蚁附蠲痹超细微粉对佐剂性关节炎大鼠外周血T细胞亚群的影响

目的:观察蚁附蠲痹超细微粉(Yifujuanbi Ultral-Micropowder;YFJBUM)对佐剂性关节炎大鼠足肿胀和外周血T细胞亚群的影响,初步探讨YFJBUM对类风湿性关节炎的作用机理。方法:采用弗氏完全佐剂(FCA)右足趾皮内注射复制大鼠佐剂性关节炎模型,采用大鼠足肿胀测定仪检测足肿胀,采用流式细胞仪检测佐剂性关节炎大鼠外周血中CD3+、CD4+和CD8+T细胞的变化。结果:YFJBUM各剂量组在不同时间点的足肿胀度均较模型组组显著降低;模型组外周血CD4+/CD8+比值较正常对照组显著增高,而YFJBUM各剂量组CD4+/CD8+比值均较模型组显著降低。结论:YFJBUM能显著调节佐剂性关节炎大鼠外周血T细胞亚群的紊乱,该作用可能是YFJBUM治疗类风湿性关节炎的主要机理之一。     

壮药透骨香水溶部位对胶原诱导型关节炎大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:研究壮药透骨香水溶部位对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠外周血T淋巴细胞亚群及相关细胞因子的影响,探讨壮药透骨香水溶部位抗类风湿关节炎可能的作用机制。方法:雌性SD大鼠70只,随机分为空白对照组10只和造模组60只,造模组采用牛源Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂乳化剂进行多点皮下注射致炎造模,致炎21 d后将造模成功大鼠随机分为透骨香水溶部位18.45、36.89、73.79 g生药/kg组、雷公藤多苷0.01 g/kg组和模型对照组,每组10只,连续灌胃给药28 d。末次给药后取大鼠外周血采用流式细胞术测定T淋巴细胞亚群(CD4~+、CD8~+)水平,取大鼠部分关节组织采用酶联免疫法(ELISA)检测关节组织匀浆液中IL-2、IL-10水平,取大鼠踝关节采用苏木精—伊红染色法(HE染色)观察关节滑膜组织病理变化。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠外周血中CD4~+T细胞数升高,CD8~+T细胞数降低,CD4~+/CD8~+比值显著升高,关节组织匀浆中IL-2含量显著升高,IL-10含量显著降低,病理提示滑膜内可见大量炎性细胞浸润,滑膜细胞排列紊乱(P<0.05或者P<0.01);与模型对照组比较,透骨香水溶部位73.79 g生药/kg组及雷公藤多苷0.01 g/kg组能显著降低CIA大鼠外周血CD4~+T细胞数和CD4~+/CD8~+比值,升高CD8~+T细胞数,降低CIA大鼠关节组织匀浆中IL-2含量,提高IL-10水平,改善CIA大鼠滑膜内炎性细胞浸润程度(P<0.05或者P<0.01)。结论:壮药透骨香水溶部位对CIA大鼠有干预治疗作用,其作用机制可能与调节T淋巴细胞亚群平衡,调控细胞因子IL-2、IL-10的表达有关。     

山海棠胶囊对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的研究

采用大鼠佐剂性关节炎（ＡＡ）动物模型,观察昆明山海棠胶囊对大鼠ＡＡ的治疗作用及其免疫机制。结果表明：经昆明山海棠胶囊治疗后,能明显改善ＡＡ大鼠的关节炎症状,其关节指数明显低于ＡＡ对照组（Ｐ〈０．０１）;给药组大鼠血清中ＩＬ－１、ＴＮＦａ、ＩＬ－８水平较ＡＡ对照组明显降低,腹腔巨噬细胞分泌细胞因子（ＩＬ－１、ＴＮＦａ、ＩＬ－６、ＩＬ－８）的能力,以及脾淋巴细胞分泌ＩＬ－６、ＩＬ－８的能力显著受到抑制;关节液内炎症细胞因子的水平明显下降;对ＣｏｎＡ诱导的脾细胞地殖与ＡＡ对照组无变化。总之,昆明山海棠胶囊对佐剂性关节炎有良好的治疗作用,其抗炎作用的发挥与其免疫抑制反应有关。     

