Fas/Fas-L在幼鼠肠缺血再灌注损伤下免疫器官凋亡中的作用

目的 探讨幼鼠肠缺血再灌注下免疫器官凋亡的发生机制，加深认识临床上免疫抑制状态的病理生理机制。方法 免疫组化检测Fas、Fas—L蛋白的表达。结果 免疫组化结果；胸腺内存在Fas／Fas—L蛋白的表达，但蛋白量少；脾脏Fas蛋白明显高于Fas—L,Fas在脾脏主要在脾窦内巨噬细胞、淋巴小结周围淋巴细胞膜和细胞浆内表达，且以巨噬细胞为主；淋巴结Fas—L蛋白表达高于Fas，Fas—L在淋巴结主要在髓窦内巨噬细胞、淋巴小结周围淋巴细胞膜和细胞浆内表达，且以巨噬细胞为主。结论 (1)在幼鼠肠缺血再灌注早期，脾主要以增加Fas的表达引发凋亡。(2)在幼鼠肠缺血再灌注早期，肠系膜淋巴结主要以增加Fas—L的表达引发凋亡。(3)在幼鼠肠缺血再灌注早期，可能通过影响外周免疫器官巨噬细胞及淋巴细胞的凋亡，影响免疫功能状态。     

肠缺血再灌注时肿瘤坏死因子免疫组织化学研究

目的　探讨肠缺血 /再灌注时肿瘤坏死因子 (tumornecrosisfactorα,TNF α)的来源及作用。方法　① 4 8只雄性Wistar大白鼠体重 (130± 15 ) g ,分成 6组 (n =8) ,假手术组 ,缺血 30min组 ;缺血 30min ,再灌注组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组 ;缺血 30min ,再灌注 90min组 ;缺血 12 0min组 ;②利用免疫组织化学技术检测肠、肝组织TNF α蛋白表达和分布。③对肠组织进行HE染色。结果　①肠粘膜免疫组化于缺血 130组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组 ;缺血 30min ,再灌注 90min组时可见TNF α强阳性物质 ,缺血 30min ,再灌注 90min组 ;可见极强阳性物质 ;②缺血 30min ,再灌注 30min组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组肝组织内可见阳性物质 ,缺血 30min ,再灌注 90min组 ;为强阳性物质 ;③肠组织HE染色显示I30’G肠粘膜轻度受损 ,缺血 30min ,用灌注 30min组 ;缺血 30min ,再灌注 6 0min组 ;缺血 30min ,再灌注 90min组肠粘膜中度受损 ,再灌注 12 0min组肠粘膜重度受损。结论　幼鼠肠缺血 /再灌注后TNF α在肠、肝内均有阳性反应 ,但肠粘膜内TNF α较肝内明显 ,因此推论幼鼠肠缺血 /再灌注损伤早期TNF α可能主要来源于肠组织 ,并且介导幼鼠肠缺血 /再灌注损伤的病理过程     

大鼠肠缺血-再灌注损伤中Fas表达与肺损伤

肠缺血-再灌注损伤不仅造成肠道本身损伤,而且肠道细菌和毒素刺激相关免疫细胞和分子释放,造成肺等脏器损伤进而引起多器官功能障碍综合征(MODs)^[1,2]。本实验通过观察大鼠肠缺血-再灌注损伤后,外周血、脾脏单个核细胞Fas表达的规律,探讨Fas与肺组织损伤的关系。     

