褪黑素抑制缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化

目的:研究褪黑素对缺氧引起的SGC-7901人胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的作用,并初步揭示其分子机制?方法:在建立缺氧诱导SGC-7901人胃癌细胞发生EMT的基础上,通过免疫印迹方法检测蛋白表达水平?免疫荧光的方法检测蛋白在细胞中的分布和表达,研究褪黑素对EMT过程的作用?结果:缺氧使SGC-7901人胃癌细胞发生EMT,表现为形态发生改变,上皮标志物表达量减少?间充质标志物表达增加,褪黑素可抑制缺氧条件下活性氧簇(ROS)的产生和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及EMT?结论:在缺氧条件下SGC-7901人胃癌细胞可发生EMT,褪黑素可抑制该过程?这些结果揭示了褪黑素在缺氧引起的肿瘤细胞EMT过程中发挥的抑制作用,为褪黑素的临床应用提供了重要的理论依据?     

缺氧诱导因子-1α和碳酸酐酶-9在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和碳酸酐酶-9(CAⅨ)在子宫颈鳞状细胞癌(SCC)组织中的表达及其临床意义。方法:采用EliVision Plus/HRP免疫组织化学法检测HIF-1α和CAⅨ在30例正常子宫颈组织、55例子宫颈上皮内瘤变(CIN)和80例SCC组织中的表达特点及相关性。结果:HIF-1α在正常子宫颈组织、CIN及SCC组织中的表达率分别为0.00%、43.64%和76.25%,差异均有统计学意义(P0.01);CAⅨ在正常子宫颈组织、CIN及SCC组织中的表达率分别为0.00%、40.00%和66.25%,差异均有统计学意义(P0.01);低分化SCC组织中HIF-1α、CAⅨ的表达率高于高-中分化SCC组织(P0.05),有淋巴结转移SCC组织中HIF-1α、CAⅨ的表达率高于无淋巴结转移SCC组织(P0.05),Ⅱ期SCC组织中HIF-1α的表达率高于Ⅰ期SCC组织(P0.05);SCC组织中HIF-1α与CAⅨ的表达呈正相关关系(P0.05)。结论:HIF-1α、CAⅨ在SCC的发生、发展中起重要作用,SCC中HIF-1α和CAⅨ的高表达和正相关关系提示了以缺氧诱导因子通路为基础的分子靶向治疗的可行性。     

缺氧诱导因子-1α在肿瘤中的表达研究进展

<正>国际肿瘤研究机构编制的《全球肿瘤发病率和死亡率估计》中报道,2018年全球有1 810万新发癌症病例和960万癌症死亡病例,其中肺癌是最常见的诊断癌症(占总病例的11.6%),是癌症死亡的主要原因(占总癌症死亡的18.4%).在男性中发病率和死亡率排在首位的肿瘤是肺癌,其次是前列腺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌;在女性中乳腺癌是最常见的肿瘤,其次是结直肠癌、肺癌、宫颈癌[1].肿瘤的治疗方法主要有手术治疗、放疗、化疗、分子靶向药物治疗和免疫治     

胃癌中缺氧诱导因子-1α蛋白的表达及临床病理意义的研究

目的:通过检测胃癌及正常胃组织中缺氧诱导因子(HIF-1α)蛋白的表达,分析其表达的相关性,并探讨其临床意义。方法:应用免疫组化sp法检测117例胃癌及20例正常胃粘膜组织中HIF-1α蛋白的表达,用统计学方法分析其与临床病理因素的关系。结果:117例胃癌组织中有72例(61.5%)HIF-1α蛋白阳性表达;正常胃粘膜组织中未见HIF-1α蛋白的表达;HIF-1α表达在肿瘤大小、不同临床分期,浸润深度以及淋巴结转移中有统计学意义(P<0.05);结论:胃癌中存在HIF-1α蛋白的表达,使肿瘤细胞适应缺氧环境,从而促进肿瘤的侵袭与转移。     

