肺耐药蛋白在急性白血病中的表达及意义

目的 探讨急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞肺耐药蛋白（LRP）的表达及意义。方法 采用LRP单克隆抗体、流式细胞技术分别测定15例单纯缺铁性贫血患者（对照组）和65例AL患者（AL组）LRP的表达率。结果 LRP的表达率在初治和复发／难治急性淋巴细胞白血病（ALL）患者分别高于初治和复发／难治急性髓细胞白血病（AML）患者（P均〈0．05）；AML中M5亚型表达率高于M3亚型（P〈0．05）。初治及复发／难治LRP（＋）者缓解率明显低于LRP（-）者（P〈0．05）。结论 LRP的表达与AL患者临床预后密切相关，化疗前检测LRP表达率有助于个体化治疗和预测疗效。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞c-kit受体表达的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞（PBMC）中c-kit受体的表达及其临床意义。方法：采用免疫荧光标记，流式细胞仪检测SLE患者PBMC的c-kit受体蛋白（CD117）表达，反转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）检测其c-kit mRNA的表达水平，并分别与正常人比较。结果：SLE患者PBMC中c-kit受体及其mRNA表达水平与正常组相比显著增高（P＜0．05）；活动期与非活动期相比显著增高（P＜0．05），非活动期SLE患者PBMC的c-kit受体蛋白表达与正常人差异无显著性（P＞0．05），PBMC的c-kit受体蛋白表达与其SLEDAI显著相关（P＜0．01），结论：SLE患者PBMC c-kit受体蛋白水平及其mRNA表达水平均显著高于正常人，且与疾病活动呈正相关，c-kit受体可能在SLE的病程变化中起着重要作用。     

急性白血病靶向治疗的新进展

急性白血病（AL）主要包括急性髓细胞白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）。我国2006年的流行病学调查显示，由于环境污染等因素，白血病的发病率呈上升趋势。AL的传统治疗方法为放射治疗（放疗）、化学治疗（化疗）和造血干细胞移植（HSCT）。近20年，随着人类对白血病细胞生物学和遗传学认识的飞速发展，一系列与AL发病机制密切相关的基因、受体、抗原、细胞内关键物质相继被发现．引发了对以这些靶点为目标的新型药物的研发。     

survivin基因及增殖细胞核抗原与急性白血病关系的研究

目的 探讨增殖细胞核抗原（PCNA）、survivin基因与急性白血病（AL）的关系：方法收集2003—2004年浙江大学医学院附属第一医院住院AL患者的资料，采用免疫组化方法检测PCNA和RT—PCR方法检测survivin在AL在治疗前后以及与正常对照组的比较：结果初发AL患者与正常对照组的PCNA和survivin的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。AL在治疗前与治疗缓解后其PCNA的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。survivin高表达的急性髓细胞白血病（AML）缓解率低，但是急性淋巴细胞白血病（ALL）的缓解率与survivin表达无关。结论 PCNA和survivin在白血病中均高表达，与白血病的发生及发展有一定的联系，PCNA与survivin互补，可作为判断急性白血病的疗效和预后指标。     

儿童急性白血病形态学免疫学和细胞遗传学的分型诊断

目的：准确地进行儿童急性白血病（AL）的诊断分型,提高初诊患儿的诊断符合率。方法：采用形态学、免疫学和细胞遗传学（MIC）相结合的诊断方法,分析了110例初诊为AL的患儿。结果：形态学与MIC分型诊断符合率为88．2％;急性淋巴细胞性白血病（ALL）免疫分型诊断符合率为92．2％;而急性髓细胞性白血病（AML）仅为62．9％。8／35例AML表达淋系抗原（1y^ -AML),12／59例ALL表达髓系抗原（My^ -AML);11／110例为杂合性白血病。染色体核型异常检出率为63．6％。t(8;21）易位见于（13／21例）M2;t(7;11）易位见于12例M2;t（15;17）易位见于（2／5例）M3;t（9;22）和t（4;11）易位见于（8／64例）ALL。结论：运用MIC诊断分型方法能提高儿童AL的诊断率,为AL个体化治疗和评估预后提供信息。     

