腹股沟区皮下埋藏睾丸对生精细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的:通过观察腹股沟区皮下埋藏睾丸生精细胞的凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达,探讨二者的关系。方法:以健康育龄期36只雄性新西兰大白兔为实验动物,随机分成实验组18只、对照组18只。实验组动物将双侧睾丸分别移位埋藏至双侧腹股沟区皮下,以制备睾丸埋藏修复阴囊皮肤缺损模型;对照组未作处理。动物模型建立后第8周末,每组随机取6只大白兔测量睾丸表面温度后进行睾丸活检。睾丸组织行原位末端标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡、免疫组化法结合图像分析仪检测睾丸生精细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:对照组的睾丸表面温度为(36.15±0.64)℃,实验组为(38.02±0.36)℃,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型建立后第8周末实验组睾丸生精小管中生精细胞的凋亡指数(AI)为(89.69士3.76)%,对照组为(7.73±4.95)%,两者比较有显著差异(P<0.05)。实验组Bax表达显著升高(P<0.05),Bcl-2表达显著降低(P<0.05),凋亡细胞主要为初级精母细胞和圆形精子细胞。结论:腹股沟区皮下埋藏睾丸局部温度升高诱导睾丸的生精细胞凋亡增加,生精细胞凋亡增加与Bcl-2蛋白表达降低、Bax蛋白表达升高密切相关。Bcl-2/Bax的改变是高温引起生精细胞凋亡的机制之一。     

皮瓣重建兔阴囊诱导精原细胞凋亡与热休克蛋白70表达

目的:探讨皮瓣重建阴囊后睾丸表面的温度变化、生精细胞凋亡及热休克蛋白70(HSP70)的表达。方法:以健康育龄期新西兰大白兔为实验动物,雄性24只、雌性12只。将雄兔随机分成实验组12只,对照组12只。采用温度计埋藏法测量实验组阴囊内睾丸表面的温度,手术切除实验组动物阴囊,建立皮瓣重建阴囊动物模型,对照组未作处理。动物模型建立后第8周末对照组随机取6只动物进行睾丸活检,实验组随机取6只动物测量睾丸表面温度后行睾丸活检。睾丸组织行HE染色、原位末端标记(TUNEL)法检测生精细胞凋亡、免疫组化法结合图象分析仪检测睾丸生精细胞HSP70的表达。模型建立后第8周末,将两组未行睾丸活检的各6只动物分别与雌兔配对喂养观察生育情况。结果:实验组模型建立前睾丸表面温度为(36.0±0.3)℃,模型建立后第8周末睾丸表面温度为(38.1±0.6)℃(P<0.05)。模型建立后第8周末实验组睾丸生精小管中生精细胞的凋亡指数(AI)为(71.85±2.69)%,对照组为(7.73±4.95)%(P<0.05)。对照组HSP70主要在圆形精子细胞中表达,实验组主要表达在精原细胞。配对喂养结果显示,实验组没有生育,对照组生育幼兔(6.0±1.3)只(P<0.05)。结论:皮瓣重建家兔阴囊后睾丸局部温度升高诱导生精细胞凋亡增加,动物丧失生育能力。HSP70参与保护皮瓣重建阴囊诱导的精原细胞凋亡。     

无精子症病人精液细胞学与睾丸针吸细胞学检查的相关性研究

６１例无精子症病人精液细胞学与睾丸针吸细胞学研究的结果显示，８７％的病人精液中检出生精细胞；精液细胞学与睾丸针吸细胞学检查总符合率为９１％（梗阻性无精子症除外）；经ｘ￣２检验二者显著相关（Ｐ＜０．００５），同一病人两种检查所反映的生精细胞发育水平一致。提示精液细胞学检查能反映睾丸生精状况，是一种比较理想的无创伤性检查方法。     

