一起副溶血性弧菌食物中毒的调查报告

2004年8月20日晚，郑某在柳州市某大酒家设满月宴，60人进餐，15人先后出现腹痛、腹泻、恶心和呕吐症状，以阵发性的腹部绞痛表现明显，在两位患者的粪便检出副溶血性弧菌。根据流行病学调查、临床表现和实验室检测结果，认定为一起副溶血性弧菌引起的食物中毒。     

一起副溶血性弧菌食物中毒的病原学分析

目的运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对一起食物中毒中分离的菌株进行同源性分析,为查明原因和溯源提供依据。方法采集患者、食品从业人员、环境样本以及留样食品进行分离、鉴定,对分离的菌株进行PFGE分析。结果本次事件共采集137份样本,检出11株副溶血性弧菌,其中5株来自病人样本,3株来自冷菜间厨师样本,1株来源于生扇贝样本,2株分别来自龙虾池、桂鱼池养殖水。11株菌株经PFGE分析,除1株患者样本与其余10株的同源性为60.0%外,其余10株副溶血性弧菌的同源性为100.0%。结论 PFGE分型技术揭示菌株之间的流行病学联系,为事件的分析和追溯来源提供分子流行病学证据。     

副溶血性弧菌食物中毒致心房颤动

患者男 ,3 8岁。因服生鱼片 8ｈ后出现心悸、呕吐、脐周阵发性绞痛、腹泻等症状而就诊。既往体健 ,无腹痛及心脏病史。体检 :Ｔ 3 9℃ ,Ｒ 2 0次 ｍｉｎ ,发育正常 ,神志清 ,皮肤湿冷 ,无颈静脉怒张 ,双肺呼吸音粗 ,未闻及干湿性罗音。心界不大 ,心律绝对不齐 ,心音强弱不等 ,脉搏短绌 ,无杂音 ,腹肌紧张 ,脐周围压痛 ,肝脾未及。实验室检查 :①白细胞总数为 13× 10 9 Ｌ ,中性粒细胞偏高。②大便常规 :肉眼呈洗肉水样血水便 ,镜检有白细胞、脓细胞及少量红细胞。③粪便培养 :检出副溶血性弧菌。心电图示 :各导联Ｐ波消失 ,代之以大小不等…     

引起食物中毒副溶血性弧菌的病原学鉴定

目的分离食物中毒患者粪便及食物加工工具样本中的病原菌,对分离菌株进行表型和毒力基因鉴定。方法采用TCBS平板法分离食物中毒样本中的病原菌。采用细菌系统鉴定方法,确定所分离的副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)生化反应特性和血清型。采用PCR检测Vp分离株的种属特异基因、直接耐热溶血素毒力基因(tdh)和直接耐热相关溶血素毒力基因(trh)。采用K-B纸片法检测Vp分离株对14种抗生素的敏感性。结果从1例携带者和3例病人粪便标本中分离出4株Vp,从2份食物加工工具样本中分离出2株Vp。6株Vp分离株均属于含Vp种属特异基因的O1∶K56血清型,tdh基因阳性但trh基因阴性。6株Vp分离株生物学性状和药敏试验结果一致。结论tdh+/trh-O1∶K56血清型Vp是引起本次食物中毒的病原菌。     

一起以蜡样芽胞杆菌为主合并副溶血性弧菌污染的食物中毒调查报告

2005年6月24日和6月25日，柳州市某大酒楼为某工学院两院系大学生举行毕业宴，510人进餐，93人发病，经调查，确认为一起以蜡样芽胞杆菌为主合并副溶血性弧菌污染的食物中毒，现将调查结果报告如下。     

某餐厅副溶血弧菌食物中毒的流行病学分析

目的查明某餐厅一起食物中毒事件发生原因和环节,提出针对性防控措施和建议。方法进行现场卫生学调查及描述流行病学分析;采集样品进行细菌培养检测。结果本次事件共有19例病例,主要临床症状为恶心(68.4%),呕吐(57.9%),腹痛(100%),腹泻(100%)。发病时间分布呈点源传播模式,3例病例肛拭样品中检出副溶血弧菌阳性。结论这是一起由副溶血性弧菌经交叉污染引起的食物中毒。     

由副溶血性弧菌引发食物中毒的调查分析及对策

副溶血性弧菌(又称嗜盐菌)，在沿海地区夏秋季引起的食物中毒居多，它主要存在于海产品类中。副溶血性弧菌引发食物中毒的潜伏期一般为2～42h不等，大多数发病时间在10h左右，其主要症状为腹痛、呕吐、腹泻，发热较轻，重者可有脱水、意识不清、血压下降等，如不治疗及时可引起电解质紊乱，因此应引起高度重视。     

