降钙素基因相关肽对尾加压素Ⅱ诱导的血管平滑肌增殖的影响

目的 :观察降钙素基因相关肽 (CGRP)对尾加压素Ⅱ (UrotensionⅡ ,UⅡ )刺激的血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响及机制。方法 :贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC ;3 H -胸腺嘧啶 (3 H -TdR)掺入测定VSMCDNA合成 ;γ- 3 2 P -ATP标记的同位素法测定丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性。结果 :UⅡ (10 -8mol/L)显著促进VSMC3 H -TdR掺入和激活MAPK。与对照组比较 ,分别增加 4 8%和 2 2 6 % (P <0 .0 1)。CGRP有效抑制UⅡ诱导的VSMC3 H -TdR掺入和MAPK激活。与UⅡ组比较 10 -9、10 -8、10 -7mol/LCGRP分别使VSMC3 H -TdR掺入降低 18%、2 5 %和31% (P <0 .0 1) ,使MAPK活性分别降低 2 6 %、5 0 %和 6 4 % (P <0 .0 1)。结论 :CGRP抑制UⅡ诱导的VSMC增殖 ,其机制可能与CGRP拮抗UⅡ刺激的MAPK活性有关     

L-精氨酸及牛磺酸对溶血性磷脂酸诱导的血管平滑肌增殖的作用

目的 :观察牛黄酸 (TAU)及L -精氨酸 (L -Arg)对溶血性磷脂酸 (LPA)诱导的血管平滑肌 (VSMC)增殖的影响并探讨其可能的机制。方法 :贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC ;3H -胸腺嘧啶 (3H -TdR)掺入测定VSMCDNA合成 ;γ - 32 P -ATP标记的同位素法测定丝裂素活化蛋白激酶 (MAPK)活性。结果 :与对照组相比 ,LPA(10 - 8mol L)可分别使VSMC3H -TdR掺入和MAPK活性增高 5 8%和 16 4 % (P <0 .0 1)。L -Arg及TAU均能浓度依赖性地抑制LPA诱导的VSMC3H -TdR掺入和MAPK激活。混合应用牛磺酸和L -精氨酸对LPA诱导的VSMC增殖及MAPK活性的抑制作用显著大于单用L -Arg和TAU(P <0 .0 1)。结论 :L -Arg及TAU均能抑制LPA诱导的VSMC增殖和MAPK激活 ,而合用L -Arg及TAU对抑制LPA诱导的VSMC增殖及MAPK活性具有协同和叠加效应     

宽叶缬草对动脉平滑肌细胞收缩及生长的影响

目的 :观察宽叶缬草 (VOL)对培养的血管平滑肌细胞 (VSMC)收缩及生长的影响。方法 :取 4～ 6周wistar大鼠胸主动脉中层平滑肌细胞进行原代及传代培养。观察VOL和L -NAME对VSMC收缩的影响 ,以及血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )和不同浓度VOL时VSMC的3H -TdR及3H -Leucine参入变化。结果 :VOL可显著抑制AngⅡ引起的VSMC收缩 ,且此作用不受L -NAME影响。VOL呈剂量依赖性抑制VSMC的3H -TdR和3H -Leucine的参入。结论 :VOL有显著抑制AngⅡ引起的VSMC收缩和生长的作用     

丹参注射液对脑梗塞患者血清LPO、SOD的影响

目的：观察丹参注射液对脑梗塞患者血清LPO及SOD的影响。方法：用丹参注射液治疗脑梗塞患者30例，观察治疗前后血清中LPO及SOD含量的变化，并与20例健康人作对比。结果：脑梗塞患者血清中脂质过氧化物明显高于健康人，而超氧化物歧化酶明显低于健康人，给丹参治疗后，血清中LPO明显降低，SOD则亦有明显升高，结论：丹参注射液可为是一种良好的外源性氧自由基清除剂，可降低血粘度，保护细胞膜，从而降低血LPO，提高SOD含量。     

