厌氧棒菌苗抑瘤作用的实验研究Ⅱ、Cp诱导带瘤小鼠脾脏抑制细胞的观察

本文研究了厌氧棒菌苗(简称Cp)诱导正常小鼠和带Lewis瘤小鼠脾脏细胞的免疫抑制作用。实验结果表明:Cp腹腔注射于正常鼠与带瘤鼠后,其脾细胞对ConA的反应减低,抑制率分别为76.46%、72.24%;同时还具有抑制同系正常小鼠脾淋巴细胞对ConA增生反应的作用,抑制率达39.31%、69.64%;将这种抑制细胞群分为粘附玻璃和非粘附玻璃细胞群,再经X线照射处理,其结果提示起抑制作用的既有抗放射性的粘附玻璃的巨噬细胞,又有对放射线极敏感的非粘附玻璃的T抑制细胞;另外,将正常小鼠、注射Cp的正常小鼠及注射Cp的带瘤小鼠脾淋巴细胞在体外经ConA诱导24小时后,皆可检测出表达抑制功能的抑制性T细胞(ConA—SC),然而带瘤对照鼠仅观察到较低的抑制作用,也未检测出表达抑制功能的ConA—SC细胞。     

带SRS肿瘤小鼠脾细胞对体外淋巴细胞增生反应的抑制作用

本文报道接种SRS肿瘤后,带瘤小鼠的脾脏细胞具有非特异性抑制体外同种异型细胞(MLR)和淋巴细胞对致分裂原刺激的增生反应。这种抑制效应在肿瘤接种后3天即可观察到,其中以粘附细胞的抑制作用为明显,从带瘤10天、20天、33天小鼠脾脏组分出来的粘附细胞,对刀豆素A(ConA),大肠杆菌脂多糖(LPS)诱发淋巴细胞增生反应的抑制率均可达90％以上。用~(60)钴2500rad照射或用抗Thy-1血清和补体处理这种脾脏粘附细胞,只能部分地消除它的抑制作用,提示很可能是通过粘附细胞中的巨噬细胞发挥作用,但也不能排除T细胞在其中也起一定的作用。     

小鼠B淋巴细胞在ConA反应中的辅佐作用

小鼠脾细胞经两次贴壁除去巨噬细胞,再经两次尼龙毛柱纯化T细胞,尼龙毛粘附的B细胞用抗θ血清加补体去除残余的T细胞后,得到高度纯化的B细胞,在体外用细胞重组实验方法观察B细胞在ConA反应中的作用。结果表明,静止B细胞和细菌脂多糖活化的B细胞均能非常显著地辅佐T细胞对ConA刺激的增殖反应,B细胞这种作用不受组织相容性抗原约束。B细胞还能辅佐T细胞产生IL-2,这证明B细胞具有辅佐细胞功能。     

肿瘤坏死因子体内抗肿瘤活性及其对巨噬细胞激活作用的关系

在体外细胞毒活性实验中,小鼠乳腺癌Ca761-86细胞对rTNF不敏感,而在体内,rTNF却可明显抑制Ca761-86细胞的生长。根据(1)rTNF在体外可直接激活小鼠腹腔巨噬细胞杀伤Ca761-86细胞;(2)在体内由rTNF诱导和激活的腹腔和脾脏中的巨噬细胞均可杀伤体外培养的Ca761-86细胞;提示rTNF在体内对Ca761-86细胞的抑制瘤效应与其对巨噬细胞的激活作用也可能有关。     

人肺癌A549细胞产生的兔疫抑制因子对IL-l产生及作用的影响

人肺癌A549细胞产生的免疫抑制因子(TDSF)作用于巨噬细胞(Mφ)5h,即可抑制白细胞介素-1(IL-1)的产生;如持续作用24 h、48h则抑制作用更强。与对照组相比P<0.05,<0.01.当TDSF存在时,经尼龙毛处理的胸腺细胞对外源性IL-1反应显著减弱,表明TDSF能抑制IL-1作用。ConA刺激未经尼龙毛处理的胸腺细胞可产生增殖,但TDSF使其增殖抑制.表明:TDSF能抑制IL-1的产生及作用,并能干扰由IL-1介导的其他反应.TDSF可通过抑制胸腺细胞增殖从而阻止新鲜T细胞的补充。     

