亲和素-生物素系统预定位技术在炎症显像中的应用

亲和素-生物素系统预定位技术已在肿瘤放射免疫显像中得到成功应用.近年来,这一新技术也已开始用于炎症的显像研究中.本文就亲和素-生物素系统预定位技术及其在炎症动物模型中的实验研究和临床试用研究中的情况进行简要综述.并就目前炎症显像的现状及存在的问题,以及预定位炎症显像的应用前景加以讨论.     

亲和素—生物素系统预定位技术在炎症显像中的应用

亲和素－生物素系统预定位技术已在肿瘤放射免疫显像中得到成功应用。近年来,这一新技术也已开始用于炎症的显像研究中。本文就亲和素－生物素系统预定位技术及其在炎症动物模型中的实验研究和临床试用研究中的情况进行简要综述。并就目前炎症显像的现状及存在的问题,以及预定位炎症显像的应用前景加以讨论。     

生物素—链霉亲和素系统在放射免疫显像中的应用（文献综述）

本文综述了生物素－链霉亲和素（ＢＳＡ）系统在放射免疫显像中的应用原理，生物素和亲和素与单抗偶联物的制备方法，及其放射性核素标记方法以及该系统ＲＩＩ的动物实验和人体应用的初步结果。资料表明该方法具有提高ＲＩＩ的Ｔ／ＮＴ比值，降低非靶器官吸收剂量，可利用理想显像枋素如９９ｍＴＣ，１１１Ｉｎ以及避免抗体活性辐射损伤等优点。     

亲和素-生物素系统介导的炎症预定位显像研究

目的：探讨亲和素-生物素系统在小鼠炎症模型中进行预定位炎症显像的实验研究。方法：实验动物均为用肌肉注射松节油所致炎症模型,采用生物素化人免疫球蛋白（B-hIgG）和99mTc标记亲和素（99mTc-Avi-din）进行二步法预定位炎症显像,在注药后3h、6h、12h对小鼠炎症模型进行显像和体内生物学分布测定,并以^99mTc-hIgG和^99mTc-Avidin作为对照组。结果：二步法预定位显像组炎症病灶在3h即可显像,其靶/非靶（T/NT）比值为1.95,6h达3.12,血中放射性清除较快。而^99mTc-hIgG组T/NT在3h仅0.38,由于其分子量较大,血中清除时间较长,血本底较高,6h-12h血中仍保持较高放射性水平,且肝脏积聚放射性较多,图像也不清晰;^99mTc-Avidin组则在肝、肾有较多放射性浓聚。结论：二步法预定位炎症显像的T/NT比值较^99mTc直接标记hIgG法为高,且病灶显像时间提前,并可提高图像的清晰度。     

人血清癌胚抗原的生物素-亲和素ELISA检测方法的建立

目的:建立检测血清癌胚抗原(CEA)的高灵敏度生物素-亲和素酶联免疫检测(BA-ELISA)方法。方法:亲和层析纯化得到CEA,免疫新西兰家兔制备多克隆抗体。将得到的抗体连接生物素和辣根过氧化物酶,在生物素化BSA包被的96微孔板上建立生物素-亲和素ELISA(BA-ELISA)。对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行鉴定,并和常规ELISA、放射免疫检测以及化学发光法相比较检测了临床标本中的CEA浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50)U/mL,检测结果表明,体系稳定性良好;灵敏度为0.42 U/mL,批内、批间差异均小于10.0%。该研究建立的方法与常规ELISA对比差异有统计学意义,与放射免疫检测对比差别无统计学意义。与化学发光法相比较,回归方程为:y=0.04825+0.99674x,r=0.994,差异无统计学意义。结论:建立的CEA的BA-ELISA检测方法易于操作、灵敏度高、价格低廉,适合应用于临床检测。     