IGF-1在成骨样细胞增殖中的作用及与钾离子通道的关系

目的 :研究胰岛素样生长因子 - 1(IGF - 1)促大鼠成骨样肉瘤细胞 (UMR10 6 )增殖作用及与钾离子通道活动的关系。方法 :采用磺基罗丹明 (SRB)染色法观察细胞增殖并用膜片钳技术记录细胞膜钾离子通道电流的变化。同时用3 H -TdR掺入测定DNA合成的改变。结果 :IGF - 1可以明显地促进UMR10 6细胞的增殖 ,且使3 H -TdR掺入率增加 93.5 7%。在含有生长因子IGF - 1(10 -8M)的培养液中培养 12h后 ,钾通道电流比对照有明显增加 ,而且用钾通道阻断剂后 ,3 H -TdR掺入率下降。结论 :IGF - 1可促进大鼠成骨样肉瘤的DNA合成和细胞增殖。且细胞膜钾通道的活动与此促增殖活动密切相关     

中药对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用的研究*

[目的]研究中药抑制血管平滑肌细胞(VSMC)生长增殖的作用和机制.[方法]采用3H-TdR(氚胸腺苷)掺入和外源性c-jun cDNA在血管平滑肌细胞中表达的方法,观察血管平滑肌细胞(VSMC)生长增殖变化.[结果]与对照血清+内皮素组(cpm 2 534.54±54.2/105细胞)相比,中药血清+内皮素组(cpm 1 104.33±37.31/105细胞)血管平滑肌细胞3H-TdR掺入量有显著下降(P＜0.01),而且血管平滑肌细胞原癌基因的c-jun mRNA表达也较弱.[结论]本实验表明复方丹参对血管平滑肌细胞增殖及其原癌基因c-jun mRNA的表达有明显的抑制作用.     

中药对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用的研究

犤目的犦研究中药抑制血管平滑肌细胞(VSMC)生长增殖的作用和机制。犤方法犦采用3H-TdR(氚胸腺苷)掺入和外源性c-juncDNA在血管平滑肌细胞中表达的方法,观察血管平滑肌细胞(VSMC)生长增殖变化。犤结果犦与对照血清+内皮素组(cpm2534.54±54.22/105细胞)相比,中药血清+内皮素组(cpm1104.33±37.31/105细胞)血管平滑肌细胞3H-TdR掺入量有显著下降(P<0.01),而且血管平滑肌细胞原癌基因的c-junmRNA表达也较弱。犤结论犦本实验表明复方丹参对血管平滑肌细胞增殖及其原癌基因c-junmRNA的表达有明显的抑制作用。     

缬沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导的牛主动脉血管平滑肌增殖及迁移的影响

目的 :观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及缬沙坦对培养的牛主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖、迁移的作用。方法 :取新生小牛胸主动脉采用贴块法培养平滑肌细胞 ,分成对照组、AngⅡ组、缬沙坦组、缬沙坦加AngⅡ组 ,干预后分别测定3 H 胸腺嘧啶 (3 H TdR)掺入量和计数迁移的细胞。结果 :AngⅡ (1μmol/L)作用 2 4h能使VSMC的3 H TdR的掺入量、细胞迁移数较对照组增多 ;与AngⅡ组相比 ,AngⅡ加用缬沙坦 (10 0 μmol/L)使3 H TdR的掺入量与细胞迁移数明显减少 ;与对照组相比 ,单用缬沙坦使3 H TdR的掺入量亦明显减少。结论 :AngⅡ对VSMC有促增殖、迁移作用 ,能被缬沙坦拮抗 ,而且缬沙坦在没有AngⅡ作用时亦能单独发挥抗增殖作用     

大豆皂甙对胰岛素下的平滑肌细胞脂质过氧化反应的影响

目的 :观察大豆皂甙对高浓度胰岛素下兔血管平滑肌细胞脂质过氧化反应的影响。方法 :采用兔主动脉平滑肌细胞培养 ,细胞随机分为正常对照组、胰岛素组及不同浓度大豆皂甙组 ,加药后继续培养 72 h,计数后测定细胞内过氧化脂质 (LPO)及超氧化物歧化酶 (SOD)含量。结果 :单纯高浓度胰岛素升高细胞内 LPO水平 ,降低细胞内 SOD活力 ,大豆皂甙与胰岛素共同孵育后 ,升高SOD活力 ;大豆皂甙低于 2 0 mg/L时抑制 LPO的产生 ,高于或等于 50 mg/L时促进 LPO的合成。结论 :高浓度胰岛素通过升高平滑肌细胞内 LPO促进动脉粥样硬化的形成 ,一定浓度的大豆皂甙抑制胰岛素所致脂质过氧化反应 ,对动脉粥样硬化具有防治作用     

