红细胞内多感染的间日疟原虫形态学观察

近些年来,国内外在临床检验及流行病学调查中,陆续发现间日疟原虫形态学的特异改变。引起寄生虫学工作者的特别注意。我们于1980年5月3日在我院第二附属医院门诊发现1例间日疟原虫重度感染患者,男,17岁,武汉市郊学生。主诉畏寒、发热、出汗1周余,每日中午发作,持续5～6小时,发作间期有头痛、疲乏等-症状.1979年秋季有类似发作史,未作抗疟治疗。检查时患者体温39.1℃,轻度昏迷,肝大肋下1.0厘米,质软。血液涂片检查发现各虫     

根治间日瘧带虫者116例临床初步疗效观察

消灭人体内的间日疟原虫、根除复发是当前疟疾防治工作中的重要任务之一。我们为了探求简便有效的根治方法,根据省血研会的指示精神,特成立了根治间日疟研究小组,于本年6月份在山区的太平县广阳公社进行根治的试验研究工作,现将临床初步疗效观察报告如下:一、方法1.治疗对象:以低年级小学生、幼儿班及幼儿园的学龄与学龄前儿童为主,通过血检发现有间日疟原虫者即作为治疗对象。2.治疗方法:采用亲配子体和亲裂殖体的西药分4组进行,由工作人员送药到手监督服用。各组儿童服药量按成人量递减如表1:     

聚合链酶反应对海南疟区儿童带疟原虫的调查

为了解应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测疟区儿童带疟原虫的效果，参照文献合成恶性疟原虫（ＰＦ）与间日疟原虫（ＰＶ）引物各１对，并改进标本处理方法，按ＰＣＲ检测操作常规，对采自乐东县的恶性疟与间日疟混合流行区的儿童血标本，分别进行ＰＦ与ＰＶ的ＰＣＲ检测，同时以厚血膜镜检法对照比较。１１９例儿童血标本检测结果，ＰＣＲ法与镜检法的带疟原虫率分别为６．７２％和５．０４％，镜检发现的ＰＦ与ＰＶ带虫者，ＰＣＲ皆可     

间日疟原虫多核与复居时期性一例观察

间日疟原虫多核和复居现象，江静波氏认为是间日疟原虫一个亚种、杨柏林氏认为是间日疟原虫固有的形态或某种变异。笔者于1984年9月在珙县王家乡对一例每日发作间日疟病人的原虫象进行了两个临床周期的观察。     

BinaxNOW 疟原虫检测试剂卡临床应用效果观察

目的评价美国Inverness medical professional diagnostics公司生产的疟原虫检测试剂卡的临床应用效果。方法以镜检方法作为金标准比较BinaxNOW疟原虫检测试剂卡临床应用效果。结果 400份样本用镜检方法和BinaxNOW疟原虫检测试剂卡诊断,镜检法检出阳性138份,其中恶性疟77份、间日疟61份;疟原虫检测试剂卡检出阳性139例,其中恶性疟71份,间日疟68份。试剂卡检测疟疾的敏感度为98.55%,特异度为98.85%,检测恶性疟的灵敏度为87.01%、特异度为98.76%,检测间日疟的敏感度为93.44%、特异度为96.76%。存在交叉反应。结论BinaxNOW疟原虫检测试剂卡诊断疟疾敏感性与特异性高,操作简单,结果显示直观、快速,适合边远疟区无镜检能力的个体、乡村医生开展疟疾筛查。     

BinaxNOW(R)疟原虫检测试剂卡临床应用效果观察

目的 评价美国Inverness medical professional diagnostics公司生产的疟原虫检测试剂卡的临床应用效果.方法 以镜检方法作为金标准比较BinaxNOV 疟原虫检测试剂卡临床应用效果.结果 400份样本用镜检方法和BinaxNOW 疟原虫检测试剂卡诊断,镜检法检出阳性138份.其中恶性疟77份、间日疟61份;疟原虫检测试剂卡捡出阳性139例,其中恶性疟71份,间日疟68份.试剂卡检测疟疾的敏感度为98.55%,特异度为98.85%,检测恶性疟的灵敏度为87.01%、特异度为98.76%,检测间日疟的敏感度为93.44%、特异度为96.76%.存在交叉反应.结论 BinaxNOW 疟原虫检测试剂卡诊断疟疾敏感性与特异性高,操作简单,结果显示直观、快速,适合边远疟区无镜检能力的个体、乡村医生开展疟疾筛查.     

