PTEN与基质金属蛋白酶在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨PTEN与基质金属蛋白酶(MMP)在胃癌组织中的表达、相互关系及意义。方法:应用免疫组化SP技术检测80例胃癌组织中PTEN、MMP2和MMP9表达,同时检测20例正常对照组胃粘膜中PTEN表达。结果:胃癌组织中PTEN高表达率35／80(43.8％)显著低于对照组20／20(100. 0％)(P<0.01);PTEN表达与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期显著相关;胃癌组织中 MMP2、MMP9阳性表达率分别为41／80(51.3％)、29／80(36．3％),与胃癌浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期显著相关;PTEN与MMP2、MMP9表达显著负相关,与病人预后相关,Kaplan-Meier生存曲线分析显示PTEN高表达者术后累计生存率显著高于低表达者,PTEN高表达者术后3年、5年生存率显著高于低表达者;MMP2、MMP9阳性表达者术后累计生存率显著低于阴性表达者,MMP2、MMP9阳性表达者术后3年、5年生存率显著低于阴性表达者。结论:胃癌组织中PTEN表达显著减少,PTEN 与MMP2、MMP9表达显著负相关,PTEN可能通过调控胃癌组织MMP2、MMP9表达,抑制胃癌的浸润和转移,影响病人的预后。     

胃癌分期的临床应用

胃癌治疗多趋向采用多方案措施，其中涉及手术切除，化疗，放疗和分子生物学免疫治疗等等，尤以手术切除而论就有多种术式。为了长期随访和对比各组的治疗效果，必须要有统一的胃癌分期标准，现用的ＴＮＭ分期法尚有不足之处，本文介绍各种改良方案，可供临床参考。     

星形细胞瘤PTEN基因突变或缺失与血管形成的关系

目的研究星形细胞瘤PTEN基因功能状态及其与血管形成的关系.方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性电泳分析(PCR-SSCP)结合银染技术和双重PCR检测10例正常脑组织、10例脑膜瘤和62例星形细胞瘤PTEN基因第5外显子点突变与基因缺失情况;选用CD34作为肿瘤微血管标记物,测定星形细胞瘤微血管密度(MVD).结果星形细胞瘤PTEN基因点突变率和缺失率分别为11.29%(7/62)和41.94%(26/62);PTEN基因缺失和突变在不同分级星形细胞瘤间的差异均有非常显著性(P＜0.001).MVD与PTEN基因异常改变呈显著正相关(r=0.701,P＜0.001).结论 PTEN基因缺失和/或突变可能在星形细胞瘤恶性进展和血管形成中发挥重要作用.     

PTEN基因对人胃癌细胞SGC-7901的生物学效应

目的 研究PFEN基因对人胃癌细胞SGC-7901增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法 将携带有PTEN基因的真核表达载体pBabe-Puro-PTEN以及pBabe-Puro，以脂质体介导的基因转染方法转入SGC-7901细胞系中，嘌呤霉素筛选获得稳定表达PTEN基因的转染细胞，通过细胞活力实验、流式细胞仪和DNA凝胶电泳，观察PTEN基因对SGC-7901细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果 稳定转染PTEN基因的SGC-7901细胞中PTEN蛋白稳定表达，转染PTEN基因的SGC-7901细胞生长速度较对照组明显减慢。流式细胞仪显示，细胞周期发生G1期阻滞。转染PTEN的细胞在透射电镜下可出现典型的凋亡形态学的改变；细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞特有的“梯状”条带，而对照组没有出现。结论 外源性PTEN基因导入SGC-7901细胞后，可引起SGC-7901细胞G1期阻滞，抑制肿瘤细胞增殖，并促进凋亡的发生。     

血清同型半胱氨酸与胃癌分期的相关性研究

目的:通过比较不同病理分期胃癌患者的同型半胱氨酸(Hcy)水平,探讨血清Hcy与胃癌及病理分期的相关性。方法:选取2014年3月—2015年6月于山东大学齐鲁医院住院的胃癌患者138例,根据美国癌症联合会第七版胃癌分期指南分为4组:Ⅰ期(n=34)、Ⅱ期(n=33)、Ⅲ期(n=58)、Ⅳ期(n=13),并以同时期入院的良性胃疾病患者为对照(n=90),比较良性胃疾病与胃癌及各分期间Hcy及肿瘤标志物水平差异,分析Hcy与胃癌不同病理分期的相关性。采用单循环酶法测定血清Hcy水平。结果:良性胃疾病患者血清Hcy水平(12.31±3.22)μmol/L,胃癌患者(16.19±4.84)μmol/L,胃癌患者血清Hcy水平显著升高(P<0.05)。血清Hcy水平随胃癌临床分期增高逐渐升高,其中I期(13.94±4.07)μmol/L,Ⅱ期(15.49±4.09)μmol/L,Ⅲ期(17.10±4.79)μmol/L,Ⅳ期(19.81±5.77)μmol/L,各分期差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析证实,血清Hcy与病理分期呈正相关(r=0.503,P<0.001)。在校正了其他胃癌危险因素后,Logistic回归分析显示,血清Hcy仍是胃癌发生的独立危险因素(OR=1.208,P=0.003)。结论:血清Hcy水平与胃癌及临床病理分期密切相关,伴随临床分期进展Hcy水平明显升高,对判定胃癌病情发展有重要价值。     

