DNA甲基化水平与肝癌发生关系的研究进展

本文综述了肝癌发生过程中基因的异常改变,ＤＮＡ 甲基化程度与肿瘤发生关系;癌基因及癌相关基因甲基化水平与肝癌发生之间的关系;分析肝癌基因甲基化检测存在问题并作一展望     

中枢神经系统损害时DNA损伤与修复

中枢神经系统损害时ＤＮＡ损伤及修复机制缺陷与卒中等ＣＮＳ疾病相关。关于ＤＮＡ损伤和修复机制及其与卒中等ＣＮＳ损害关系的研究是一新课题，具有重要的理论和实践意义。     

中枢神经系统损害时DNA损伤与修复

中枢神经系统(CNS)损害时DNA损伤及修复机制缺陷与卒中等CNS疾病相关。关于DNA损伤和修复机制及其与卒中等CNS损害关系的研究是一新课题,具有重要的理论和实践意义。     

DNA甲基化与肝癌研究进展

ＤＮＡ甲基化是转录水平的ＤＮＡ的修饰方式之一,其在调节基因表达及维持细胞正常分化中起着重要作用。正常情况下细胞内约７５％的胞嘧啶一鸟嘌呤碱基对中的胞嘧啶（Ｃ）处于甲基化状志,它是维持细胞稳定性的重要因素,其水平下降或模式改变可导致基因结构和功能的异常,是细胞癌变中重要的一步。大量实验表明,在肿瘤的发生发展中存在ＤＮＡ甲基化水平和模式的紊乱。研究发现,化学致癌剂诱发的大鼠肝结节增生和肝癌中可发现ｃ－ｍｙｃ、ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因的ＤＮＡ甲基化模式改变,而相应癌基因表达增加［１］。我国为肝癌（ＨＣＣ）…     

脑缺血与DNA损伤

脑缺血再灌注时 ,细胞内氧自由基大量增加 ,直接参与神经元损伤 ,其机制与氧化DNA损伤有关。氧化DNA损伤主要包括DNA单链损伤和双链损伤。DNA单链损伤可造成多二磷酸腺苷 核糖多聚酶 (PARP)过度激活 ,并引起辅酶I(NAD )衰竭 ,使细胞能量代谢障碍 ,最终导致细胞死亡。研究氧化DNA损伤的分子机制及寻找抑制DNA损伤的特异性药物 ,对于缺血性脑损伤的防治具有极其重要的意义。     

脑缺血与DNA损伤

脑缺血再灌注时,细胞内氧自由基大量增加,直接参与神经元损伤,其机制与氧化ＤＮＡ损伤有关。氧化ＤＮＡ损伤主要包括ＤＮＡ单链损伤和双链损伤。ＤＮＡ单链损伤可造成多二磷酸腺苷－核糖多聚酶（ＰＡＲＰ）过度激活,并引起辅酶Ｉ（ＮＡＤ＾＊）衰竭,使细胞能量代谢障碍,最终导致细胞死亡。研究氧化ＤＮＡ损伤的分子机制及导找抑制ＤＮＡ损伤的特异性药物,对于缺血性脑损伤的防治具有极其重要的意义。     

DNA甲基化与肝癌的研究现状

原发性肝细胞癌(肝癌)是最常见的恶性肿瘤之一,其发生是一个多阶段的过程,包括遗传学和表观遗传学改变引起的原癌基因激活和抑癌基因失活。既往研究普遍认为,遗传学改变是肝癌发生的核心环节,近年来随着对肝癌认识的深入,发现表观遗传学改变对其发生发展亦起着重要作用,其中DNA甲基化的研究较为广泛和深入。此文就DNA甲基化与肝癌发生发展的关系,以及甲基化在肝癌临床诊治和预后评估中的意义进行综述。     