L759与L615瘤细胞抗原性的初步比较观察——瘤苗主动免疫及交叉攻击试验

L759是在615近交系小鼠上新建立的一株可移植性肉瘤白血病。由于 L759的原带代瘤鼠是一只莪术 L615瘤苗+BCG 主动免疫后经10~5个活 L615细胞攻击而存活的小鼠,它很可能并非自发瘤,而是在免疫机体中由 L615细胞遗传性发生变异而来。因而弄清它与 L615的关系,具有一定的理论意义。我们通过瘤苗主动免疫及交叉攻击试验,对 L759与 L615瘤细胞的抗原性进行了初步的比较,结果并未发现两者之间有     

绞股蓝总皂甙对小鼠S180肉瘤及K562细胞的抑制作用

目的 绞股蓝总皂甙（GP）对小鼠S180肉瘤及K562细胞的抑制作用。方法 通过动物实验观察绞股蓝总皂甙对小鼠S180肉瘤生长状况，肿瘤坏死面积（TNA）与肿瘤总面积（TTA）和比率，瘤周瘤内免疫活性细胞浸润状况及荷瘤小鼠脾脏的影响，通过细胞培养观察绞股蓝总皂甙对K562细胞生长的抑制作用。结果 经重复实验证实，GP能显著抑制小鼠S180肉瘤的生长，TNA与TTA的比率显著增加，瘤周尤期是瘤内淋巴细胞，巨噬细胞浸润数量明显增加，荷瘤小鼠脾重增加，脾白髓数目增多，体积增大。同时证实，GP对K562细胞株具有明显的生长抑制作用。结论 GP的抑瘤作用主要是直接杀伤瘤细胞，免疫活性细胞也发挥了一定作用。     

可移植性小鼠肉瘤白血病(L759)的实验研究

L759是1975年9月在615近交系小鼠上开始建立的一个可移植性肉瘤白血病新瘤株,现已传至132代。其生长特性已基本稳定,在615系小鼠中用瘤细胞移植,发病率为100％,无自发缓解,平均存活时间13.8±2.5天;对不同年令、性别的615系小鼠和不同途径(包括口服)接种,均可发病。L759白血病细胞于局部皮下接种后迅速侵入血管并通过血行向全身播散,其特点是在接种局部可长出较大的实体瘤结,并逐渐发展为典型的白血病,故属肉瘤白血病。 L759与L615细胞形态相似。电镜观察在瘤细胞内看到池内A颗粒,在脾组织中还看到C型病毒样颗粒。 L759对抗癌药的敏感谱较广。不仅对抗代谢类及烷化刘类药物非常敏感,而且对生物碱类也颇敏感,长春新诚对瘤重的抑制率可以达到100％。对于L759的来源及其与L615的关系进行了讨论。     

炎喜康免疫药理作用的实验研究

炎喜康是一新型非甾体抗炎药,具有明显的抗炎作用。本实验用免疫学方法探讨了该药的抗炎作用的部分机制。结果表明,该药能抑制巨噬细胞吞噬功能,促进抑制性T细胞的抑制作用,这可能是其抑制小鼠迟发型变态反应和大鼠佐剂性关节炎的作用机制之一。该药还能增强SRBC诱导的小鼠脾溶血素的产生和ConA以及LPS诱导的T和B细胞的增殖反应,呈现明显的免疫增强作用。     

刀豆素A诱导小鼠抑制性细胞的体外研究

我们研究了刀豆素A(ConA)在体外诱导小鼠脾脏抑制性细胞所需的最适当剂量,发现约0.78μg/ml或50pμg/ml的浓度对大多数小鼠能诱导出以抑制性功能为主的细胞,这些细胞能抑制正常淋巴细胞(应答细胞)对促有丝分裂原的增生反应。6.25～12.50μg/ml的ConA所诱导的脾细胞能增强应答细胞对促有丝分裂原的增生反应。未经ConA诱导的脾细胞(对照细胞)可抑制或增强应答细胞对促有丝分裂原的增生反应。通常检测抑制性功能是应用相对抑制率来表示,但是它不能真实地反映ConA诱导细胞的功能。我们建议增加绝对抑制率的指标,因它能反映ConA诱导细胞的真实功能。这两种表示方法可以相互补充。     

创伤后巨噬细胞对T淋巴细胞的直接接触免疫抑制作用

本实验研究了创伤小鼠巨噬细胞对Ｔ淋巴细胞的直接接触抑制作用。结果显示：创伤后巨噬细胞可通过直接的细胞接触方式抑制正常小鼠Ｔ淋巴细胞转化、ＩＬ－２的产生、ＩＬ－２４的表达以及ＩＬ－２介导的淋巴细胞增殖，但对ＩＬ－２－ＩＬ－２Ｒ反应及ＩＬ－１的产生无明显影响，可明显提高Ｔｓ细胞抑制活性。去除正常小鼠淋巴细胞中的Ｔｓ细胞，可阻断创伤后巨噬细胞的这一抑制活性。提示：（１）创伤后巨噬细胞可通过ＩＬ－１以外的     