类风湿关节炎大鼠模型的构建及昆明山海棠对大鼠佐剂性关节炎的干预研究

目的:制作和比较佐剂性关节炎大鼠模型及胶原性关节炎大鼠模型,选择外观及病理变化更明显的模型来观察昆明山海棠制剂对其的干预作用.方法:构建AA和CIA大鼠模型,采用肿胀度评分法观察造模前后大鼠关节变化情况,造模后28 d分离关节滑膜、切片HE染色,观察滑膜炎症,ELISA方法检测血清中细胞因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β)水平;观察昆明山海棠对大鼠关节肿胀度、血清细胞因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β)及关节滑膜组织炎症的影响.结果:从造模后16 d开始AA组和CIA组的关节肿胀度升高(P＜0.01);AA组在出现肿胀的时间及程度上与CIA组比较有显著差异(P＜0.01);造模后28 d,两个模型组血清中IL-1β、TNF-α水平升高,TGF-β水平下降(P＜0.01),同时,两个模型组间也存在显著差异(P＜0.05);造模后,AA组滑膜组织有大量炎性细胞浸润、纤维素样渗出及出现丰富的血管翳;经过昆明山海棠的干预,高、中剂量组关节肿胀得到明显改善(P＜0.01);昆明山海棠高、中剂量能抑制血清中IL-1β、TNF-α水平及提高TGF-β水平(P＜0.01).结论:AA大鼠模型与CIA模型比较出模时间更早,症状更明显;昆明山海棠能改善AA大鼠关节肿胀度,抑制血清中细胞因子的水平,对AA大鼠有明显的治疗作用.     

仙龙颗粒对大鼠佐剂性关节炎T淋巴细胞亚群的影响

为探讨仙龙颗粒(XLG)对细胞免疫功能的影响,采用Freund's完全佐剂诱发SD大鼠佐剂性关节炎(AA),在灌服XLG 30天后,测定T淋巴细胞亚群CD 4、CD 8细胞表达率及CD 4/CD 8比值.结果显示XLG大剂量组明显抑制CD 4、提高CD 8细胞表达率,使CD 4/CD 8比值降低;中剂量组仅抑制CD 4细胞,对CD 8细胞无明显作用,CD 4/CD 8比值仍异常;小剂量组对CD 4/CD 8均无明显作用.表明XLG大剂量有较好的细胞免疫调节作用.     

乌头汤及其配伍对佐剂性关节炎大鼠外周血T淋巴细胞的影响

目的：探讨乌头汤及其配伍各组对佐剂性关节炎大鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋细胞百分比含量以及CD4^＋/CD8^＋比值的变化的影响。方法：用完全弗氏佐剂诱导复制大鼠关节炎模型,并用乌头汤及其配伍的各组药物进行干预,末次给药后采血,采用流式细胞仪测定大鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋的含量。结果：与正常组相比,模型组大鼠外周血中CD4^＋细胞的百分比含量明显升高,CD8^＋细胞的百分比含量明显下降;与模型组相比,经过乌头汤及其配伍各组、MTX组治疗干预后,大鼠外周血中升高的CD4^＋百分比呈现不同程度的下降,下降的CD8^＋百分比水平呈现不同程度的升高,升高的CD4^＋/CD8^＋比值也呈现不同程度的下调;乌头汤与各个配伍组之间的上述作用比较没有明显的差异。结论：乌头汤及其配伍各组对佐剂性关节炎大鼠抑制作用的作用机制可能是通过调节外周血中异常的CD4^＋、CD8^＋的百分比含量而发挥的。     