急性白血病细胞G-CSF、GM-CSF受体的检测及其临床意义

目的：研究急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞表面粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）与粒-巨噬细胞集落刺激因子受体（GMCSFR）的表达规律。观察重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）在AL中应用的临床疗效。方法：采用流式细胞术检测15例正常对照和86例AL患者G-CSFR、GM—CSFR的表达率。观察rhG-CSF的应用对AL治疗的影响。结果：急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患者G-CSFR、GM—CSFR的表达率明显高于急性淋巴细胞白血病（ALL）（P〈0．01），均低于对照组。AL患者G-CSFR与GMCSFR表达率无相关性（rs=0．127，P〉0．20）；ANLL患者，G-CSFR表达率与CD13、MPO表达率呈正相关（P〈0．01），与CD33表达率呈负相关（P〈0．01），GM-CSFR表达率与HLA-DR表达率呈正相关（P〈0．01）。ALL患者。GM—CSFR的表达率与CD19的表达率呈正相关（P〈0．01）。应用rhG-CSF能减少AL患者中性粒细胞缺乏及发热的天数，但对缓解率无影响。结论：G-CSFR、GM—CSFR．的表达率在ANLL与ALL中有差异，两者的表达无相关性，在化疗过程中及化疗后应用rhG-CSF对AL的缓解率无显著影响。     

c-kit受体与其他髓系膜抗原标志物对急性非淋巴细胞白血病诊断价值的比较

近年来，有报道称c-kit受体(c-kitR，CD117)可作为髓系免疫学标记物，用于急性白血病(AL)的分型诊断，对急性非淋巴细胞白血病(ANLL)的诊断以及ANLL与急性淋巴细胞白血病(ALL)的鉴别诊断有重要参考价值。本研究运用流式细胞术(FCM)检测CD117在AL中的表达，探讨其对ANLL的诊断意义；并根据灵敏度和特异度的概念将CD117与CD13、CD14、CD33等髓系膜抗原标志物对ANLL的诊断价值进行了比较研究。     

急性白血病P—gp和GSTπ的表达及临床意义

目的：探讨初诊急性白血病（AL）耐药机制。方法：应用免疫酶法（APAAP）检测74例初诊急性白血病（AL）P－gp、GSTπ的表达及临床意义。结果：急性髓性白血病（AML）患者P－gp阳性率21％,GSTπ阳性率27％,两者均阳性13％;急性淋巴白血病（ALL）患者P－gp阳性率14％,GSTπ阳性率50％,两者均阳性9％。无论是AML还是ALL两者均无相关性。P-gp和GSTπ均阳性者完全缓解（CR）明确低于均阴性者（P＜0．05）。结论：P－gP、GSTπ共阳性是AL预后不良的重要指标之一。     

凋亡抑制蛋白survivin在白血病细胞中的表达及其意义

目的探讨白血病原代细胞中凋亡抑制蛋白survivin基因的表达情况,及其与疗效的关系.方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测45例白血病患者和10例健康人骨髓中survivin的表达水平,并给与合适的方式化疗,评判疗效.结果白血病细胞中survivin mRNA 阳性率为68.9%（31/45）.急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞中survivin mRNA表达阳性率为73.3%,较急性髓系白血病（AML）的63.6%稍高;慢性粒细胞白血病（CML）患者中survivin mRNA 表达率很高,可达80.0%,慢性淋巴细胞白血病（CLL）中则为66.7%,但均高于正常对照组的20.0%（P＜0.05）.在22例AML患者中,survivin mRNA表达阴性者接受2个疗程化疗后缓解率（CR）87.5%,明显高于表达阳性患者的64.3%.在15例ALL患者中也有类似的结果,CR分别为100%和81.8%.CML患者中,survivin mRNA阳性的4例中有2例两年内发生急变;CLL患者病情均较稳定.结论survivin基因在白血病细胞中有较高的表达,并与疗效及预后有密切的关系.     

C—kit受体和CD34在急性髓系白血病中的表达与化疗疗效关系

目的：探讨ｃ－ｋｉｔ受体、ＣＤ３４的表现与化疗疗效的关系。方法：应用流式细胞仪，测定１０例正常人和８７例急性髓细胞白血病骨髓ｃ－ｋｉｔ受体和ＣＤ３４的表达。结果：正常人骨髓ｃ－ｋｉｔ受体和ＣＤ３４表达率分别为０．５％和１．７％。以〉２０％细胞表达为阳性，患者ｃ－ｋｉｔ受体和ＣＤ３４阳性率分别为５２％和３７％。结论：ｃ－ｋｉｔ受体和ＣＤ３４阳性病例缓解率较低，差异有显著性（Ｐ〈０．０１），ｃ－ｋｉｔ     

PI-103在体外抗急性髓细胞白血病效应的实验研究

目的研究急性髓细胞白血病（AML）细胞P13K-Akt—mTOR信号转导通路各基因的表达及PI-103在体外对AML细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法RT-PCR法检测AML细胞P13K、Akt、mTORmRNA的表达;四甲基偶氮唑蓝法检测PI-103对AML细胞的增殖作用;流式细胞仪检测PI-103对AML细胞的凋亡率和细胞周期的影响。结果①81．25％的AML患者表达P13K基因,87．5％的患者表达mTOR基因,50％的患者同时表达此两种基因。②PI-103能明显提高PI3K—Akt-mTOR信号通路持续活化的AML细胞的增殖抑制率和凋亡率、阻滞细胞于G0／G1期（P均〈0．05）,且与剂量显著相关（P均〈0．05）。结论大部分AML患者存在PI3K-Akt-mTOR信号转导通路的异常活化;PI-103可通过PI3K、mTOR信号通路抑制AML细胞增殖、促进其凋亡。     

