哮喘豚鼠嗜酸细胞IL-5、IL-3和GM-CSF受体mRNA表达及意义

目的　观察白介素 5受体α(IL 5Rα)、IL 3Rα、粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM CSFRα)及共同 β链 (βcR)mR NA表达与嗜酸粒细胞 (Eos)凋亡的关系 ,探讨各受体在哮喘发病中的作用。方法　健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组 (卵蛋白致敏激发 ) ,以TUNEL法检测支气管灌洗液 (BALF)中低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos)细胞凋亡 ,原位杂交及RT PCR法检测各受体mRNA表达。结果　哮喘组Eos显著高于正常组 ,以HEos为著 (P <0 .0 1) ;Eos凋亡率明显低于正常组 (P <0 .0 1) ,HEos表达IL 3Rα、GM CSFRα明显高于NEos ;哮喘组不同密度Eos表达各受体αmRNA明显下降 ,而 βcRmRNA表达明显增加。RT PCR检测IL 5Rα、IL 3RαmRNA相对含量 ,哮喘组显著低于正常组 (P <0 .0 1)。结论　哮喘Eos存在凋亡抑制 ,其IL 5、IL 3和GM CSF受体的表达可能通过两种机制调节 :各自α链表达减少 ,使其对Eos活化及凋亡抑制的负调节减弱 ;共同 β链表达增加 ,使其对Eos活化和凋亡抑制的正性调节增强。表明IL 5等细胞因子受体可以通过调节Eos凋亡参与哮喘发病。     

哮喘气道炎症中嗜酸性粒细胞凋亡与 IL-5、IL-10关系的研究

目的　动态观察哮喘动物模型气道嗜酸性细胞凋亡在炎症中的意义和调控机理，研究IL-5和IL-10对凋亡的调节作用。方法　卵白蛋白（OVA）腹腔注射与雾化吸入诱发BALB/c小鼠哮喘发作。在激发后0、8、24、48、96小时及7、14天行BAL，ELISA法测定IL-5、IL-10浓度。CD15、CD49d双色标记嗜酸细胞(EOS)，流式细胞仪上检测EOS凋亡率。结果　OVA激发后电镜观察显示肺内有明显炎性细胞浸润和细胞凋亡。哮喘组EOS凋亡总体水平与对照大体相似。EOS凋亡率与IL-10/IL-5比值密切相关。结论　IL-5和IL-10分别上行和下行调节哮喘气道炎症。气道局部有EOS凋亡现象，并受到IL-5、IL-10相互作用的调节。     

嗜酸性粒细胞凋亡与支气管哮喘

细胞凋亡也称程序性细胞死亡(PCD),是细胞接受某种信号后或某些刺激后一种主动的、由一些凋亡相关基因相互作用使细胞消亡的耗能过程。凋亡与坏死不同,其发生具有积极的生物学意义,为维持机体内环境稳定所必需。支气管哮喘(哮喘)是一种以嗜酸性粒细胞(EOS)、肥大细胞反应为主的气道变应性炎症和气道高反应性(AHR)为特征的疾病。研究发现在哮喘患者的气道以EOS持续聚集为特征,当EOS被激活后,可诱发哮喘时组织的损害。而EOS性炎症的消退与临床哮喘的改善有关。现从实验研究及临床治疗方面阐述EOS凋亡与支气管哮喘的关系。1　EOS凋亡…     

穴位敷贴对哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡及其调控基因的影响

目的探讨穴位敷贴治疗哮喘的机理。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、穴位敷贴治疗组、地塞米松治疗组,每组10只。处理结束后采用TUNEL法检测支气管肺泡组织EOS凋亡;免疫组化法检测凋亡相关基因Fas、Fas配体(FasL)、bcl-2表达。结果模型组豚鼠支气管肺组织EOS凋亡指数及Fas、FasL、bcl-2表达与正常对照组比较差异均无显著性。穴位敷贴组和地塞米松组EOS凋亡指数及Fas、FasL表达明显高于模型组(P<0.01);地塞米松组和穴位敷贴组之间有显著性差异,前者明显高于后者(P<0.01)。穴位敷贴组bcl-2表达低于模型组(P<0·05);地塞米松组和模型组之间差异无显著性。结论穴位敷贴可以上调支气管肺泡组织促凋亡基因Fas及其配体FasL表达、下调凋亡抑制基因bcl-2表达、促进哮喘主要炎性细胞EOS凋亡。这可能是其治疗哮喘的作用机理之一。     