胃癌患者外周血缺氧诱导因子-1α的表达及其意义

目的：检测胃癌患者外周血缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α） mRNA的表达情况,探讨其临床意义。方法采用荧光定量RT-PCR技术检测50例胃癌患者及30例健康对照者外周血中HIF-1αmRNA表达情况。结果胃癌患者HIF-1αmRNA表达阳性率为54．0％（27/50）,高于对照组的0％（0/30）,两组比较差异有统计学意义（P＜0．01）;T3～T4期胃癌患者HIF-1αmRNA阳性表达率为64．7％（22/34）,高于T1～T2期患者的31．3％（5/16）,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论胃癌患者外周血HIF-1αmRNA的表达可作为检测肿瘤细胞转移的分子标志物之一,有助于预后的判断。     

牛磺酸对缺氧大鼠视网膜缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察牛磺酸对高原缺氧条件下大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨牛磺酸对视网膜缺氧适应的影响.方法 SD大鼠分为4组,平原对照组(C)、模拟5 500 m高度缺氧组(H)与平原牛磺酸组(T)、模拟5 500 m高度缺氧牛磺酸组(HT),分别以基础饲料和添加了2.4%牛磺酸的饲料喂养1周,营养干预后平原对照组、平原牛磺酸组在平原继续饲养,模拟缺氧组、模拟缺氧 牛磺酸组放入低压舱模拟5 500 m高原缺氧,分别在处理0、2、6、12、24、48、72 h后取视网膜.应用RT-PCR、免疫组化和Western blot方法检测视网膜中HIF-1α在mRNA和蛋白水平的表达.结果缺氧后视网膜中HIF-1α免疫阳性神经元数目明显增多,主要分布在视网膜内层,内核层(INL)中细胞免疫阳性率从缺氧2 h开始增加,到72 h阳性率下降到与对照无显著性差异.mRNA与蛋白的表达在缺氧早期高于后期.牛磺酸处理后细胞免疫阳性率增加,HIF-1αmRNA与蛋白的表达量也明显增强.结论牛磺酸能通过缺氧诱导因子途径促进视网膜缺氧适应性调节,保持正常的视觉功能.     

MicroRNA-199a通过缺氧诱导因子1α抑制胃癌细胞上皮间充质转化

目的 探讨微小RNA-199a(miR-199a)调节缺氧诱导因子-1a(HIF-1α)表达对缺氧状态下胃癌细胞上皮间充质转化(EMT)的影响及可能的机制.方法 低氧处理胃癌细胞24 h,通过转染si-HIF-1α和miR-199a mimic,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测miR-199a的表达水平,蛋白质印迹法(Western blotting)检测HIF-1α及相关EMT蛋白的变化,镜下观察胃癌细胞形态.结果 低氧处理后,能下调miR-199a mRNA表达,上调HIF-1α和间叶细胞标志蛋白表达,下调E-钙黏隶(E-cad-herin)蛋白表达.转染miR-199a mimic后能抑制HIF-1α的蛋白表达,转染si-HIF-1α和miR-199a mimic后能部分逆转低氧的作用,抑制EMT过程的发展.结论 miR-199a可能通过降低HIF-1a的表达抑制缺氧状态下胃癌细胞的EMT过程的发生.     