黄芪糖蛋白诱导佐剂性关节炎大鼠体内细胞凋亡的研究

目的:探讨黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠体内细胞凋亡的诱导作用。方法:建立大鼠佐剂性关节炎模型,治疗2周后,取外周血、膝关节滑膜组织,分别使用流式细胞术和原位末端标记(TUNEL)法检测外周血淋巴细胞和膝关节滑膜组织的细胞凋亡情况,使用免疫组织化学法检测膝关节滑膜组织中Fas、FasL的蛋白表达水平。结果:低剂量黄芪糖蛋白可提高外周血CD4+、CD+8细胞的凋亡比例(P<0.05),低、中、高剂量黄芪糖蛋白均可增加膝关节滑膜组织的细胞凋亡率(P<0.01),同时降低Fas表达水平(P<0.01),增强FasL表达水平(P<0.01)。结论:黄芪糖蛋白可诱导佐剂性关节炎大鼠外周血淋巴细胞及膝关节滑膜组织细胞凋亡,且调节滑膜组织中Fas、FasL的蛋白表达水平。     

针刺对实验性变态反应性神经炎T细胞亚群的调节作用

目的:探讨针刺治疗变态反应性神经炎的机理.方法:40只大鼠分为正常对照组、模型组、针刺组、药物组.针刺组取"L4夹脊""足三里""悬钟"穴,药物组用泼尼松灌胃给药.用流式细胞仪检测大鼠外周血T细胞亚群的变化.结果:模型组CD8 细胞数降低,CD4 /CD8 比值明显升高.针刺组能显著提高CD8 细胞数,使CD4 /CD8 比值接近正常,而对CD3 、CD4 细胞数无明显影响.结论:针刺疗法能有效调整T细胞亚群的紊乱状况.     

风湿平对佐剂性关节炎的药效研究

目的:风湿平是昆明山海棠复方,由经典复方调制而成,具有免疫抑制、细胞拮抗及抗炎镇痛作用,本文报告其抗佐剂性关节炎的作用。方法:大鼠分为5组:对照,昆明山海棠大、中、小剂量及强的松组,每天给药一次,连续28天或14天,以窄带尺量取左、右关节肿。结果:风湿平能很好控制佐剂性关节炎大鼠,不论是对佐剂侧治疗,还是对非佐剂侧治疗,而且以对非佐剂侧治疗为佳。结论:风湿平有良好的免疫抑制作用。     

基于“方证相关”理论的治“痹”经方调控T细胞亚群比较研究

目的:在"方证相关"理论指导下,采用佐剂性关节炎模型平行比较乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤对外周T细胞亚群的影响。方法:采用流式细胞仪检测佐剂性关节炎大鼠外周血中CD3+,CD4+和CD8+T细胞的变化。结果:佐剂性关节炎大鼠外周CD3+和CD4+T细胞无明显变化,而CD8+T细胞显著减少,CD4+/CD8+显著升高,乌头汤和桂枝芍药知母汤均能显著提高异常降低的CD8+T细胞,白虎加桂枝汤仅高剂量能显著提高异常降低的CD8+T细胞,但三方均能使异常增高CD4+/CD8+显著降低;临床等效剂量时降低的CD4+/CD8+作用由强到弱依次是桂枝芍药知母汤、乌头汤和白虎加桂枝汤。结论:临床等效剂量下乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤均对佐剂性关节炎大鼠外周血T细胞亚群紊乱具有显著的调节作用,提高CD8+T细胞和降低CD4+/CD8+作用依次是桂枝芍药知母汤乌头汤白虎加桂枝汤,与药效学的结果一致,初步提示对外周血T细胞亚群调节强度的差异是乌头汤、桂枝芍药知母汤和白虎加桂枝汤3个经方主要药效学效能差异的原因之一。     

昆明山海棠胶囊对小鼠的生殖毒性研究

目的:探讨昆明山海棠胶囊的生殖系统毒性.方法:根据卫生部<中药新药研究指南>,进行该制剂的特殊毒理实验研究.结果:显性致死试验阳性;雌鼠均不能受孕;精子畸形率显著增高,随剂量增加而精子畸形率增高;对孕鼠重量、活胎重量及平均胎仔数等各项指标均无影响.结论:昆明山海棠胶囊具有低-中度的遗传毒性和一般生殖毒性,而无胚胎毒性.     

