白介素-18基因多态性与结直肠癌易感性的关系

目的探讨白介素-18（m-18）基因单核苷酸多态性及其单倍型与结直肠癌易感性之间的关系。方法以170例结直肠癌患者和160名健康对照者为研究对象,应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法对IL．18基因-137G／C、-607C／A单核苷酸多态性进行基因分型,同时用SHEsis软件分析IL-18基因的连锁不平衡及单倍型频率。结果IL-18基因-607C／A多态性在结直肠癌患者和健康人群中的分布差异无统计学意义（P〉0．05）．而IL-18基因-137G／C多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义（P〈0．05）。等位基因频率的相对风险分析显示．C等位基因携带者患结直肠癌的风险是G等位基因的1．814倍（OR=1．814,95％CI：1．246～2．642）。联合基因型分析显示,IL-18基因-137G／C、-607C／A单核苷酸多态性存在着强烈的连锁不平衡（ID＇｜=0．945）,-137C／-607A单倍型频率在结直肠癌患者中显著高于健康人群（P〈0．05）。-137C／-607A单倍型携带者显著增加了结直肠癌的发病风险（OR=1．637,95％CI：1．100～2．437）。结论IL—18基因-137G／C多态性和-137C／-607A单倍型与结直肠癌的发病具有相关性．其中-137C等位基因可能是结直肠癌的遗传易感基因。     

微卫星不稳定结直肠癌hMLH1和hMSH2及hMSH6种系突变与hMLH1启动子甲基化检测

目的探究微卫星不稳定（MSI）结直肠癌患者的hMLH1、hMSH2和hMSH6种系突变特征和hMLH1启动子甲基化状态。方法对前瞻性收集的34例MSI结直肠癌患者检测其hMLH1、hMSH2和hMSH6种系突变，并研究其肿瘤的hMLH1启动子甲基化状态。结果34例MSI结直肠癌中。共检测到MLH1基因启动子的甲基化19例（55．9％）。19例MSI—H结直肠癌中检测到MLH1基因的甲基化14例（73．7％）；15例MSI—L结直肠癌检测到MLH1基因的甲基化5例（33．3％）；两组差异有统计学意义（P〈0．05）。全组共发现8个hMSH2和hMSH6基因的突变，其中hMSH6基因突变3个，hMSH2基因突变5个。结论中国人MSI结直肠癌错配修复基因突变（未测到MLH1基因突变）和MLH1基因启动子的甲基化检出率可能有别于国外MSI结直肠癌。     

X射线损伤修复交叉互补基因1的单核苷酸多态性与散发性结直肠癌易感性相关

目的 检测单核苷酸多态性（SNP）位点Arg399Gln在散发性结直肠癌患者和非癌对照组中的分布情况，分析其与散发性结直肠癌及其临床病理特征的相关性。方法 从178例肿瘤组织和非癌对照组的180例血样中提取DNA，采用Taqman探针技术检测Arg399Gln多态性表型，并用统计软件计算各基因型的比值比（OR）和95％可信区间（95％CI）。结果 肿瘤组与对照组就XRCC1Arg399Gln多态性的基因表型差异有统计学意义（P〈0．05）；年龄不超过60岁的患者和超过60岁的患者在该位点的基因型差异有统计学意义（P〈0．05）；以399Arg／Arg基因型为参照，在年龄超过50岁的人群中（OR=0．64，95％C10．50～0．83，P〈0．05）和男性人群中（OR=0．64，95％C10．51～0．79，P〈0．05）携带至少一个Gin等位基因可致罹患散发性结直肠癌的风险显著降低；XRCC1399SNP与患者性别及散发性结直肠癌的发生部位、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移以及病理分型均无显著相关性（P均〉0．05）。结论 XRCC1399SNP可能通过改变DNA的损伤修复功能，成为散发性结直肠癌的易感因素。     