低氧环境地高辛通过抑制HIF-1α下调结肠癌HCT 116细胞VEGF表达的实验研究

目的研究低氧环境下地高辛能否通过抑制HIF-1α下调结肠癌HCT 116细胞VEGF的表达。方法将HCT 116细胞分为常氧组(Normoxia组)、低氧组(Hypoxia组)和低氧+地高辛组(Hypoxia+Digoxin组)。在低氧环境下对结肠癌HCT 116细胞使用地高辛干预,在3个不同时间点(0、24和72h)使用MTT法对HCT 116细胞活性进行检测;同时在干预24小时后分别采用RT-PCR法和western blotting法对HCT 116细胞VEGF和HIF-1α的mRNA和蛋白水平进行检测。结果低氧环境下HCT 116细胞活性呈时间依赖性下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);且在各时间点低氧+地高辛组细胞活性较低氧组细胞下降更加明显,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在干预24小时后,HCT 116细胞VEGF和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平较未干预细胞明显降低(均P<0.05)。结论在低氧环境下,地高辛可以通过抑制HIF-1α的合成下调结肠癌HCT 116细胞VEGF的表达,抑制肿瘤细胞增殖。     

中药防风抑制胃癌SGC-7901细胞生长的研究

目的研究中药防风对胃癌SGC-7901细胞生长的影响。方法通过细胞培养技术、集落形成实验、MTT实验等方法,观察防风对胃癌SGC-7901细胞生长的影响。结果SGC-7901细胞在防风作用24 h后,出现体积变小、核固缩、空泡样变化等形态学改变。防风对SGC-7901细胞的生长曲线、集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与防风的浓度和时间呈正相关,其IC50值为24 mg/ml。结论防风能抑制SGC-7901细胞生长,这些结果为防风在临床上的进一步应用提供了理论依据。     

缺氧诱导因子-1α/Notch1通路在缺氧致病机制中的研究进展

缺氧普遍存在于多种疾病中。缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)是细胞适应缺氧微环境的关键转录调节因子,Notch信号是传递缺氧反应的关键中间体,缺氧状态下Notch信号的激活独立于HIF-1α,HIF-1α与Notch1信号存在串扰,共同参与疾病的发生与发展。现就HIF-1α/Notch1通路在缺氧致病机制中的作用相关研究进展进行综述,为靶向缺氧途径提供新的策略。     

缺氧诱导因子-1α在胃腺癌的表达及临床意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α（Hypoxiainduciblefactor-1,HIF-1α）表达与胃腺癌临床病理特征两者间的相关性。方法:应用免疫组织化学方法,检测63例胃腺癌组织、癌旁组织及正常组织中HIF-1α的表达。结果:HIF-1α蛋白在胃黏液腺癌组织的阳性率明显高于癌旁区组织、正常组织,差异具有显著性（P<0.05）;在胃黏液腺癌组织中,随着组织学病理分级的增加、临床分期的进展和淋巴结的转移,HIF-1α蛋白表达阳性率逐渐上升,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:HIF-1α表达与胃癌浸润、淋巴结转移和肿瘤大小有关,参与胃癌的发生和发展;HIF-1α可作为判断胃癌患者生物学行为及预后的指标之一,也为临床提供靶向治疗的方向。     

不同缺氧方法诱导BeWo细胞缺氧诱导因子1α表达的实验研究

【目的】探讨用于滋养细胞缺氧研究的缺氧方法及滋养细胞模型。【方法】滋养细胞来源的BeWo细胞系,分4组培养:正常对照组、低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组。培养4 8h后收集细胞,应用实时定量PCR方法,检测BeWo细胞HIF- 1αmRNA表达水平;应用Westernblot方法,检测BeWo细胞HIF -1α蛋白的表达水平。【结果】与正常对照组相比,低氧浓度组、二氯化钴组和去铁敏组的HIF- 1α蛋白和mRNA表达均明显升高;与低氧浓度组比较,二氯化钴组和去铁敏组HIF 1α蛋白和mRNA表达水平无明显差异。【结论】环境缺氧和细胞缺氧均可诱导BeWo细胞HIF 1α的表达,二氯化钴或去铁敏可以作为缺氧方法用于滋养细胞缺氧方面的研究,BeWo细胞也可作为一种细胞模型用于HIF -1α表达的研究。     

缺氧诱导因子-1与恶性肿瘤关系的研究进展

低氧是恶性肿瘤微环境的特征之一,缺氧诱导因子-1(HIF-1)是细胞适应低氧环境的重要调节因子.HIF-1是低氧环境下的氧调节型α亚基与组成型β亚基形成的稳定的异二聚体,其促进肿瘤血管生成、上调并激活基质金属蛋白酶及赖氨酸氧化酶等细胞因子及信号通路、诱导特异性微RNA生成,参与多种恶性肿瘤细胞的增殖、侵袭、转移等相关生...     