白藜芦醇对大鼠肠缺血再灌注致肠黏膜通透性改变的影响

目的 探讨白藜芦醇(RES)对肠缺血再灌注致肠黏膜损伤大鼠的保护作用及其可能机制.方法 成年雄性SD大鼠24只随机分为假手术组、缺血再灌注损伤组、RES治疗组.假手术组仅分离肠系膜上动脉(SMA)而根部不夹闭.肠缺血再灌注损伤组和RES治疗组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部,分别立即经阴茎背静脉注射9g·L-1盐水、RES( 20 mg·kg-1),45 min后放松血管夹形成再灌注.各组大鼠均于制模后6h采集静脉血和回肠标本.检测血清二胺氧化酶(DAO)及小肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)水平,应用原位末端转移酶标记法检测肠黏膜上皮细胞凋亡率,HE染色法观察肠组织病理损伤情况.结果 肠缺血再灌注6h后,RES治疗组DAO及IFABP水平与肠缺血再灌注损伤组比较显著减少[DAO:(1 650±1 150)U·L-1vs(2920±1 520)U·L-1;IFABP:(845.12±123.86) μg·L-1vs(1 443.76±174.62) μg·L-1,Pa＜0.05],但二组较假手术组[(630±150)U·L-1,(26.76±4.86)μg·L-1)]均显著增加(Pa＜0.05).假手术组大鼠肠绒毛顶部、固有层和黏膜下层只有少量散在分布的凋亡细胞,缺血再灌注损伤组大鼠肠黏膜凋亡阳性细胞数量较假手术组明显增加[(66.63±1.71)％ vs (9.60±1.76)％,P＜0.05],分布范围从绒毛顶部扩大到中、底部,固有层和黏膜下层,细胞凋亡亦明显加重;RES组大鼠肠黏膜细胞凋亡率[(46.72±1.50)％]明显低于缺血再灌注损伤组(P＜0.05).结论 RES对肠缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与其抑制肠黏膜上皮细胞凋亡有关.     

肠三叶因子对炎症性肠病小鼠细胞凋亡的调节机制

目的 探讨肠三叶因子(ITF)对小鼠炎症性肠病(IBD)肠上皮细胞及脾淋巴细胞凋亡的调节作用,分析ITF对IBD的保护作用机制.方法 48只小鼠随机分为3组(n=16):三硝基苯磺酸(TNBS)组,用TNBS建立IBD模型后每只小鼠给予9 g·L-1盐水0.1 Ml腹腔注射;基因重组肠三叶因子(Ritf)组,建立IBD模型后每只小鼠给以Ritf 0.1 Ml腹腔注射;乙醇对照组,未造模型小鼠每只给予9 g·L-1盐水0.1 Ml腹腔注射.各组均连续5 d注射,第6天评估疾病活动度指数(DAI),处死动物后取其结肠组织及脾脏组织,测定其结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性、应用原位末端标记试剂盒及流式细胞技术检测其肠上皮细胞、脾淋巴细胞凋亡情况及脾淋巴细胞Fas表达情况.结果 与TNBS组小鼠相比,Ritf组小鼠在死亡只数、大便性状、血便情况、体质量下降情况等临床症状及肠道局部炎症均明显减轻,MPO值显著降低(P＜0.05),肠上皮细胞凋亡指数显著下降(P＜0.01);乙醇对照组IBD小鼠脾淋巴细胞的凋亡明显不足,且Fas表达下调,但TNBS组与Ritf组间凋亡率无显著性差异.结论 ITF对IBD小鼠具有保护作用,并且可能通过调节IBD小鼠肠上皮细胞凋亡水平保护肠上皮细胞,但ITF对脾淋巴细胞的凋亡无调节作用.     

白藜芦醇对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨白藜芦醇(resveratro1,RES)对实验性大鼠肠缺血再灌注肠黏膜损伤的保护作用.方法 24只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(SO)、缺血再灌注损伤组(I/R)、RES治疗组.SO组仅分离肠系膜上动脉(SMA)根部而不夹闭.肠缺血再灌注损伤组(I/R)和RES治疗组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部后分别立即经阴茎背静脉注射生理盐水、RES(20 mg/kg),45 min之后放松血管夹形成再灌注.各组大鼠均于制模后6 h采集标本.检测血清和回肠组织中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡率,并观察肠黏膜病理变化.结果 小肠缺血再灌注后,血清及小肠组织中反映氧化损伤程度的MDA明显升高,SOD则明显减少,小肠黏膜上皮细胞凋亡,应用RES后能显著改善上述改变.结论 白藜芦醇对肠缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与通过抗氧化作用及抑制肠黏膜上皮细胞凋亡有关.

