日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答

目的观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫后肠系膜淋巴结Th17细胞的免疫应答。方法 20只C57BL/6小鼠随机分为感染组和对照组,每组10只,感染组小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴,每鼠(40±5)条。感染后5~6周分离小鼠肠系膜淋巴结的淋巴细胞,分别用抗小鼠CD3单克隆抗体(anti-CD3,1μg/ml)和抗小鼠CD28单克隆抗体(anti-CD28,1μg/ml)刺激,培养4 h后收集细胞,RT-PCR检测小鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞中白细胞介素17(IL-17)和维甲酸相关孤独受体(ROR-γt)mRNA的转录水平;培养72 h后,ELISA检测细胞培养上清液IL-17和γ干扰素(IFN-γ)的含量。同时用佛波酯(PMA,10 ng/ml)和离子霉素(1μg/ml)刺激淋巴细胞5 h后,胞内细胞因子染色,流式细胞术检测Th17细胞的含量和其他细胞因子的产生。结果 ELISA检测结果显示,感染小鼠肠系膜淋巴结培养物上清液中IFN-γ[(214.3±62.6)pg/ml]和IL-17[(176.8±62.1)pg/ml]的含量明显高于健康小鼠[(46.7±13.9)和0 pg/ml](P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,IL-17和ROR-γt mRNA转录水平也明显高于健康小鼠。感染小鼠肠系膜淋巴细胞CD4+T细胞中,Th17细胞的比例为(0.55±0.03)%,明显高于健康小鼠[(0.16±0.01)%](P<0.05)。在CD4+T细胞中,IL-17+IL-4+细胞占0.06%,IL-17+IFN-γ+和IL-17+IL-5+细胞各占0.02%,IL-17+IL-9+细胞占0.01%,未检测到IL-17+IL-10+和IL-17+Foxp3+细胞。结论日本血吸虫感染C57BL/6小鼠的肠系膜淋巴结能诱导Th17细胞产生。Th17细胞能分泌IL-4,及少量的IFN-γ、IL-5和IL-9,不分泌IL-10,也不表达Foxp3。     

日本血吸虫感染新模型小鼠IFN-γ及IL-4 mRNA的动态变化

目的 构建日本血吸虫感染小鼠伴随免疫新模型,通过观察比较新模型小鼠与常规感染小鼠脾细胞诱生Th1细胞因子（γ-IFN）和Th2细胞因子（IL-4）mRNA的动态变化,从分子水平探讨日本血吸虫感染小鼠伴随免疫新模型的细胞免疫机制。方法 小鼠感染日本血吸虫尾蚴20d后,按300 mg/kg.d腹腔注射丙烯基硫脲,持续抑制雌虫产卵,建立日本血吸虫感染小鼠伴随免疫新模型。同时设立常规模型对照组和正常小鼠对照组。在感染后第2,3,6,9和12 w,采用RT-PCR对各组小鼠脾细胞IFN-γ和IL-4的mRNA水平进行半定量检测分析。结果 新模型组与常规模型组小鼠IFN-γ和IL-4 mRNA水平变化趋势基本一致,IFN-γmRNA水平在感染后9w最强,然后逐渐下降,至第12w;IL-4 mRNA水平在感染后3w开始逐渐增强,至12w仍维持高水平。新模型组IFN-γmRNA水平在感染3w后明显高于常规模型组（P〈0.05）;常规模型组IL-4 mRNA水平在感染6w后明显高于新模型组（P〈0.05）。正常小鼠IFN-γ和IL-4 mRNA水平较低,均无明显变化。结论 日本血吸虫感染新模型小鼠与常规模型小鼠的细胞免疫功能变化趋势基本一致,表现为Th1淋巴细胞功能先升高,然后逐渐向Th2淋巴细胞功能极化,提示可溶性虫卵抗原（soluble egg antigen,SEA）不是诱导Th2功能极化的唯一因素,对细胞免疫应答由Th1向Th2功能极化有促进作用。     

