活性维生素D_3协同他莫西芬对裸鼠乳腺癌细胞移植瘤的抑制效应

目的:探讨活性维生素D3联合他莫西芬对转染pVDRE-Tk-ERα质粒的MDA-MB-231乳腺癌细胞裸鼠移植瘤的协同抑制效应及其相应机制。方法:将重组pVDRE-Tk-ERα真核表达质粒转染到ER阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞内并将处于对数生长期的MDA-MB-231VDRE-ERα细胞皮下注射到Balb/c裸鼠体内,4w后,分别用0.5μg/kg的活性维生素D3和50mg/kg的他莫西芬单独及联合处理裸鼠移植瘤模型20d,测量各组裸鼠移植瘤的体积大小。利用HE染色观察移植瘤的组织结构,用免疫组化法检测移植瘤细胞Ki-67蛋白的表达变化以检测移植瘤细胞的增殖活性变化。结果:活性维生素D3和他莫西芬联合作用组较对照和单独作用组能够显著减小裸鼠移植瘤的体积并有效改变其组织病理结构,二者联合运用还能在体内显著抑制乳腺癌细胞的增殖活性。结论:活性维生素D3在体内可通过VDRE-Tk启动子诱导ERα的表达从而有效恢复雌激素阴性乳腺癌细胞对他莫西芬的敏感性。     

1,25-二羟维生素D3与维生素D受体的研究

维生素D对于人体健康具有重要作用。本文就维生素D的重要活性形式1,25-二羟维生素D_2及维生素D受体两者关系作一综述,为进一步研究维生素D提供参考。     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节作用

1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25-(OH)2D3]是维生素D3的活性形式,是第二甾体类激素,它除了调节机体的钙和骨代谢外,还参与免疫系统的分化与调节.1,25-(OH)2D3是通过与它的特定受体--维生素D受体相互作用来实现它的大部分基因效应的,抗原呈递细胞和T细胞是它作用的靶细胞,它的作用主要是诱导产生基因耐受性树突细胞,抑制致病性T淋巴细胞,促进调节性T淋巴细胞的增生.1,25-(OH)2D3及其类似物已经在许多实验模型中被证明能够抑制自身免疫性疾病和移植排斥反应,这是一个复杂和丰富的研究领域,可能让我们发现一种新的治疗自身免疫性疾病和移植排斥反应的重要方法.     

甘草提取物(Gc34)对MDA-MB-231乳腺癌细胞体外促凋亡作用研究

目的观察甘草提取物Gc34对MDA-MB-231细胞的体外促凋亡作用。方法 MTT法检测不同时间(24、48、72h),不同浓度(25、50、75、100μg/ml)Gc34对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用;采用AO/EB染色、透射电镜实验判断凋亡;流式细胞仪检测其凋亡率。结果 MTT结果显示,随着Gc34作用浓度升高,细胞增殖能力随之下降,Gc34对MDA-MB-231细胞体外增殖抑制呈明显的剂量-时间依赖性,72h半数抑制浓度(IC50)为65.38μg/ml;AO/EB染色表明药物组细胞出现明显凋亡迹象,而阴性对照组中细胞形态完好;透射电镜结果显示,75μg/ml Gc34处理72h后细胞出现典型凋亡形态学改变;流式细胞仪分析结果显示,随Gc34剂量增加细胞凋亡率逐渐上升,呈明显的剂量依赖性。结论甘草提取物Gc34在体外能明显抑制MDA-MB-231细胞增殖并诱导其凋亡。     

活性维生素D3及受体在肾脏病中作用

维生素D是人体内不可缺少的生物活性物质,也是必需维生素之一。有学者认为⁽¹⁾,维生素D是一种激素,因为它具有激素样生理特性。多数植物和动物都能在日光下合成维生素D。     