胶原复合梯度TCP修复关节软骨的形态学观察

目的采用新型双向三维可降解生物活性材料胶原复合梯度TCP（collagen complexTCP，Col／TCP）对兔关节软骨缺损进行修复，并对再生软骨进行组织形态学观察。方法取30只成年大白兔，体重2．0～2．5kg，雌雄不限，于双侧股骨外侧髁制作关节软骨缺损模型。于右侧植入Col／TCP修复缺损，作为实验组，左侧不予处理作为对照组。术后4、6、8、12和24周分别处死6只动物，取股骨外侧髁关节面行大体、组织学、透射电镜及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色观察。采用Wakitanifa法软骨组织形态学评分评价修复组织质量。结果大体观察：实验组术后4周，缺损区由白色组织完全充填，表面较光滑，有光泽；12周，修复关节软骨组织与周围正常软骨基本一致，且与关节下骨结合紧密；24周，再生软骨未见明显退变。对照组观察期内均未见软骨组织形成，缺损由纤维组织填充，修复组织表面粗糙，与正常组织界线清楚。实验组术后4、6、8、12和24周组织学评分分别为（7．60&#177;0．98）、（5．69&#177;0．58）、（4．46&#177;0．85）、（4．35&#177;0．12）、（4．41&#177;0．58）分，对照组分别为（10．25&#177;1．05）、（9．04&#177;0．96）、（8．96&#177;0．88）、（8．88&#177;0．68）、（8．66&#177;0．54）分；Ⅱ型胶原含量实验组分别为0．28％&#177;0．01％、0．59％&#177;0．03％、0．68％&#177;0．02％、0．89％&#177;0．02％和0．90％&#177;0．01％，对照组为0．08％&#177;0．02％、0、09％&#177;0．04％、0．11％&#177;0．03％、0．25％&#177;0．03％和0．29％&#177;0．01％；两组各指标比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。透射电镜观察实验组可见典型软骨细胞，而对照组为粗大胶原纤维，细胞少见。结论双向三维可降解生物活性材料Col／TCP在动物体内可诱导关节软骨缺损后的软骨修复。     

精液、睾丸针吸细胞学与睾丸活检的相关性

对两组病例，第１组６１例无精子症病人，进行精液细胞学与睾丸针吸细胞学检查；第２组１５例正常生育男性及４例无精子症病人，进行睾丸活检与精液细胞学检查。结果显示：第１组５３例（占８７％，５３／６１）精液中检出生精细胞，检出病例中精液细胞学与睾丸针吸细胞学所反映的生精细胞发育水平总符合率为９１％，经Ｘ２检验二者显著相关（Ｐ＜０．００５）；８例（占１３％）精液细胞学检查未见生精细胞的病例，考虑梗阴性无精子症，其中７例经精液生化指标证实，５例睾丸针吸细胞检查见精子。第２组两种方法所反映的生精细胞发育水平完全一致。说明精液细胞学检查既能很好反映睾丸生精状况，又能反映精道梗阴情况，是一种比较理想的判断睾丸生精功能及精道梗阻的无创伤性检查方法。     

大鼠一侧睾丸扭转对侧睾丸改变的实验研究

目的 :研究一侧睾丸扭转 (UTT)后对侧睾丸组织学及生精细胞凋亡的改变 ,以明确UTT后对侧睾丸是否存在损伤。　方法 :SD雄性大鼠 6 0只 ,随机分为实验组 (n =4 8)及对照组 (n =12 )。实验组采用Turner方法建立左侧睾丸扭转模型 ,于扭转后 6h处死 4只 ,其余 4 4只再分为扭转睾丸复位及切除组 ,分别于术后 1d、1周、4周处死7～ 8只 ,取睾丸组织进行组织学及生精细胞凋亡的检测。　结果 :UTT复位后对侧睾丸组织学发生明显改变 ,生精细胞凋亡指数明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。扭转睾丸切除后对侧睾丸变化不明显。　结论 :UTT可引起对侧睾丸损伤 ,其机制可能与再灌注有关 ,扭转睾丸切除可防止或减轻对侧睾丸的损伤     