γδ T细胞分泌IL-17A激活肝星状细胞促进日本血吸虫感染小鼠肝纤维化

目的研究分泌白细胞介素17A (IL-17A)的γδ T细胞对日本血吸虫诱导的早期肝纤维化形成的影响。方法将10只6～8周龄C57BL/6野生型雌性小鼠随机分为健康对照组和野生感染组,每组5只。另5只6～8周龄C57BL/6背景的T细胞抗原受体δ链基因敲除(TCR δ KO)小鼠为TCR δ KO感染组。两个感染组每鼠经腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴(20±2)条,健康对照组不感染。感染后6周,各组小鼠麻醉后脱颈处死,取肝组织研磨后裂解,沉淀部分经密度梯度离心收集肝非实质细胞,采用流式细胞术检测肝非实质细胞中γδT细胞表达的IL-17A含量,采用ELISA检测裂解上清中IL-17A浓度。另取部分肝组织,4%多聚甲醛固定后,行苏木精-伊红(HE)和Masson染色,观察胶原纤维沉积情况。取各组小鼠外周血,ELISA检测血清中IL-17A浓度。体外培养的人肝星状细胞系(LX-2细胞)分为3组,实验组加入终浓度为10 ng/ml的IL-17A,阳性对照组和阴性对照组分别加入终浓度为10 ng/ml的IL-13和等量PBS,荧光定量PCR检测各组LX-2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Col 1) mRNA的相对转录水平。结果流式细胞术检测结果显示,野生感染组小鼠表达IL-17A的Vγ2亚型γδ T细胞百分比为(48.0±1.0)%,高于健康对照组的(17.0±1.6)%(P 0.01)。Masson染色结果显示,TCR δ KO感染组小鼠的胶原沉积面积为(3.5±0.2)×10~4μm~2,小于野生感染组的(6.4±0.5)×10~4μm~2(P 0.01)。ELISA检测结果显示,TCR δ KO感染组小鼠血清和肝组织裂解液上清中的IL-17A浓度分别为(34.0±22.3)和(101.6±18.6) pg/ml,均低于野生感染组的(143.9±33.8)(P 0.05)和(217.2±19.2) pg/ml (P 0.01)。荧光定量PCR检测结果显示,经IL-17A刺激后,实验组LX-2细胞中α-SMA和Col 1 mRNA相对转录水平较阴性对照组分别上调(4.0±0.7)和(8.7±1.2)倍(P 0.05或0.01)。结论分泌IL-17A的γδ T细胞可能参与日本血吸虫感染所致小鼠肝纤维化的进程中,其分泌的IL-17A激活肝星状细胞可能是其加据纤维化的途径。     

白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑耐药性及其与CAP1基因相关性研究

目的 了解白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑的耐药率以及氟康唑耐药与白假丝酵母菌CAP1基因相关性。方法 采用微量稀释法检测了245株白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑的敏感性。采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)和流式细胞术分别检测白假丝酵母菌CAP1基因mRNA(CAP1-mRNA)及其表达产物Cap1p。采用氟康唑浓度递增(4~64 μg/mL)的YPD培养液连续培养法了解氟康唑诱导白假丝酵母菌耐药性的作用,qRT-PCR和流式细胞术确定CAP1基因与氟康唑耐药性形成的关系。结果 134株白假丝酵母菌对氟康唑敏感(MIC≤8 μg/mL)、36株剂量依赖敏感(16~32 μg/mL)、75株耐药(≥64 μg/mL),耐药率为30.6%(75/245)。氟康唑耐药白假丝酵母菌株CAP1-mRNA和Cap1p表达水平均明显高于氟康唑敏感菌株(P<0.05)。氟康唑能诱导氟康唑敏感菌株产生耐药性(MIC≥64 μg/mL),其CAP1-mRNA和Cap1p表达水平也显著升高(P<0.05)。结论 白假丝酵母菌临床菌株对氟康唑有较高的耐药率。氟康唑能诱导氟康唑敏感白假丝酵母菌株产生耐药性。白假丝酵母菌对氟康唑耐药性与CAP1基因表达上调密切相关。     

