HIV外膜蛋白的结构与功能研究进展

人免疫缺陷病毒 (ｈｕｍａｎｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｖｉｒｕｓ ,ＨＩＶ)ｅｎｖ基因编码的前体分子 ｇｐ16 0 (ＨＩＶ 1)或ｇｐ140 (ＨＩＶ 2 )经蛋白酶剪切加工后 ,成为成熟的外膜蛋白ｇｐ12 0 (ＨＩＶ 1) ｇｐ10 5 (ＨＩＶ 2 )和跨膜蛋白 ｇｐ41(ＨＩＶ 1) ｇｐ36 (ＨＩＶ 2 )。在病毒表面 ,外膜蛋白和跨膜蛋白以非共价键结合成Ｅｎｖ异二聚体 ,3个异二聚体组成包膜超分子结构 ,形成病毒表面的突起[1 ] 。ＨＩＶ外膜蛋白是激发体液免疫和细胞免疫应答的最重要蛋白抗原。自从 1984年Ｋｌａｔｚｍａｎｎ等发现ＨＩＶ与ＣＤ4+细…     

一株HIV1变异株的发现

我们在进行序列分析过程中发现一株不同于以往国内外报道的新型ＨＩＶ1的变异毒株。现报道如下 :1　材料和方法1.1　前病毒ＤＮＡ的提取　某ＨＩＶ1感染者 30 0 μｌＥＤＴＡ抗凝血 ,使用Ｐｒｏｍｅｇａ公司的ＤＮＡ提取试剂盒 (ＷｉｚａｒｄＧｅｎｏｍｉｃＤＮＡＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎＫｉｔ)提取ＨＩＶ1前病毒ＤＮＡ。1.2　ＨＩＶｅｎｖ基因ｃ2 -ｖ3区的套式ＰＣＲ扩增　以所提的ＨＩＶ1前病毒ＤＮＡ为模板 ,利用一对外侧引物ＥＰ1,ＥＰ2 (序列为 ,ＥＰ1:5′ -ＧＧＣＡＧＴＣＴＡＧＣＡ ＧＡＡＧＡＡＧＡＧＧ - 3′ ;ＥＰ2 :5′ -ＣＣ…     

AngⅡ、mm-LDL和TNFα对ECV304细胞 PDGF-B链基因转录调控的影响

目的 :从基因转录水平探讨ＡｎｇⅡ、ｍｍ -ＬＤＬ及ＴＮＦα对ＥＣＶ30 4细胞ＰＤＧＦ -Ｂ链基因表达的影响。方法 :( 1 )以ＧＡＰＤＨ为内参照 ,用反转录 -多聚酶链反应 (ＲＴ -ＰＣＲ)方法检测 1 0 - 6 ｍｏｌ/ＬＡｎｇⅡ、1 0 0 μｇ/ｍＬｍｍ -ＬＤＬ及 2 0 0Ｕ/ｍＬＴＮＦα作用于ＥＣＶ30 4细胞 1 8ｈ后各实验组ＰＤＧＦ -Ｂ链基因ｍＲＮＡ水平 ,分别为对照组的 1 5倍、2 0倍和 1 3倍 ,提示ＡｎｇⅡ、ｍｍ -ＬＤＬ及ＴＮＦα在转录水平对ＥＣＶ30 4细胞ＰＤＧＦ -Ｂ链基因的表达有促进作用。 ( 2 )构建一系列含人ＰＤＧＦ -Ｂ链基…     

云南省静脉吸毒者六种输血性相关病毒感染的流行病学调查

云南省近些年的静脉吸毒者 (Ｉｎｔｒａ ｖｅｎｏｕｓｄｒｕｇｕｓｅｒｓ,ＩＶＤＵｓ)急剧增多并居高不下 ,由此出现了多种经血传播病毒感染的报道。本项研究旨在探讨云南省ＩＶＤＵｓ的ＴＴ肝炎病毒 (ＨｅｐａｔｉｔｉｓＴＴｖｉｒｕｓ ,ＴＴＶ)感染状况和分子生物学研究 ;同时 ,还定群同步测试了ＨＩＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＧＶ和ＨＴＬＶ等 5种病毒的感染流行率 ,以探讨这 6种病毒对ＩＶＤＵｓ的相关致病性。选自云南省某戒毒所 15 8名ＩＶＤＵｓ的血清标本 ,男性 12 9例 (81 6 % ) ,女性2 9例 (18 4% ) ;男女平均年龄为 2 6 1±5 5岁 …     