原发性肝癌患者DNA损伤修复酶基因多态性分析

目的探讨DNA损伤修复酶基因多态性与原发性肝癌发生发展的关系。方法 PCR-RFLP法检测150例肝癌患者（肝癌组）和150例健康体检者（对照组）DNA损伤修复酶基因的表型,并进行比较。结果肝癌组XRCC1 Arg399Gln位点野生型的比率明显低于对照组（P〈0.05）;XRCC1（Arg194Trp、Arg280His）、hOGG1Ser326Cys位点多态性型别在两组中出现的频率相近（P〉0.05）;各基因位点不同表型者的尿8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平相比,P均〉0.05。结论 DNA修复酶基因多态性与肝癌的发生发展无明确的相关关系。     

Multifaceted Influence of Histone Deacetylases on DNA Damage Repair: Implications for Hepatocellular Carcinoma

Hepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most commonly diagnosed cancers and a leading cause of cancer-related mortality worldwide, but its pathogenesis remains largely unknown. Nevertheless, genomic instability has been recognized as one of the facilitating characteristics of cancer hallmarks that expedites the acquisition of genetic diversity. Genomic instability is associated with a greater tendency to accumulate DNA damage and tumor-specific DNA repair defects, which gives rise to gene mutations and chromosomal damage and causes oncogenic transformation and tumor progression. Histone deacetylases (HDACs) have been shown to impair a variety of cellular processes of genome stability, including the regulation of DNA damage and repair, reactive oxygen species generation and elimination, and progression to mitosis. In this review, we provide an overview of the role of HDAC in the different aspects of DNA repair and genome instability in HCC as well as the current progress on the development of HDAC-specific inhibitors as new cancer therapies.     

H_2O_2致小鼠淋巴细胞DNA的损伤及修复

目的　应用单细胞电泳检测 (SCGE)过氧化氢 (H2 O2 )致小鼠淋巴细胞 DNA损伤及其修复。方法　标准 SCGE条件下荧光显微镜观察。结果　 H2 O2 不同浓度 80、16 0和 32 0μmol/ L ,3个组 H2 O2 浓度均可致小鼠淋巴细胞 DNA损伤 ,较低剂量即可造成细胞拖尾 ,可逆性损伤在 6 0 m in内可获得明显修复。结论　单细胞电泳可快速灵敏地检测氧化损伤 ,也可能用于流行病学研究。     

缺锌对衰老小鼠抗氧化系统和肝脏DNA损伤修复功能的影响

目的　通过D 半乳糖诱导小鼠衰老模型 ,探讨缺锌对衰老小鼠抗氧化系统和肝脏DNA损伤与修复的影响。　方法　雄性 3月龄小鼠 70只 ,随机分成 5组 :青年组、衰老模型组、衰老缺锌组、衰老配喂组和衰老补锌组。各衰老组按 10 0mg /kg经颈背部皮下给予D 半乳糖注射液 ,青年组给予等剂量的生理盐水 ,连续 30d。衰老缺锌组和补锌组喂饲缺锌饲料 (含锌 1 6 1μg/kg) ,其他组喂饲正常锌饲料 (含锌 5 0 μg/kg) ,最后 2周补锌组喂饲补锌饲料 (10 0 μg/kg)。第 30天处死小鼠 ,取样检测血清锌、肝锌、超氧化物歧化酶、丙二醇、肝脂褐质和DNA损伤情况。　结果　与衰老模型组相比 ,衰老缺锌组血清锌 (0 5 3± 0 1)mg/L、肝锌 (14 5 4± 2 18)mg/L水平下降 ,血清和肝超氧化物歧化酶活性〔(14 2 87± 10 16 )NU/ml和 (180 11± 13 2 2 )NU/ml,P <0 0 5〕降低 ,丙二醇含量升高 ,肝脂褐质含量增高 ;彗星试验显示衰老缺锌组小鼠肝DNA损伤加重 ,彗星细胞尾长 /总长比值显著增加。补锌后上述指标均有改善。　结论　锌可有效的影响衰老的速度和程度 ,缺锌可加速衰老的进程 ,适当补锌有助于延缓衰老。     