龙岩市不同来源副溶血性弧菌耐药性分析

目的 了解福建省龙岩市腹泻患者粪便标本和市售水产品的副溶血性弧菌(VP)的耐药特征。方法 收集VP162株,其中人源32株,水产品来源130株,以实时荧光定量PCR方法检测毒力基因,判断产毒株和非产毒株,采用微量肉汤稀释法开展16种药物敏感试验。结果 162株不同来源的VP对阿莫西林、环丙沙星、左氧氟沙星、四环素、多西环素、氯霉素和阿奇霉素的敏感率均为100.0%,但对9种药物出现不同程度的耐药,耐药率较高的是头孢唑林(25.3%)、氨苄西林(15.4%)和复方磺胺甲恶唑(13.0%);产毒株与非产毒株耐药率差异无统计学意义(χ²=0.353,P>0.05);共有7种耐药谱,耐一种药物的耐药率为15.4%,3种及以上多重耐药率为13.0%。结论 腹泻患者VP与市售水产品VP的耐药特征接近,应严格控制抗生素在临床和养殖业中的使用。     

引起一起食物中毒的副溶血性弧菌病原学检测和分子分型溯源研究北大核心CSCD

目的对引起一起食物中毒的副溶血性弧菌进行实验室鉴定,分析菌株间的相关性。方法按照国标GB4789和有关规范对采自患者的粪便肛拭标本及砧板涂抹标本进行肠道致病菌检测,同时采用实时荧光PCR对耐热直接溶血素(TDH)毒力基因进行鉴定。提取副溶血性弧菌分离株基因组DNA,经限制性内切酶SfiⅠ酶切后进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),获得指纹图谱,利用BioNumerics6.6软件进行聚类分析。结果从病人和砧板标本共分离出8株O1血清型副溶血性弧菌,其TDH毒力基因为阳性。聚类分析显示,分离自中毒病人和砧板的8株副溶血性弧菌的指纹图谱相似性高达100%。结论引起该起食物中毒的病原菌为携带TDH毒力基因的O1血清型副溶血性弧菌,且来自同一污染源。     

5岁以下腹泻患儿副溶血性弧菌感染调查分析

目的 了解5岁以下腹泻患儿副溶血性弧菌(VP)的感染情况。方法 收集腹泻患儿粪便样本495例份,非腹泻患儿粪便样本327例份,进行细菌培养。挑取单个菌落,行氧化酶鉴定,阳性者进一步采用全自动细菌鉴定系统检测VP,同时患儿的基本信息采用结构化问卷调查完成。结果 VP在腹泻病例中检出率为5.9%,高于非腹泻病例(1.5%),差异有统计学意义(χ²=9.309,P<0.05,OR=4.008,95%CI:1.535～10.463)。腹泻患儿中VP的检出率在男性和女性中差异无统计学意义(χ²=0.100,P>0.05,OR=0.885);2岁以上年龄组腹泻病例中VP的检出率(9.1%)较2岁以下组(4.2%)高(χ²=4.688,P<0.05,OR=2.257);VP的检出率在腹泻病例中呈现明显的季节分布(χ²=13.982,P<0.05),在秋季检出率最高(13.1%,13/99),其次是夏季(6.6%,8/122)、春季(3.2%,6/186),冬季检出率最低(2.3%,2/87...     

广东省2003～2008年副溶血性弧菌血清学分型研究

目的了解广东省副溶血性弧菌食物中毒患者和水产品分离株的血清型分布。方法采用血清玻片凝集试验对365株从食物中毒患者和水产品中分离的副溶血性弧菌进行血清分型。结果365株副溶血性弧菌中,205株食物中毒患者分离株以O3：K6型为主,血清型中排前3位的是O3：K6（71.71%）、O4：K8（10.24%）、O2：K3（4.39%）;160株水产品分离株共分50个血清型,排前3位的是O5：K17（8.13%）、O2：K28（6.25%）、O2：K3（5.63%）,无优势菌型。结论2003～2008年广东省副溶血性弧菌食物中毒分离株血清型以O3：K6型为主,水产品分离株血清型呈多样性。     

柠檬酸和温度联合处理对海水鱼中副溶血性弧菌的杀灭作用

采用响应曲面分析法对副溶血性弧菌的抑制条件进行优化。对副溶血性弧菌死亡率影响因素进行单因素分析后,以Box-Benhnken 设计(BBD)评价温度、时间、pH3个因素显著性和交互作用,得出副溶血性弧菌最佳净化条件为:温度55.5 ℃、时间25 s、pH4.96。在该条件下, 副溶血性弧菌死亡率的预测值为97.36%,在三文鱼上验证该值达97.07％,并且该条件处理前后鱼肌原纤维蛋白的Ca²⁺-ATPase 活性没有显著差异。     

