慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义

目的:比较慢性乙型肝炎(CHB)感染者外周血T细胞亚群的变化,探讨其与临床疾病状态的关系。方法:用流式细胞术(FCM)检测HBeAg阳性ALT异常者42例(A组);HBeAg阳性ALT持续正常者25例(B组);HBsAg阳性、HBeAg、HBV-DNA及ALT正常者20例(C组);健康体检(各型病毒学指标均为阴性)者25例外周血中T淋巴细胞亚群。结果:A、B组CD4+T细胞数量较C组及正常组明显降低;而CD8+T细胞数量较正常组明显升高(P0.01),CD4+/CD8+、CD4+CD25+T细胞与正常组比较明显降低(P0.05)。结论:慢性乙肝HBeAg阳性ALT正常患者Ts细胞数量增多,Th细胞和CTL细胞受到抑制,乙肝病毒复制与CD4+T细胞及CTL数量低下,抑制性T细胞增高高度相关。通过T淋巴细胞亚群的检测可以监控患者的免疫状态,从而为指导临床免疫治疗提供依据。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的了解慢性乙型肝炎患者的细胞免疫功能. 方法用免疫花环法测定41例慢性乙肝患者外周血T细胞亚群并分析其变化. 结果 CD3、CD4细胞以及CD4/CD8比值较正常人显著减少(p<0.01),CD8细胞较正常人明显升高(p<0.01). 结论慢性乙肝患者外周血T细胞亚群紊乱,免疫功能低下.     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的：了解慢性乙型肝炎患者的细胞免疫功能。方法：用免疫花环法测定41例慢乙肝患者外周血T细胞亚群并分析其变化。结果：CD3、CD4细胞以及CD4／CD8比值较正常人显著减少（p＜0．01），CD8细胞较正常人明显升高（p＜0．01）。结论：慢性乙肝患者外周血T细胞亚群紊乱，免疫功能低下。     

肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群变化特点及临床意义

目的:探讨肺癌患者外周血T淋巴细胞变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测法检测56例肺癌患者(其中20例早中期肺癌、36例晚期肺癌);18例健康人群外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中总T细胞(CD3+)、Th细胞(CD3+CD4+)、Tc细胞(CD3+CD8+)、NKT细胞(CD3+CD16+CD56+)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+)、调节性T细胞(Treg,CD4+CD25+Foxp3+)占CD4+T细胞比例和CD3+γδT细胞比例。结果:56例肺癌患者总T细胞(CD3+)比例明显低于健康组(61.41%±7.88%vs71.63%±5.59%,P0.001),肺癌患者Tc细胞比例明显低于健康组(23.58%±7.18%vs28.44%±5.20%,P0.05),肺癌患者Treg比例明显高于健康组(6.20%±1.63%vs3.65%±2.00%,P0.001);肿瘤组外周血CD3+γδT细胞比例显著低于健康组(3.35%±1.41%vs5.53%±1.87%,P0.01)。但肺癌患者晚期组与肺癌早中期组比较外周血CD3+γδT细胞比例显著增高(3.70%±1.89%vs2.64%±1.41%,P0.05),肺癌患者晚期组与早中期组比较外周血Treg细胞比较显著增高(6.78%±2.64%vs5.06%±1.22%,P0.05)。肺癌患者外周血中NK细胞低于健康组(15.02%±7.61%vs18.74%±6.39%,P0.05),而Th细胞和NKT细胞都有所降低,但差异尚不具统计学意义(P0.05)。结论:肺癌患者总T细胞、Th细胞、Tc细胞和NK细胞都有所降低,Treg细胞有所上升,提示肺癌患者处于免疫抑制状态。Treg细胞和CD3+γδT细胞与肺癌的临床病程具有一定的关联性。     

帕金森病患者NK细胞亚群及T淋巴细胞亚群变化的临床意义

目的:探讨帕金森病(PD)不同年龄、不同病期、伴随症状患者外周血NK细胞亚群及T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法:应用先进的流式细胞仪(FCM)直接免疫荧光染色法检测47例PD患者外周血NK细胞亚群及T淋巴细胞亚群,并与健康人组进行对照与相关分析。结果:PD组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平较对照组均明显降低(P<0.05),而CD16+56水平则较对照组明显增高(P<0.05)。高龄、病情重及伴痴呆和抑郁的PD患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平降低更显著(P<0.05)。结论:PD发病过程中存在T细胞免疫功能低下及NK细胞免疫平衡失调,高龄、病情重及伴痴呆和抑郁的患者NK、T细胞免疫功能异常降低更明显,此为PD病理生理基础赋予新的内涵,亦为PD的免疫干预性治疗提供新的途径。     