云南省昭通市疟疾的实验室诊断研究

目的通过多种实验室方法综合诊断昭通市疟原虫疑似病例,为疟疾防治提供参考。方法用疟原虫检测试纸条(immune colloidal gold technique,ICGT)先做快速检测,然后按照镜检标准制作厚、薄血涂片,经常规吉氏染色后在油镜下(×1 000)的薄血膜观察疟原虫形态,鉴定虫种。最后针对间日疟原虫(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、三日疟原虫(Plasmodium malariae)和卵形疟原虫(Plasmodium ovale)4种疟原虫的18s rRNA基因进行巢式PCR扩增。结果 10份县区采集的疑似病例,快速试纸条1532未做,3份可诊断为恶性疟,其它6例皆不能明确诊断;显微镜下4份可明确诊断为恶性疟,其中1201为高密度恶性疟,3份可明确诊断为间日疟,1649县级初次镜检误诊为间日疟,省级镜检确诊为卵形疟,1532县级初次镜检误诊为恶性疟,省级镜检未发现疟原虫;所有病例皆经省级采用巢式PCR扩增,4份确诊为恶性疟,3份确诊为间日疟,1649确诊为卵形疟,1532和A无条带。经快速检测、镜检、巢式PCR,证实昭通市2013年9月以来报告的10例疟疾病例分别为3例间日疟、4例恶性疟、1例卵形疟、2例阴性。结论基层镜检技术不稳定;胶体金法诊断结果不能作为确诊依据,镜检准确性依赖于镜检人员技术水平,剿式PCR法诊断最为准确;疟疾确诊需逐级复核和多种实验室方法综合判断。     

多重巢式聚合酶链反应在疟疾混合感染检测与分型中的应用

目的:应用能够同时检测恶性疟(P.falciparum)、间日疟(P.vivax)、卵形疟(P.ovale)、三日疟(P.malarie)及其混合感染的多重巢式PCR方法,对疑似疟疾混合感染样本进行检测,评价其在疟原虫混合感染及分型中的应用价值,旨在为疟疾流行病学调查、疟疾混合感染的确诊提供一种快速高效、特异性强、灵敏度高的实验室诊断方法,为传统的镜检法提供有效的补充。方法:根据恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫的18SSU rRNA基因序列设计5对引物(1对通用引物、4对特异性引物),以等比例混合的4种疟原虫核酸为模板,建立疟疾多重巢式PCR检测方法,并应用该法对28份疑似疟疾混合感染样本进行检测及测序验证,将其结果与镜检法比较。结果:28份疑似混合感染样本中混合感染样品数为6例,其中恶性疟和间日疟混合感染样品5例,恶性疟和卵形疟混合感染样品1例。结论:本研究建立的多重巢式PCR检测方法能够同时用于恶性疟、间日疟、卵形疟、三日疟及其混合感染样本的检测,在疟疾混合感染的确诊与分型上较镜检法有明显的优势和更高的应用价值。     

用~(32)P标记的重组DNA探针检测红内期间日疟原虫

目前有关间日疟原虫基因诊断的报道极少,作者首次用中国地理株来源的间日疟原虫DNA重组质粒为探针,检测红内期间日疟原虫,同时与镜检方法进行了比较.1 材料和方法 含间日疟原虫DNA插入片段的重组质粒为作者克隆,用[α-~(32)P]dCTP[北京     

聚合酶链反应检测疟疾的研究

目的 建立能鉴别诊断恶性疟原虫间和日疟原虫的PCR检测方法。方法 根据红内期疟原虫SSUr-RNA基因序列,设计合成两对引物,采用PCR技术,检测89份门诊“四热”病人血样,并与镜检法进行比较研究。结果 恶性疟原虫血样能扩增出205bp的特异带,间日疟原虫血样能扩增出120bp的特异带,PCR检测的阳性率为74.16%,镜检法为68.54%,PCR法与镜检法的符合率为94.38%。结论 PCR检测的敏感性和特异性均优于镜检法,对于诊断恶性疟原虫和间日疟原虫以及恶性疟原虫的间日疟原虫的混合感染具有一定的应用价值。     