上海市市售水产品中副溶血性弧菌的分离、鉴定及耐药性研究

目的了解上海市市售水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)污染状况和耐药性,为防治Vp引起的食源性疾病提供依据。方法采集上海市各大农贸市场3类水产品共273份检测Vp,用统计学处理分析结果;K-B法进行药敏试验。结果水产品中Vp平均检出率为38.46%,其中甲壳类的检出率为50.96%,贝类为27.12%,鱼类为15.79%,三者间有极显著差异(P<0.01)。药敏试验结果显示,105株分离菌株对头孢曲松、萘啶酸和诺氟沙星100%敏感,对氨苄西林的耐药率达69.52%,有20株对多种抗生素耐药。结论上海市售水产品中Vp污染比较严重,药敏结果对多种抗生素耐药。     

Characterization of the Novel Phage vB_VpaP_FE11 and Its Potential Role in Controlling Vibrio parahaemolyticus Biofilms

Vibrio parahaemolyticus causes aquatic vibriosis. Its biofilm protects it from antibiotics; therefore, a new different method is needed to control V. parahaemolyticus for food safety. Phage therapy represents an alternative strategy to control biofilms. In this study, the lytic Vibrio phage vB_VpaP_FE11 (FE11) was isolated from the sewers of Guangzhou Huangsha Aquatic Market. Electron microscopy analysis revealed that FE11 has a typical podovirus morphology. Its optimal stability temperature and pH range were found to be 20–50 °C and 5–10 °C, respectively. It was completely inactivated following ultraviolet irradiation for 20 min. Its latent period is 10 min and burst size is 37 plaque forming units/cell. Its double-stranded DNA genome is 43,397 bp long, with a G + C content of 49.24% and 50 predicted protein-coding genes. As a lytic phage, FE11 not only prevented the formation of biofilms but also could destroy the formed biofilms effectively. Overall, phage vB_VpaP_FE11 is a potential biological control agent against V. parahaemolyticus and the biofilm it produces.     

小鼠动物毒性试验、神奈川溶血试验以及tdh试验对副溶血性弧菌致病性检测有效性的研究

目的比较小鼠动物腹腔注射、灌胃、神奈川溶血实验以及荧光tdh基因PCR反应对副溶血性弧菌致病性检测的有效性。方法采用四种方法,对分离自腹泻者、水产品及自然水体中的菌株测定阳性率,以精确卡方统计比较结果。结果tdh反应可区分腹泻者来源菌株阳性率为90.0%,水产品来源阳性率为9.62%,自然水体来源阳性率为7.32%, P<0.001。结论荧光tdh 基因PCR反应可有效应用于致病性菌株检测。     

副溶血性弧菌Vop T蛋白的表达及其抗体的毒力菌株特异性研究

目的 研究副溶血性弧菌VopT蛋白的菌群特异性,为建立致病性副溶血性弧菌的快速检测方法以及探讨VopT的作用机制奠定基础。方法 根据副溶血性弧菌VopT蛋白基因(VPA1327)序列设计合成引物,通过PCR从副溶血性弧菌致病株WX06152(血清型O3∶K6)中扩增出目的基因,构建原核表达载体pET-30a(+)-VPA1327并转化大肠杆菌BL21(DE3)。经IPTG诱导表达,重组蛋白应用MALDI-TOF-MS/MS鉴定和His镍柱纯化,并通过免疫BALB/c小鼠制备抗血清,建立副溶血性弧菌VopT蛋白的间接ELISA检测方法,并分析其敏感性和毒力菌株特异性。结果 成功表达了大小为33 kDa融合蛋白,肽指纹图谱与副溶血性弧菌VopT蛋白一致。重组VopT抗血清能够特异性检测副溶血性弧菌毒力株的全菌细胞及其裂解蛋白,与环境株及其它种属菌株无明显交叉反应,灵敏度达到10⁵CFU·mL^-1。结论 重组VopT的抗血清具有良好特异性,为探讨VopT致病机理和分泌机制研究提供了一定的参考依据。     

复合聚合酶链反应同时检测二个腹泻毒力因子

为检测腹泻病原菌产毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）和副溶血弧菌的两个毒力因子基因热稳肠毒素和热稳直接溶血素，用标准模板建立复合聚合酶链反应（ＰＣＲ），并检测了模拟标本和８８份临床腹泻大便标本。结果热稳肠毒素和热稳直接溶血素基因引物扩增各自的标准模板分别产生１８６ｂｐ和４２５ｂｐ的片段，一元的复合ＰＣＲ都只扩增热稳肠毒素和热稳直接溶血素基因ＤＮＡ并产生特异片段，对其它细菌无扩增。热稳肠毒素和热稳直接溶血素的