发作期哮喘患者外周血T细胞亚群、B细胞和NK细胞的变化及临床意义

目的：探讨发作期哮喘患者外周血T细胞亚群、B细胞和NK细胞变化及临床意义。方法：采用直接免疫荧光法,用流式细胞术检测30例发作期哮喘患者和30例正常人对照的T细胞亚群、B细胞和NK细胞的变化。结果：与正常对照组比较,发作期哮喘患者CD4^＋T细胞、CD19^＋B细胞和CD4^＋／CD8^＋比值显著增高（P〈0．01）,CD8^＋T细胞显著下降（P〈0．01）和CD56^＋CD16^＋NK细胞下降（P〈0．05）。CD3^＋T细胞无明显变化。结论：发作期哮喘患者的免疫功能紊乱在哮喘发病中起着重要作用。     

流式细胞术检测肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群研究

目的 探讨肿瘤患者T淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法 采用流式细胞术检测27例肿瘤患者和25例正常对照组的T淋巴细胞亚群。结果 肿瘤患者CD3^＋T细胞、CD4^＋T细胞和CD4^＋／CD8^＋比值明显低于对照组并有统计学意义，而CD8^＋T细胞显著高于对照组（P〈0．01）。结论 肿瘤患者的免疫功能下降。流式细胞术对肿瘤患者的免疫功能的检测具有快速、敏感、准确的特点，对于评价疗效、判断预后具有重要价值。     

乙型肝炎病毒感染者外周血T淋巴细胞亚群表达与其血清HBV-DNA水平的相关性分析

观察乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血T细胞亚群功能变化与其血清HBV-DNA水平,探讨病毒复制程度与细胞免疫功能的关系.应用流式细胞术直接荧光法检测142例HBV感染者和35名健康对照者外周血中T淋巴细胞亚群百分率,用荧光定量PCR法检测HBV感染者血清HBV-DNA.结果显示:与健康对照组比较,慢性乙型肝炎组CD4...     

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后外周血树突状细胞和淋巴细胞亚群的变化及意义

目的 分析慢性乙型肝炎患者拉米夫定抗病毒治疗前后外周血树突状细胞和淋巴细胞亚群变化。方法 对16例拉米夫定抗病毒治疗有效的慢性乙型肝炎患者动态观察48周，在治疗前、后对外周血单核细胞来源的树突状细胞进行体外培养，用流式细胞仪检测DC表面分子及淋巴细胞亚群水平，观察治疗前、后的变化。结果 16例患者中，11例治疗持续有效，未发生YMDD变异，5例发生变异。无变异组的慢性乙肝患者，治疗12周时，HLA—DR水平较治疗前降低（P〈0．05）；治疗48周时，CD80、CD40和CD1a与治疗前比明显提高（P〈0．05）而HLA—DR恢复至治疗前水平。变异组患者。治疗12周时，CD83及HLA—DR降低（P〈0．05）；治疗48周时，HLA-DR仍低于治疗前（P〈0．05）。无变异组患者，治疗12周时，CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞、NK细胞、CD19^＋B细胞和CD4^＋／CD8^＋T细胞比值均无明显变化；48周时，CD4^＋T细胞比例增高，NK细胞比例下降（P〈0．05）。而变异组患者的淋巴细胞亚群则无显著改变。结论 拉米夫定治疗持续有效组，DC表面共刺激分子CD80、CD40可随着HBV被长时间有效抑制而得到部分恢复，治疗过程中有DC表面的HLA-DR暂时降低，而后HLA—DR水平恢复和CD1a明显提高，同时外周血CD4^＋T细胞比例上升和NK细胞比例下降。而发生YMDD变异组。DC表面HLA—DR呈现持续性降低。     

尿毒症患者透析前后外周血B细胞和T细胞及其亚群的研究

应用单克隆抗体技术检测了３５名正常人和３１例尿毒症患者外周血Ｂ细胞和Ｔ细胞亚群。结果显示：尿毒症患者外周血Ｂ细胞数显著地高于正常人（Ｐ〈０．００１）,ＣＤ３、ＣＤ４低于正常人（Ｐ〈０．０１）,ＣＤ４／ＣＤ８又非常显著地低于正常人（Ｐ〈０．００１）。因此认为,尿毒症患者为一种自身免疫调节异常的疾病。     