白血病细胞p53和bcl—2表达与化疗药诱导凋亡的关系

目的 探索ｐ５３和ｂｃｌ－２表达及化疗药物体外诱导白血病细胞凋亡与患者化疗疗效的关系。方法 用免疫组化法测定４２例急性白血病患者骨髓细胞ｐ５３和ｂｃｌ－２表达水平;用Ｔｃｌ－２表达水平;用ＴｄＴ介导的脱氧核苷酸切口和末端标记法（Ｔｕｎｅｌ法）、Ｗｒｉｇｈｔ－Ｇｉｅｍｓａ梁色及超微结构观察等方法检测化疗药物诱导的白血病细胞凋亡。结果 ４２例急性白血病患者ｐ５３和ｂｃｌ－２总体表达水平显著高于对照组。     

急性淋巴细胞白血病Ki-67抗原和Bcl-2的表达及临床意义

目的：通过增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的检测，观察其在急性淋巴细胞白血病（ALL）和慢性淋巴细胞白血病（CLL）中的表达，探讨其与ALL免疫学分型，临床疗效和预后的关系。方法：采用链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶（SAP）免疫组织化学染色的方法，对120例白血病患者的骨髓或外周血进行Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的检测。结果：（1）Ki-67抗原在成人ALL中的表达高于其在急性非淋巴细胞白血病（ANLL），CLL中的表达，Bcl-2蛋白在成人ALL中的表达明显低于ANLL，CLL中的表达。（2）在成人ALL各免疫表型中，T细胞，伴有髓系抗原标记的急性淋巴细胞白血病（My^ ALL)的Ki-67和Bcl-2阳性表达率较高。（3）完全缓解（CR）率在Ki-67和Bcl-2两项同时低表达组中最高，在仅一项低表达组中次之，在两项均高表达组中最低。（4）Ki-67高表达组的生存期比低表达组短，且差异有显著性意义。而Bcl-2的表达在两组之间无差异。结论：对成人ALL患者进行增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的检测，能反映患者肿瘤细胞的增殖活性和凋亡抑制情况，与白血病的类型，临床疗效和预后密切相关。     

白血病细胞共刺激分子和MHC分子的表达分析

目的：检测各型白血病细胞表面共刺激分子和MHC分子的表达情况。方法：采集66例初诊白血病患者骨髓标本细胞及15例正常人外周血标本，分离单个核细胞，采用直接荧光抗体标记，应用流式细胞仪检测细胞表面CD80（B7—1）、CD86（B7—2）、HLA-DR和HLA-ABC的表达。结果：所有66白血病患者，仅1例急性髓细胞白血病（AML）与1例B-ALL表达CDS0，其余均为CD80阴性表达;CD88在急性淋巴细胞白血病（ALL）及慢性髓细胞白血病（CML）组的表达低于健康对照；HLA-DR的表达仅在CML细胞低于对照。所有白血病及正常人PBMC上HLA-ABC表达均为强阳性。在45例急性髓细胞白血病（AML）中，CD86阳性占18例（40％），CD86的表达在M4和M5亚型AML中最高；HLA-DR阳性25例（55％），HLA—DR在M2、M4、M5的表达明显高于其它亚型，而在M3型表达HLA-DR均为阴性；CD80、HLAABC在不同FAB亚型的表达无差异。CD86在高危核型及Ph＋组的表达低于低危核型组。共刺激分子及MHC分子的表达与诱导化疗的疗效未发现有相关。结论：各型白血病存在不同程度的B7或HLA-DR表达的缺陷。上调HLA-Ⅱ抗原及协同刺激分子在白血病细胞上的表达对设计高效的白血病免疫治疗方案具有重要意义。     

老年急性髓细胞白血病治疗新进展

全世界范围内，急性白血病的发病率约为4／10万每年。急性髓细胞白血病（AML）在新诊断的白血病中大约占到70％。这其中大概又有35％的患者为老年AML患者，且中位年龄为67岁。AML的发病率还在逐年上升，而且2006年在美国，年龄在65岁以上的AML患者约为3730万，至2030年这个数目将会翻倍。     