糖皮质激素对哮喘豚鼠肺组织IL-5 mRNA表达及嗜酸性粒细胞浸润的影响

目的：探讨哮喘时哮酸性粒细胞（Ｅｏｓ）浸润与ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达的关系以及糖皮质激素对其影响。方法 采用孵蛋白（ＯＡ）吸入致敏制作豚鼠哮喘模型,在诱发哮喘２４ｄ后,检测气气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中不同密度的Ｅｏｓ的数量及其百分比,肺组织中原位ＩＬ－５ｍＲＮＡ的表达,以及地塞米松预防用药６ｄ对其变化的影响。结果：①哮喘组ＢＡＬＦ中Ｅｏｓ总数增加,低密度Ｅｏｓ（ＨＥｏ）增加尤为显著;肺组织中ＩＬ－５     

嗜酸性粒细胞凋亡与哮喘发病及治疗的关系

支气管哮喘是机体对抗原性或非抗原性刺激引起的一种气管 -支气管反应性过度增高的疾病 ,简称哮喘。其临床特征为发作性伴有哮鸣音的呼气性呼吸困难 ,持续数分钟到数小时或更长 ,可自行或经治疗后缓解。病理上是以嗜酸性粒细胞 (ＥＯＳ)浸润为主 ,多种细胞 (胞大细胞、淋巴细胞     

哮喘豚鼠肺组织嗜酸性粒细胞Fas表达及药物的影响

目的：研究哮喘时嗜酸性粒细胞凋亡与Ｆａｓ表达的关系及药物地它们的影响。方法：应用地塞米松（ＤＭ）、雷公藤甲素及氨茶碱（ＡＭ）干预哮喘豚鼠,以ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡,以ＲＴ－ＰＣＲ及原位杂交检测ＦａｓｍＲＮＡ表达。结果：哮喘组Ｅｏｓ凋亡率较正常对照组显著降低。应用ＤＭ、ＴＰ、ＡＭ后均显著增加。正常豚鼠Ｅｏｓ可检测到ＦａｓｍＲＮＡ表达,不同Ｅｏｓ表达差异不显著。哮喘组ＦａｓｍＲＮＡ明显减少,以低密度     

支气管哮喘病人嗜酸性粒细胞凋亡的研究

目的探索支气管哮喘病人嗜酸性粒细胞凋亡情况.方法对30例支气管哮喘病人分别于急性发作期、缓解期和30例健康人经纤维支气管镜取支气管肺泡灌洗液用免疫细胞组化方法进行嗜酸性粒细胞凋亡的研究.结果支气管哮喘病人急性发作期,治疗后的缓解期和健康人组EOS凋亡百分比分别是(3.50±1.59)%,(5.53±2.22)%和(6.90±3.27)%.三组间差异显著(P均＜0.001).结论支气管哮喘病人存在着EOS凋亡异常,经激素治疗后可改善EOS凋亡.EOS凋亡是支气管哮喘发病机理中的主要环节之一.     

旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠IL-4及IL-5的影响

目的通过研究旋毛虫感染鼠在过敏性哮喘发病时血清及支气管肺泡灌洗液中IL-4和IL-5的水平变化．探讨旋毛虫感染对过敏性哮喘的作用。方法取雌性、8周龄BALB／C小鼠20只,随机分为4组．A组为空白对照组,B组为单纯过敏性哮喘组,C组为感染旋毛虫后哮喘组,D组为单纯感染旋毛虫组。C、D组小鼠经灌胃法感染旋毛虫囊包幼虫200—300条;4周后,以卵清白蛋白（OVA）分别对B、C组小鼠进行致敏激发,建立过敏性哮喘模型;8周后,取小鼠血清、肺泡灌洗液,用ELISA法检测IL-4和IL．5水平。结果血清中A、B、C、D组小鼠IL-4水平分别为（136．4948±31．1670）、（209．8004±21．5652）、（162．7892±17．6829）、（182．7092±12．0841）pg／L;IL-5水平分别为（7．3101±1．8600）、（15．9997±2．28208）、（9．2411±1．7280）、（11．4135±2．10776）ng／L;与B组比较,C组小鼠IL-4、IL-5水平均降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。肺泡灌洗液中A、B、c、D组小鼠IL．4水平分别为（169．1636±9．9997）、（232．9076＋17．9501）、（172．3508＋-19．1895）、（193．0676＋-16．5708）pg／L;IL-5水平分别为（12．8618±1．7799）、（23．8460±5．507）、（15．7560±4．5419）、（20．3440±3．9713）ng／L;与B组比较,C组小鼠IL-4、IL-5水平降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠IL-4、IL-5的表达有抑制作用。     