肿瘤坏死因子-α基因多态性与结直肠癌的关系

目的研究肿瘤坏死因子-α（TNF-α）-308G／A基因功能多态性与结直肠癌生成及发展的关系。方法研究病例为德国曼海姆医院普通外科2000年10月至2003年3月间收治的157例经病理组织学证实为结直肠癌的患者（病例组），对照组为117例查体的健康人，病例与对照人群均为欧洲高加索人种。采用聚合酶链反应，限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法检测结直肠癌组及正常对照组的TNF-α-308G／A基因型。结果病例组患者TNF-α-308G／A基因型和等位基因与对照组相比，差异无统计学意义（基因型P=0．663；等位基因χ^2=0．404，P=0．525）。Ⅲ、Ⅳ期病理分期患者A等位基因（22．6％）和A／A基因型（8．1％）的比例明显大于Ⅰ、Ⅱ期（12．9％和1．2％），两者差异有统计学意义（基因型：P=0．048，OR=7．368，95％CI=0．839～64．743；等位基因：χ^2=4．720，P=0．03，OR=1．962，95％CI=1．061～3．628）。结论TNF-α-308G／A基因功能多态性与结直肠癌生成无关．TNF-α-308A／A基因型或A等位基因与结直肠癌的进展相关。     

结直肠癌中MDR1和ABCG2基因多态性与伊立替康疗效及不良反应的关系

目的研究MDRl和ABCG2基因单核苷酸多态性（SNP）与结直肠癌患者伊立替康（CPT-11）化疗疗效及不良反应的关系。方法回顾性收集北京大学肿瘤医院消化肿瘤内科1996年1月至2011年12月行以CPT．11为基础化疗药物的晚期结直肠癌患者的完整临床资料及血液样本,提取血液DNA,用直接测序法检测MDRl和ABCG2基因SNP．分析基因多态性与CPT-11疗效和不良反应的相关性。结果MDR12677G〉T／A及ABCG2421C〉A、34G〉A和376C〉T的血标本及肿瘤组织检测SNP结果一致率高,分别为94．4％（34／36）、94．6％（35／37）、95．0％（38／40）和97．2％（35／36）。MDR12677G〉T／A中,野生型（G／G）患者较突变型患者临床获益率高．但差异无统计学意义（P〉0．05）;且在二线化疗的患者中,野生型患者无进展生存期（PFS）明显优于突变型患者（P=0．012）。未观察到ABCG2421C〉A、34G〉A和376C〉T多态性与化疗疗效有相关性（均P〉0．05）。同时,未观察到MDR12677G〉T／A、ABCG2421C〉A、ABCG234G〉A和ABCG2376C〉T多态性与患者3度以上粒细胞减少及腹泻相关。结论在晚期结直肠癌患者中,MDR12677G〉T／A可能作为分子标记物来预测伊寺替康方案化疗疗效。     

结直肠黏液腺癌的临床特点

目的 探讨结直肠黏液腺癌与非黏液腺癌的临床病理特点及其预后。方法总结1994年至2007年间收治的2089例结直肠癌中169例黏液腺癌的病例资料．比较分析结直肠黏液腺癌与非黏液腺癌的临床病理特点和预后及其关系。结果与非黏液腺癌相比,结直肠黏液腺癌肿瘤直径大[（5．52±3．56）cm比（4．62±2．68）cm,P〈0．01]、发病年龄轻[（52．3±16．5）岁比（58．7±13．6）岁,P〈0．01]。结直肠黏液腺癌中结肠占97例（57．4％）,有浆膜浸润116例（68．7％）,发生腹膜转移26例（15．4％）,脏器侵犯44例（26．0％）,淋巴结转移103例（60．9％）;与非黏液腺癌的814例（44.3％）、914例（49．8％）、125例（6．8％）、300例（16．3％）和929例（50．1％）相比,差异具有统计学意义（P〈0．01）;但黏液腺癌的根治性切除率（86．4％）和肝转移发生率（5．3％）与非黏液腺癌（91．5％和8．5％）的差异无统计学意义（P〉0．05）。黏液腺癌和非黏液腺癌患者的中位生存时间分别为52．6和148．2个月,差异有统计学意义（P〈0．01）：可根治切除患者黏液腺癌和非黏液腺癌中位生存时间分别为125．1和151．0个月．差异也有统计学意义（P=0．020）;两组Ⅰ、Ⅳ期患者总生存率差异无统计学意义（P〉0．05）;而Ⅱ、Ⅲ期患者非黏液腺癌中位生存时间149．0个月,明显长于黏液腺癌的67．7个月（P=0．033）。结论黏液腺癌可能是具有独特生物学行为的肿瘤,其预后差与其独特的病理类型有关。     