DNA损伤修复基因hOGG1的遗传多态与乙肝相关性HCC的风险

目的:探讨DNA损伤修复基因hOGGI的遗传多态Ser326Cys与肝细胞癌(HCC)易感性的关系．方法:应用基因测序分型方法,分析96例HCC患者和96例健康对照hOGG1的遗传多态及与HBV感染的交互作用．结果:HCC病例组的Cys／Cys,Cys／Ser和Ser／Ser基因型分别为20．9％,44．2％和34．9％．Ser／Cys杂合子个体的OR值为1．5,Cys／Cys纯合子个体的OR值为1．9,明显高于Ser/Ser个体,表现出剂量效应．HBV感染者发生HCC的相对风险度是非HBV感染者的9倍(OR=9．2;95％CI 0．99-5．9)．对于HCC,hOGG1-Ser326Cys变异或HBV感染单一因素的OR值分别为5．5 (95％CI 0．7-240．1)和10．9(95％CI1．6-453．3),但携带变异基因者如果感染HB V,OR值则高达27．8(95％CI4．7-970．2)．结论:DNA修复基因hOGG1的Cys等位基因可能增加HCC的遗传易感性,他与HBV协同在乙肝相关性HCC的发生中起着重要作用．     

韩宗超

目的 观测过氧化氢诱导的大鼠衰老神经细胞DNA损伤与修复情况。方法 在荧光显微镜下观察不同浓度H2O2处理的3月、8月和26月龄大鼠的脑皮质、海马和基底节经分离的神经细胞及氧化损伤断裂的单链DNA,并做彗星图像分析。结果 在相同浓度H2O2介导下,衰老神经细胞DNA损伤分值较正常神经细胞高,皮质细胞较海马、基底节区细胞DNA损伤分值高,细胞更易受损伤。给予0．5～4．0 h孵育后,表明脑细胞最大修复时间仅为1．0 h,且衰老神经细胞较正常神经细胞的DNA损伤分值高,修复能力下降。当H2O2介导浓度为64 μmol／L时,3月龄鼠脑皮质、海马和基底节神经细胞DNA损伤分值依次为250、213和205,26月龄鼠DNA损伤分值依次为355、340和335。当H2O2介导浓度为128 μmol／L时,26月龄鼠DNA修复率约为10％。结论 彗星实验是一种非常敏感的检测DNA损伤与修复的方法。     

癌细胞端粒酶活性、DNA含量和Ki-67表达与肝细胞肝癌转移和复发的关系

为探讨端粒酶活性、DNA倍体和Ki－67基因在肝细胞性肝癌（HCC）中的表达及其相互关系，以及对肝癌转移和预后的影响，用TRAP法检测了34例HCC及15例肝硬化（门脉高压）患者肝组织端粒酶活性；用流式细胞计检测DNA倍体和Ki-67阳性细胞。结果显示，34例HCC中29例端粒酶活性，15例肝硬化中2例阳性，HCC二倍体肿瘤23例，异倍体肿瘤11例；端粒酶阳性表达和异倍体肿瘤与HCC肝内转移和门静脉癌栓明显相关（P＜0．05），而与肿瘤大小、AFP水平、有无乙型肝炎（HBV感染）及分化程度无关；Ki－67抗原在HCC中呈现高表达,与肝硬化组织相比差异显著（P＜0．01），Ki－67表达和端粒酶活性与肝内转移等因素的关系极为相似。提示大多数HCC和个别肝硬化组织端粒酶活性呈现阳性；Ki－67在HCC中呈现高表达；端粒酶活性、Ki－67基因和DNA倍体可能在肿瘤发生、转移及预后中起重要作用，尤其前者可作为临床诊断、病情恶性程度及预后判断的标记物。     