氯化钴预处理小鼠海马组织缺氧诱导因子-1α表达时间的依赖性研究

目的 观测小鼠注射氯化钴( CoC12)后不同时间点小鼠海马组织中缺氧诱导因子-1(HIF1α)蛋白质的表达.方法 小鼠腹腔注射CoCl2后不同的时间点(0、1h、2h、3h、4h、5h和6h)取海马组织,应用Western Blot、免疫荧光激光共聚焦显微镜等技术,检测小鼠海马组织内HIF-1α的蛋白表达变化.结果实验发现海马组织内HIF-1α蛋白表达量随时间的变化发生变化,其各个时间点HIF-1α蛋白相对丰度值分别是0.135±0.01,0.572±0.01,0.595±0.03,1.09±0.03,1.30±0.04,1.275±0.03,0.947±0.03,4h时达到相对峰值,5～6h后其表达开始下降;HIF-1 αFITC免疫荧光强度值分别为13.33±3.42,30.95±7.86,46.50±9.65,61.50±10.02,88.30±15.69,71.39±11.28,67.41±10.78,荧光强度同样在4h时达到高峰,在5～6h时间段内逐渐减少.结论 CoCl2预处理小鼠海马组织中HIF-1α表达具有时间依赖性.     

食管癌组织中缺氧诱导因子-1α蛋白的表达

目的:检测食管癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的表达.方法:采用免疫组化方法检测100例食管癌及其癌旁正常组织中HIF-1α的表达.结果:食管癌组织中HIF-1α蛋白的阳性表达率明显高于正常黏膜(90%vs58%,P＜0.05),深层浸润组高于浅层浸润组(P＜0.05),与食管癌分化程度及淋巴结转移无关.结论:HIF-1α的高表达可能与微环境缺氧有关,亦可能与食管癌的癌变及浸润有关.     

缺氧对Tca83细胞中HIF-1α与MMP-9表达的影响

目的探讨缺氧对体外培养的人舌癌Tca83细胞中缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)1α及基质金属蛋白酶(matrix metaloproteinases)-9表达的影响。方法以CoCl2浓度为150 mmol/L的DMEM培养基体外培养Tca83细胞,分别为4、8、12、24 h,以未含CoCl2的培养基作空白对照组,采用免疫荧光染色检测Tca83细胞中HIF-1α及MMP-9的表达,分析缺氧时间不同对两种蛋白表达的影响。结果常氧条件下,HIF-1α与MMP-9的表达较弱。而缺氧条件下,HIF-1α与MMP-9表达明显增强,且随缺氧时间的延长,HIF-1α与MMP-9表达逐渐增强。结论应用浓度为150 mmol/L的CoCl2可以诱导Tca83细胞发生缺氧,缺氧可诱导Tca83细胞中HIF-1α与MMP-9表达增强,且HIF-1α与MMP-9表达水平随缺氧时间的延长而增强。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠背部随意型皮瓣活力影响的实验研究