生物素-链霉亲和素系统在检测人PBMC IL-2R_α中的应用

本文报道用自制生物素-链霉亲和素系统配以抗IL-2R_aMcAb,建立检测人PBMCIL-2R_a的方法,并对本法中的关键条件进行探索,确定生物素化二抗和链霉亲和素的最适浓度以及多种诱导物的最适诱导时间和浓度。用本法对比检测了健康献血者和肿瘤患者PBMC IL-2R_a的表达水平,表明未经诱导的肿瘤患者PBMC IL-2R_a百分率显著高于正常人(P<0.01)。     

应用生物素-亲和素系统检测胸水特异性IgG抗体的研究

应用亲和素—生物素化过氧化物酶复合物酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)检测159份结核性胸水和82份对照胸水中的抗PPD—IgG,并在同一滴定板上做常规ELISA对比。结果表明在82.4％的胸水中,ABC—ELISA较常规ELISA敏感,前者的抗体几何平均滴度为后者的2.4倍。本法敏感性为90.6％,特异性为95.1％,提示可作为结核性胸膜炎的辅助诊断方法。动态观察尚可为疗效判定提供依据。     

地高辛的生物素—链霉亲和素免疫法测定方法的建立

目的：将生物素链霉亲和素免疫反应系统引入地高辛血药浓度监测中，准确地监测地高辛血药浓度。方法：将生物素与抗ＤＩＧＩｇＧ化学连接，ＤＩＧ通过ＨＳＡ与ＨＲＰ连接，建立了生物素链霉亲和素免疫反应系统测定地高辛的竞争反应模型。结果：以０５、１、２、３、５μｇ／Ｌ五个标准点建立了竞争反应曲线，同时将ＢＮＨＳＩｇＧ作了１：４００、１：８００、１：１６００、１：３２００的稀释，探讨了竞争反应曲线的规律性变化，运用流行的四参数曲线拟合法对竞争曲线作了拟合。同时做了方法学评价。结论：流行的生物素链霉亲和素技术可以引入被动的酶联免疫吸附法中，提高反应的灵敏度     

生物素-亲和素技术锚定肝素于胰岛表面

背景：胰岛微血管在胰岛分离过程中被破坏,进而影响移植后胰岛的营养供应。肝素对于血管的再生具有非常重要的意义;同时,临床胰岛移植多应用肝素来抑制血栓形成,但全身肝素化增加了出血的风险。而亲和素同时具备生物素和肝素2个较强的结合位点。 目的：利用亲和素这一特性,应用生物素-亲和素技术,将肝素锚定于胰岛的表面,促进胰岛再血管化,同时达到避免全身应用大剂量肝素带来出血风险的目的。 方法：根据Ricordi自动化法分离纯化成人胰腺,然后将成人胰岛依次和0,0.5,1,1.5,2 g/L生物素(包括生物素N-羟基丁二酰亚胺酯、长臂活化生物素、肼化生物胞素、生物素酰肼、TFP-biotin),1 g/L亲和素素,0.5,1.0,1.5,2.0 g/L肝素孵育培养,观察肝素化变化。 结果与结论：TFP-biotin介导胰岛表面肝素化效果最好,且其肝素化前后胰岛活力率变化的差异无显著性意义(P > 0.05),同时肝素化和未肝素化胰岛具备相似的胰岛素释放反应(P > 0.05)。提示生物素-亲和素技术是一种安全、有效的胰岛表面肝素化处理方法。     

促甲状腺激素生物素-链亲和素TRFIA定量检测法的建立

用Eu3＋标记链亲和素（SA）,分别用两株识别人促甲状腺素（human thyroid stimulating hormone,hTSH）的单克隆抗体包被96微孔板并生物素化,建立了高灵敏的hTSH生物素-链亲和素（BAS）时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）检测法。本法的灵敏度为0.02mIU/L;批内CV为2.7%~3.5%,批间CV为3.2%~3.8%;平均回收率为100.26%;与电化学发光免疫分析技术（ECLIA）比对,相关系数达0.9544,线性方程为Y=1.3133X-32.297;与ECLIA临床测定值也呈明显相关;正常值范围为0.33~3.09mIU/L。本文建立的hTSH-BAS-TRFIA具有灵敏度高,特异性强,稳定性好,测定范围宽,检测时间短和非放射性等优点,具有良好的应用价值。     