辅助性T淋巴细胞22及其效应因子IL-22在自身免疫性肝炎小鼠模型中的表达及意义

目的研究自身免疫性肝炎(AIH)小鼠模型中辅助性T淋巴细胞(Th)22细胞水平及其功能因子IL-22的表达情况,探索其在AIH发病中的意义。方法选取30只4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6)、AIH组(n=14),剩余10只用于提取肝脏特异性抗原S100。在实验第1天和第7天通过腹腔注射法将新鲜提取的S100与等体积弗氏完全佐剂混合液注射到小鼠腹腔内,第28天成功建立AIH小鼠模型(造模期间AIH组有7只小鼠因注射不当、出现腹水、感染等原因死亡)后,将小鼠经腹腔注射5%水合氯醛(0.1 ml/10 g)麻醉后摘取眼球取血,收集小鼠脾脏采用流式细胞术检测Th22细胞数,RT-PCR检测AHR mRNA水平;收集肝组织用于HE染色观察肝脏病理变化,RT-PCR和免疫印迹法检测肝组织IL-22、IL-22R表达情况;ELISA法检测血清中IL-22细胞因子水平。2组间比较采用t检验。结果对照组小鼠肝组织排列整齐,肝小叶结构清晰,AIH组小鼠汇管区有大量炎症细胞浸润,肝组织出现点状甚至碎片状坏死。AIH组Th22细胞数较对照组明显升高[(0.083±0.052)%vs(1.555±0.812)%,t=-4.405,P0.05]。AIH组小鼠脾脏中Th22转录因子AHR mRNA的相对表达量较对照组有明显升高(0.485±0.096 vs 1.268±0.366,t=-5.452,P0.05)。AIH组肝组织中IL-22 mRNA和IL-22R mRNA的相对表达量均较对照组明显升高(IL-22 mRNA:1.146±0.227 vs 3.813±0.478,t=-12.458,P0.001;IL-22R mRNA:0.276±0.037 vs 1.734±0.248,t=-15.333,P0.001);AIH组肝组织的IL-22及IL-22R的蛋白相对表达量均明显高于对照组(1.040±0.261 vs 0.410±0.077,t=-6.324,P0.05;1.432±0.304 vs 0.830±0.146,t=-6.316,P0.05)。AIH组血清IL-22水平较对照组升高,且差异有统计学意义(t=-15.799,P0.05)。结论 AIH小鼠Th22细胞及IL-22因子的表达水平均明显升高,其可能在AIH的发病中起重要作用。     

弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝mRNA表达和细胞免疫水平的影响

目的 探讨弓形虫感染对大鼠大脑组织神经丝(NF)mRNA表达和细胞免疫水平的影响.方法 将4周龄雄性SD大鼠分成两组(每组10只):弓形虫感染组腹腔感染2×10~(10)个/L弓形虫速殖子悬液2 ml;对照组腹腔注射灭菌生理盐水2 ml.9周后,应用RT-PCR法检测大鼠大脑组织中高相对分子质量NF(NF-H)、中相对分子质量NF(NF-M)和低相对分子质量NF(NF-L)mRNA表达水平:流式细胞术检测大鼠外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞;酶联免疫吸附试验测定其血清γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)水平.结果 大鼠弓形虫感染9周后,大脑组织NF-L、NF-H mRNA表达量(0.51±0.06、0.68±0.05)较对照组(0.79±0.03、0.76±0.05)明显下降(t值分别为3.41、2.17,P<0.01或<0.05);NF-M mRNA表达量(0.69±0.02)与对照组(0.72±0.03)比较.差异无统计学意义(t=2.09,P>0.05).弓形虫感染组大鼠的CD4~+T细胞[(32.19±5.01)%]和CD8~+T细胞[(20.06±2.28)%]与对照组[(35.82±3.71)%、(22.06±3.90)%]比较,差异均无统计学意义(t值分别为1.69、1.88,P均>0.05).弓形虫感染组大鼠血清IFN-γ[(6.03±0.16)ng/L]、TNF-α[(18.05±1.93)ng/L]、IL-4[(15.76±1.59)ng/L]水平均高于对照组((4.77±0.13)、(9.54±1.57)、(5.67±0.42)ng/L,t值分别为2.81、2.74、2.63,P均<0.05].结论 弓形虫感染可导致大鼠大脑组织中NF亚单位mRNA表达水平下降,血清IFN-γ、TNF-α、IL-4水平升高.     

结核分枝杆菌Rv1009蛋白的免疫学特性

目的研究原核表达的结核分枝杆菌Rv1009蛋白在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答。方法采用皮下包埋的方法,以预先转移到硝酸纤维素膜上的原核表达的Rv1009蛋白免疫小鼠(10只)3次,每次间隔2周。用间接ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。末次免疫完成后4周,处死3只免疫小鼠并分离脾淋巴细胞,体外经PPD(0.2μg/孔)刺激后,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖指数。用ELISA法检测脾淋巴细胞悬液中IFN-γI、L-10及IL-12的水平。结果Rv1009蛋白免疫小鼠血清特异性抗体滴度为1∶1600,淋巴细胞增殖指数为2.46±0.28,IFN-γ含量为1 350±34 pg/ml,IL-10含量为512±15 pg/ml,均显著高于生理盐水对照组;IL-12含量与生理盐水阴性对照组相当,为112±13pg/ml。结论Rv1009有可能作为新型结核疫苗的候选组分。     