资木瓜总苷对佐剂性关节炎大鼠滑膜肥大细胞脱颗粒和类胰蛋白酶表达的影响

目的:观察资木瓜总苷(TSCS)对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织病理改变、滑膜肥大细胞脱颗粒及类胰蛋白酶表达的影响,探讨肥大细胞功能与TSCS治疗大鼠AA的关系.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组和TSCS 组(200 mg·kg-1),每组15只,致炎后第3天开始ig给药,1次/d,模型组和正常对照组给予等容积生理盐水,持续21 d.除正常对照组外,其余大鼠足部注射弗氏完全佐剂诱导建立AA模型,检测大鼠体质量和足跖体积变化,HE染色评价滑膜组织病理改变,TB染色观察滑膜肥大细胞数量及其脱颗粒情况,免疫组化法检测滑膜组织中类胰蛋白酶表达情况.结果:TSCS能明显增加AA大鼠体质量,减轻足跖肿胀度,显著减轻滑膜组织炎性细胞浸润、滑膜细胞增生和滑膜纤维组织增生,有效抑制滑膜肥大细胞数量和脱颗粒率,显著抑制滑膜组织类胰蛋白酶表达.相关分析显示,滑膜肥大细胞数量及脱颗粒率均与滑膜组织病理改变总评分呈明显的正相关.结论:TSCS具有治疗大鼠AA和调节滑膜肥大细胞功能的作用,由于两者存在明显的正相关性,因此TSCS可能通过抑制滑膜肥大细胞功能,对AA大鼠起治疗作用.     

生姜油对小鼠佐剂性关节炎的作用

目的:研究生姜油对佐剂性关节炎(adjunctive arthritis,AA)小鼠的作用。方法:小鼠右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂(CFA)制备AA小鼠模型。致炎后第8天起治疗组ig生姜油0.5和1.0 ml/kg,每天一次,连续14天。容积法测AA小鼠的继发性足肿胀,取胸腺和脾脏计算脏器指数,流式细胞术测全血T淋巴细胞亚群CD4 和CD8 。结果:生姜油ig给药组明显减轻AA小鼠的继发性足肿胀,降低AA小鼠的胸腺指数和脾脏指数,抑制CD4 细胞异常增加和CD8 细胞异常减少,恢复CD4 /CD8 比例。结论:生姜油对AA小鼠有抑制作用。     

益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血小鼠造血功能及T细胞亚群的影响

目的:研究益血生髓颗粒对苯试剂诱导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠造血及免疫功能的影响。方法:72只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AA模型组、益血生髓颗粒低剂量组(低剂量组)、益血生髓颗粒高剂量组(高剂量组)和司坦唑醇阳性药组(阳性对照组),除正常对照组其他各组小鼠注射苯和玉米油混合液2 ml/kg,每周4次,建立AA模型,正常组注射同体积玉米油,7周后,低剂量组用药1.2 g/(kg·d),高剂量组用药4.8 g/(kg·d),阳性对照药组予司坦唑醇2 mg/(kg·d),连续给药15 d后,检测血细胞(WBC、RBC、HGB、PLT)、骨髓有核细胞数(BMNC)、T淋巴细胞亚群(CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、Th₁、Th₂)、血清白介素2(IL-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和HE染色骨髓病理学的变化情况。结果:与AA模型组比较,低、高剂量组和阳性对照组小鼠外周血四种血细胞数量、血清M-CSF、CD3⁺CD4⁺T和CD4⁺/CD8⁺比值升高(P<0.05),CD3⁺CD8⁺T、IL-2水平和Th₂细胞百分数降低(P<0.05),骨髓病理学显示骨髓组织增生较模型组活跃,造血细胞增多,非造血细胞减少。结论:益血生髓颗粒可通过对AA小鼠T细胞亚群的免疫调节和促进造血细胞增殖达到一定恢复造血功能的作用。     

