。除正常组外,其余3组大鼠分别在低氧环境中饲养3周、4周和5周。测定各组大鼠的平均肺动脉压力(mPAP)、右心室收缩压(RVSP)、右心室肥厚度[RV/(LV+S)%]、血浆和肺组织中5-HT含量。应用免疫组织化学法观察大鼠肺组织中5-HT1B受体的分布和表达,Western blotting法测定大鼠肺组织中5-HT1B受体的蛋白含量。结果:和正常组相比,低氧3周组大鼠的mPAP、RVSP和右心室肥厚度均显著升高(均P0.05),并且随着低氧时间的延长而持续升高(均P0.05)。低氧大鼠血浆和肺组织中5-HT的含量均显著高于正常组大鼠(均P0.05),并随着低氧时间的延长而持续升高(均P0.05)。免疫组织化学结果显示:5-HT1B受体主要分布在正常大鼠肺动脉的内膜层,而平滑肌层中仅有少量表达;和正常组相比,低氧3周组大鼠肺动脉平滑肌层中5-HT1B受体的表达显著增多;随着低氧时间的延长,大鼠肺动脉平滑肌层中5-HT1B受体表达持续增多。Western blotting结果表明,大鼠肺组织中5-HT1B受体的蛋白含量变化和免疫组织化学结果相一致。结论:低氧性肺动脉高压大鼠体内5-HT水平显著升高,其肺动脉中5-HT1B受体呈过度表达,这可能是低氧性肺动脉高压形成的分子机制之一。