维生素D_3对报告载体荧光素酶表达的作用

目的：　研究１,２５－二羟维生素Ｄ３ 对结肠癌细胞系Ｃａｃｏ－２ 细胞中报告基因表达的作用,并探讨在报告载体ｐＧＬ２ 序列中存在潜在的抑制性维生素Ｄ应答元件（ＶＤＲＥ）的可能性。方法：　采用磷酸钙沉淀法将报告载体转染入Ｃａｃｏ－２ 细胞。Ｃａｃｏ－２细胞经不同浓度１,２５－二羟维生素Ｄ３ 处理后测定细胞裂解液中表达的荧光素酶活性。结果：　应用ｐＧＬ２ 报告载体时,当用ｐＳＧ５－ＶＤＲ表达载体共转染后,１,２５－二羟维生素Ｄ３显著地抑制Ｃａｃｏ－２ 细胞荧光素酶的表达（Ｐ＜ ０．０５）;而未使用该表达载体共转染则无抑制作用（Ｐ＞ ０．０５）。应用ｐＧＬ３ 报告载体时,不同浓度的１,２５－二羟维生素Ｄ３ 对ｐＬＧ３转染后Ｃａｃｏ－２ 细胞表达的荧光素酶活性均无显著抑制作用（Ｐ＞ ０．０５）,该作用不依赖是否存在有ｐＳＧ５－ＶＤＲ表达载体共转染。结论：１,２５－二羟维生素Ｄ３ 对报告载体ＰＧＬ２ 荧光素酶表达具有抑制作用,而对ｐＧＬ３ 则否;类似人类ＰＴＨ基因中的潜在抑制性ＶＤＲＥ存在于报告载体ｐＧＬ２,在ｐＧＬ３ 中该ＶＤＲＥ业已改变。     

血清1,25-二羟维生素D3水平对老年骨质疏松症患者骨骼肌减少症的预测价值

目的探讨血清1,25-二羟维生素D3〔1,25-(OH)_2D_3〕水平对老年骨质疏松症(OP)患者骨骼肌减少症(SAR)的预测价值。方法选取2015年3月-2018年3月我院收治的OP患者246例为研究对象,回顾性分析一般临床资料,根据OP是否合并SAR分为合并SAR组(n=180)和未合并SAR组(n=66),分析患者血清1,25-(OH)_2D_3水平与OP合并SAR的相关性,进一步探讨预测价值。结果合并SAR组血清1,25-(OH)_2D_3、钙(Ca)、碱性磷酸酶(ALP)水平显著低于未合并SAR组,ALT高于未合并SAR组(P0.05),但两组GLU水平比较无明显差异(P0.05); Spearman秩相关性分析发现OP患者血清1,25-(OH)2D3水平与ASMI不相关(P0.05),与握力、步速呈正相关(P0.05); OP患者血清1,25-(OH)2D3水平与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、体质量(BMI)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)不相关(P0.05),与雌二醇(E2)、睾酮(T)、白介素-10(IL-10)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平呈正相关(P0.05),与活性氧(ROS)、全段甲状旁腺素(i PTH)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)呈负相关(P0.05)。结论血清1,25-(OH)_2D_3水平在是否合并SAR的OP患者中存在显著差异,且还与OP患者SAR部分评价指标及影响因素相关,在OP合并SAR中有一定预测价值。     

补充维生素D3对预防婴幼儿佝偻病的效果观察

目的 观察维生素D3预防婴幼儿佝偻病的效果。方法 选择2015年1月—2017年5月60例婴幼儿,按随机数表法分为对照组与观察组,每组各30例。对照组给予常规生活指导并服用乳酸钙颗粒,0.25 g/d,服用3个月;观察组在常规生活指导基础上给予服用维生素D3,400 IU/d,服用3个月,两组均随访1年。检测两组婴幼儿血清钙离子、磷离子及血清骨源性碱性磷酸酶(BALP)水平,检测血清骨钙素(BGP)、血清25-羟维生素D3及脱氧吡啶啉(DPD)水平,检测两组婴幼儿骨密度,统计3个月内两组婴幼儿发生佝偻病比例。结果 干预后,观察组血清钙磷离子及BALP水平均高于对照组(P<0.05);干预后,观察组BGP、25-(OH)D3、DPD水平均高于对照组(P<0.05);干预后,观察组胫骨、桡骨、尺骨骨密度水平均高于对照组(P<0.05);观察组发生佝偻病比例低于对照组(P>0.05)。结论 维生素D3可有效预防婴幼儿出现佝偻病。     