PTEN基因与泌尿系肿瘤

PTEN基因是最近新发现的抑癌基因 ,对PTEN/PI3K/AKT细胞内信号传导通路有关键调控作用。PTEN在很多肿瘤中都有丢失或减低表达 ,与肿瘤的发生、进展、侵袭有关。本文对PTEN基因在泌尿系统肿瘤中的研究进展进行综述     

胃癌组织中PTEN和VEGF-C及VEGFR-3表达的关系

目的：研究PTEN、VEGF-C、VEGFR-3在胃癌及正常胃组织中的表达,探讨它们在胃癌的发生、发展、浸润和转移中的作用。方法：选择临床病理资料齐全的胃癌蜡块标本54例,另取正常胃黏膜标本15例作对照。采用SP免疫组织化学方法检测PTEN、VEGF-C、VEGFR-3在其中的表达。采用χ^2检验和相关分析作统计学分析。结果：胃癌组织中PTEN呈低表达,且肿瘤浸润深、有淋巴转移、临床分期高、病理分化低时降低;VEGF-C呈高表达,且肿瘤直径大、肿瘤浸润深、有淋巴转移、临床分期高、病理分化低时增高;VEGFR-3呈高表达,且肿瘤直径大、肿瘤浸润深、有淋巴转移、临床分期高时降低。胃癌组织中VEGF-C与VEGFR-3的表达呈正相关,PTEN与VEGF-C及PTEN与VEGFR-3的表达呈负相关（P〈0.05）。结论：检测PTEN、VEGF-C、VEGFR-3在胃癌中的表达情况对胃癌的预防、诊断、治疗和预后的判断有指导意义。     

PTEN、VEGF-C和VEGFR-3在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：研究P-I-EN基因（phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome ten）、血管内皮生长因子-C（vascular endotnelial growth factor C，VEGF—C）和血管内皮生长因子受体-3（vascular endotnelial growth factor receptor 3，VEGFR-3）在胃癌及正常胃组织中的表达，探讨其在胃癌的发生、发展、浸润和转移中的作用。方法：选择临床病理资料齐全的胃癌蜡块标本54例，采用免疫组织化学SP法检测PTEN、VEGF—C和VEGFR-3在其中的表达。另取正常胃黏膜标本15例为对照组。采用χ^2检验和相关分析。结果：胃癌组织中PTEN低表达，且在肿瘤浸润深、有淋巴转移、临床分期高、病理分化低时降低；VEGF—C高表达，且在肿瘤直径大、肿瘤浸润深、有淋巴转移、临床分期高、病理分化低时增高；VEGFR-3高表达，且肿瘤直径大、肿瘤浸润深、有淋巴转移、临床分期高时升高。胃癌组织中VEGF—C与VEGFR-3的表达呈正相关，PTEN与VEGF—C、VEGFR-3的表达均呈负相关（P〈0．05）。结论：检测PTEN、VEGF—C和VEGFR-3在胃癌组织中的表达情况对胃癌的诊断、预防和预后判断有指导意义。     

PTEN基因对人胃癌细胞SGC-7901的生物学效应

目的　研究PTEN基因对人胃癌细胞SGC 790 1增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法　将携带有PTEN基因的真核表达载体pBabe Puro PTEN以及pBabe Puro ,以脂质体介导的基因转染方法转入SGC 790 1细胞系中 ,嘌呤霉素筛选获得稳定表达PTEN基因的转染细胞 ,通过细胞活力实验、流式细胞仪和DNA凝胶电泳 ,观察PTEN基因对SGC 790 1细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果稳定转染PTEN基因的SGC 790 1细胞中PTEN蛋白稳定表达 ,转染PTEN基因的SGC 790 1细胞生长速度较对照组明显减慢。流式细胞仪显示 ,细胞周期发生G1期阻滞。转染PTEN的细胞在透射电镜下可出现典型的凋亡形态学的改变 ;细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞特有的“梯状”条带 ,而对照组没有出现。结论　外源性PTEN基因导入SGC 790 1细胞后 ,可引起SGC 790 1细胞G1期阻滞 ,抑制肿瘤细胞增殖 ,并促进凋亡的发生     

胃癌术前分期的临床应用及其价值

准确的胃癌术前分期是胃癌综合治疗方案实施的需要.早期胃癌,特别是黏膜内癌,可以行内镜下切除以避免不必要的外科手术;为了获得局部进展期胃癌R0切除,新辅助治疗倍受关注并已展开探索.随着内镜超声检查(EUS)、经腹超声检查(TAUS)、多层螺旋CT(MSCT)、磁共振成像(MRI)、正电子发射型断层成像(PET)、PET-CT和腹腔镜探查分期等影像学技术的发展,胃癌术前分期的准确率已得到明显改善.本文旨在对胃癌术前分期的临床应用现状及其价值作一阐述.     