褪黑素对大鼠脑缺血再灌注DNA损伤及修复的影响

目的研究褪黑素早期干预对大鼠局灶性脑缺血再灌注DNA损伤和修复关键蛋白-XRCC1的影响。方法应用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将90只大鼠随机分为褪黑素干预组(30只)、缺血组(30只)和假手术组(30只)。褪黑素干预组术前30min腹腔注射褪黑素按10mg/kg给药。利用单细胞凝胶电泳、免疫组织化学法,测定褪黑素早期干预后脑缺血再灌注DNA单链断裂和XRCC1的情况。结果XRCC1免疫组织化学显示,在各时相点褪黑素干预组的XRCC1蛋白含量均高于缺血组[缺血2h再灌注10min(70．4±6．3 vs 59．4±3．6);1h(32±5．1 vs 24±2．9);4h(25±3．5 vs 11±2．9);12h(17．4±5．6 vs 9．1±1．58);24h(10．6±1．8 vs 7．2±1．9);48h(8．0±1．6 vs 5．2±1．3)],DNA单链断裂轻于缺血再灌注对照组,并且在各时相点均有显著差异[缺血2h再灌注10min (10．4±3．7 vs 13．4±3．8);1h(11．2±2．3 vs 18．7±5．9);4h(19．7±3．4 vs 33．6±9．2);12h(24．9±3．8 vs 42．9±13．5);24h(17．4±4．3 vs 27．5±4．8);48h(15．5±27 vs 25．4±6．6)]结论褪黑素对于脑缺血再灌注DNA单链断裂有保护作用,可能是减少XRCC1的降低。     

人衰老二倍体成纤维细胞对烷化剂损伤的应答

目的　观察衰老的人胚肺二倍体成纤维细胞 (2BS)对烷化剂甲磺酸甲酯 (MMS)诱导的DNA损伤的应答。　方法　以体外培养的不同代龄的人胚肺 2BS为对象 ,以MMS诱导DNA损伤 ,以年轻细胞 (<30代 )为对照 ,观察衰老细胞 (>5 5代 )经MMS处理后的细胞形态、增殖特性、细胞周期的改变 ,并分别检测 gadd4 5、p2 1和p5 3等基因转录水平的表达变化 ,同时以非程序性DNA合成(UDS)和单细胞凝胶电泳试验测定DNA修复能力。　结果　经MMS诱导DNA损伤后 ,衰老细胞的细胞形态、生长曲线和细胞周期的变化均不及年轻细胞明显 ;gadd4 5、p2 1和 p5 3等基因的可诱导性表达均低于年轻细胞 ;同时 ,衰老细胞总的及单个细胞的修复能力较年轻细胞明显下降。　结论　衰老 2BS细胞对MMS诱导的DNA损伤后的细胞应答变化能力下降 ,且其修复能力的减退可能与基因的可诱导性表达下降有关。     

DNA damage and repair induced by diazoacetyl derivatives of amino acids with different mechanism of cytotoxicity. Correlations with mutagenicity and carcinogenicity

Summary Eight synthetic N-diazoacetyl amino acids, prepared by inserting a diazoacetyl group onto the -nitrogen of a natural amino acid, and two natural diazoazetyl amino acids, azaserine (O-diazoacetyl-L-serine) and DON (6-diazo-5-oxo-L-norleucine), have been studied by autoradiography for their capacity to induce DNA repair synthesis in mouse cells cultivated in vitro. Dose-dependent unscheduled DNA synthesis was present in cells treated with the eight N-diazoacetyl derivatives, and was absent in cells exposed to approximately equitoxic concentrations of azaserine and DON. Azaserine and DON, unlike N-diazoacetyl derivatives, did not alkylate -(4-nitrobenzyl) pyridine at an appreciable extent. When DNA damage (single stranded breaks or weak points in alkali) was measured by the sensitive technique of alkaline elution, DGA was found about 4 times as potent as azaserine and about 12 times as DON on a molar basis, but about 800 and 17,000 times as potent as azaserine and DON respectively by extrapolating to equitoxic concentrations. Carcinogenicity and mutagenicity seem to follow mainly the capability of inducing DNA damage.This investigation was supported in part by a grant of the Consiglio Nazionale delle Ricerche