纤维蛋白胶促进急性完全横断性脊髓损伤修复的初步研究

目的探讨纤维蛋白胶（fibri nglue，FG）对完全横断性脊髓损伤修复和再生的影响。方法取健康雌性SD大鼠10只，体重250～300g，制备急性完全横断性脊髓损伤模型。随机将其分为实验组和对照组，每组5只，实验组脊髓断端注入FG（100 μL／只），对照组不予任何治疗。术后4周，采用BBB运动评分法进行运动功能评价。术后4周处死动物，应用免疫组织化学方法观察神经中丝（neurofilament，NF）和神经胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）表达。采用图像分析方法，对脊髓横断处远、近端进行神经纤维计数及GFAP面积比分析。结果BBB运动评分：对照组（2．40&#177;0、51）分，实验组（3．00&#177;0．45）分，两组间运动功能比较差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组织化学观察示，对照组近、远端可见少量NF阳性细胞和GFAP阳性结构；实验组近、远端可见大量NF阳性细胞及GFAP阳性结构生长，并向损伤中心区汇聚，但未到达中心区。图像分析显示，神经纤维数量：实验组近端（113．10&#177;20．75）根、远端（73．60&#177;33．61）根，对照组近端（45．50&#177;17．18）根、远端（23．50&#177;8．20）根；GFAP面积比：实验组近端33．75％&#177;11．06％、远端27．75％&#177;7．15％，对照组近端23．78％&#177;5．76％、远端19．78％&#177;5．17％；实验组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论FG对脊髓损伤具有一定程度的修复及促进其再生的作用。     

实验性高脂兔体外培养阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡的研究

目的观察高脂诱导的血管性ED家兔阴茎海绵体平滑肌（Corpus Cavernosum Smooth Muscle，CCSM）细胞形态、结构变化及高脂对CCSM细胞凋亡、增殖的影响。方法雄性新西兰家兔10只，随机分为模型组和对照组，每组各5只。模型组为采用经高脂、高胆固醇饮食结合球囊导管扩张双侧髂内动脉建立、鉴定的血管性ED模型；对照组喂以正常饮食。8周后切取阴茎CCSM组织观察并做体外细胞培养。经处理后分别在光镜、透射电镜下观察，流式细胞仪检测细胞凋亡，MTT比色法观察细胞增殖活性，RT-PCR法研究Caspase-3 mRNA的表达情况，免疫荧光法检测Caspase-3活性。结果与对照组相比，模型组光镜和电镜下CCSM细胞内含较多脂质囊泡，线粒体、内质网等细胞器出现损伤，凋亡小体明显增多。流式细胞仪检测证实模型组CCSM细胞凋亡率较对照组明显增高（1．44&#177;0．20％Vs5．96&#177;1．60％，P〈0．01）。MTT比色法显示高脂对CCSM的增殖有明显抑制作用（模型组与对照组A值分别为：0．52&#177;0．08Vs1．42&#177;0．04，P〈0．01）。模型组的Caspase-3 mRNA表达和活性值均显著高于对照组（0．74&#177;0．00Vs0．65&#177;0．00，P〈0．01；活性值0．03&#177;0．00Vs0．01&#177;0．00，P〈0．05）。结论高脂、高胆固醇饮食可严重影响CCSM结构，促进CCSM细胞凋亡并抑制其增殖。CCSM细胞凋亡／增生的失衡可能是高脂导致ED发生发展的重要病理环节。     