雌二醇对小鼠T淋巴细胞IL-2 IL-4 mRNA表达的影响及其对自身免疫病调节机制初探

目的观察生理水平(100 pg/ml)和妊娠水平(50 ng/ml)的雌二醇(E_2)对体外培养的小鼠T淋巴细胞白细胞介素(IL)-2、IL-4 mRNA表达的影响,并进一步探讨E_2对自身免疫性疾病的调节机制。方法Balb/c小鼠断颈处死后,制备脾T淋巴细胞并分3组,分别为ConA 5μg/ml(对照组),ConA 5μg/ml E_2：100 pg/ml,ConA 5μg/ml E_2 50 ng/ml。每组6个样本。并将各组T细胞置于37℃,5％CO_2条件下分别孵育0、24、48 h。采用半定量反转录一聚合酶链反应(QRT-PCR)法检测0、24、48 h IL-2、IL-4 mRNA表达。结果生理水平和妊娠水平E_2可下调活化48 h的T细胞IL-2基因的转录水平,与对照组相比具有统计学意义。E_2对活化后24、48 h的T细胞IL-4基因转录的调节作用呈剂量选择性。生理水平E_2使活化T细胞IL-4 mRNA水平显著降低,而妊娠水平E_2使活化T细胞IL-4 mRNA水平显著升高。结论①生理水平E_2下调IL-2、IL-4基因的转录。②妊娠水平E_2下调IL-2基因的转录、上调IL-4基因的转录。③E_2对自身免疫病发病机制过程中起重要的调节作用。     

粪肠球菌介导的铜绿假单胞菌重组疫苗诱导小鼠的保护力及细胞免疫应答北大核心CSCD

目的研究基于粪肠球菌(Ef)载体的铜绿假单胞菌(Pa)重组疫苗rEf(pGEX-LasR)诱导小鼠的保护力及细胞免疫应答。方法分别将5×10^(9)CFU的疫苗株、空载体株和Ef株菌液口服灌胃免疫BALB/c鼠,每周3次,连续3周;初次免疫后4周用5×10^(7)CFU的Pa01株菌液滴鼻攻击小鼠,2周后杀鼠剖检;菌落计数检测小鼠肺细菌负荷,MTT法检测小鼠脾细胞增殖水平,荧光激活细胞分选仪(FACS)检测小鼠脾细胞CD4^(+)/CD8^(+)T细胞亚群和脾细胞凋亡水平;采用PaAg体外刺激培养小鼠脾细胞48 h,PCR扩增IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因。结果疫苗组、空载体组和Ef对照组小鼠肺细菌负荷分别为(7.616±0.010)lgCFU/g、(8.876±0.011)lgCFU/g和(8.902±0.010)lgCFU/g,疫苗组显著降低(P<0.01);与空载体组和Ef对照组比较,疫苗组小鼠脾细胞CD4^(+)T细胞亚群显著增加(P<0.01),脾细胞增殖活性增强(P<0.01)、凋亡率减低(P<0.01);疫苗组小鼠脾细胞DNA可扩增出IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因条带,空载体组和对照组未扩增出条带。结论Pa重组疫苗rEf(pGEX-LasR)可诱导小鼠产生细胞免疫应答,促进小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、IL-12、IL-17和Fox3^(+)基因的表达,降低Pa01攻击小鼠后的肺细菌负荷。     

小鼠感染伯氏疟原虫后TLR2、9、11及其下游因子表达量的变化

目的了解小鼠感染伯氏疟原虫后Toll样受体(TLRs)的免疫作用。方法用伯氏疟原虫感染小鼠,采用RT-PCR、ELISA等方法测定TLRs的mRNA和下游炎症因子血清水平。结果小鼠感染伯氏疟原虫后TLR2、9、11的mRNA分别升高3、3.5和6倍;在感染后96h,IL-6、TNF-α及IL-12均达到峰值,分别为10 023U/ml、485pg/ml和186pg/ml;IL-18持续升高,在144h为4 225pg/ml。结论小鼠感染伯氏疟原虫后TLRs mRNA表达上调,并增强下游炎症因子的表达。     