IgM及IgG抗致新生儿溶血病1例报道

由于Ｒｈ血型不合引起的新生儿溶血病 (ＲｈＨＤＮ)屡见报道 ,均以抗Ｄ较为多见 ,而因抗 ｃ引起发生的新生儿溶血病 (ＨＤＮ)报道较少 ,就近我院发现 1例ＩｇＭ及ＩｇＧ抗 ｃ致新生儿溶血病 ,现报告如下。病例 :患儿 ,女 ,出生 4天 ,因面部发生黄染并波及全身加重入院治疗 ,实验室检查 :Ｈｂ 85ｇ/Ｌ ,ＲＢＣ 2 .6× 10 12 /Ｌ ,ＷＢＣ 13 2× 10 9/Ｌ。总胆红素 46 5 .1μｍｏｌ/Ｌ ,直接胆红素 2 0 .1μｍｏｌ/Ｌ ,间接胆红素 45 5 .9μｍｏｌ/Ｌ患儿系第二胎足月顺产 ,其母第一胎时妊娠足月发生死胎 ,自述无输血史。血型血清学检查1 试…     

感染人类免疫缺陷性病毒患者的血浆和中性粒细胞中巨细胞病毒DNA负荷的比较评价

巨细胞病毒 (ＣＭＶ)感染是艾滋病末期患者发病和死亡的重要原因。鉴于目前还不清楚哪一类ＰＣＲ(定性或定量 )和哪一种血液成份 (白细胞或血浆 )最适于诊断ＣＭＶ病 ,作者就此进行了较为详尽的探索。作者研究了两组实验对象。第 1组为 10 6例无症状的人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ)感染患者 ,第 2组为伴ＣＭＶ病的艾滋病患者。这些患者的血液在抽取后 6小时内离心收集血浆。血浆标本在过滤(0 .4 5μｍ孔 )后冷藏在 70℃以备ＤＮＡ提取。然后 ,剩余的血用 6 %的葡聚糖分离 ,收集中性粒细胞 ,同上条件保存。同时抽取ＨＩＶ 血清阴性 /ＣＭＶ 血…     

HI-SIV和HIVgp120干预CD_3/CD_4信号转导通路的研究

目的和方法 :在ＨＩＶ感染的早期及无症状的病毒携带者体内ＣＤ 4Ｔ淋巴细胞对抗原和有丝分裂原刺激缺乏ＩＬ - 2表达和增殖反应 ,甚至在ＣＤ 4Ｔ淋巴细胞进行性减少之前就已经有明显的免疫缺陷。形成这一损伤的确切机制尚不十分清楚 ,但已有研究证实ＨＩＶｇｐ1 2 0和ＣＤ4分子结合 ,从而抑制Ｔ淋巴细胞抗原受体 (ＴＣＲ)信号转导有关。本研究采用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ及电泳迁移率改变检测法 (ＥＭＳＡ)观察了ＨＩＶｇｐ1 2 0多肽片段和灭活ＳＩＶ病毒 (ＨＩ-ＳＩＶ)对ＣＤ3/ＣＤ4活化刺激诱导的ＴＣＲ信号转导通路的影响 ,了解病毒蛋白…     

重型β海洋性贫血一例及其家系成员调查

本文对浙西南畲族居民 β海洋性贫血 (地中海贫血 )流行病学调查过程中 ,发现 1例重型 β海洋性贫血 ,并对其家系成员进行调查 ,结果报告如下。病例 :　患儿 ,男 ,12岁 ,畲族。平素面色苍白 ,时常感冒、咳嗽 ,多次接受输血治疗。实验室检查指标 :ＲＢＣ 2 .2 9×10 12 /Ｌ ,ＨＧＢ 5 1ｇ/Ｌ ,ＭＣＶ 6 6 .8ｆｌ,ＭＣＨ 2 2 .3ｐｇ ,ＲＤＷ 31% ;ＨｂＦ 0 .4 2 % ,ＨｂＡ2 4 .2 %。通过ＰＣＲ和反向点杂交 (ＲＤＢ)技术对其白细胞提取液进行基因分析 ,结果为 - 2 8(Ａ -Ｇ) /- 2 8(Ａ -Ｇ)位点突变 ,属纯合子。确诊为重型 β海洋性贫血。患者…     