牙周病患者血清TNF含量和外周血B细胞及T细胞亚群水平

目的 :探讨牙周病患者血清TNF和外周血B细胞及T淋巴细胞亚群的水平。方法 :分别利用磁酶免法和单克隆技术测定 5 5例牙周病患者血清TNF含量和外周血B细胞及T淋巴细胞亚群水平 ,并以 35名正常健康人作对照。结果 :牙周病患者血清TNF、B细胞数水平显著地高于正常人组 (P <0 .0 1 ) ;CD3、CD4、CD4 /CD8显著地低于正常人组 (P <0 .0 1 )。结论 :牙周病是一种自身免疫调节异常的疾病     

不同宫颈癌临床分期患者外周血中T淋巴细胞及NK细胞的表达分析

目的分析宫颈癌患者外周血中T淋巴细胞及其亚群以及NK细胞的表达情况。方法前瞻性分析145例在我院就诊的宫颈癌患者的临床资料,按照宫颈癌FIGO临床分期差别分为:宫颈癌Ⅰ期38例、宫颈癌Ⅱ期42例、宫颈癌Ⅲ期35例、宫颈癌Ⅳ期30例;同期选择体检正常女性30例作为对照组。应用流式细胞仪检测各组患者外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+T细胞亚群、调节性T细胞(Treg)以及NK细胞数量,同时计算各亚群的比例以及Treg占CD4^+T细胞的比例。应用多元Logistic回归分析评估各细胞亚群数量及比例与宫颈癌临床分期的相关性。结果与对照组相比,宫颈癌患者CD3^+T细胞、CD4^+T细胞、NK细胞数量以及CD4^+/CD8^+比值均较低,Treg/CD4^+比值较高(均P <0.05),而CD8^+T细胞数量差异无统计学意义(均P>0. 05)。随宫颈癌病理严重程度递增,CD3^+T细胞、CD4^+T细胞、NK细胞数量以及CD4^+/CD8^+比值逐步降低,Treg/CD4^+比值逐步增高(均P <0.05),而CD8^+T细胞数量差异无统计学意义(均P>0.05)。多元Logistic回归分析显示,Treg/CD4^+比值是宫颈癌临床分期的危险因素,CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+比值及NK细胞是其保护性因素(均P<0.05)。结论宫颈癌患者细胞免疫功能均不同程度降低,晚期患者降低最显著。检测T淋巴细胞亚群及NK细胞可用于宫颈癌患者免疫监测,为临床治疗及预后评估提供参考。     

联合检测血清CEA及外周血T淋巴细胞、DNT细胞在肺癌诊断中的应用

目的 探讨肺部良、恶性病变鉴别的新方法.方法 采用流式细胞仪测定肺癌患者、肺良性病变患者及健康体检者三组血清CEA及外周血T淋巴细胞亚群与DNT细胞的表达水平.结果 联合检测血清CEA及外周血T淋巴细胞亚群与DNT细胞可将肺癌检出的灵敏度、特异度提高至90.8％、98.9％.结论 利用血清CEA及外周血T淋巴细胞亚群与DNT细胞联合检测,将明显提高肺癌诊断的灵敏度和特异度,有较大的临床应用价值.     

慢性疲劳综合征患者外周血淋巴细胞亚群及CD25^＋调节性T细胞表达的研究

研究慢性疲劳综合征（CFS）患者外周血淋巴细胞亚群及CD25＋调节性T细胞的表达情况。使用流式细胞仪检测84例CFS患者（CFS组）、50例健康体检者（健康对照组）外周血淋巴细胞亚群（T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、B细胞、NK细胞）及CD25＋调节性T细胞的表达情况。结果显示,CFS组与健康对照组的T细胞、CD8＋T细胞百分率以及CD4＋/CD8＋比值无显著差别（P〉0.05）;而CFS组NK细胞、CD4＋T细胞及CD25＋调节性T细胞百分率显著增高,B细胞百分率显著降低（P〈0.05）。结论：慢性疲劳综合征患者外周血淋巴细胞各亚群比例异常,提示其免疫功能失衡,而CD25＋T调节性细胞可能在该病进程中有重要意义。     

支气管哮喘患儿外周血B细胞和T细胞及其亚群的研究

目的 :探讨了支气管哮喘患儿外周血B细胞和T淋巴细胞及其亚群的变化。方法 :应用单克隆技术测定了 38例支气管哮喘患儿外周血B细胞和T淋巴细胞亚群的水平并以 30名正常健康人作比较。结果 :支气管哮喘患儿外周血B细胞数显著地高于正常人组 (P <0 .0 1 )CD3 、CD4、CD4/CD8显著地低于正常人 (P <0 .0 1 )。结论 :支气管哮喘是一种自身免疫调节异常的疾病     

Increased Th2-like Invariant Natural Killer T cells in Peripheral Blood From Patients With Asthma

Purpose

Invariant natural killer T (iNKT) cells might play an important role in asthma pathogenesis in humans. Our previous study found no difference in the number of blood iNKT cells between asthma patients and controls. However, few studies have examined the function of blood iNKT cells in human asthma.