间日疟原虫孢子期SSUrRNA基因扩增、鉴定及其诊断应用

目的体外扩增、克隆间日疟原虫孢子期SSUrRNA编码基因特异性片段，分析其分子特征，评价其核酸诊断应用效果。方法根据间日疟原虫基因库相关核酸序列设计引物，采用聚合酶链反应技术从间日疟患者血样DNA提取物中扩增出间日疟原虫SSUrRNA基因片段，与pGEM—Teasy质粒连接构建重组子并转化大肠杆菌JM109；阳性克隆以双酶切鉴定后，双脱氧末端终止法测定分析其序列特征；以SSUrDNA为靶基因，建立间日疟PCR诊断方法，并以镜检法为标准评价其用于间日疟原虫感染的检测效果。蛄果从间日疟患者血样中扩增的SSUrDNA片段大小约为267bp；阳性克隆双酶切及PCR扩增均得到预期大小的片段；核酸序列测定显示插入的SSUrRNA基因扩增片段，含有267个核苷酸，与间日疟原虫Sall株孢子期SSUrRNA基因序列比较，同源性为99．3％，其中第220住为插入了1个碱基“T”，243住碱基由“G”取代了“T”。将纯化的含有SSUrRNA靶基因的重组质粒以正常人血液核酸提取液倍比稀释成浓度梯度作模板，PER扩增结果显示检测灵敏度至少迭102copy／μl；特异性检验显示仅间日疟原虫患者血样扩增出约267bp的特异性基因片段，而恶性疟原虫、弓形虫、血吸虫、肝吸虫感染患者血样及正常人血未见特异性扩增条带。以镜检法为参照标准，PCR敏感性为100％（102／102），特异性为100％（76／76）。结论所扩增克隆的间日疟原虫孢子期SSUrDNA片段序列具有种特异性且相对稳定，不同地理株间存在单核苷酸多态性，以其为靶基因建立的PCR检测方法敏感、特异，具有良好的推广使用价值。     

上海市20家医院疟疾血片镜检考核结果分析

目的对20家医院疟疾血片镜检考核结果进行分析,发现不足并提出提高镜检能力的建议。方法对镜检实验室进行盲样考核。结果二级及以上医院的正确率为97.2%,一级医院的正确率为77.8%两者比较差异具有统计学意义（χ2=7.27,P〈0.05）,间日疟原虫血片的镜检正确率为85.0%,恶性疟原虫血片的镜检正确率为71.2%,两者比较差异具有统计学意义（χ2=8.6,P〈0.05）。结论二级及以上医院比一级医院镜检能力强,镜检人员对间日疟原虫的检出能力强于恶性疟原虫     

小柴胡汤加味治愈疟疾14例介绍

用小柴胡汤加味治疗疟疾,效果满意。现介绍如下。凡有典型临床症状及发病二次以上,并于周围血液中检见疟原虫者;或有典型的发病史及临床症状,发作三次以上,白细胞总数减少,虽未找见疟原虫者均列为本文观察对象。本组疟疾患者14例,其中男13例,女1例;年龄16—51岁;三日疟者1例,间日疟者13例;初发3例,连年复发者11例。     

聚合酶链反应用于恶性疟疾诊断初步研究

合成一对恶性疟原虫特异引物，用聚合酶链的反应（PCR）技术检测海南岛恶性疟病人滤纸血滴30例，结果28例阳性，在206bp处可见一条清晰易辨的扩增条带，2例阴性经血片复查，其中1例为间日疟原虫；同时检测间日疟病人血滴和未发现原虫的发热病人血滴各16例，均为阴性，与镜检符合率达98．4％（61／62例）。初步表明PCR法具有准确、敏感、特异、简捷等优点，采用滤纸血滴方便现场采样、保存和送检，且易批量检测，在疟疾临床诊断和流行病学调查方面，将可替代血片镜检法，逐步扩大应用。     