Abstract：

Objective To study the protective effects of resveratrol (RES) on intestinal ischemia-reperfusion injury in rats.Methods Twenty-four SD rats were randomly divided into the sham operation group,intestinal ischemia-reperfusion injury (I/R) group and resveratrol treated (RES) group.The intestinal ischemia injury was induced by superior mesenteric artery occlusion for 45 minutes,and then the blood supply to the intestine was restored to cause reperfusion injury.After 6 hours' reperfusion,the rats were sacrificed and intestine was collected.Of the RES group,the rats were subjected to I/R injury,and treated with 20 mg/kg resveratrol by intravenous injection immediately after the mesenteric artery was clamped.Superoxide Dismutase (SOD) and Malonaldehyde (MDA) levels in serum and intestine were measured.Apoptotic intestinal epithelial cells were detected by TUNEL methods.The histological injury of the intestine was also examined.Results Compared with the sham operated rats,MDA levels in the serum and intestine as well as the apoptotic epithelial cells were significantly increased in the rats subjected to I/R (MDA in serum and intestine 4.63±0.53 vs 1.32±0.40;8.60± 0.98 vs 4.13±0.86,P＜0.01;apoptotic index 66.63 ± 1.71 vs 46.72 ± 1.50,P＜0.01 ).However,the SOD levels in the serum and intestine were decreased (49.21±4.38 vs 86.65±6.14;351.03 ± 21.46 vs 468.93 ± 16.21,P＜0.01).In the rats subjected to I/R injury but received resveratrol treatment,the epithelial cells apoptosis and MDA levels in serum and intestine were decreased,and SOD levels in serum and intestine increased (P＜0.05).Conclusions Resveratrol protects intestine from ischemia-reperfusion injury in rats.     

促肝细胞生长素对大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡的干预

目的探讨促肝细胞生长素（pHGF）对肾缺血再灌注损伤（IRI）大鼠肾功能及‘肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法雄性Sprague—Dawley大鼠32只，随机分为假手术组（组I）、缺血再灌注组（组Ⅱ）、缺血再灌注前pHGF干预组（组Ⅲ）和缺血再灌注后pHGF干预组（组Ⅳ）。采用无损伤动脉夹钳夹大鼠双侧肾蒂45min，制作肾IRI模型。组I和组Ⅱ腹腔注射等量9g／L盐水（0．8mL），组Ⅲ和组Ⅳ分别在术前和术后腹腔注射pHGF 50mg／kg。于IRI 12 h股动脉采血，处死动物后迅速摘取其左侧肾脏。采用酶法检测血清肌酐（Scr），采用肾组织原位细胞凋亡标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡。结果组Ⅱ血清Scr水平（120．850±22．237）μmol／L明显高于组I（22．775±6．508）μmol／L（P〈0．01），组Ⅲ（60．413±10．197）μmol／L和组Ⅳ（69．40±11．443）μmol／L表达水平均明显较组Ⅱ下降（Pa〈0．01）。组Ⅱ肾脏凋亡阳性细胞的表达（26．850±1．476）较组I（0．90±0．385）明显升高（P〈0．01），组Ⅲ（8．30±1．146）和组Ⅳ（9．0±0．869）均较组Ⅱ显著下调（Pa〈0．01）。组Ⅲ和组Ⅳ间各项值比较差异均无显著性差异（Pa〉0．05）。结论pHGF能显著降低肾缺血再灌注损伤大鼠血清Scr水平，显著抑制其肾小管上皮细胞凋亡，对缺血性急性肾衰竭既有保护又有治疗作用。     