胃癌组织P300/CBP基因突变研究

目的　探讨p3 0 0 /CBP基因突变在胃癌的发生、发展中的作用。方法　采用PCR SSCP及DNA序列分析技术检测 3 0例新鲜胃癌组织p3 0 0 /CBP的基因突变 ,以远癌胃黏膜组织作对照。结果　胃癌组织中p3 0 0 /CBP基因存在 4个位点的点突变 ,分别位于p3 0 0gDNA的 4741碱基 ,T→G ,突变点为非编码区 ;4773碱基 ,T→G ,突变点为编码区 ,丝氨酸 (Ser)→精氨酸 (Arg) ;4847碱基 ,T→C ,突变点为编码区 ,缬氨酸 (Val)→丙氨酸 (Ala) ;4881碱基 ,T→C ,突变点为编码区 ,缬氨酸 (Val)→丙氨酸 (Ala)。本组 3 0例胃癌组织中有 4例突变 ,其中 2例出现前 2个位点的突变 ,2例同时出现 4个位点的突变。结论　胃癌组织中p3 0 0 /CBP基因可出现 2～ 4个位点的点突变。     

原发性胃癌中MRE11基因的突变筛查

目的:研究染色体不稳定性相关基因MRE11(meiotic recombination 11 homolog A)突变与原发性胃癌的相关性。方法:收集27例原发性胃癌病人的胃癌组织和对应的正常胃黏膜组织,并通过显微切割方法从胃癌组织中获取较纯胃癌细胞。设计扩增MRE11基因外显子的引物共20对,采用PCR产物直接测序方法在胃癌细胞和对应正常胃黏膜组织中对MRE11基因编码区进行突变检测,并运用CGH方法对存在突变的胃癌细胞进行染色体分析。结果:在27例原发性胃癌中,4例存在MRE11基因共4个体细胞水平的错义突变,其中3例为肠型胃癌。CGH显示该4例胃癌均存在5个以上基因组片断的获得或丢失事件。结论:MRE11基因突变可能在某些原发性胃癌的发生发展中起着重要作用,尤其是显示染色体不稳定性的肠型胃癌。     

肝细胞癌组织中p53基因突变的研究

目的探讨黄曲霉素（ＡＦＢ１）污染严重的南宁地区的肝细胞癌（ＨＣＣ）与ｐ５３基因突变的关系。方法采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析,检测６５例ＨＣＣ患者的ｐ５３基因第７外显子点突变。结果３８例ＨＣＣ的ｐ５３基因第２４９密码子有集中的点突变,突变频率为５８５％;伴有乙型肝炎病毒阳性者ｐ５３基因突变率５７４％,阴性者６３６％;高度分化、中度分化和低度分化ＨＣＣ的ｐ５３基因突变率分别为１００％、５５２％和８０８％;伴ＨＣＣ转移者ＨＣＣ的ｐ５３基因突变率为８８９％,未转移者为４６８％。结论ＡＦＢ１是产生ｐ５３基因突变热点的主要原因,而乙型肝炎病毒则具有协同作用;ｐ５３基因突变与ＨＣＣ的分化程度及转移有关,并预示着ＨＣＣ的恶性程度,可能是一个具有重要意义的预后指标     

胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变的检测及其临床意义

目的 检测胃癌患者门静脉血中p53和K-ras基因突变,探讨其与胃癌肝转移的关系.方法 应用PCR-SSCP技术检测62例胃癌手术患者门静脉血中p53和K-ras基因的突变率.结果 外周血和门静脉血中的p53和K-ras突变阳性率分别为8%、5%和39%、34%;有无肝转移p53和K-ras突变阳性率分别为92%、77%和24%、22%;剖腹后探查前或胃癌探查后门静脉血p53和K-ras突变阳性率分别为39%、34%和56%、63%,上述两组指标之间相比差异均有统计学意义（P＜0.05）,但与患者性别、年龄、肿瘤的分化程度之间无显著性相关（P＞0.05）.结论 门静脉血内微转移癌细胞的基因突变检测有助于判断胃癌临床分期,对预测胃癌肝内微小转移有一定的临床价值.     