维生素E琥珀酸酯对人胃癌细胞中核因子及抗凋亡基因的影响

目的本研究以人胃癌SGC-7901细胞为肿瘤模型,在体外探讨维生素E琥珀酸酯(VES)在抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡过程中对NF-κB组成性激活及抗凋亡基因在转录水平上的调控作用。方法采用MTT法和AnnexinV法分别检测不同浓度水平VES处理人胃癌SGC-7901细胞后细胞的生长和凋亡情况。采用细胞成分分离法获得细胞核总蛋白,然后以Westernblot法测定VES处理后核因子蛋白p65在细胞核总蛋白中的含量。用RT-PCR方法检测VES对SGC-7901细胞中抗凋亡基因c-IAP1、c-IAP-2、NAPI、survivin、XIAP的转录调节作用。结果12.5～50.0μmolVES作用24h后,SGC-7901细胞的生长被明显抑制。50μmolVES作用于细胞12h后可诱导细胞发生凋亡,且作用48h后其凋亡诱导作用更明显。Westernblot结果发现,VES处理SGC-7901细胞后使细胞核内NF-κBp65蛋白的含量下降,即抑制了NF-κBp65向细胞核内的迁移。RT-PCR结果提示,VES处理胃癌细胞后可以在基因水平上抑制抗凋亡基因NAIP和survivin转录,对其他IAPs家族成员-c-IAP1、c-IAP-2、XIAP的转录无下调作用。结论VES对SGC-7901细胞内NF-κB组成性激活的调控作用及对抗凋亡基因在转录水平上的抑制作用可能是其抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞发生凋亡的机制之一。     

硒-甲基硒代半胱氨酸诱导乳腺癌细胞凋亡作用

目的 探讨硒-甲基硒代半胱氨酸（MSC）对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长抑制作用。方法 不同浓度MSC培养液（12.5、25.0、50.0、100.0、200.0 μmol/L）作用于MDA-MB-231细胞24、48 h,噻唑蓝法检测MSC对细胞增殖的抑制作用;Hoechst染色法观察细胞凋亡形态;试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力变化。结果 MSC对细胞增殖具有抑制作用,与对照组比较（100±0.00%）,200 μmol/L MSC处理24、48 h细胞生存率[分别为（64.15±2.81）%、（42.57±2.25）%]明显下降（P<0.01）,呈剂量和时间效应关系;Hoechst染色结果显示,高剂量MSC组细胞可见明显染色质凝聚现象;与对照组[SOD （82.47±1.99）、GSH-Px （46.69±0.55） U/mgprot、MDA （5.80±0.11）μmol/mgprot]比较, 200 μmol/L MSC处理组细胞24 h时,细胞内SOD、GSH-Px活力[分别为（20.99±3.03）、（22.00±0.75） U/mgprot]明显下降,MDA含量[（36.20±0.25）μmol/mgprot]明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）;相同剂量MSC作用MDA-MB-231细胞48 h时,细胞内氧化应激指标变化趋势与作用24 h时趋势相同。结论 MSC能够抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与细胞内氧化应激状态改变有关。     

维生素D_3对大鼠胃腺癌作用的研究

方法：经饮水摄入Ｎ－甲基－Ｎ′－亚硝基－Ｎ－亚硝胍（ＭＮＮＧ，１５０ｍｇＬ－１）制作大鼠胃腺癌模型，饲以１，２５－二羟基维生素Ｄ３〔１，２５（ＯＨ）２Ｄ３〕添加的饲料（２．５ｍｇｋｇ－１和５．０ｍｇｋｇ－１）。于实验１６、３２周处死动物，进行增生细胞核抗原（ＰＣ－ＮＡ）免疫组织化学和组织病理学研究。结果：实验１６周，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３（５．０ｍｇｋｇ－１）添加组大鼠腺胃粘膜上皮细胞ＰＣＮＡ标记率明显高于只经饮水摄入ＭＮＮＧ组，实验３２周胃腺癌发生率、癌巢数和微血管密度显著增加。结论：一定剂量的１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＭＮＮＧ诱发大鼠胃腺癌的发生有促进作用。     