黄芪对幼兔缺血再灌注后肠黏膜细胞凋亡的影响及对肠黏膜屏障的保护

目的 研究黄芪对幼兔肠缺血再灌注后肠黏膜细胞凋亡的影响及肠黏膜屏障的保护作用.方法 雄性幼兔20只,分假手术组、肠缺血再灌注组(模型组)、黄芪组、生理盐水组(对照组);黄芪组在手术前7天予黄芪腹腔注射6 mg/(kg·d),对照组每天予等量生理盐水.在手术时制作肠缺血再灌注模型,观察小肠组织及血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、肠黏膜细胞凋亡指数、肠黏膜形态损伤情况及黄芪对其改变的影响.结果 肠缺血再灌注后血浆及小肠组织SOD活性明显降低,肠黏膜细胞凋亡指数明显增加,小肠黏膜形态及肠黏膜屏障功能损害加重,黄芪能显著改善上述改变.结论 黄芪对幼兔肠缺血再灌注肠黏膜屏障损伤有明显的保护作用.     

谷氨酰胺强化肠内营养对炎症性肠病幼鼠模型结肠黏膜细胞凋亡作用的研究

目的 探讨谷氨酰胺强化肠内营养对炎症性肠病（IBD）幼鼠模型肠黏膜细胞凋亡的调控及促进黏膜愈合的作用。方法 将80只4~5周龄Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为空白对照组、IBD模型组、短肽组和短肽+谷氨酰胺（Gln）组,每组20只。采用一次性结肠灌注三硝基苯磺酸建立IBD模型,造模3 d后,短肽组给予短肽制剂（100 mL/kg）,短肽+Gln组给予短肽制剂（100 mL/kg）+Gln（0.5 g/kg）,干预1周。实验结束后观察幼鼠的一般情况,并留取肠黏膜,苏木素-伊红（HE）染色观察肠黏膜组织病理情况;RTPCR法检测肠黏膜凋亡调控基因（bax、bcl-2）及凋亡信号转导因子（Caspase-3、Caspase-9）的表达;Westernblot法检测结肠黏膜IGF-1表达水平。结果 IBD模型组一般情况均较其他组差,短肽+Gln组一般情况优于IBD模型组和短肽组。模型组bax mRNA表达水平高于空白对照组、短肽组和短肽+Gln组（P < 0.05）;bcl-2、Caspase-3、Caspase-9 mRNA水平在各组比较差异均无统计学意义（P > 0.05）。短肽组IGF-1水平明显高于短肽+Gln组、空白对照组及IBD模型组（P < 0.05）。结论 Gln强化肠内营养能有效改善IBD模型幼鼠的一般营养状况,但在抑制结肠黏膜细胞凋亡及刺激结肠黏膜IGF-1合成方面并未优于专一肠内营养。     

褪黑素在脂多糖致幼鼠脑损伤中的保护作用

目的 探讨褪黑素(MT)在不同时间点对脂多糖(LPS)致幼鼠脑损伤中的保护作用及意义.方法 160只1月龄Spragne-Dawley幼鼠(100-120 g)随机分为4组:LPS组、对照组、MT提前15 min给药组(A组)和MTO h给药组(B组).每组40只,各组均按观察时间分为24、48 h 2个时间点,各时间点20只,均有10只不注射伊文思蓝(EB),待观察至相应时间点采用免疫组织化学方法检测各组幼鼠脑组织神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞的凋亡阳性细胞数,余幼鼠于相应时间点经右颈外静脉近心端注入EB,采用甲酰胺法测定相应时间点脑组织中EB水平.结果 各组幼鼠脑组织24、48 h NSE阳性区面积、凋亡阳性区面积及EB水平比较,差异均有统计学意义(F=705.44,369.96,1 719.05,890.55,1041.46,219.06 Pa<0.01).A、B组幼鼠脑组织24、48 h NSE阳性区面积、凋亡阳性区面积及EB水平比较,差异均无统计学意义(t=0.474,0.588,0.842,0.855,0.732,0.90 Pa>0.05).结论 LPS可诱导幼鼠脑组织神经细胞凋亡;MT可抑制脑组织凋亡阳性细胞表达,具有显著的抗凋亡作用.实用儿科临床杂志,2009,24 (10):777-779     