精液细胞学与睾丸活检及针吸细胞学的相关性研究

为了寻找无创伤性判断睾丸生精功能及精道梗阻的检查方法，对６５例无精症患者随机分为两组：第一组６１例无精子症患者，进行精液细胞学与睾丸针吸细胞学检查；第二组１５例正常生育男性及４例无精子症患者，进行睾丸活检与精液细胞学检查。结果：第一组５３例（占８７％），精液中检出生精细胞，检出病例二者的生精细胞发育水平总符合率９１％，经χ２检验两者呈显著相关（Ｐ＜０．００５）；８例（占１３％）精液细胞学检查未见生精细胞的病例，考虑梗阻性无精子症，其中７例经精液生化指标证实，５例睾丸针吸细胞检查见精子。第二组两种方法所反映的生精细胞发育水平完全一致。说明精液细胞学检查既能很好反映睾丸生精状况，又能反映精道梗阻情况，是一种比较理想的判断睾丸生精功能及精道梗阻的无创伤性检查方法。     

缺血后适应对兔短期缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的探讨缺血后适应对兔局部短期缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法18只新西兰白兔随机分成3组，每组6只；假手术对照组（S组）、缺血，再灌注对照组（IR组）、缺血后适应组（Post组）。除S组外，其余两组均接受左冠脉前降支15min阻断和30min再灌注，Post组在15min缺血后接受连续3次每次再灌注30s，缺血30s的后适应。以DNA电泳和TUNEL分析检测兔短期缺血再灌注心肌组织的细胞凋亡情况，免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果兔IR组缺血区心肌DNA电泳呈现DNA梯形，而Post组和s组未见梯形。Post组心肌细胞凋亡指数显著低于IR组[（28．06±2．92）％，（55．70±13．96）％，P〈0．01]。Bcl-2基因的蛋白表达量Post组高于IR组（10．00±0．89，7．83±1．47，P〈0．05）；Bax基因的蛋白表达量Post组低于IR组（7．50±0．84，9．83±0．98，P〈0．05）。结论缺血后适应显著减少了兔短期缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡程度与上调Bcl-2基因的蛋白表达，下调Bax基因的蛋白表达有关。     

皮片游离移植修复阴囊撕脱伤对精子生成影响的实验研究及临床观察

目的 探讨皮片游离移植修复全阴囊皮肤撕脱伤对睾丸生精功能的影响.方法 以育龄期健康新西兰大白兔作为实验动物,雄性42只,雌性24只.将雄兔随机分为实验组(24只)及对照组(18只).将实验组动物双侧阴囊皮肤全层切除,采用腹部中厚皮片游离移植修复缺损.对照组未作处理.对照组及实验组造模后3周末、8周末时按随机数字表法各取6只动物采用温度计埋藏法测量睾丸表面温度,温度测量后取睾丸组织活检,常规HE染色.8周末将两组未采集活检的雄兔各12只分别与雌兔配对喂养半个月,观察对应母兔的生育情况.临床上对3例阴囊皮肤撕脱伤患者采用撕脱阴囊反取皮回植修复,并对其性生活情况及精液质量进行随访观察.结果 模型建立后3周末、8周末实验组的睾丸表面温度[(36.15±0.24)℃、(36.77±0.42)℃]与对照组的睾丸表面温度[(36.12±0.68)℃]接近,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05);对照组HE染色曲细精管内见各级生精细胞,排列有序,管腔内见较多的成熟精子;实验组模型建立后第3周末的HE染色见曲细精管内生精细胞明显减少,排列紊乱,管腔未见精子,第8周末曲细精管内生精细胞增多,排列相对规整,部分管腔可见成熟的精子;配对喂养对照组雌兔受孕率12/12,平均生崽数(6.0±1.3)只;实验组雌兔受孕率8/12,平均生崽数(4.1±3.2)只,两组受孕率比较差异无统计学意义.临床3例患者游离植皮修复之阴囊在术后1～2个月可见早期皮片挛缩征象,但1年后均出现松弛而下垂,阴囊外形较满意,修复2年后患者的精液质量均恢复至正常.结论皮片游离移植修复全阴囊皮肤缺损对睾丸的精子发生干扰较小,可保留青壮年患者生育能力.     