PTEN抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231体外增殖及其机制的探讨

目的:观察PTEN对乳腺癌细胞MDA-MB-231体外增殖和迁移的影响,进一步探讨其可能机制.方法:选用人乳腺癌细胞MDA-MB-231并体外培养,质粒转染技术建立过表达PTEN的稳定细胞株MDA-MB-231/PTEN作为实验组,空载体细胞株MDA-MB-231/pcDNA3.1作为阴性对照组,以未转染细胞为正常对照组,RT-PCR检测各组细胞PTEN的表达水平,MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖能力,Transwell小室迁移实验检测各组MDA-MB-231细胞的迁移能力.结果:PTEN在MDA-MB-231/PTEN细胞中表达稳定,且其表达量明显高于阴性对照组和正常对照组,而阴性对照组和正常对照组PTEN表达量差异无统计学意义.转染PTEN基因可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移能力.结论:PTEN与乳腺癌的增殖和迁移有关,对乳腺癌细胞的体外增殖和迁移能力起到抑制作用.     

Vitamin D and vitamin D analogs as cancer chemopreventive agents

Epidemiologic studies have associated vitamin D, attained through nutrition and sun exposure, with reduced cancer risk. Although dose-limiting hypercalcemia has limited the use of natural vitamin D in cancer prevention, several promising new synthetic vitamin D analogs (deltanoids) are under development. Examples are KH-1060, EB-1089, 1alpha-hydroxyvitamin D5, vitamin D2, and QW-1624F2-2. Clinical targets for deltanoids include colon, prostate, and breast. Studies to elucidate the molecular mechanisms underlying the observed efficacy of deltanoids are ongoing. The vitamin D receptor, a steroid/thyroid receptor superfamily member, appears to control most deltanoid effects on proliferation, apoptosis, differentiation, and angiogenesis.     

血清1,25(OH)2D和25(OH)D的测定及正常值的建立

目的　建立 1,2 5 (OH) 2 D和 2 5 (OH)D的长沙居民正常值。　方法　选择长沙居民 13 7例 ,年龄 3 0～ 75岁 ,使用RIA方法测定血清上述指标正常值。　结果　两项指标皆随年龄下降 ,对于 2 5 (OH )D ,<40岁 ,40～ 60岁以及>60岁 ,三年龄组分别为 (2 5 .5± 3 .6) ,(2 1.3± 3 .3 )以及 (18.9± 3 .3 )ng/ml ,1,2 5 (OH) 2 D三年龄组分别为 (3 2 .2± 3 .1) ,(2 7.4± 3 .4)以及 (2 5 .7± 3 .7) pg/ml组间有显著差异。　 结论　 1,2 5 (OH) 2 D和 2 5 (OH)D血清正常值随增龄而下降 ,必须按年龄段分别确定正常值 .     

1,25-二羟基维生素D3对原发性骨质疏松骨代谢的影响

目的探讨1，25-二羟基维生素D3[1，25（OH）2D3]对原发性骨质疏松骨代谢的影响。方法采用8月龄雌性新西兰兔，摘除双侧卵巢建立Ⅰ型骨质疏松模型，随机分为假手术组（Sham）、单纯去卵巢组（OVX）、葡萄糖酸钙组（OC）和葡萄糖酸钙＋1，25（OH）2D，组（OCR）。采用3岁龄新西兰雌兔和4岁龄新西兰雄兔，作为Ⅱ型骨质疏松动物模型，随机分为空白对照组（Control）、葡萄糖酸钙组（Calcium）、葡萄糖酸钙＋1，25（OH）2D3组（CR）。OC组和Calcium组单纯给予葡萄糖酸钙，OCR组和CR组给予葡萄糖酸钙和1，25（OH）2D3。给药8周后测定各实验组的骨代谢生化指标。结果给药8周后，在Ⅰ型骨质疏松模型中，OCR组的血钙、血磷、碱性磷酸酶（ALP）均较OVX组和OC组显著升高（P〈0．05或P〈0．01），OCR组的BGP、尿Ca／Cr较OVX组和OC组明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。在Ⅱ型骨质疏松模型中，雌、雄性兔CR组的血钙、BGP、ALP均较Control组和Calcium组有显著性升高（P〈0．05或P〈0．01），尿Ca／Cr较其他两组明显下降（P〈0.05或P〈0．01）。结论1，25（OH）2D3对Ⅰ型骨质疏松症有降低骨转换，促进骨形成，抑制骨吸收的作用；对Ⅱ型骨质疏松症有提高骨转换，促进骨形成，抑制骨吸收的作用。     