重组白细胞介素17F对肺炎支原体感染小鼠体内防御素β-2及巨噬细胞炎性蛋白表达的影响

目的观察重组白细胞介素17F(rIL-17F)对肺炎支原体(MP)感染小鼠体内防御素β-2(Defb-2)及巨噬细胞炎性蛋白(MIP)表达的影响,探讨rIL-17F防御MP感染的相关机制。方法 SPF级BALB/c小鼠随机分为感染组、干预组和对照组,以鼻腔接种的方式建立MP感染模型,以鼻腔黏膜免疫方式进行rIL-17F干预。采用荧光定量PCR法检测其肺组织Defb-2、MIP-1α、MIP-2βmRNA的表达水平,ELISA法检测其肺泡灌洗液(BALF)、脾脏及纵隔淋巴结细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4、IFN-γ水平。结果 1.干预组MP菌落计数明显低于感染组,BALF中白细胞总数及中性粒细胞、巨噬细胞计数明显高于感染组,差异均有统计学意义。对照组无菌落生长。感染组BALF中白细胞总数及中性粒细胞、巨噬细胞计数明显高于对照组,差异均有统计学意义。2.干预组肺组织Defb-2、MIP-1α和MIP-2βmRNA表达水平均明显高于感染组,差异有统计学意义。3.干预组与感染组比较,MIP-1α水平在纵隔淋巴结细胞培养上清中明显升高,MIP-2β水平在BALF和纵隔淋巴结细胞培养上清中明显升高,差异均有统计学意义;IL-4水平在BALF中明显降低,在脾细胞培养上清中则明显升高,差异均有统计学意义;IFN-γ水平在脾细胞培养上清中明显升高,差异有统计学意义。感染组与对照组比较,MIP-1α水平在脾细胞及纵隔淋巴结细胞培养上清中均明显升高,差异有统计学意义;MIP-2β水平两组之间无显著差异;IL-4水平在BALF及脾细胞培养上清中均明显升高,差异有统计学意义;IFN-γ水平在BALF中明显升高,差异有统计学意义。结论 rIL-17F能促进Defb-2及MIP等炎性因子的表达,调节Th1/Th2平衡,增加感染部位中性粒细胞和巨噬细胞等炎性细胞的聚集,提高MP清除率,增强机体抗感染能力。     

二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞凋亡及其对Fas、FasL及caspase-8表达的影响

目的：探讨二烯丙基二硫（DADS）诱导白血病 K562 细胞凋亡的作用及其机制。方法：采用 Hoechst 33258 染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术分析不同浓度及不同作用时间 DADS 对 K562 细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR法检测DADS作用48 h后 Fas、FasL、caspase-8 mRNA的表达。结果：DADS可诱导K562 细胞凋亡。DADS(作用细胞24 h)浓度从10 mg/L增至40 mg/L时,其对K562细胞的凋亡率由（11.60±0.83）%增至（37.94±0.87）%;DADS(40 mg/L浓度组)作用时间从24 h增至72 h,其对K562细胞的凋亡率由（37.94±0.87）% 增至（47.02±0.66）%,各实验组随时间、浓度增加凋亡率明显增加 (P<0.05)。DADS作用48 h后,Fas、caspase-8 mRNA 表达水平较对照组上调;FasL mRNA 较对照组下调（P＜0.05）。结论：DADS 呈时间和浓度依赖性诱导白血病K562 细胞凋亡,其凋亡机制可能与上调 Fas、caspase-8,下调 FasL有关。     