Methods

Twenty asthma patients and eight controls were included in this study. Blood iNKT cells were identified using double staining with anti-Vα24 and anti-Vβ11 monoclonal antibodies (mAbs) or with 6B11 and anti-Vβ11 mAbs. Intracellular IL-4, IL-10, and IFN-γ cytokines were stained in blood iNKT cells using their respective mAbs and isotypes. In addition, their relationships with clinical parameters were analyzed.

Results

The number of Vα24+Vβ11+ iNKT cells or 6B11+Vβ11+ iNKT cells did not differ between asthma patients and controls. However, among Vα24+Vβ11+iNKT cells, the proportion of IL-4+iNKT cells was increased in asthma patients compared to controls (7.0±3.0% vs 0.5%±0.4%, P<0.05). There were no differences in the proportions of IL-10+or IFN-γ+iNKT cells between the groups. The proportion of IL-4+ cells among 6B11+Vβ11+iNKT cells inversely correlated with FEV1, expressed as a percentage predicted value in asthma patients (Rs=-0.64, P<0.05, n=19).

Conclusions

Blood iNKT cells are thought to be Th2-like, and IL-4-producing iNKT cells may be associated with lung function in human asthma.     

慢性阻塞性肺疾病T淋巴细胞亚群与生化参数变化及其相关性分析

利用基于免疫荧光标记技术为原理的流式细胞分析技术研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者免疫功能与生化参数的变化及其相关性分析.对31例COPD患者与30名健康者T淋巴细胞亚群与生化参数等13项指标进行检测,并进行统计学相关分析.结果表明,COPD组和对照组免疫指标比较,CD3 CD4 T淋巴细胞计数无显著性差异(P>0.05),而COPD组中CD3 CD8 T淋巴细胞计数低于对照组(P<0.05),并且CD4/CD8比值升高(P<0.05);COPD组UN、UA、GLU、HDL-C均高于对照组(P<0.05),Cr则明显高于对照组(P<0.01),其余生化参数均无显著性差异(P>0.05);COPD组UA与CD3 CD8 T淋巴细胞呈负相关(r=-0.463,P<0.01),TG与CD3 T淋巴细胞呈负相关(r=-0.493,P<0.01),TG与CD3 CD4 T淋巴细胞呈负相关(r=-0.413,P<0.05).COPD患者的免疫功能与尿酸和血脂水平相关.     

恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞高效体外扩增的方法

探讨从恶性肿瘤患者外周血单个核细胞（PBMCs）中高效扩增淋巴细胞的方法,取3例恶性肿瘤患者的PBMCs,每例患者重复3次,在GMP实验室体系下,经淋巴细胞刺激因子体外诱导扩增淋巴细胞和观察扩增情况,应用流式细胞仪分析扩增前后总CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋淋巴细胞、CD3^＋CD16＋56^＋（NK细胞）、CD3^＋CD16＋56^＋（NKT细胞）以及CD4^＋和CD8^＋T细胞比值的变化,分析培养前后各淋巴细胞亚群的扩增情况和重复性,同时观察淋巴细胞体外扩增培养后回输患者的生物安全性。结果表明,CD3^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋CD16＋56^＋细胞比例较培养前明显增加（P〈0．01）,而CD3^＋CD^＋、CD3^-CD16＋56^＋细胞比例、CD^＋和CD8^＋T细胞比值则明显的降低（P〈0．01）。CD3^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋CD16＋56^＋细胞增殖倍数的中位数分别为487．9、832．5和2540．6;而CD3^＋CD4^＋和CD3^＋CD16＋56^＋则分别为159．6和155．5。细胞体外扩增培养前后亚型和扩增倍数的重复性较差,在本研究中只有CD3^＋T细胞在体外培养前后、CD3^＋CD16＋56^＋细胞在培养后的CV值在10％以内。培养扩增后淋巴细胞细菌、真菌、支原体、外来病毒及内毒素检查后无阳性发现,所有患者细胞回输治疗后无明显的毒副反应。在本研究体系下体外诱导扩增培养肿瘤患者自体外周血NK细胞及致敏淋巴细胞效率较高,细胞毒性细胞比例增高较大,具有良好的生物安全性,为恶性肿瘤患者应用NK细胞进行过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法。