当归拈痛汤加味膏外敷对AA大鼠关节中HIF-1α、滑膜细胞凋亡的影响

目的 探讨当归拈痛汤加味膏外敷在佐剂性关节炎(AA)大鼠关节中对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及滑膜凋亡的影响.方法 40只wistar大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组及对照组.建立AA模型,给药后18d,取踝关节行HE染色及HIF-1α免疫组化染色,流式细胞仪检测滑膜细胞的凋亡变化.分析HIF1α、滑膜凋亡在AA中的相关性及与节炎活动指标、滑膜病理之间的关系.结果 给药18d后,治疗组HE染色显示明显减轻滑膜增殖以及炎症反应,免疫组化显示治疗组HIF-1α明显表达降低,流式细胞仪检定显示治疗组滑膜细胞凋亡率明显升高.结论 HIF-1α的表达与滑膜细胞凋亡率呈明显负相关,该膏剂通过抑制HIF-1α活性,从而调控一系列下游靶基因,如滑膜细胞凋亡等,此可能是其抑制滑膜增生的作用机制之一.     

芪白平肺胶囊对慢阻肺痰瘀阻肺证模型大鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨芪白平肺胶囊(原名金泰胶囊)对慢阻肺痰瘀阻肺证模型大鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法:采用复合因素造模方法复制慢阻肺痰瘀阻肺证大鼠模型,造模的同时给予芪白平肺胶囊、川芎嗪、硝苯地平,观察大鼠一般状况及T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)的变化。结果:模型组CD3+、CD4+、CD4+/CD 8+较正常组明显下降(P0.01),模型组CD 8+较正常组明显升高(P0.01);芪白平肺胶囊高剂量组各参数与正常组无差异(P0.05);硝苯地平组各参数较模型组无差异(P0.05);川芎嗪组各参数较模型组及芪白平肺胶囊高剂量组均有显著差异(P0.01);芪白平肺胶囊低剂量组各参数较模型组及芪白平肺胶囊高剂量组均有显著差异(P0.01)。结论:芪白平肺胶囊可升高慢阻肺痰瘀阻肺证CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平,降低CD8+水平。     

双氢青蒿素对AA大鼠外周血T淋巴细胞的调节作用

目的:探讨双氢青蒿素对佐剂性关节炎(AA)大鼠外周血T细胞的调节作用.方法:采用佐剂性关节炎动物模型,将体重160～ 180 g的SD大鼠随机设为6组:正常对照组、模型对照组、甲氨蝶呤对照组(1mg·kg-1)、双氢青蒿素高、中、低剂量(11.2,5.6,2.8 mg·kg-1)组,造模2周后灌胃给药,连续给药28 d,并采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群、酶联免疫法检测血清白介素-4 (IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平.结果:相较于正常组,模型组外周血CD4+T,CD4+ T/ CD8+T和血清IFN-γ水平显著升高(P＜0.01),血清IL-4水平显著降低(P＜0.01),CD3+T,CD8+T则无明显变化;高、中剂量双氢青蒿素组CD4+T所占百分比分别是(34.81±3.80)％,(34.92±5.14)％,CD4+ T/ CD8+T分别是2.21±0.43,2.27±0.48,与模型组相比显著降低(P＜0.05,P＜0.01);双氢青蒿素高、中、低剂量组血清INF-γ水平分别是(15.90±2.05),(16.27 ±2.11),( 18.15±2.15) ng·L-1,与模型组相比显著降低(P＜0.01);IL-4水平分别是(40.21±4.89),(40.04±4.56),(34.81±4.02)ng·L-1,与模型组相比显著升高(P＜0.01),其调节作用在2.8 ～5.6 mg·kg-1范围呈剂量依赖性(P＜0.05).结论:双氢青蒿素能有效改善AA大鼠T细胞功能紊乱状况,为其应用于类风湿关节炎治疗奠定实验基础.     