股部皮下埋藏睾丸对精子发生影响的实验研究

目的 探讨采用股部埋藏睾丸的方式修复阴囊皮肤缺损对睾丸精子发生的影响。方法 以育龄期贵州小型猪为实验动物，随机将雄性小型猪分为实验组和对照组。实验组动物手术切开阴囊制作股部埋藏睾丸动物模型，对照组手术处理同实验组但睾丸不移位。3个月后实验组、对照组随机各取2只行睾丸活检，观察睾丸的病理变化。然后将实验组、对照组6只分别与雌猪配对喂养3个月，观察有无生育，并在动物模型建立6个月后再次对所有实验组和对照组动物进行睾丸活检。结果 术后3个月和6个月实验组病理检查均发现睾丸曲细精管内各级生精细胞明显减少，未见成熟精子；而对照组睾丸曲细精管内各级生精细胞正常，可见成熟精子。术后3个月后，实验组动物与雌性动物配对喂养3个月无生育；而对照组生育正常。结论 猪股部埋藏睾丸的方法影响睾丸的精子发生，建议临床上最好不用此方法修复阴囊皮肤缺损，尤其是对希望保留生育能力的患者。     

皮瓣重建阴囊对家兔生殖功能的影响

目的 通过检测皮瓣重建阴囊后睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况,以探讨皮瓣重建阴囊后对兔生殖功能的影响.方法 以育龄期新西兰大白兔作为实验动物,雄性动物随机分为实验组(皮瓣重建阴囊组)48只、对照组(皮瓣重建阴囊假手术组)24只和空白组18只.建模后的第3～8周末应用原位末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡和免疫组织化学法(SABC法)检测PCNA表达情况;第8周末各组分别对未取睾丸活检的12只雄性家兔与雌兔配对喂养,观察生育情况.结果 凋亡检测结果 :空白组正常睾丸生精细胞的凋亡指数为7.73±4.95.在第3周末实验组凋亡指数为22.59 4-3.04,对照组为21.13±1.68;在第8周末实验组凋亡指数为71.85±2.69.对照组为13.64±2.09.实验组在重建阴囊后3～8周内随着时间延长生精细胞凋亡指数逐渐增加,其凋亡指数明显高于空白组(P＜0.05);在第3周末实验组与对照组凋亡指数比较差异无统计学意义(P＞0.05);在第8周末实验组与对照组凋亡指数比较差异具有统计学意义(P＜0.05);第3周末对照组凋亡指数与空白组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);第8周末对照组凋亡指数与空白组比较差异无统计学意义(P＞0.05).PCNA检测即增殖指数检测结果 :空白组正常睾丸生精细胞的增殖指数为43.07±2.25.第3周末及第4周末实验组增殖指数分别为9.32±9.30及12.52±3.87,对照组第3周末为45.69±4.98,实验组第3、4周末增殖指数分别与对照组第3周末及空白组增殖指数比较差异具有统计学意义(P＜0.05);实验组第7周末及第8周末增殖指数分别为46.98±18.92及49.53±9.79,对照组在第8周末为39.90±5.10,实验组第7、8周末增殖指数分别与对照组第8周末及空白组增殖指数比较差异无统计学意义(P＞0.05);对照组增殖指数在第3周末和第8周末分别与空白组增殖指数比较差异均无统计学意义(P＞0.05).配对结果 :空白组、对照组配对后对应母兔均受孕生崽,平均生崽数分别为(6.0±1.28)只、(5.92±1.31)只,两组生崽数差异无统计学意义(P＞0.05);实验组配对后对应母兔均未受孕,与空白组和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 皮瓣重建阴囊导敛的家兔生殖功能障碍主要是由于生精细胞的过度凋亡所致,生精细胞的增殖能力仪在重建阴囊早期受到一定的影响.而后期则无明显受损表现.     