钙敏感受体对乳鼠心肌细胞凋亡的诱导作用

探讨在缺氧/复氧所诱导乳鼠心肌细胞凋亡中,钙敏感受体（calcium - sensing receptor,CaSR）对Fas/Fas配体（Fas L）途径的影响。方法对8只2日龄Wistar大鼠心肌细胞进行原代培养,后随机分为三组：(1)对照组：细胞不经缺氧/复氧处理,在其他组复氧开始时培养基内加入与用药组等体积的生理盐水;(2)缺氧/复氧组：心室肌细胞缺氧2h/复氧24h,细胞培养基内于复氧开始时加入与用药组等体积的生理盐水;(3) CaSR激动剂氯化钆(GdCl3)组：细胞培养基内于复氧开始时加入300μmol/L CaSR激动剂GdCl3。流式细胞仪分析细胞凋亡率,透射电镜观察细胞超微结构,蛋白印迹法检测CaSR、Fas和FasL蛋白的表达。结果流式细胞仪检测显示,缺氧/复氧组心肌细胞凋亡为12.18％±1.54％,与对照组相比,心肌细胞凋亡明显增加(P＜0.01)。CaSR激动剂GdCl3使心肌细胞凋亡进一步增加至20.25％±2.87％ (P＜0.01)。透射电镜下可见线粒体絮状变、线粒体嵴溶解、空泡样变;CaSR激动剂使CaSR、Fas和FasL表达进一步上调,明显高于缺氧/复氧组(P＜0.05)。结论CaSR激活参与了缺氧/复氧所诱导的乳鼠心肌细胞凋亡,CaSR可通过激活Fas/FasL死亡受体途径导致乳鼠心肌细胞凋亡。     

急性缺氧性肺动脉高压兔心肌细胞凋亡和相关基因的表达

目的探讨急性缺氧性肺动脉高压(PAH)兔模型心肌组织的细胞凋亡,以及基因bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3在左室心肌细胞中的表达。方法采用呼吸机建立急性缺氧肺动脉高压兔模型,分为对照组(n=10)和缺氧PAH组(n=20),采用TUNEL标记法检测兔模型心肌组织中的凋亡细胞,并运用免疫组化及原位分子杂交技术研究基因bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3在左室心肌细胞中的表达。结果缺氧PAH组左室心肌细胞凋亡指数为(17±3),明显高于对照组(2±0.3);缺氧PAH组左室心肌Bax、Fas、FasL和Caspase-3蛋白和mRNA表达显著上调,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01),缺氧PAH组左室心肌bcl-2蛋白和mRNA表达呈弱阳性。结论细胞凋亡参与了急性缺氧肺动脉高压的发生及发展,急性缺氧性PAH发生后,促凋亡基因和抑制凋亡基因的表达在左心室的平衡被打破。     