变应性鼻炎和哮喘患者血清IL-33及IL-5水平的研究

目的探讨IL-33和IL-5在变应性鼻炎（AR）、支气管哮喘（BA）以及AR合并BA中的作用。方法采用双抗体夹心ELISA法测定43例AR患者（AR组）、41例BA患者（BA组）、39例AR合并BA患者（合并组）及40例正常健康体检者（对照组）血清中的IL-33和IL-5水平。结果与对照组比较,其他各组患者血清IL-33和IL-5水平均明显升高（均P〈0．05）;与BAN比较,AR组及合并组血清IL-33和IL-5水平明显升高（均P〈0．05）;与AR组比较,合并组血清IL-33和IL-5水平明显升高（均P〈0．05）。血清中IL-33水平与IL-5水平呈直线性正相关（P〈0．05）。结论IL-33和IL-5参与了AR和BA的发病过程。     

支气管哮喘患者IL-4、IFN-γ及GM-CSF分泌水平分析

目的:探讨支气管哮喘的发病机理,研究细胞因子IL-4I、FN-γ及GM-CSF与哮喘的关系。方法:选择哮喘患者(哮喘组)及健康志愿者(正常组)各15例,分离外周血单个核细胞,应用ELISA双抗体夹心法测定其IL-4I、FN-γ和GM-CSF的分泌水平。结果:支气管哮喘组单个核细胞培养上清中IL-4和GM-CSF的水平明显高于正常对照组(P<0.01),IFN-γ水平明显低于正常对照组(P<0.01)。结论:淋巴细胞分泌的细胞因子IL-4、GM-CSF和IFN-γ参与了哮喘发病的病理过程。     

中药循经敷贴对哮喘豚鼠肺组织IL-10mRNA表达的影响

目的:探讨中药循经敷贴治疗哮喘的作用机制。方法:采用Hutson法豚鼠模型,治疗组隔日诱喘后用中药敷贴30 min,对照组隔日诱喘后采用生理盐水浸润纱布敷贴,比较记录诱喘潜伏期时间。两周后处死豚鼠,取肺组织,用半定量RT-PCR法比较IL-10mRNA的表达。结果:中药循经敷贴能显著延长豚鼠诱喘潜伏期,提高哮喘豚鼠肺组织IL-10mRNA的表达。结论:提高IL-10mRNA的表达可能是中药循经敷贴治疗哮喘的重要机制之一。     

支气管哮喘豚鼠肺内嗜酸粒细胞增多和凋亡的关系

目的　探讨支气管哮喘 (简称哮喘 )肺内嗜酸粒细胞 (Eos)增多与Eos凋亡的关系。方法　采用卵蛋白致敏的豚鼠哮喘模型 ,动态观察肺组织病理学、支气管肺泡灌洗液 (BALF)细胞学和Eos凋亡的变化。结果　致敏豚鼠抗原激发后 ,血管周围Eos迁移和浸润主要发生在 2 4h以内 ,而支气管周围Eos浸润和BALF内Eos增高持续 1周以上。哮喘豚鼠第 2 4,48,72hEos凋亡率分别为 (2 .1± 1.3 ) % ,(3 7± 2 3 ) % ,(4 6± 2 7) % ,显著低于正常豚鼠 [(10 .1±3 4) % ,P <0 .0 5 ] ,至 168h才接近于正常水平。糖皮质激素地塞米松治疗使Eos凋亡率显著增加 [(3 4 .1± 12 .2 ) % ,P<0 .0 1] ,伴随气道炎症消退。结论　哮喘Eos凋亡抑制可能是肺内Eos浸润增加的一个重要机制     

雷公藤甲素对哮喘动物模型气道反应性的作用及机理

用卵白蛋白致敏和激发豚鼠，形成哮喘动物模型（哮喘组）。用雷公藤甲素（简称“雷公藤组”）处理哮喘模型后，测定以上二组和正常对照组豚鼠对组织胺的气道反应性、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中的嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）绝对计数、低密度Ｅｏｓ（ＨＥｏｓ）百分比以及ＥＡＬＦ中的嗜酸性粒细胞活力增强活性（ＥＶＥＡ）。发现哮喘组气道反应性非常显著高于正常组（Ｐ＜０．００１）、雷公藤组（Ｐ＜０．０１），雷公藤组显著高于正常组（Ｐ＜０．０５）。而且，哮喘组Ｅｏｓ绝对计数和ＨＥｏｓ％均与气道反应值（ＰＣ２０值）显著相关（ｒ＝－０．７６和－０．８８，Ｐ＜０．０５和０．０１）。雷公藤甲素处理不能抑制哮喘模型肺内的Ｅｏｓ聚集，但却降低ＨＥｏｓ％至正常组水平。哮喘组ＢＡＬＦＥＶＥＡ显著高于对照组、雷公藤组。哮喘组ＢＡＬＦＥＶＥＡ与ＨＥｏｓ％呈显著的正相关（ｒ＝０．７５，Ｐ＜０．０５）。以上结果表明，雷公藤甲索具有降低哮喘动物模型气道反应性的作用，其机理可能与减少“活化”的ＨＥｏｓ有关。雷公藤甲素可能有潜在的临床应用价值。     