全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊对生精功能的晚期影响的实验研究

目的:探讨全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊对睾丸生精细胞凋亡及bcl-2蛋白表达的影响。方法:以2月龄贵州小型猪为实验动物,雄性40只,雌性24只。雄性随机分正常对照组(Ⅰ),自然愈合组(Ⅱ),植皮组(Ⅲ),皮瓣组(Ⅳ),每组10只。建模10月末雄性对照组及实验组每组6只与同期饲养的雌猪一一配对饲养,配对3周后雌猪继续喂养4个月观察生育情况,雄猪1年末取各组双侧睾丸标本,原位末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡指数(AI),免疫组化(SABC法)检测bcl-2蛋白表达。对数据行单因素方差分析。结果:细胞凋亡结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的AI值(x±s)%分别为:7.07±3.50、40.34±4.85、15.14±1.36、39.29±5.73,Ⅰ与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ相比差异无显著性(P>0.05),Ⅲ与Ⅱ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05)。bcl-2蛋白表达结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的bcl-2蛋白表达(x±s)%分别为:75.07±3.74、54.93±4.03、66.85±3.06、53.33±5.22,Ⅰ与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ相比差异无显著性(P>0.05),Ⅲ与Ⅱ、Ⅳ相比差异均有显著性(P<0.05)。配对喂养结果:Ⅱ、Ⅳ组配种没有成功,Ⅰ组全部配对成功,生育幼猪(10.0±1.18)头,Ⅲ组4头配种成功,生育(9.92±1.31)头,Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅲ组与Ⅱ、Ⅳ组相比差异均有显著性(P<0.05),Ⅱ与Ⅳ组相比差异无显著性(P>0.05)。结论:全阴囊Ⅲ度烧伤不同方式重建阴囊1年后对生精功能均有抑制作用,导致生精细胞凋亡增加,bcl-2蛋白表达降低,其中植皮重建阴囊对睾丸生精功能影响最小,建议阴囊Ⅲ度烧伤创面采用植皮修复。     

大鼠非特异性睾丸炎模型的建立及生精上皮的变化

目的:探讨大鼠生精上皮在非特异性炎症状态下的变化。方法:20只成年W istar雄性大鼠随机分为2组(对照组和实验组),对照组腹腔注射生理盐水(1 m l/kg),实验组注射细菌内毒素(LPS),剂量为1 mg/kg,两组均隔1 d注射1次,距第1次注射10 d后取材。HE染色观察睾丸组织的病理改变,免疫组化方法探讨生精上皮内增殖细胞核抗原(PCNA)、α连接素的变化。结果:实验组睾丸组织有明显炎性改变;生精上皮内PCNA表达量显著降低:每个生精小管(仅精原细胞着色的小管)阳性细胞个数为(59±5)个,比对照组明显减少(P<0.01),而这种小管占总管数的比例显著升高(P<0.01),为0.673±0.054;实验组大鼠睾丸内α连接素表达量亦减少(P<0.01),阳性反应颗粒平均光密度为0.150±0.014。结论:睾丸炎症时精原细胞增殖和生精上皮内细胞间粘附力度均减弱,这可能是睾丸炎导致男性不育的原因之一。     

3D-SC人工皮肤材料体外降解性能研究

目的研究3D-SC人工皮肤材料在体外的降解性能。方法将3D-SC人工皮肤材料分别置于生理盐水(对照组)、胰组织液(实验1组)、生理缓冲液(Hanks液,实验2组)和pH7.4的0.2mol/L磷酸盐缓冲液(实验3组)中,37℃恒温水浴条件下降解,实验1组第3、5、7、9、11和14天取材,其余各组第3、7、14、15、21和30天取材,测定质量损失百分率。结果材料在实验1组降解最快,14d内完全降解;对照组、实验2组和实验3组,第14天质量损失百分率分别为8.68%±2.30%、28.51%±10.68%和7.35%±0.61%,第15天分别为71.83%±2.58%、91.32%±1.87%和75.64%±6.13%,呈急速式降解,实验2组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);第30天质量损失百分率分别为91.87%±8.15%、95.62%±1.36%和92.10%±2.26%,3组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论3D-SC人工皮肤材料具有较好的降解性。在无酶参与时,降解速度呈慢-快-慢的过程。     