1,25(OH)2D3对载脂蛋白E缺乏鼠主动脉内皮细胞增生与凋亡及一氧化氮合酶表达的影响

目的 了解1,25(OH)2D3对载脂蛋白E缺乏鼠(apoE-/-)主动脉内皮细胞(EC)增生、凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响.方法 apoE-/-鼠主动脉EC分离培养,MTT法观察1,25(OH)2D3影响apoE-/-鼠EC生长,TUNEL检测细胞凋亡,RT-PCR检测Bc1-2、Fas mRNA和eNOS mRNA表达.结果 细胞对照组与无水乙醇对照组EC增生率差异无统计学意义[(0.162±0.031)vs.(0.158±0.006),p＞0.05],1,25(OH)2D3在10-4、10-5、10-6、10-7、10-8 mol/L时EC增生率高于对照组(P＜0.01),但不同浓度1,25( OH)2D3作用组之间差异无统计学意义[分别为(0.189±0.013)、(0.285±0.011)、(0.296±0.026)、(0.284±0.017)、(0.233±0.010),P ＞0.05],选定10-6mol/L 1,25(OH)2D3为研究浓度,干预分离培养apoE-/-鼠主动脉EC.1,25( OH)2D310-6mol/L组、细胞对照组、无水乙醇对照组凋亡指数分别为(15.14±3.19)、(18.94 ±4.22)、(19.27±4.58),Bcl-2 mRNA分别为(0.78±0.16)、(0.46±0.21)、(0.42±0.17),Fas mRNA分别为(0.43±0.12)、(0.79±0.21)、(0.81±0.20),eNOS mRNA分别为(0.56±0.16)、(0.39±0.13)、(0.35±0.11).25(OH)2D3干预组EC凋亡指数、Fas mRNA、eNOS mRNA降低,Bcl-2 mRNA增高(P均＜0.01),细胞对照组与无水乙醇对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).相关分析发现在1,25(OH)2D3干预组,eNOS表达量与凋亡指数、Fas mRNA呈负相关(r=-0.676、-0.758),与Bcl-2表达呈正相关(r =0.762),差异有统计学意义(P均＜0.01).结论 1,25(OH)2D3刺激apoE-/-鼠主动脉EC增生、抑制主动脉EC凋亡,影响凋亡相关基因Bcl-2、Fas mRNA表达,上调eNOS mRNA表达.     

缺氧及肺动脉高压患儿左心室心肌细胞凋亡及凋亡相关基因的表达

目的研究慢性缺氧性疾病及肺动脉高压(PAH)患儿左心室心肌细胞凋亡及相关基因的表达。方法以因缺氧性疾病而死亡的新生儿为研究对象,以交通意外死亡儿童为正常对照组。慢性缺氧性疾病患儿入院后多普勒超声测肺动脉收缩压(PASP)和肺动脉平均压,根据PASP分为单纯缺氧组和缺氧-PAH组(PASP>4.0 kPa为PAH)。患儿死亡后取左心室心肌组织采用Tunnel末端标记法检测细胞凋亡指数,用原位杂交法及SP免疫组化法测定Fas、FasL、bax、bcl-2、caspase-3凋亡相关基因的mRNA和蛋白表达。结果(1)单纯缺氧组和缺氧-PAH组心肌细胞凋亡指数高于正常对照组(P<0.01),但单纯缺氧组和缺氧-PAH组之间无差异;(2)缺氧组和缺氧-PAH组心肌细胞Fas、FasL、bax、caspase-3的mRNA和蛋白表达均高于正常对照组(P均<0.01),bcl-2的mRNA和蛋白表达稍高于对照组,但无统计学意义;各基因mRNA和蛋白表达在单纯缺氧组和缺氧-PAH组之间无差异;(3)缺氧-PAH组PASP与心肌细胞凋亡指数呈正相关(r=0.478,P<0.05)。结论各种小儿疾病所致缺氧可致左心室心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达改变,PAH可致凋亡加重。     

细胞色素C对HL-60细胞促凋亡作用及其与相关凋亡基因的研究

目的 　探讨细胞色素C在体外作用于HL - 6 0细胞时细胞发生效应及其相关凋亡基因的表达变化的机制。方法 　用不同浓度的细胞色素C作用于HL - 6 0细胞 2 4小时 ,然后应用光镜、荧光显微镜检测HL - 6 0细胞形态的变化 ;用流式细胞仪、DNA凝胶电泳对HL - 6 0细胞凋亡进行检测 ;用RT -PCR检测Bcl- 2、Fas基因表达的变化。结果 　当细胞色素C浓度在 0～ 37.5mg L作用HL - 6 0细胞 2 4小时 ,细胞发生的凋亡逐渐增加 ,可见典型的凋亡细胞和明显的DNA梯度 ;同时 ,在该浓度范围内 ,Bcl- 2表达逐渐减少 ,而Fas表达逐渐增加 ;当细胞色素C浓度大于 37 5mg L时 ,细胞凋亡率并不增加 ,而是下降 ,且出现细胞坏死。结论 　一定浓度细胞色素C能诱导HL - 6 0细胞发生凋亡 ,并且细胞凋亡率、Bcl- 2、FAS基因表达的变化与细胞色素C浓度呈一定的量效依赖关系 ,细胞色素C诱导HL - 6 0细胞凋亡可能与抑制Bcl- 2基因的表达和激活Fas基因的表达有一定的关系。     