615系小鼠可移植性乳腺癌株(Ca759)的实验研究

Ca759是1975年9月将615系经产雌鼠的一自发B型乳腺癌经同系移植而建立的一个新瘤株,迄今已传201代,其移植成功率均为100%,皮下移植瘤的潜伏期为5.0±0.3天,存活期为26.9±3.6天。Ca759于常规移植后,局部肿瘤的生长曲线可分为潜伏期、缓慢生长期和快速生长期,即使到晚期局部肿瘤十分巨大,也很少发生溃破,而带瘤宿主也无明显的恶液质表现,转移罕见。随着肿瘤的增长,脾脏也进行性增大,瘤系数与脾系数也均不断增大,两者呈明显的正相关。 Ca759对临床常用十种抗癌药中有8种表现出不同程度的敏感性,特别是环磷酰胺对Ca759的抑瘤率达到100%,对氨甲碟呤、三尖杉酯碱也敏感,这就为抗癌药物的筛选及抗肿瘤作用原理的研究提供有一个较敏感而又有特点的模型。     

人阴道乳酸杆菌的抑瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:探讨从本地区健康女性生殖道内分离的三株产过氧化氢乳酸杆菌的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。方法:建立KM小鼠宫颈癌U14移植瘤动物模型,随机分组,以模型组作为阴性对照组,设顺铂(Di-aminodichloroplatin,DDP)、卡介苗(BCG)作为阳性对照组;乳酸杆菌组小鼠腹腔注射乳酸杆菌1010个/只,连续10 d;测定肿瘤抑制率和腹腔巨噬细胞的吞噬率及吞噬指数;MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞的增殖活性。结果:与模型组比较,三株乳酸杆菌处理组小鼠的腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数均明显增高;小鼠脾脏的T、B淋巴细胞的增殖活性均显著增强;小鼠的U14移植瘤生长均受到抑制。结论:我们分离的三株阴道乳酸杆菌能够明显抑制小鼠宫颈癌U14的生长;能够增强荷瘤小鼠巨噬细胞和淋巴细胞活性,可能是阴道乳酸杆菌抗癌机制之一。     

氨茶碱对小鼠脾细胞免疫功能调节作用的观察

本文通过氨茶碱在小鼠体内应用后,小鼠脾细胞对ConA的增殖反应、诱生IL-2活性和小鼠脾细胞对外源性IL-2的反应性的变化情况,来观察氨茶碱的免疫调节作用。结果表明:按治疗剂量及治疗剂量的1/50应用氨茶碱,均抑制小鼠脾细胞对ConA的增殖反应,降低IL-2的活性,随着用药时间的延长抑制作用明显。应用不同剂量的氨茶碱可影响小鼠脾细胞对外源性IL-2的反应性,即应用治疗剂量时反应性增强,低剂量时反应性降低。     

Ecco-18株病毒对P615移植瘤小鼠脾细胞产生IL-2的影响

P615移植瘤小鼠脾细胞经ConA诱导产生IL-2较正常鼠明显下降。于P615鼠背部皮下注3次Ecco-18株病毒后,其脾细胞培养上清IL-2含量较带瘤对照组明显升高。     

用尼龙毛分离小鼠脾脏T淋巴细胞

细胞免疫涉及肿瘤免疫、移植排斥反应和抗感染等现代医学中的几个重大课题,在进行细胞免疫研究前,必须分离纯化免疫活性细胞(特别是T淋巴细胞)。近年来Julius、Eisen、Greaves、Trizio等先后利用尼龙毛分离T及B淋巴细胞;李绍康等成功地用国产尼龙毛分离了小鼠淋巴结T细胞。我们根据李绍康和Greaves等方法利用国产尼龙毛也成功地分离了小鼠脾     