感染旋毛虫小鼠免疫能力的性别差异研究

目的 研究感染旋毛虫早期雌雄小鼠免疫能力的性别差异。方法 不同剂量的旋毛虫感染雌雄小鼠7 d后,测定脏器指数和白细胞组成比例,脾脏和胸腺组织进行HE染色分析,ELISA法测定血清中IL-2、IL-4、IL-10的含量,流式细胞仪检测脾脏免疫调节性T细胞比例。结果 与感染旋毛虫的雌性小鼠相比,感染旋毛虫雄性小鼠的胸腺指数明显增大(t=4.595, P<0.05);淋巴细胞百分比明显下降而单核细胞和粒细胞百分比明显上升(t=2.604, P<0.05);胸腺组织变化不明显而脾脏组织变化明显;免疫调节性T细胞比例上升,但无统计学意义。血清中细胞因子的变化也存在雌雄差异,与正常小鼠相比,感染旋毛虫的雌性小鼠IL-2含量上升而雄性小鼠下降(F=5.664,P<0.05);IL-4、IL-10含量均上升(F=10.461,P<0.05;F=1.170,P>0.05),且雄性高于雌性。结论 感染旋毛虫7 d后,雄性小鼠的免疫应答强于雌性小鼠。     

广州管圆线虫感染小鼠脾脏T淋巴细胞亚群和细胞因子的变化

摘 要：目的 观察小鼠感染广州管圆线虫后脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。方法 用从褐云玛瑙螺体内检获的广州管圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠, 感染后第19d及第25d分批处死小鼠, 分离脾细胞,使用细胞内细胞因子荧光染色方法, 用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞中的T细胞亚群的含量,用双抗夹心ELISA法检测脾细胞培养上清细胞因子的浓度。结果 与对照组比较,感染小鼠脾脏CD4+、CD4+IL-4+T淋巴细胞比例显著上升,而CD4+ IL-17 +、CD4+IFN-γ+T淋巴细胞比例显著下降;脾细胞培养上清细胞因子IL-4水平明显升高,而IL-17水平明显下降。同时,感染程度和感染时间等因素也可造成脾脏T淋巴细胞亚群及其细胞因子分泌水平的变化。结论 小鼠感染广州管圆线虫后,表现以脾脏CD4+T淋巴细胞大量增殖和Th2型淋巴细胞极化为特点。     

Sj26基因转染的树突状细胞对日本血吸虫感染的免疫保护机制研究

目的 探讨日本血吸虫Sj26基因转染的树突状细胞（DC）对日本血吸虫感染的保护性免疫作用机制。 方法 BALB/c小鼠48只随机均分4组, 于小鼠耳廓分别注射细胞悬液(浓度1×10⁶/ml)0.2 ml, A组注射Sj26基因转染的DC、B组注射质粒pcDNA3转染的DC、 C组注射未处理的DC, D组注射RPMI-1640。共免疫3次，间隔2周。末次免疫后2周，每鼠经皮肤感染40±2条尾蚴。分别于免疫前、末次免疫后第 2 周以及攻击感染后第 6 周采血, ELISA法检测血清IgG抗体、γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）水平，免疫印迹法（Western blot）检测血清特异性抗Sj26 IgG抗体，双夹心ELISA法检测脾淋巴细胞经伴刀豆球蛋白A(ConA)和可溶性虫卵抗原(SEA)刺激后培养上清中IFN-γ和IL-4含量。噻唑蓝法（MTT）检测脾淋巴细胞增殖情况。 结果 A组血清IgG抗体水平(吸光度A₄₉₁值)，免疫后（A₄₉₁=0.117）显著高于免疫前（A₄₉₁=0.049）（t=2.73，P<0.05），也显著高于B组（A₄₉₁=0.061）和C组（A₄₉₁=0.058）（t值为2.48和2.56，P<0.05）。A组血清能特异识别血吸虫成虫抗原Mr 26 000蛋白。血清IL-4水平，各组免疫前、后均无明显变化。 IFN-γ水平，A组血清免疫后为（101.4±4.9)pg/ml, 明显高于免疫前的(15.0±1.9) pg/ml（t=5.80，P<0.01），亦高于免疫后的B组（40.1±3.1) pg/ml和C组（35.6±1.2) pg/ml (t值为3.98和4.13，P<0.01)。脾淋巴细胞经ConA刺激诱生的IFN-γ， A组（171.2 pg/ml）显著高于 D组（91.0 pg/ml）（t=4.25，P<0.01）。 经SEA刺激诱生的IFN-γ， A组（70.8 pg/ml）显著高于D组（49.7 pg/ml）（t=2.83，P<0.01）。经ConA刺激诱生的IL-4水平，A组（79.7 pg/ml）明显低于D组（125.2 pg/ml）（t=4.40, P<0.01）。经SEA刺激诱生的IL-4，A组（50.7 pg/ml）明显低于D组（70.5 pg/ml）（t=2.62，P<0.05）。A组脾淋巴细胞经ConA和SEA刺激后的刺激指数分别为4.1和2.82，均高于其他各组（与D组比较，t=3.20, P<0.01和t=2.15，P<0.05）。 结论 Sj26基因转染的树突状细胞免疫小鼠主要诱导Th1型免疫应答。     