Morphological responses of the rabbit testis to ischemic/reperfusion injury due to torsion

OBJECTIVE: To investigate the morphological effects of free radical injury on spermatogenic cells in both testes of the rabbit experimental model of testicular torsion. MATERIALS AND METHODS: The left testes of 8 peripubertal NZW rabbits (3-6 months) were subjected to 0, 15, 30, 60, 90, 120, and 180 min of ischemia by applying a clamp to the spermatic cord, followed by reperfusion. Another set of 8 rabbits was subjected to 60 min of ischemia and administered antioxidants (acetylsalicylic acid, ascorbic acid, allopurinol, quercetin, superoxide dismutase) before reperfusion. Both testes of 4 animals per group were harvested at 24 h and the remaining 4 at 3 months. Johnsen scores for spermatogenic activity and other changes were assessed histologically and these were compared with testicular malondialdehyde (MDA), a measure of free radical damage, assayed on testicular homogenates using the thiobarbiturate method. RESULTS: In the 24-hour reperfusion group, apoptotic bodies and giant cells were more prominent in the seminiferous tubules of the left testes compared to the right, and were maximal after 90 min. In the 3-month reperfusion group, giant cells were absent, and apoptotic bodies were reduced in both testes. Testicular MDA showed an increase only in the left testes in the 24-hour reperfusion group, while the 3-month group showed increased MDA levels in both testes, but more on the left. The Johnsen score fell only to 8.0 in the left testes in the 24-hour reperfusion group, but dropped to 2.3 in the 3-month reperfusion group. Only in the 3-month reperfusion group, did antioxidant-treated animals show a fall in Johnsen scores in the left testes, regardless of the type of antioxidant. CONCLUSION: These findings confirm a role for reactive oxygen species (ROS) in damage to spermatogenic cells in both the ipsilateral and contralateral testes following torsion, with longer term effects in the torted testis. Currently available antioxidants do not provide any significant long-term protection against morphological damage to the testis by ROS generated in testicular torsion.     

30%乙醇经大鼠输精管逆向注射的抗生育研究

目的:通过对大鼠经输精管逆向注射30%乙醇的研究,初步探讨这种方法的抗生育效果及其安全性。方法:将30只SD雄性大鼠[3月龄,重(200±20)g],随机均分为实验和对照两组:分别用5号针头注射器(1 m l)取30%乙醇0.5 m l(实验组)和生理盐水0.5 m l(对照组)经每只雄性大鼠的输精管逆向注射。分别于1.5个月和3个月时各用60只SD雌性成年大鼠交配作妊娠试验来计算其雌鼠妊娠率,并在3个月后处死所有雄鼠,取出附睾组织在镜下检查其精子活力和精子畸形率;同时采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检查其生精细胞的凋亡情况。结果:实验组在1.5个月时交配后的雌鼠妊娠率为0,3个月时的a+b级精子为(0.32±1.12)%、雌鼠妊娠率为(0.58±1.27)%,与对照组[(80.62±2.68)%、(70.68±1.62)%、(86.62±1.68)%]相比,均有明显的下降(P<0.05);而精子畸形率[(78.26±1.08)%]与对照组[(20.34±1.26)%]相比,却出现了明显的上升(P<0.05);同时3个月时实验组大鼠的凋亡指数为(7.63±1.16)%,与对照组(5.62±1.32)%相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:乙醇经大鼠输精管逆向注射的方法在3个月内可产生明显的抗生育效果,但对其生精细胞没有显著性的影响。