CD26,人免疫缺陷病毒感染细胞的辅助分子

人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染并进入细胞是ＨＩＶ感染的关键步骤。ＣＤ４分子为ＨＩＶ感染并进入细胞的第一受体，ＣＤ２６分子为ＨＩＶ感染并进入细胞的第二受体。从ＨＩＶ感染细胞的ＣＤ２６分子量显著减少，ＤＰＰⅣ酶活性抑制剂、ＣＤ２６分子的单抗阻断ＨＩＶ感染并进入细胞，ＣＤ２６与ＣＤ４基因共转染使ＮＩＨ３Ｔ３变成ＨＩＶ易感的细胞系等方面证实了ＣＤ２６分子在ＨＩＶ感染中的作用管一发现对ＨＩＶ生活周期、细胞及动     

血小板源生长因子对培养内皮细胞移行的影响及其与血管内皮细 …

一、材料与方法1 材料与试剂 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)株(ＥＣＶ30 4)由武汉大学菌种保存中心提供。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＤＭＥＭ/Ｆ12 、胎牛血清 (ＦＢＳ)及青霉素 链霉素均为美国Ｇｉｂｃｏ公司产品。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)抗血清为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＳＡＢＣ试剂盒抗血清及二氨基联苯胺(ＤＡＢ)由博士德公司提供。2 血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)对培养ＨＵＶＥＣ移行的影响 :参照Ｇａｊｄｕｓｅｋ等[1] 介绍的方法 ,并加以改进。选用生长良好的ＨＵＶＥＣ悬液 ,调整细胞密度为 2× 10 4 个 /…     

用B7~ 瘤细胞诱导抗肿瘤CTL及其杀伤活性的测定

目的和方法 :研究利用脂质体转染的方法 ,将小鼠Ｂ7基因导入Ｃ57ＢＬ小鼠大肠癌细胞株ＣＭＴ93细胞 (弱免疫原性 )。用 80 0 μｇ/ｍＬ的Ｇ41 8筛选得到阳性克隆 ,免疫组织化学检测发现Ｂ7分子得到充分表达 ,主要以细胞膜染色为主 ,也有部分细胞浆着色。将 5× 1 0 6Ｂ7 ＣＭＴ93细胞接种于Ｃ57ＢＬ小鼠背部皮下 ,以相同细胞数的野生型瘤细胞接种为阴性对照。结果 :实验组小鼠 (ｎ =4)第 2周开始肿瘤的体积逐渐缩小 ,至第 4周末肿瘤全部消失 ,而对照组肿瘤呈进行性生长 (ｎ =3) ,至第 4周末肿瘤大小为 ( 1 7654± 0 4963)ｃｍ2 (长径×短…     

HIV-1CN54合成gag DNA疫苗鼻内免疫BALB/c小鼠诱发的免疫应答

目前 8 0 %的ＨＩＶ感染是通过粘膜表面 (主要是肠道和生殖道 )发生的。粘膜免疫保护粘膜表面不感染ＨＩＶ ,除抗体的作用之外 ,ＣＤ8+ＣＴＬ细胞应答也发挥重要作用。ＨＩＶ 1ＣＮ54 是Ｂ′ Ｃ重组毒株 ,中国与欧盟合作以其为代表毒株研制疫苗 ,以期预防和控制艾滋病。我们以前的研究表明用ＨＩＶ 1ＣＮ54 合成ｇａｇ(ｓｙｎｇａｇ)的ＤＮＡ疫苗进行肌肉注射免疫小鼠诱发比较强的体液和细胞免疫应答 ,本研究则采用鼻内接种ＤＮＡ疫苗的方法 ,观察是否诱发系统和粘膜的免疫应答。取雌性ＢＡＬＢ ｃ(6～ 8周 ,重 18～2 0ｇ) ,每笼 4只 ,任意…     