生物素─链霉亲和素系统在检测巨细胞病毒抗体中的应用

本文用自制ＣＭＶ抗原和生物素－链霉亲和素系统试剂，通过最适条件的对比，建立了检测人血清中抗巨细胞病毒ＩｇＭ、ＩｇＡ类抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ，并与普通ＥＬＩＳＡ作比较，结果表明，ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ的非特异性吸附明显低于普通ＥＬＩＳＡ，与普通ＥＬＩＳＡ相比，抗体效价分别提高５和７倍，阳性率分别提高６８％和１５３．５％。在实际工作中曾用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测临床样品１６５份，就所得结果进行分析。表明ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶＩｇＭ和ＩｇＡ可提高特异性和灵敏度，值得推广应用。     

生物素─链霉亲和素系统在检测巨细胞病毒抗体中的应用

本文用自制ＣＭＶ抗原和生物素－链霉亲和素系统试剂，通过最适条件的对比，建立了检测人血清中抗巨细胞病毒ＩｇＭ、ＩｇＡ类抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ，并与普通ＥＬＩＳＡ作比较，结果表明，ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ的非特异性吸附明显低于普通ＥＬＩＳＡ，与普通ＥＬＩＳＡ相比，抗体效价分别提高５和７倍，阳性率分别提高６８％和１５３．５％。在实际工作中曾用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测临床样品１６５份，就所得结果进行分析。表明ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶＩｇＭ和ＩｇＡ可提高特异性和灵敏度，值得推广应用。     

双抗体夹心生物素-亲和素ELISA法检测相思子毒素

目的 建立相思子毒素(abrin)的酶联免疫检测方法,为abrin临床诊断、中毒治疗、法医学鉴定等应用领域提供技术基础和参考依据.方法采用双抗体夹心生物素-亲和素ELISA法来检测微量abrin.结果该法检测abrin线性范围为0.125～31.25 μg/L,线性回归方程为y=0.52369X 0.51632(r=0.9816,P＜0.0001,n=9),检测限为0.125 μg/L.不同浓度蓖麻毒素(ricin)、葡萄球菌肠毒素(SEB)对检测结果基本无干扰,表明该法检测abrin具有很好的特异性.该法能用于abrin毒素污染水样、土样、食品、血液等模拟样品的分析,相对标准差为2.35%～4.14%,具有较好的重现性.结论 成功建立了夹心BA-ELISA法检测abrin,巧妙地将多克隆抗体的强富集能力、单克隆抗体的特异性以及生物素-亲和素系统的放大作用结合起来,达到了提高检测的灵敏度和特异性的目的 ,可适用于各种微量abrin样品的分析.     

自制链霉亲和素的纯化和特性

应用生物素亲和层析法从streptomyces avidinii菌培养液中纯化链霉亲和素(SA),经反复试验.1L培养液中平均约含36mgSA,2-亚氨基生物素琼脂糖珠4B凝胶的结合客量为3.8～5.2mg/ml,解离波为pH 4.0 50mmol/L醋酸铵,从凝胶上解离回收的纯化SA量为20～42mg,平均回收率为80.5％,蛋白活性为14.4U/mg。经鉴定所得SA的分子量为63241,比消光系数为E~(1％)_(280)=33.56,每分子SA可结合4分子生物素,制备的SA-HRP用于ELISA所得P/N值比AV-HRP提高一倍,酶结合物的效价在8个月中保持80％以上。     

C－反应蛋白生物素亲和素免疫酶标法的建立及其在人肝组织中的表达

Ｃ－反应蛋白生物素亲和素免疫酶标法的建立及其在人肝组织中的表达高艳琴，袁胜涛，胡锡琪，汪乃经Ｃ－反应蛋白（Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎ，ＣＲＰ）主要由肝细胞合成，多存在于血液、胸水、腹水中，当机体处于感染、外伤及炎症活动期，ＣＲＰ的水平急骤上升...     