Effects of tripholide on airway responsiveness in asthma in guinea pigs

TripholideextractedfromaChineseherbhasbeenwidelyusedasanimmuneinhibitortotreatsystemiclupuserythematosus,rheumatoidarthritisandnephriticsyndromeinChina.Inpatientswithasthma,thereareimmunefunctionaldisordersincludingtheincreaseoftheratioofCD4/CDSTcells,activationofThZ--likecellsandexcessiveproductionofThZ--likecytokinessuchasIL--5,IL3andgranulocyte--macrophageclony--stimulatingfactor(GM--CSF).Thesecytokinescaninduceeosinophiliaandactivationofeosinophilsintheairwayandplayanimportantrolei…     

哮喘大鼠血单个核细胞中STAT5b mRNA和IL-4 mRNA的表达及布地奈德的影响

目的研究哮喘大鼠血单个核细胞中信号转导和转录激活因子STAT5bmRNA和IL-4mRNA的转录表达及布地奈德(BUD)对其表达的影响。方法30只体重为140￣200g清洁级SD雌性大鼠,随机分为3组:哮喘组(A组)、BUD组(B组)、正常对照组(C组)。对血中嗜酸性粒细胞(EOS)计数;应用双抗体夹心ELISA测定血浆中IL-4和IFN-γ水平;采用SYBRGREENI荧光定量PCR法测定STAT5bmRNA和IL-4mRNA的相对含量。结果(1)A组血中单个核细胞STAT5bmRNA和IL-4mRNA的表达均高于B组和C组(P<0.01);B组与C组之间差异无统计学意义(P>0.05)(。2)STAT5bmRNA与IL-4mRNA的表达呈正相关(P<0.01),且两者的表达分别与血浆中的IL-4水平、EOS绝对值呈正相关(P<0.01),与血浆中IFN-γ水平呈负相关(P<0.01)。结论哮喘大鼠血中单个核细胞STAT5bmRNA和IL-4mRNA的表达增强且呈正相关;布地奈德可以下调STAT5bmRNA和IL-4mR-NA的表达,可能是其抑制哮喘气道炎症形成的重要机制之一。     

过敏性哮喘患者脱敏治疗前后外周血IL-4、IL-5活性和IgE的变化

目的　观察过敏性哮喘患者脱敏治疗前后外周血IL 4、IL 5活性和IgE的变化。 方法　应用ELISA法分别测定发作期及缓解期过敏性哮喘患者脱敏治疗前后外周血IL 4、IL 5活性及IgE ;以肺功能仪测定FEV1%和PEFR以观察肺功能的变化。结果　①发作期过敏性哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC)培养上清液IL 5活性及IL 4明显高于缓解期过敏性哮喘患者和正常健康者 (P均 <0 .0 1) ;②发作期及缓解期过敏性哮喘患者脱敏治疗前后外周血IL 4及IL 5活性和肺功能 (FEV1、PEFR)有显著性或非常显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;③IgE浓度比治疗前明显降低 (P <0 .0 1) ,与正常人无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　过敏性哮喘患者脱敏治疗后外周血IL 4、IL 5活性明显降低 ,IgE有一定程度下降 ,提示IL 4、IL 5、IgE在支气管哮喘发病机制上起着重要作用     

旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的影响

目的:通过观察小鼠感染旋毛虫并诱发过敏性哮喘后,肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的变化,探讨旋毛虫感染对小鼠过敏性哮喘的影响.方法:将15只8周龄、BALB/c雌性小鼠,随机分为3组,每组各5只,Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ组为单纯过敏性哮喘组,Ⅲ组为感染旋毛虫并发哮喘组.Ⅲ组小鼠经口感染200～300条旋毛虫囊包幼虫,建立旋毛虫感染动物模型模型.28 d后,以卵清白蛋白致敏(Ovalbumin,OVA)激发Ⅱ组和Ⅲ组小鼠,建立过敏性哮喘小鼠模型;56 d后,取小鼠肺泡灌洗液,以ELISA双抗体夹心法法检测总IgE、IL-4及IL-5水平.结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组小鼠总IgE水平分别为(43.70±29.49)、(387.49±148.32)、(102.50±49.55) ng/mL; IL-4水平分别为(169.16±10.00)L、(232.91±17.95)、(172.35±19.19)pg/L;IL-5水平分别为(12.86±1.78)、(23.85±5.51)、(15.76±4.54) ng/L,与Ⅱ组相比较,Ⅲ组肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5水平降低(P＜0.05).结论:旋毛虫感染对过敏性哮喘小鼠肺泡灌洗液中总IgE、IL-4及IL-5的表达有抑制作用.