通利大肠对慢性阻塞性肺疾病大鼠外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察"通利大肠"对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的外周血T淋巴细胞亚群的影响,从炎症调控角度探讨COPD"从肠论治"的效应机制。方法:用气管注射脂多糖加熏香烟联合造模方法建立COPD大鼠模型,宣白承气汤及其拆方作为实验用药随机分为正常组、模型组、治肠组、治肺组及肺肠同治组。正常组、模型组灌胃纯净水,各给药组灌胃相应中药,连续14d。流式细胞检测法检测外周血T淋巴细胞总数、辅助性T淋巴细胞(CD+3CD+4细胞)百分比、细胞毒性T淋巴细胞(CD+3CD+8细胞)百分比以及CD+4/CD+8水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠T淋巴细胞总数减少,CD+3/CD+8升高,CD+4/CD+8水平降低(P0.01),CD+3/CD+4有降低的趋势。与模型组比较,治肠组CD+4/CD8+升高(P0.05)。与治肺组比较,肺肠同治组的T淋巴细胞总数增加,CD+4/CD8+升高(P0.05)。结论:通利大肠,或在治肺的基础上增加通利大肠,可影响COPD模型大鼠外周血T淋巴细胞的亚群分布,减少CD3+CD+8细胞的百分比,调节T淋巴细胞总数和CD3+CD+4细胞与CD+3CD+8细胞比例,这可能是COPD"从肠论治"效应产生的作用环节之一。     

左归丸对肾虚仔鼠胸腺内CD4-CD8-T细胞分化的影响

目的:研究左归丸对肾虚仔鼠发育过程中CD4-CD8-T细胞在胸腺内分化的影响以及补肾填精法的应用价值,探索“肾为先天之本”的理论内涵。方法:采用大鼠2∶1进行雌雄配对,3种应激法复合构建肾虚模型,将孕鼠分为正常组,模型组,胸腺肽组(0.003 g·kg^-1),左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg^-1)。正常组不造模给予生理盐水灌胃;模型组造模给予生理盐水灌胃,胸腺肽组造模给予胸腺肽胶囊溶液灌胃,左归丸低、高剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃,选取胚胎16,19 d及出生第1天(E16,E19,P1)3个时期,计算仔鼠胸腺指数,电镜观察仔鼠胸腺上皮细胞超微结构形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测仔鼠胸腺内胸腺肽β4(TMSβ4)和胸腺肽α1(Tα1)的含量,流式细胞学检测仔鼠胸腺细胞表面CD4,CD8,CD25,CD44表达以鉴定T细胞类型。结果:电镜下模型组胸腺上皮细胞形态不规则,细胞核变形,核染色质明显聚集增加,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组胸腺上皮细胞变形不明显;ELISA法检测结果显示,与正常组比较,模型组不同时期的TMSβ4,Tα1含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组胸腺内TMSβ4和Tα1的含量明显升高(P<0.05);流式细胞检测显示,与正常组比较,模型组在E16,E19,P13个时期CD4^-CD8^-T细胞均明显增加(P<0.05),CD4^-CD8^-CD25^-CD44^-T(DN4)明显增加(P<0.05);与模型组比较,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组在E16,E19,P1时期CD4-CD8^-T细胞均明显减少(P<0.05),同时DN4也明显减少(P<0.05)。结论:左归丸可以改善肾虚仔鼠胸腺上皮细胞的结构,并通过增加仔鼠胸腺内TMSβ4和Tα1的分泌诱导胚胎期胸腺内T细胞从DN4至DP阶段的分化,说明左归丸通过补肾填精,促进T细胞发育成熟,调节仔鼠肾虚免疫失调状态。