肝脾γδT细胞淋巴瘤一例

患者女 ,4 5岁。上腹胀痛伴发热 ,月经量多 ,鼻衄 3个月于 2 0 0 1年 3月 6日入院。体检 :消瘦 ,贫血貌 ,皮肤散在淤点紫癜 ,颈部、腋下及右滑车上淋巴结肿大。胸骨无压痛。肝肋下 2ｃｍ ,剑下 4ｃｍ。脾脏明显肿大 ,Ⅰ线 12ｃｍ ,Ⅱ线 14ｃｍ ,Ⅲ线 1ｃｍ。Ｂ超检查 :脾厚 7ｃｍ ,实质回声均匀 ,腹腔内未发现淋巴结明显肿大。实验室检查 :白细胞 4 .1× 10 9/Ｌ ,中性粒细胞 0 .5 2 ,淋巴细胞 0 .4 4 ,血红蛋白 74ｇ/Ｌ ,血小板 2 4×10 12 /Ｌ ,红细胞 2 7× 10 12 /Ｌ。临床免疫学检查 :ＣＤ385 4 % ,ＣＤ4 5 4 .2 % ,ＣＤ8正常。球蛋…     

酶联免疫吸附法同时检测血清中的HIV和HCV抗体

用酶联免疫吸附试验检测病毒抗体 ,多为对单一抗体的检测 ,我们将人类免疫缺陷病毒 (ＨＩＶ 1 2 )和丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)抗原包被于同一载体 ,同时检测这两种病毒的抗体 ,取得了与单测法基本一致的效果。ＨＩＶ 1 2抗原和ＨＣＶ抗原为加拿大Ｙｅｓ生物技术研究有限公司产品 ;ＨＩＶ酶联免疫检测试剂盒批号 96 0 5 15 ,ＨＣＶ酶联免疫诊断试剂盒批号 96 0 72 3,均为厦门新创科技有限公司产品。ＨＩＶ和ＨＣＶ抗体阴、阳性国家参照品由卫生部药品生物制品检定所制备 ,批号分别为 96 0 1、96 0 4。 112 0份血清样品取自山东医科大学附属医院…     

血清HIV抗体阴性静脉药瘾者肝组织HIV DNA测定

为评估ＨＩＶ抗体阴性ＨＩＶ感染高危人群潜在的ＨＩＶ传播性 ,本研究对来自德国的 38例ＨＩＶ抗体阴性的静脉药瘾者肝组织样品进行常规ＤＮＡ抽提 ,用ＨＩＶ不同结构区 (ｇａｇ,ｐｏｌ,ｅｎｖ) 6对引物同时扩增ＨＩＶＤＮＡ。结果发现 38例肝组织中有 30例在ＨＩＶｇａｇ区 (Ｍ6 6 7 ｓｋ0 3ｃ ,Ｍ6 6 1 ｓｋ0 1ｃ)发生特异性扩增。 10例对ＨＩＶｅｎｖ区 (ｅｎｖ5 2 6 Ｃ0 2 ,ｅｎｖＣ0 1 5 71Ｋ)发生特异性扩增。进一步分析发现 38例中有 3例同时在ｇａｇ、ｐｏｌ、ｅｎｖ 3个区域产生特异性扩增 ,12例分别对ＨＩＶｇａｇ和ｐｏｌ区或ｇ…     

十二指肠溃疡伴幽门螺杆菌感染者胃窦组织中T淋巴细胞的检测

经胃镜 ,尿素酶及病理检查证实的十二指肠溃疡 (ＤＵ)并幽门螺杆菌 (Ｈｐ)感染者 44例 ,并以年龄与前者近似胃镜下确诊的Ｈｐ(- )慢性浅表性胃炎 (ＣＳＧ)30例为对照。胃镜下取胃窦组织 5～ 6块 ,应用免疫组织化学法 (ＩＨＣ)及流式细胞术 (ＦＣＭ)对组织内Ｔ细胞亚群ＣＤ3、ＣＤ4和ＣＤ8含量分别进行检测。ＦＣＭ检测 ,采用微小组织标本制作机先将胃窦组织研碎 ,取出悬液 ,尼龙沙网过滤 ,电子温控离心机 2 0 0×ｇ离心 ,洗涤后制成1× 10 6/ｍｌ的单细胞悬液。采用三色免疫荧光 (ＣＤ3 ＰｒｅＣＰ、ＣＤ4 ＦＩＴＣ、ＣＤ8 ＰＥ10 μｌ)直接…     