粒细胞集落刺激因子受体在急性白血病中的表达及临床意义

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)受体在急性白血病(AL)中的表达及临床意义。方法:选用G-CSF受体单抗,采用流式细胞技术检测G-CSF受体在AL中的表达情况。同时制备骨髓单个核细胞(MNC)悬液,并分别加入不同浓度的G-CSF(10μg/L,15μg/L,20μg/L,25μg/L),培养24、48、72h后计数MNC数。结果:G-CSF受体的表达率:急性髓系白血病(AML)初诊为(76.5±12.8)%,急性淋巴细胞白血病(ALL)初诊为(6.12±1.98)%,二者比较P<0.05。骨髓MNC培养24、48、72h后的计数在初诊AML随着G-CSF浓度的增加有上升趋势;在缓解的AML及初诊、缓解的ALL则无此变化。结论:G-CSF受体主要表达于AML细胞,并促进其增殖,不表达于ALL细胞,不促进其增殖。     

急性髓细胞白血病患者NGF及p75NTR测定的临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病（AML）患者神经生长因子（NGF）及其低亲和性NGF受体（p75NTR）表达及临床意义。方法运用ELISA测定24例AML患者血清NGF水平,流式细胞术测定骨髓白血病细胞群p75NTR的表达水平;同时选择15例健康者作为对照组。结果①AML患者血清NGF水平与对照组比较明显升高（P〈0.05）,骨髓白血病细胞群表面p75NTR表达水平较对照组明显降低（P〈0.05）。②AML完全缓解（CR）者化疗前p75NTR较未缓解（NR）者明显高表达（P〈0.05）,NGF变化不明显（P〉0.05）。NR者化疗后NGF和p75NTR表达水平与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）,且p75NTR较CR者明显低表达（P〈0.05）。③AML患者NGF以及p75NTR高表达和低表达3年总体生存率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 AML患者血清NGF高水平以及骨髓白血病细胞群p75NTR低表达可能参与AML发生发展,且可能是判断近期疗效的有效指标。     

急性白血病BCL-2基因的表达及临床意义

目的：探讨急性白血病患者BCL-2基因的表达及临床意义。方法：应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例急性白血病患者细胞中BCL-2基因的表达。结果：BCL-2基因的表达水平与患者的年龄，性别，淋巴结肿大，肝脾肿大，出血，生化乳酸脱氢酶LDH，白血病分型及初治或复发难治等因素无关，但与患者骨髓中原幼细胞数呈正相关，除7例急性早幼粒细胞白血病患者外，BCL-2基因高表达患者完全缓解率（CR）低于低表达者。结论：BCL-2基因的表达对于预测白血病细胞耐药，判断预后，评估化疗反应及选择化疗方案均有十分重要的意义。     

Fas／Apo—1抗原在急性白血病中的表达及其意义

目的：了解Fas表达与临床疗效的关系。方法：应用卵白素-生物素复合物法（ABC法）检测54例急性白血病（AL）Fas抗原表达，并做MTT药敏试验。结果：发现AL患者Fas抗原阳性表达率明显低于非恶性血液疾病（急淋：4．12％±2．43％，急非淋：5．95％±3．97％，对照组：30．81％±12．21％，P＜0．01）。结论：Fas介导的细胞凋亡路径障碍在白血病的形成和维持中具有重要的病理生理意义。Fas抗原阳性细胞表达率与MTT药敏试验二者无相关性（r＝－0．127）。     

急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中W T1表达及其与疗效、预后的关系

目的：观察急性髓系白血病（AML）患者骨髓单个核细胞中Wilms基因（WT1）的表达,并分析其表达与疗效、预后的关系。方法选择AML患者56例、非肿瘤患者28例。采用定量PCR法检测骨髓单个核细胞中WT1表达,并分析其表达与患者性别、年龄、外周血白细胞数量、骨髓原幼细胞比例、LDH水平的关系。首次诱导化疗后,观察不同WT1表达水平与AML患者的疗效、无事件生存（ EFS）时间、总生存（ OS）时间的关系。结果 AML患者WT1表达水平中位数为2875拷贝／10000 ABL拷贝,高表达阳性率为85．7％;非肿瘤患者WT1表达水平中位数为8拷贝／10000 ABL拷贝,无高表达患者。 WT1表达水平不同的AML患者性别、年龄、外周血白细胞数量、骨髓原幼细胞比例、LDH水平比较差异无统计学意义。 WT1表达正常AML患者首次诱导化疗后完全缓解率、中位EFS时间与WT1高表达AML患者比较,P均＞0．05。 WT1表达正常AML患者中位OS时间为29．5个月,WT1高表达AML患者为19个月,两者比较P均＜0．05。结论 AML患者WT1表达水平明显高于非肿瘤患者;AML患者WT1表达水平与患者的疗效、预后可能有关。