修复基因XRCC1Arg194Trp位点多态性与结直肠癌易感性的相关性分析

目的探讨DNA损伤修复基因XRCC1Arg194Trp位点多态性与结直肠癌易感性的关系。方法选取120例结直肠癌患者与120例正常对照者进行对比研究。取外周血提取DNA,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）技术对XRCC1Arg194Trp基因多态性进行检测分析,比较不同基因型与结直肠癌易感性的关系。结果2组观察对象在年龄、性别、吸烟、饮酒、饮食特点等常见暴露因素方面的差异均无统计学意义（P〉0．05）,变异基因型Arg／Trp＋Trp／Trp出现频率在2组观察对象中分别为30．00％和24．17％,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论XRCC1Arg194Trp位点多态性与结直肠癌的易感性并无显著相关性。     

食管癌UGT1A1基因多态性与伊立替康不良反应关系的研究

目的初步了解食管癌人群中尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1基因（UGTlAl基因）的多态性分布情况,研究其与伊立替康导致的不良反应（延迟性腹泻和中性粒细胞减少）的相关性。方法纳入2012年1～10月四川省人民医院收治的48例食管鳞状细胞癌患者,男37例、女11例,年龄56（25～38）岁。收集患者食管鳞状细胞癌病理石蜡切片样本,提取基因组DNA,采用聚合酶链反应（PCR）和测序法检测UGTlAl基因的多态性情况,对UGTlAI＊28（TA6〉TA7）、UGTlAI＊6（211G〉A）和UGTlAI＊93（-3156G〉A）3个位点进行考察。观察记录不同UGTlAl基因型患者在伊立替康治疗后出现的不良反应（延迟性腹泻和中性粒细胞减少）情况,并对UGTlAl基因的多态性与不良反应的相关性进行分析。结果48例食管癌患者中有10例携带UGTIAl基因多态性,多态性率为20．8％。其中最常见的是UGTlAI＊93（-3156G〉A）多态性,多态性率为16．7％（8／48）;其次为GTlAI＊6（211G〉A）,多态性率为4．2％（2／48）。携带UGTlAl基因多态性的患者在伊立替康治疗发生3～4度腹泻或3～4级中性粒细胞减少症状的比例分别为60．0％和40．0％,显著高于携带野生型UGTlAl基因的患者（21．1％和15．8％,P〈0．05）。有45．5％（5／11）的女性患者携带UGTlAl基因多态性,13．5％（5／37）的男性患者携带UGTlAl基因多态性,两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在食管癌患者中,UGTlAI＊93（-3156G〉A）和GTlAl;6（211G〉A）两个多态性位点能够有效预测伊立替康导致的不良反应。男性患者UGTlAl的多态性率显著低于女性患者。     

hMLH1在直肠上皮内瘤变和早期直肠癌组织中的表达

目的探讨hMLH1在直肠上皮内瘤变与早期直肠癌组织中的表达情况及其早期诊断价值。方法采用PV-9000二步法免疫组织化学检测技术对术后确诊的28例早期浸润性直肠癌、36例直肠上皮内瘤变和30例正常直肠黏膜组织的石蜡切片进行hMLHl蛋白表达的检测。结果正常直肠黏膜组织、直肠上皮内瘤变组织和早期浸润性直肠癌组织hMLH1蛋白的阳性表达率分别为100％（30／30）、77．8％（28／36）和39．3％（11／28），3组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。直肠上皮内瘤变组织hMLH1的阳性表达与患者的年龄、性别、肿瘤最大径、异型增生、肿瘤类型和距肛缘的距离均无关（P〉0．05）；早期直肠癌组织hMLH1阳性表达与其分化程度有关（P〈0．05）。结论hMLHI基因表达缺失可能是直肠癌发生的早期事件之一,hMLH1蛋白检测对于上皮内瘤变和早期直肠癌中两种疾病的早期诊断有一定的临床价值。     

蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子在结直肠癌组织芯片中的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（CIP2A）的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测92例结直肠癌组织芯片中CIP2A的表达情况,分析其表达与患者临床病理因素及预后之间的关系。结果CIP2A高表达与肿瘤TNM分期、组织分型、腹膜种植及肝转移有关（P〈0．05）;但与患者性别、年龄、肿瘤部位、CEA、结直肠癌家族史及分化程度无关（P〉0．05）。CIP2A高表达组1、3、5和10年总生存率分别为97．1％、71．4％、59．2％和44．4％,明显低于低表达组的98．2％、85．7％、80．3％和74．9％,两者差异具有统计学意义（P=0．021）。多因素生存分析显示,CIP2A高表达并非是影响结直肠癌的独立不良预后因素（P=0．099,HR=1．982,95％CI：0．879-4．469）。结论CIP2A高表达与结直肠癌的临床病理特征密切相关,CIP2A可能成为潜在的结直肠癌转移和预后分子标志物或治疗靶点。     

错配修复基因hMLH1单核苷酸多态性T1151A在消化道肿瘤发病中的作用

在多次检出中国人大肠癌患者hMLH1基因T1151A的基础上,探讨这一单核苷酸多态性在不同人群中的存在状况及其在消化道肿瘤发病中的作用。方法：100例健康中国汉族人、80例健康日本人、100例健康德国人和109例德国人大肠癌患者、中国汉族人101例大肠癌患者、79例胃癌患者、76例食管癌患者及其胃癌和食管癌患者的亲属,取每例外周静脉血,提取基因组DNA;PCR-SSCP和DNA测序分析hMLH1基因的第12外显子。结果：hMLH1基因T1151A在中国和日本健康人群中的等位基因频率分别为3%和2.5%;与相应正常人群比较,<45岁的大肠癌患者中hMLH1基因T1151A的检出率较高(P<0.05);显著性差异还存在于具有癌症家族史的胃癌患者及其亲属与正常对照的比较(P<0.05和P<0.01);食管癌患者及其亲属与正常对照之间的比较无显著差异(P     

Association Between EGF, TGF-β1, VEGF Gene Polymorphism and Colorectal Cancer

Introduction  Up to the present, EGF 61 A/G, TGF-β1 −509 T/C, and VEGF 936 T/C gene polymorphisms have been analyzed in other cancer entities than colorectal cancer. We have now investigated the frequency of these gene polymorphisms among colorectal cancer patients. Material and methods   A total of 157 colorectal cancer patients and 117 cancer-free healthy people were recruited at the Surgical Department of the Universit?tsklinikum Mannheim. All patients and healthy people are Caucasians. Genomic DNA was isolated from peripheral blood, and gene polymorphisms were analyzed by polymerase chain reaction–restriction fragment length polymorphism (PCR–RFLP). Results  The distribution of EGF 61 G/G homozygotes among colorectal cancer patients was more frequent than that in the control group (33.1% versus 11.1%; Odds Ratio [OR] = 3.962; 95% Confidence Interval [CI] = 2.036–7.708). The frequency of the “G” allele in the colorectal cancer patient group was also higher than that in the control group (51.3% versus 33.3%; OR = 2.105; 95% CI = 1.482–2.988). No difference could be found for the TGF-β1 and VEGF genotypes among colorectal cancer patients and healthy controls. Conclusions  The EGF 61 G/G genotype and the G allele are significantly related to colorectal cancer. The TGF-β1 −509 T/C and VEGF 936 T/C gene polymorphisms are not related to colorectal cancer. Guo-yang Wu and Till Hasenberg contributed equally to this work.     