间日疟原虫红内期SSUrRNA基因片段的扩增、测序及诊断应用

目的：体外扩增间日疟原虫（深圳株）红内期小亚单位核糖体核糖核酸编码基因（SSUrDNA）片段，克隆测序分析，并探讨其诊断应用。方法：设计1对特异性引物，采用聚合酶链反应（PCR）从间日疟患血样中扩增出间日疟原虫SSUrDNA片段；用PUC19质粒T载体构建重组子导入大肠杆菌JM109；阳性克隆双酶切鉴定后，双脱氧末端终止法测定序列；以SSUrDNA为靶基因，PCR诊断间日疟，双盲法检测40份血样（28份镜检阳性的血样，12份健康血）。结果：间日疟原虫SSUrDNA扩增片段大小约为341bp；阳性克隆双酶切及PCR扩增均得到预期大小的片段；序列测定插入片段为341bp，与SalI株顺序相比，仅在第151位处缺失1个碱基C；以SSUrDNA为靶基因，双盲法检测镜检阳性及健康人血样，结果完全正确。结论：所克隆的间日疟原虫SSUrDNA片段序列在间日疟原虫虫株间高度保守，以其为靶基因建立的PCR检测方法适用于间日疟的诊断。     

关于变异间日疟原虫

近年来,江苏发现有变异的间日疟原虫(据张奎等1977、1979年报道),主要特征为间日疟原虫滋养体期具有多核、同期和不同期的重复感染,部分疟原虫游离于红细胞外,受染的红细胞胀大变形等。据此,1980年10月起,我们复查了历年保持的广西间日疟原虫薄血膜制片标本。在查片镜检中也发现了这种变异的间     

间日疟临床非典型发作因素探讨

<正> 为探讨间日疟非典型发作是否与非同步发育的各批疟原虫有关,给临床诊断和防治工作提供依据。作者自1982年以来,对经血检确诊,临床发作在二场以上的135例非典型发作和94例典型发作的间日疟进行了对比观察。     

疟疾发作的时间为什么长短不一?

疟疾的发作是由于进入红细胞内发育成熟的疟原虫裂殖子周期性破坏红细胞所引起的。由于疟原虫的种类不同,疟原虫裂殖子在红细胞里生长成熟的时间不同,故发作的时间也就长短不一样。间日疟裂殖子发育成熟的时间为48小时,每48小时挤破红细胞释放裂殖子1次,故呈间日定时寒热发作。三日疟为72小时,故隔2天发作1次;卵形疟     

应用双重PCR检测海南疟区发热病人的效果

目的 评价双重PCR检测疟区发热病人的效果。方法 对疟区求诊发热病人，手指取血分别制作厚薄血膜片和滤纸血斑作为检测血样。参照献用恶性疟原虫PF1－2和间日疟原虫PV3－5为特异性引物，同在一个反应体系常规进行PCR，扩增片段分别为206bp和431bp。同时镜检厚血膜作对照。结果 该反应体系最低可检出原虫血症为1个恶性疟原虫／μl血和10个间日疟原虫／μl血的感染；检测132例疟区发热病人血样的阳性率为65．1％，而镜检法为64．4％，且有1例漏诊和3例误诊，两法符合率为97％。结论 双重PCR用于疟区发热病人检测，较镜检敏感、特异，适合我国恶性疟与间日疟混合流行区的疟疾诊断，还可用于血检质量的监控。     

中缅边境居民疟疾感染的疟原虫抗原检测、镜检和PCR筛查

目的 了解云南省沧源县抵边村寨居民和境外周边居民疟疾感染情况，比较疟原虫抗原检测（RDT）、镜检和PCR在低疟区和消除区居民疟疾筛查效果，为预防疟疾消除后再输入提供依据。方法 2020年8月—2021年3月，在中缅边境地区云南省临沧市沧源佤族自治县班老乡、缅甸掸邦第二特区勐冒县班歪区梅不老乡、缅甸掸邦第二特区南邓特区拥摸和大岩乡3个调查点，采集调查对象指尖血，运用RDT、疟原虫显微镜检查法、荧光定量PCR与巢式PCR法检测疟原虫感染情况。结果 共采集1 040人份血样，含中国居民606人、缅甸居民434人。其中男性506人，女性534人，年龄0～<5、5～<15、15～<30、30～<45、45～<60和≥60岁分别有51、283、187、232、205和82人。经疟原虫抗原检测试剂盒法检测1 040人均为阴性，疟原虫显微镜检查法检出间日疟阳性1份，疟原虫检出率为0.10%，荧光定量PCR与巢式PCR检出间日疟阳性1份，疟原虫检出率为0.10%。其中，缅甸掸邦第二特区勐冒县班歪区梅不老乡检出间日疟1例，疟原虫检出率为0.35%，云南省临沧市沧源佤族自治县班...