抗亲和素鼠单克隆抗体增强亲和素-生物素免疫技术和免疫组织学染色的敏感性

亲和素、生物素已应用于增加传统免疫酶方法的敏感性。但有时发现在检测微量抗原时，敏感性依然不够。为此，作者建立了几株抗卵清和素糖蛋白的鼠单抗，通过选择性扩大ABC复合物，增加底物信号，增强亲和素一生物素免疫测定法的敏感性。     

促甲状腺激素生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种低成本、高灵敏度的检测血清促甲状腺激素(TSH)的生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法。方法引入生物素-亲和素放大系统,一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板,另一株标记生物素,辣根过氧化物酶标记链亲和素,鲁米诺作为发光底物,采用夹心法,建立TSH酶促化学发光免疫分析方法。结果方法分析灵敏度为0.01mIU/L,批内变异系数为2.01%～5.40%,批间变异系数为2.96%～17.9%,回收率为90.6%～114.4%,高值促甲状腺激素血清样品经系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性关系,相关系数大于0.99,与原子高科TSH免疫放射分析方法和罗氏电化学发光分析法的测定值具有良好的相关性。结论生物素-亲和素TSH酶促化学发光免疫分析方法具有成本低、灵敏度高、特异性高和稳定性好的特点,具有广阔的应用前景。     

人生长激素的生物素—新和素放大酶联免疫法的建立

为建立有生物素和亲和素放大系统的人血清生长激素 (hGH)酶联免疫分析法 (BA ELISA) ,以微量的GH抗原免疫BALB/C小鼠 ,利用杂交瘤技术制备出 2 9株分泌抗hGH单克隆抗体 (MCA)的杂交瘤株。选择最佳配对MCA ,利用亲和素与生物素高亲和力的特性 ,建立了血清hGH双位点的BA ELISA法。我们的MCA滴度为 (0 5～ 5 0 0 )× 10 4,亲和常数Ka =(0 13～ 1 40 )× 10 10 L/mol。血清hGH的ELISA的灵敏度为 0 0 4± 0 0 1μg/L ;在血清中分别加入 1,2 5 ,5 μg/L的hGH ,其回收率为 90 7%～ 10 7 6 % (平均为 10 1 2 0 %± 0 0 3 % ) ;hGH含量为 2 8、10 0、2 9 8μg/L的血清批内、批间变异系数分别为 4 9%、3 8%、7 9%和 6 2 %、3 5 %、9 5 % ;用本法测定了正常儿童、生长激素缺乏症 (GHD)患儿和活动性肢端肥大症患者空腹血清hGH水平 ,分别为 1 87± 3 0、0 30± 0 42和 8 71± 6 95 μg/L。上述结果表明 ,本ELISA方法灵敏、特异、稳定、准确 ,能确切反映hGH分泌功能 ,在诸多方面均优于RIA。     

自制头颈肿瘤专用定位装置在常规放射治疗中的应用

我中心自行设计制作了一种头颈部专用CT立体定位装置,通过与三维TPS配合使用实现了对头颈部肿瘤的精确定位和放射治疗,进一步提高了头颈部肿瘤的治疗效果。1999年10月至2001年4月,已用此装置治疗头颈部肿瘤患者36例,取得了良好效果。现将使用情况介绍如下。 一、材料与方法 1.装置组成:该装置主体由一块有机玻璃底板和两块侧板组成,三块板上均有三根构成一特殊等腰三角形的金属丝,在两侧板上各为读取Y、Z坐标的标尺,在底板上为读取X坐标的标尺。 2.使用方法:先将一泡沫头枕固定于底板中央,患者头颈