Accuracy of the routine detection of mutation in mismatch repair genes in patients with susceptibility to hereditary upper urinary tract transitional cell carcinoma

OBJECTIVE: To establish the clinical benefits of systematic testing for hMSH6 and hMLH1 mutations in the very rare patients with upper urinary tract transitional cell carcinomas (UUT-TCCs), a clinical predisposition for hereditary tumour and no mutation detected in hMSH2 gene. PATIENTS AND METHODS: In all, 164 UUT-TCC specimen blocks were screened for microsatellite instability (MSI); 27 (16%) had high MSI levels. Eight patients (30%) had clinical criteria suspicious of hereditary tumour; in three a mutation in hMSH2 was detected. For the other patients, clinical data were collated, and DNA gene sequences analysed to detect mutations in hMLH1 and in hMSH6 genes. RESULTS: Five patients were assessed (mean age at the diagnosis of UUT-TCC 65.2 years, sd 8, range 54-71; two aged < 60 years). Three patients had a personal history of hereditary nonpolyposis colorectal related-cancer (three colorectal). There were only mutations in hMSH2 gene detected, with none in hMSH6 and hMLH1. CONCLUSION: For the rare patients with UUT-TCC who are suspected of carrying mismatch repair gene mutations if no hMSH2 mutation is found by genetic testing, complementary DNA sequencing for hMLH1 and hMSH6 mutation does not seem to contribute and should not be recommended in daily practice.     

Phenotype-genotype correlation: challenge of intestinal-type adenocarcinoma of the nasal cavity and paranasal sinuses

BACKGROUND: Intestinal-type adenocarcinoma (ITAC) of the nasal cavity and paranasal sinuses shows microscopic features indistinguishable from colorectal cancer. Our aim was to verify whether the morphologic resemblances mirror genetic profile similarities. METHODS: Twenty consecutive surgically treated ITAC cases, previously investigated for p16(INK4a) and TP53, were investigated for hMLH1, hMSH2, and beta-catenin immunoreactivity, and for adenomatous polyposis coli (APC), K-ras, and BRAF gene mutations. RESULTS: One case was immunonegative for both hMLH1 and hMSH2, and 12 tumors (40%) revealed a strong beta-catenin overexpression. No BRAF and APC truncating mutations were identified, whereas K-ras mutations were detected in 9 ITACs (50%). CONCLUSIONS: Our data confirm the phenotypic similarities at the genetic level between colorectal cancer and ITACs showing deregulation of K-Ras/BRAF and loss of heterozygosity (LOH) of chromosome 18q. By contrast, both frequency rate and type of inactivation of the APC-beta-catenin pathway differ in the 2 tumors, suggesting different gatekeeper events in the early development of ITAC (p16(INK4a) and TP53) and colorectal cancer (APC).     

结直肠癌患者IL-6基因启动子-174G→C多态性研究

目的：观察结直肠癌患者是否存在IL-6基因启动子-174G→C位点的多态性。方法：采用PCR扩增、限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）分析判断46例结直肠患者IL-6启动子-174G→C多态性。结果：全组结直肠癌患者IL-6基因启动子-174位点均为GG型。结论：本组结直肠癌患者中未发现IL-6基因启动子-174位点的多态性。     