深圳地区小儿肠道病毒感染的核酸检测分析

为了解深圳地区肠道病毒 (ＥＶ)的感染流行情况和病毒分型特征 ,我们采用检测ＥＶ的套式逆转录聚合酶链反应(ＲＴ ｎＰＣＲ)方法进行ＥＶ感染检测 ,并对临床分离株 5′端非编码区 ( 5′ＵＴＲ)基因序列进行分子进化树分析。采用ＴＲＩＺＯＬ ＬＳＲｅａｇｅｎｔ试剂从疑诊ＥＶ感染儿童大便、咽拭子和脑脊液中提取ＥＶ ＲＮＡ ,根椐ＥＶ 5′ＵＴＲ保守的基因序列设计两对特异性引物 ,引物序列分别为ＥＶＰ1 60 :5′ＣＡＡＧＣＡＣＴ(ＴＡ)ＴＴ(ＣＡ)ＣＣＣＣＧＧ3′,ＥＶＰ2 50 :5′ＴＡＣＴＴＧＡ(ＧＡ)ＣＣ ＴＡＧＴＡ3′,ＥＶＰ50 0 :5′…     

我国人免疫缺陷病毒感染者病原学和免疫学指标及其 …

目的 研究中国人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）感染者实验指标在临床进展中的意义及各指标间的相互关系。方法 对我国１９０例ＨＩＶ感染样品进行了测定,主要指标包括血浆病毒载量,Ｐ２４抗原检测,病毒培养及Ｔ淋巴细胞亚群计数。结果 血浆ＨＩＶ病毒载量,ＣＤ４计数及ＣＤ４计数及ＣＤ４／ＣＤ８比值与临床进程明显的相关（Ｐ〈０．０１）;     

抗人红细胞血型B抗原单链抗体基因的构建表达

我室曾建立分泌抗Ｂ血型抗原ＩｇＭ类单克隆抗体的5Ｄ12杂交瘤细胞株[1] ,本文应用基因工程技术 ,分离和克隆了 5Ｄ12株单抗的ＶＨ 和ＶＬ 基因 ,采用重叠延伸拼接ＰＣＲ(ＳＯＥＰＣＲ )技术[2 ] 体外成功构建 5Ｄ12单链抗体基因 ,获得较高水平的表达。1　材料和方法1 1　细胞和载体　Ｅ ｃｏｌｉＴＧ1为英国Ｗｉｎｔｅｒ教授惠赠 ;质粒ｐＧＥＸ 4Ｔ 2购自Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司 ;含十五肽接头质粒ｐＳＴＥ 2 15由德国Ｄｕｂｅｌ教授惠赠。1 2　引物和试剂　用于扩增重链可变区的一对引物为ＶＨＢａｃｋ (5 ＡＧＧＴ (Ｃ/Ｇ )ＣＡＧＣＴＧ…     

心电图显示心前区右束支传导阻滞和ST段抬高的长期随访

ＢｒｕｇａｄａＪ等报道〔Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ,2 0 0 2 ,10 5 (1) :73- 78〕ＥＣＧ显示右束支传导阻滞和心前区导联Ｖ1～Ｖ3 ＳＴ段抬高常见于心脏猝死患者 ,但在无临床症状患者中出现 ,其预后令人质疑。选择Ｂｒｕｇａｄａ表型的 334例患者 ,进行心电图检查和随访。其中男 2 5 5例 ,女 79例 ,平均年龄 (42± 16 )岁。心脏骤停复苏后ＥＣＧ异常者共分三组 :71例 (Ａ组 )、晕厥后 73例 (Ｂ组 )和无症状的 190例 (Ｃ组 )。三组中室性心律失常分别为 83%、6 3%、33%。随访 (5 4± 5 4 )个月和 (2 6± 36 )个月 ,在Ａ组中 6 2 %患者及Ｂ组…