小鼠急性日本血吸虫病肝脏肉芽肿动态及脾细胞IL-4 mRNA水平的相应变化

本研究观察了小鼠急性日本血吸虫病肝脏肉芽肿的动态改变及在ConA或SEA体外诱导下小鼠脾细胞IL－4mRNA水平的相应变化。实验结果显示SEA刺激下牌细胞IL－4mRNA的动态变化与肝脏内芽肿的形成、发展及调节过程密切相关。在血吸虫成虫排卵前,无论ConA或SEA均不能诱导IL－4mRNA的转录。在感染后5周,肝脏肉芽肿开始出现．此时用RT－PCR法可以检测到IL－4mRNA的特异条带。感染后8周,肉芽肿炎症反应达高峰,SEA诱导的IL-4mRNA转录水平同时增高。感染10周以后,肉芽肿体积逐渐缩小,IL－4mRNA特异条带也同时消失。提示IL-4可能在肉芽肿的形成及调节过程中起重要作用。     

白细胞介素12调节小鼠Th1/Th2的抗结核分支杆菌感染研究

目的 观察、评价白细胞介素１２（ＩＬ－１２）对结核分支杆菌感染小鼠细胞因子的影响和疗效。方法 将ＢＡＬＢ／ｃ小鼠４２只,制成小鼠结核分支杆菌感染模型,随机分为对照组（ＰＢＳ）和ＩＬ－１２共两组（２１只）。给予ＰＢＳ或ＩＬ－１２治疗,检测血清γ干扰素（ＩＮＦ－γ）、ＩＬ－４、ＩＬ－１０水平（ＥＬＩＳＡ法）和器官菌数计数,观察治疗后生存率。结果 ＩＬ－１２组小鼠无一死亡、肺、肝、脾菌落数分别为（２２７     

Th1和Th2型细胞因子对小鼠感染血吸虫的免疫保护性研究

目的 探讨Th1和Th2类细胞因子对小鼠感染血吸虫的免疫保护作用. 方法 C57BL/6小鼠48只,抽签法随机均分为4组,白细胞介素（interleukin,IL）-4组,给予IL-4 （200 ng）; IL-12组,给予IL-12 （200 ng）;胸腺基质淋巴生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）组,给予TSLP（200 ng）;生理盐水组,给予生理盐水（200μl）.4组均为腹腔注射,每周3次,持续注射8周.给药后2周,各组小鼠经皮攻击感染日本血吸虫尾蚴（40±2）条/鼠,感染后第3、6周剖杀,计算各组小鼠虫荷数、肝脏卵荷数.芯片检测各组小鼠感染前和感染后不同时间点血清中IL-5、IL-10、γ-干扰素（interferon-γ,IFN-γ）及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的动态变化.观察小鼠肝、脾的病理变化. 结果 细胞因子注射的第8周,IL-4组的Th2类细因子IL-5、IL-10依次为161.97、65.47 μg/ml; TSLP组的IL-5、IL-10依次为132.72、77.18 μg/ml; IL-12组的IL-5、IL-10依次为87.15、12.29 μg/ml;生理盐水组的IL-5、IL-10依次为188.92、167.52 μg/ml.IL-4和TSLP组Th2类细胞因子水平均高于IL-12组,但低于生理盐水组.IL-12组IFN-γ、TNF-α依次为165.7、23.64 μg/ml,水平高于其它各组.感染后3周IL-4、IL-12、TSLP、生理盐水组虫荷数依次为（9.50±4.51）、（12.83±2.32）、（6.75±2.87）、（9.80±3.03）条;感染后6周上述各组虫荷数依次为（18.83±5.91）、（24.80±9.42）、（21.67±3.67）、（17.67±6.74）条,每克肝组织虫卵数依次为（58 286.98±25 351.60）、（80 460.18±35 542.66）、（54 579.56±16 399.21）、（41 094.92±25 598.27）.与生理盐水组相比,各实验组虫荷数与每克肝组织虫卵数差异均无统计学意义.感染后第3周,IL-4、IL-12、TSLP、生理盐水组脾指数依次为（0.010±0.002）、（0.011±0.002）、（0.009±0.001）、（0.007 ±0.001）,各实验组与生理盐水组相比,差异均有统计学意义（t=3.158、5.076、6.204,P＜0.05）.感染后第6?     