多基因联合提高结直肠癌甲基化检测阳性率的研究

目的探讨联合检测Vimentin、sFRP1和HPP1基因甲基化对提高结直肠癌甲基化阳性率的意义。方法收集90例结直肠癌（结直肠癌组）和60例腺瘤性息肉（腺瘤组）患者及20例结直肠正常组织（正常对照组）标本,提取组织标本的DNA,采用甲基化特异性PCR（MSP）检测Vimentin、sFRP1和HPP1基因甲基化状态。分析其与结直肠癌的关系及甲基化阳性率。结果结直肠癌组Vimentin、sFRP1和HPP1基因甲基化率分别为66．7％（60／90）、68．9％（62／90）和72．2％（65／90）;腺瘤组则分别为53.3％（32／60）、55．0％（33／60）和50．0％（30／60）;正常对照组分别为0、0和5．0％（1／20）。结直肠癌组3个基因甲基化阳性率均高于腺瘤组和正常对照组（P〈O．05）。3个基因甲基化联合检测诊断结直肠癌和腺瘤的阳性率分别为93．3％（84／90）和76．7％（46／60）,高于单个基因检测的甲基化阳性率（P〈0．05）。3个基因甲基化状态与本组结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移、远处转移及TNM分期无关（P〉0．05）。结论Vimentin、sFRP1和HPP1基因启动子甲基化水平在结直肠癌组织中升高．其联合检测明显提高了结直肠癌甲基化检测阳性率．有可能成为结直肠癌早期诊断的甲基化检测方案。     

单链构象多态性分析和变性高效液相色谱分析技术检测hMLH1和hMSH2基因突变的比较

目的比较单链构象多态性分析（SSCP）和变性高效液相色谱分析技术（DHPLC）应用于遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）分子遗传学诊断的灵敏性和特异性。方法应用PCR-SSCP和DHPLC方法分析经测序验证有序列变异的7个家系的所有成员的相应PCR扩增产物，分别计算SSCP和DHPLC的灵敏度和特异度。结果应用SSCP对hMLH1和hMSH2进行基因突变筛查的敏感性和特异性分别为51．6％和66．6％；而应用DHPLC进行基因突变筛查的敏感性和特异性则分别为100％和93．3％；两种方法进行基因突变筛查的结果差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DHPLC进行基因突变筛查的敏感性和特异性均高于SSCP，是理想的分子遗传学检测方法。     

遗传性非息肉病性大肠癌家系研究

目的;分析遗传性非息肉病性大肠癌家系肿瘤的基因表达及特点,诊治经验。方法：分析24个遗传性非息肉病性大肠癌家系的诊断,治疗和随访结果。记录恶性肿瘤部位,确诊年龄,同时性和（或）异时性癌,肿瘤的病理学资料,应用聚合酶链反应和单链构像多态性方法检查家族成员hMLH1和hMSH2各外显子,对可疑突变片段测序。结果：24个家系中共有患者75例,共诊断各种恶性肿瘤125个,主要有大肠癌,胃癌,子宫内膜癌等,本组诊断大肠癌患者64例（异时性多原发大肠癌16例）,24％的大肠癌患者首次手术10年内再发异时性大肠癌,发现2个家系携带hMSH2基因,1个家系携带hMLH1基因种系突变,均产生截短蛋白,3个家族中已发现12例突变基因携带者,结论：本病主要特点是恶性肿瘤早发,多发;结肠直肠癌,尤其是右侧结肠癌为主,多原发癌,尤其是多原发性大肠癌多见,家族发病年龄逐代提前,常规肠段切除手术可能不适于此类大肠癌的治疗。已发现2个家系有hMSH2基因,1个家系有hMLH1基因突变。     

胃癌易感性与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4基因+49A/G多态性的关系

目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)基因外显子1区+49A/G位点多态性在中国人群中的分布及其与胃癌易感性的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测205例胃癌患者和262例正常对照者CTLA-4基因+49A/G多态位点基因型频率,进行多态性与胃癌易感性的关系分析并进行分层分析.结果 CTLA-4基因外显子1区+49位点A/G、G/G基因型在胃癌组患者中的分布频率明显高于对照组(P＜0.01,OR=2.146;P＜0.01,OR=3.215);分层分析示:男性患者、年龄在40～55岁之间、不吸烟、不饮酒患者组等组别的胃痛患者携带G/G基因型的频率较正常对照组显著增加.结论 CTLA-4基因外显子1区+49A/G多态性与胃癌易感性有明显相关,携带A/G、G/G基因型的个体胃癌发病风险增加,分层因素也影响这一结果.