贝那普利减轻肾小球硬化机制及与肾脏细胞凋亡关系的研究

目的　探讨血管紧张素转化酶抑制剂 (ACEI)减轻肾小球硬化的机制。方法　单侧肾切除大鼠加阿霉素注射诱导肾硬化模型 ,治疗组每日予贝那普利 6mg/kg灌胃一次 ,共 12周。采用TUNEL法检测肾脏细胞凋亡 ,免疫组化法检测肾组织Fas和FasL表达 ,病理分析软件进行量化分析。结果　模型组较对照组肾小球硬化明显 ,肾实质凋亡细胞数显著增多 ,Fas和FasL表达亦明显增强 ;贝那普利治疗组肾小球硬化较模型组明显减轻 ,肾细胞凋亡数显著较少 ,Fas和FasL表达亦减弱。结论　ACEI可能通过降低凋亡相关蛋白Fas及FasL在肾组织表达而抑制肾脏细胞过度凋亡 ,从而发挥其延缓肾小球硬化的作用     

Fas/FasL在再生障碍性贫血患儿中的表达及意义

目的研究凋亡基因Fas及其配体(FasL)在儿童再生障碍性贫血(AA)中的表达及意义,探讨AA的发病机制。方法30例AA患儿分为重型再生障碍性贫血(SAA)组12例,慢性型再生障碍性贫血(CAA)组18例,对照组为健康体检儿童10例。采用流式细胞术结合单克隆抗体荧光染色的方法测定AA患儿Fas/FasL表达水平及CD34 细胞数量。比较各组间表达差别。结果AA患儿Fas表达水平显著高于健康对照组(P<0.05),但SAA与CAA组Fas表达水平无差别(P>0.05);FasL表达水平在AA和健康对照组比较无差异(P>0.05)。CD34 细胞数量AA组明显低于健康对照组(P<0.05)。结论Fas/FasL系统参与诱导AACD34 细胞凋亡过程,导致造血干细胞减少,骨髓造血衰竭。     

缬沙坦对阿霉素肾病肾硬化大鼠细胞凋亡及Fas和FasL表达的影响(英文)

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(AT1RA)缬沙坦对阿霉素肾病肾硬化大鼠肾脏细胞凋亡及凋亡相关蛋白的影响。方法：36只SD大鼠随机分为模型组、治疗组和对照组。大鼠单侧肾切除加阿霉素注射诱导阿霉素肾病肾硬化模型。治疗组每日予缬沙坦(20 mg/kg)灌胃1次,共12周。对照组和模型组每日用等量生理盐水灌胃。采用TUNEL法检测肾脏细胞凋亡情况,计算出肾小球凋亡指数(GAI)和肾小管凋亡指数(TAI)。免疫组化法检测肾组织Fas和FasL表达。光镜下观察肾组织病理改变,并计算肾小球硬化指数(GSI)。结果：模型组较对照组肾小球硬化明显,GSI高于对照组(P<0.01);而治谱镚SI较模型组降低,但仍高于对照组(P<0.01)。模型组和治疗组GAI和TAI较对照组显著增高(P<0.01);而治疗组GAI和TAI均低于模型组(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.01)。模型组和治疗组的Fas和FasL表达较对照组亦明显增强(P<0.01),其中治疗组低于模型组(P<0.01)。 结论：AT1RA缬沙坦可能通过降低凋亡相关蛋白Fas及FasL在肾组织表达而抑制肾脏细胞过度凋亡,从而发挥其延缓肾小球硬化的作用。