K-ras mutation influences macroscopic features of gastric carcinoma

INTRODUCTION: Gastric carcinoma is classified morphologically as type 1 to 4. Type 1 is defined as a polypoid tumor; types 2 and 3 are defined as ulcerated tumors with polypoid growth or gastric wall infiltration, respectively, and type 4 tumors are defined as flat. This morphological classification is important because biological characteristics differ between the four morphological types, but little is known about genetic differences between them. MATERIALS AND METHODS: One hundred eight gastric tumors were classified macroscopically as type 1 to 4. Tumoral DNA was microdissected from paraffin-embedded tissue sections. PCR amplification of exon 1 of a K-ras containing codons 12 and 13 was performed. K-ras amplicons were dot-blotted onto nylon filters and hybridized with radiolabeled oligomer primers. RESULTS: A K-ras mutation was found in 20 of 108 gastric cancers. A significant relationship of K-ras mutation with polypoid cancer was found. The frequency of K-ras mutation was 6/14 (43%), 8/29 (28%), 2/11 (18%), and 4/54 (7%) in type 1 to 4 tumors, respectively. K-ras mutation was correlated with well-differentiated tumors. Of various types of K-ras mutations, 12 Asp often was seen in type 1 and 2 gastric cancers (well-demarcated, elevated tumors), while 12 Val and 12 Ser were often seen in type 3 and 4 cases (infiltrating carcinomas). CONCLUSION: K-ras mutations occur prominently in type 1 and type 2 gastric cancers.     

肝癌VHL基因突变的研究

目的：研究肝癌VHL基因突变以及其与血管内皮生长因子、微血管密度等临床病理特征之间的关系。方法：取30例肝癌标本;设计一对引物覆盖VHL第二外显子,RT-PCR加DNA序列测定分析其中10例VHL基因,分析HCC与VHL突变的关系,比较有无VHL基因突变的HCC其VEGF、MVD及临床病理特征的差异。结果：10例HCC标本,3例发生VHL基因突变（30%）;与未发生VHL基因突变7例HCC相比,VHL突变肝癌VEGF、MVD均增高（P〈0.05）;临床病理分析显示VHL基因突变HCC病理分级较高（P〈0.05）。结论：肝癌VHL突变率约30%;其突变与其临床病理特点有关,VHL突变肝癌有较高的恶性和侵袭性。     

PTEN蛋白和p27在胃癌中的表达和相关性研究

目的：研究胃癌中抑癌基因PTEN和p27的表达和丽者间的关系.方法：应用免疫组化方法检测36例胃癌组织、10例癌旁组织和8例正常胃组织中PTEN和p27蛋白的表达情况.结果：胃癌组织中PTEN和p27阳性表达率分别为61.1%（22/36）和63.9%（23/36）（P＞0.05）,均低于正常胃组织阳性率100%（P＜0.05）胃癌组织中PTEN和p27阳性表达存在正相关关系（r=0.3043 P＜0.05）,结论：PTEN和p27基因的异常改变参与胃粘膜细胞的恶性转化过程,PTEN和p27蛋白表达水平可作为评价胃癌病理生物学行为的客观指标之一.     

遗传性弥漫型胃癌上皮型钙黏素基因种系突变的检测

目的 研究遗传性弥漫型胃癌上皮型钙黏素基因(CDH1)种系突变情况。方法 对符合初筛标准的5个胃癌家系(A、B、C、E、F)先证者取血,提取基因组DNA,利用PCR方法扩增上皮型钙黏素基因的16个外显子,以变性高效液相色谱技术检测,对可疑突变者双向测序。结果 B家系先证者CDH1基因第10号外显子1507位碱基出现杂合性C→T转换,导致编码谷氨酸的密码子CAG转变为终止密码子UAG,从而产生截短蛋白。该先证者异时性患有乳腺侵润性小叶腺癌和弥漫型胃癌,免疫组化研究显示乳腺癌组织中上皮型钙黏素表达完全缺失,表明乳腺癌组织中CDH1基因完全失活。结论 中国胃癌家系中存在遗传性弥漫型胃癌家系,并检测到一种新的CDH1基因种系截短突变,乳腺侵润性小叶腺癌可能系遗传性弥漫型胃癌肿瘤谱的一部分。     

PTEN基因在甲状腺癌组织中的表达及其意义

摘要：为探讨PTEN基因在甲状腺癌中的表达及其与甲状腺癌生物学行为的关系，笔者采用免疫组化方法检测PTEN基因在不同甲状腺组织中的表达。结果示，甲状腺癌组织PTEN基因的阳性表达率明显低于甲状腺正常组织和甲状腺腺瘤组织；PTEN基因表达与甲状腺癌的TNM分期、淋巴结转移呈负相关。提示PTEN基因表达的降低在甲状腺癌的发生和转移过程中起重要作用。