Mechanisms of eosinophilia in Toxocara canis infected mice: In vitro production of interleukin 5 by lung cells of both normal and congenitally athymic nude mice

Mechanisms of eosinophilia were compared between in vitro bone marrow cell cultures of congenitally athymic (nu/nu) mice and their heterozygous littermates (nu/+). Cultures of 5 × 10⁴ bone marrow cells using interleukin 3 (IL-3), IL-5 and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor showed that nu/nu and nu/+ mice mimicked each other in eosinophil production both before and after infection with Toxocara canis. Eosinophil differentiating activity (EDA) was detected in media conditioned by spleen cells and lungs of T. canis infected nu/+ mice, although nu/nu mice showed EDA only in lung-conditioned medium. EDA, detected both in infected nu/nu and nu/+ mice, was inhibited by an anti-IL-5 monoclonal antibody. These results indicate that IL-5 may be produced by lung cells of both nu/nu and nu/+ mice as well as by spleen cells of nu/+ mice infected with T. canis, which is the reason why nu/nu mice infected with T. canis exhibit blood eosinophilia.     

Modulation of T-cell responsiveness during Trypanosoma cruzi infection: analysis in different lymphoid compartments

Spleen and lymph node cells of Trypanosoma cruzi-infected mice were studied for mitogen-induced responsiveness in terms of proliferation and lymphokine production (IL-2, IFN-gamma). Splenocyte (SP) as well as lymph node cell (LN) proliferation and IL-2 production were depressed during the acute phase of the infection. Proliferative capacity of LN cells recovered completely and that of SP partially during the chronic phase. In contrast to these suppressive effects, the mitogen-induced IFN-gamma response was enhanced. In vitro co-incubation of normal SP or LN cells with trypomastigotes resulted in a reduced mitogen-induced cell proliferation and IL-2 secretion, similar to those seen with cells taken from infected mice. In contrast, trypomastigotes exerted a stimulatory activity on the mitogen-induced IFN-gamma response of both SP and LN cells. Addition of lymph node cells from T. cruzi-infected mice (LN-I) to lymph node cells of control mice (LN-C) suppressed strongly the mitogen-induced responsiveness of such cocultures. A marginal level of suppression was recorded in cocultures of spleen cells from infected mice (SP-I) and control spleen cells (SP-C). The potent suppressive cells within LN-I populations were identified as macrophage-like and such cells were absent in SP-C and peritoneal exudate cells from T. cruzi infected animals.     

大蒜素对白色念珠菌感染小鼠肾上腺功能调节作用的研究

目的探讨大蒜素对白色念珠菌感染小鼠肾上腺功能的调节作用。方法将小鼠随机分为3组:健康对照组、模型组和大蒜素组。模型组、大蒜素组分别建立小鼠白色念珠菌感染模型。大蒜素组小鼠给予大蒜素灌胃,其余组给予等量生理盐水。连续用药14d后,采血,测定血浆促肾上腺激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量;取左侧肾上腺,称重,测定肾上腺指数。结果健康对照组ACTH、CORT和肾上腺指数分别为(21.09±3.08)pg/ml、(14.05±2.66)ng/ml和(0.15±0.02)mg/g,模型组和大蒜素组分别为(32.85±3.93)pg/ml、(24.63±4.18)ng/ml、(0.32±0.07)mg/g和(25.15±3.55)pg/ml、(19.03±2.25)ng/ml、(0.19±0.04)mg/g。大蒜素组小鼠血浆ACTH、CORT含量及肾上腺指数与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大蒜素对白色念珠菌感染小鼠肾上腺功能具有调节作用。