目的:观察抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(Nacetylcysteine,NAC)对随意型皮瓣成活的影响。方法:采用Wistar大白鼠为实验动物,在其背部形成7cm×2cm的任意型皮瓣,将实验动物随机分为两组:对照组术后即刻腹膜下注射生理盐水,实验组术后即刻腹膜下注射NAC,并分别于术后1,12,24和48h取皮瓣组织作形态学观察并采用免疫组织化学方法(SP法)检测术后3h皮瓣组织TNFα的表达。结果:实验组皮瓣成活率明显高于对照组(P<0.01);组织学检查发现实验组皮瓣组织结构的破坏较对照组轻,炎症细胞浸润情况,术后1h两组差异无显著性意义(P>0.05),术后12,24和48h炎症细胞计数实验组低于对照组,两组差异有显著性意义(分别为P<0.05,P<0.01和P<0.01);两组术后3h皮瓣组织浸润的炎症细胞中均有TNFα表达,实验组为弱阳性,而对照组为强阳性。结论:腹膜下注射NAC可以提高大鼠背部随意型皮瓣成活率,其机制可能与下调TNFα等细胞因子的表达从而减少炎症细胞在皮瓣组织的浸润有关。     

烫伤诱导大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α定位表达的研究

目的 探讨40％Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子—1α(HIF—1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法 采用40％TBSAⅢ度烫伤大鼠模型,蛋白免疫印迹法(Western—blot)测定HIF—1α蛋白水平表达,免疫组化法定位显示HIF—1α表达。结果 烫伤后大鼠心肌组织内HIF—1α蛋白表达量明显升高。左、右心室HIE—1α蛋白表达不同,HIF—1α蛋白表达增加主要定位于细胞核。结论 严重烧伤可以诱导心肌组织HIF-1α蛋白表达增加。左心室对照组HIF—1蛋白含量明显高于右心室。HIF—1α蛋白表达增加主要分布于心肌细胞核内,诱导下游因子表达。     

里拉京通过下调NOTCH1信号通路抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖的实验研究

【摘要】目的 探讨柯里拉京能否通过下调NOTCH1信号通路抑制胃癌SGC 7901细胞的增殖, 以及对Hes1表达的影响。方法〓使用不同浓度的柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)对胃癌SGC 7901细胞进行干预。在不同时间点(0、24和48h)使用MTT法对SGC 7901细胞活性进行检测。干预48h后, 使用qPCR和western blot对在不同浓度(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)柯里拉京干预后,细胞NOTCH1、Hes1 mRNA和蛋白的表达水平进行分析。结果〓使用不同浓度柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)对胃癌SGC 7901细胞进行干预后, 细胞活性呈时间依赖性和剂量依赖性下降, 差异均有统计学意义(P＜005)。不同浓度柯里拉京(0μg/ml、10μg/ml和100μg/ml)干预48 h后, 胃癌SGC 7901细胞NOTCH1及Hes1 mRNA和蛋白的表达水平呈剂量依赖性降低, 差异均有统计学意义(P＜005)。结论〓柯里拉京可通过下调NOTCH1/Hes1信号通路抑制胃癌SGC 7901细胞增殖, 同时为柯里拉京用于临床治疗胃癌等恶性肿瘤奠定了实验基础。
     

缺氧诱导因子-1α在大肠腺癌组织中的表达意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大肠腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:用免疫组化SABC法检测50例大肠腺癌患者组织中HIF-1α的表达,并探讨HIF-1α表达与患者年龄、肿瘤大小、分化程度、浸润转移、临床分期等的联系。结果:正常大肠黏膜组织中HIF-1α均为阴性表达,50例肠癌组织HIF-1α阳性32例,表达率64.0%。HIF-1α主要表达于癌细胞浆及胞核,肿瘤坏死区周围及肿瘤浸润边缘部的癌细胞HIF-1α表达明显增多。其阳性表达与大肠腺癌浸润转移、Dukes分期有关。HIF-1α阳性表达率肿瘤浸润至浆膜组显著高于未浸润至浆膜组(74.36%vs27.27%),淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组(82.14%vs40.91%)。HIF-1α表达率随着Dukes分期从A到D期逐渐增高。HIF-1α表达与年龄、肿瘤大小、分化程度无关(P>0.05)。结论:HIF-1α在大肠腺癌组织中表达水平明显上调,与大肠腺癌的浸润、转移、临床分期密切相关,在大肠癌发展中起着重要作用。