Vitamin D2 vs. vitamin D3: They are not one and the same

Conflicting evidence has led to uncertainty as to whether vitamin D₂ and vitamin D₃ are equally efficacious in improving vitamin D status, despite historically being considered equipotent. A systematic review and meta‐analysis completed in 2012 indicated that D₃ was more effective at raising vitamin D levels {using total 25‐hydroxyvitamin D [25(OH)D] as a marker of status} but the meta‐analysis identified high levels of heterogeneity between studies and a lack of statistically powered sample sizes to provide a conclusive answer. Thus, to meet the need for robust data, our research team conducted the largest (to date) randomised, controlled trial comparing the two forms of vitamin D. The D₂–D₃ Study was conducted in 335 healthy South Asian (n = 90) and White European women (n = 245). The study was designed to compare the respective efficacy of vitamin D₂ with vitamin D₃ at raising total 25(OH)D when added to a juice or a biscuit, at a relatively low dose of 15 μg/day for 12 weeks. Overall, the results showed that those who consumed vitamin D₃ showed an average increase in vitamin D status of 74%–75%, whereas an average increase of 33%–34% in vitamin D status was found in those who consumed vitamin D₂. Therefore, this study emphatically shows that vitamin D₃ is more than twice as effective as vitamin D₂ at raising total 25(OH)D concentrations, when given in a low dose that is both physiologically relevant and in line with public health guidance.     

Inorganic sulfur reduces the motility and invasion of MDA-MB-231 human breast cancer cells

This study investigated the effects of inorganic sulfur on metastasis in MDA-MB-231 human breast cancer cells. MDA-MB-231 cells were cultured in the absence or presence of various concentrations (12.5, 25, or 50 µmol/L) of inorganic sulfur. Cell motility, invasion, and the activity and mRNA expression of matrix metalloproteases (MMPs) were examined. Numbers of viable MDA-MB-231 cells did not differ by inorganic sulfur treatment from 0 to 50 µmol/L within 48 h. Inorganic sulfur significantly decreased cell motility and invasion in the MDA-MB-231 cells in a dose-dependent manner (P < 0.05), as determined using a Boyden chamber assay and a Matrigel chamber. The activities of MMP-2 and MMP-9 were significantly reduced by inorganic sulfur in a dose-dependent manner (P < 0.05). The inorganic sulfur also significantly inhibited MMP-2 and MMP-9 expression in the cells (P < 0.05). These data suggest that inorganic sulfur can suppress cancer cell motility and invasion by inhibiting MMP-2 and MMP-9 activity and gene expression in MDA-MB-231 cells.     

蓬子菜总黄酮诱导NB4细胞凋亡作用及机制

目的 观察蓬子菜总黄酮（FGVL）诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株（NB4）细胞凋亡作用,并探讨其作用机制。方法 FGVL（50、100、200 μg/mL）作用于体外培养的NB4细胞,Hoechst染色观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡状况;RT-PCR检测NB4凋亡相关基因Mel-18、Sall4、Bmi-1 mRNA表达。结果 细胞形态学观察显示,NB4细胞经FGVL处理48 h后,与对照组比较,FGVL各剂量组NB4细胞凋亡比例均明显升高（P<0.05）,呈现细胞核固缩、核碎裂及凋亡小体等典型的细胞凋亡特征;与对照组（2.3%）比较,50、100、200 μg/mL FGVL组NB4细胞凋亡率（分别为9.3%、13%、20.4%）明显升高（P<0.05）;细胞周期检测结果显示,与对照组比较,50、100、200 μg/mL FGVL组NB4细胞G0/G1期细胞比例（分别为43.92%、37.26%、29.15%）减少,S期细胞比例（54.16%、62.23%、70.46%）增多;与对照组比较,100、200 μg/mL FGVL组NB4细胞Mel-18 mRNA表达水平升高,Sall4、Bmi-1 mRNA表达水平明显降低。结论 FGVL可阻滞NB4细胞于S期,抑制细胞增殖,通过调节Mel-18、Sall4、Bmi-1等凋亡相关基因表达诱导细胞凋亡。