615系小鼠乳腺癌细胞系(Ca761/L)的建立及其生物学特性

Ca761/L是将615系小鼠实体型乳腺癌株(Ca761/S)在体外培养而建成的一个小鼠乳腺癌细胞系,它是一个生长迅速而稳定的悬浮培养的瘤细胞系,迄今已在体外培养二年,传至150余代。其细胞形态以中圆形为主,多为单核,电镜下显示恶性细胞的征象并可见到A型病毒样颗粒。细胞化学(DNA、RNA、SDH、5′AMPase、ACP等)的观察结果与电镜所见相符。培养至第5天细胞可增长27.4倍。分裂指数以第3天最高达18‰。瘤细胞核型为45或43,-2X,tri12±tri17,+M1～5。≥7μg/ml ConA就产生凝集反应,甚至不加ConA也可能出现自发凝集。将5×10~6浓度细胞经不同途径接种于615系小鼠,成瘤率达100%。无一例自发缓解且保存其转移特性。支原体检测阴性。因此,Ca761/L具有较大的推广应用价值。     

藏药结血蒿水提物的免疫抑制作用研究

目的研究结血蒿水提取物（AV-ext）对小鼠免疫反应的抑制作用。方法运用淋巴细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应观察AV-ext体外应用和口服给药对小鼠脾细胞增殖的影响;运用小鼠脾细胞增殖试验,观察AV-ext体外应用对小鼠活化脾细胞分泌IL-2的影响;用明胶酶谱法和粘附分析法,观察AV-ext对小鼠活化T淋巴细胞移动和粘附能力的影响。结果AV-ext在1μg／mL-100μg／mL剂量范围内对脾细胞无明显的细胞毒性,但对刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠脾细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应具有明显的抑制作用,对小鼠活化脾细胞分泌IL-2、小鼠活化T淋巴细胞分泌基质金属蛋白酶9（MMP-9）及粘附能力有显著的抑制作用;连续7d每日口服给予150mg／kg和300mg／kg的AV-ext,能明显抑制小鼠脾细胞增殖及活化脾细胞分泌MMP-9。结论AV-ext能显著抑制小鼠的细胞免疫反应。     

615系小鼠乳腺癌的超微结构研究

本文综合报道了615系小鼠乳腺癌自发瘤Ca841、Ca842和乳腺瘤株Ca759、Ca761、Ca763移植瘤的透射电镜观察。Ca841、Ca842、Ca761、Ca763的原代瘤光镜诊断符合Duun氏小鼠乳腺癌分类的A型,而Ca759则为B型。在超微结构方面,它们之间相似之处主要表现在瘤细胞均呈现不同程度的多形性,核质此高,核仁明显,可见核分裂相,表面有微绒毛,细胞间有细胞连接,胞质中均可见A型病毒样颗粒,核糖体特别丰富而其它细胞器较少。综上符合一般癌细胞的特征。它们之间不同之处,在Ca841、Ca842,其瘤细胞与肌上皮样细胞形成腺泡样结构,含有A型和B型两种病毒样颗粒,瘤细胞可分明、暗二型;Ca759瘤细胞多紧排列成癌巢,也有明、暗二型瘤细胞;Ca761、Ca763瘤细胞排列较分散,不能区分明、暗细胞,其细胞器较丰富除含大量多聚核蛋白体外,尚可见高尔基复合体和微丝。除Ca761外,均可见基膜。在Ca761有时可见从中心粒直接发出伸向细胞表面的纤毛。就我们所见,进行了讨论。其中特别值得提出的是:原代A型乳腺癌在移植过程中有的可转变成B型;存在于原代癌中的A型及B型病毒颗粒在移植中B型颗粒多丧失而A型颗粒可持续存在;明细胞与暗细胞似乎是处于不同功能状态的同一细胞,暗细胞可能处于功能活跃状态;某些瘤细胞中所见的微纤维与瘤细胞的活动与侵袭可能存在一定关系。另外,令人感兴趣的是Ca763的某些瘤细胞中,可见有从中心粒发出的纤毛,这点在其它文献中尚未见报道。     

宽叶返魂草对免疫功能影响的实验研究

目的：观察宽叶返魂草对小鼠免疫功能的影响。方法：实验组小鼠灌胃宽叶返魂草煎液每次0.5ml (含生药0.5g/ml），每日1次，连续7天，对照线小鼠灌胃等量生理盐水。结果：灌胃结束后实验组小鼠免疫器官脾脏和胸脾萎缩，并抑制LPS刺激后的脾细胞增殖反应，抑制小鼠碳廓清指数，对ConA刺激的小鼠脾细胞增殖反应，牌细胞IL－2的产生无明显影响。结论：宽叶返魂草水煎剂对小鼠的免疫功能有明显的抑制作用，对细胞免疫应答抑制不明显，地非特异性巨噬细胞吞噬功能亦有抑制作用。