甲基莲心碱对氧化低密度脂蛋白导致平滑肌细胞脂质堆积和增殖的影响

目的 观察甲基莲心碱（Nef）对氧化低密度脂蛋白（oxLDL）导致兔主动脉平滑肌细胞（VSMC）内脂质堆积、增殖的影响。方法 以oxLDL为泡沫细胞诱导剂,测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）的活性。观察Nef对oxLDL导致的VSMC增殖及测定细胞内游离Ca^2＋浓度。结果 Nef可显著抑制oxLDL诱导的VSMC内甘油三酯、总胆固醇堆积,oxLDL组细胞内SOD和GSH—PX活性较正常组降低,Nef处理组VSMC内SOD和GSH—PX活性明显升高（P〈0．05）。Nef可显著降低VSMC内Ca^2＋。结论 Nef可显著抑制oxLDL诱导VSMC的脂质堆积和增殖。     

血管活性肽对同型半胱氨酸刺激平滑肌细胞增殖的实验研究

目的 观察对兔主动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖起负调节作用的Ｃ－型利钠利尿肽（ＣＮＰ）、肾上腺髓质素（Ａｄｍ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、生长抑素（ＳＳＴ）和甲状旁腺素相关蛋白（ＰＴＨｒＰ）等活性肽对同型半胱氨酸（Ｈｃｙ）刺激的ＶＳＭＣ增殖的影响。方法 ６只大耳白兔胸主动脉贴块法离体培养平滑肌细胞;分对照及Ｈｃｙ加不同处理因素组;＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入测定ＶＳＭＣ增殖;差速离心分离细胞膜、胞浆及胞     

原癌基因c－fos和c－jun在血管平滑肌细胞增殖调控中的作用

体外培养大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ），通过３Ｈ－ＴｄＲ参入实验和ＲＮＡ印迹分析，观察内皮素－１对ＶＳＭＣＤＮＡ合成、原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ表达及ｃ－ｊｕｎ反义ＲＮＡ对ＶＳＭＣ增殖的影响。结果表明，内皮素－１作用于ＶＳＭＣ１２小时，３Ｈ－ＴｄＲ参入开始增加，２４小时达到峰值。在内皮素－１作用下，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ的表达活性在３０分钟达到高峰，３／小时后恢复到原来水平。将可合成ｃ－ｊｕｎ反义ＲＮＡ的表达载体导入ＶＳＭＣ，外源性ｃ－ｊｕｎ基因在ＶＳＭＣ中大量表达并显著抑制细胞增殖。本文提示，原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ在ＶＳＭＣ增殖调控中起着重要作用。     

Inhibitory effect and mechanism of chuanxiongzine on multiplication of VSMC

Objective: To study the inhibitory effect of chuanxiongzine on vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation and explore its molecular biology basis. Methods: we selected the VSMC cultured 4～8 generation from rat aorta thoracalis as research object.The objects were divided into four groups( Ⅰ )control group, ( Ⅱ )chuanxiongzine(50 μg/ml)group, ( Ⅲ )chuanxiongzine (100 μg/ml) group and( Ⅳ ) chuanxiongzine (200 μg/ml) group. The inhib itory effect of chuanxiongzine on VSMC proliferation was investigated by cell counting, MTT and 3H-TdR incorporation assay. In order to illuminate the molecular biology mechanism of chuanxiongzine inhibiting VSMCs proliferation, the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and C-myc were detected.Results: Chuanxiongzine could inhibit the proliferation of VSMC significantly in a dose- and time-dependent manner, compared with control group (P ＜ 0.05). The expression of PCNA and c-myc were inhibited obviously and correlated with the concentration of chuanxiongzine (P ＜ 0.05). Conclusion: Chuanxiongzine may play a considerable role in VSMC proliferation process. The inhibitory effect of chuanxiongzine in a dose- and time-dependent manner can be realized via down regulating the expression of PCNA and c-myc. In this study, The great theoretical fundament about Chinese medicine, which is used to treat atherosclerosis (AS), has been obtained.     

Cl^-通道在溶血磷脂酸引起的血管平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨Cl-通道在溶血磷脂酸(LPA)引起的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法采用细胞计数和氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验,并结合激光共聚焦显微镜上测定细胞内Ca2 浓度等技术,研究不同Cl-通道阻断剂对LPA促大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。结果Cl-通道阻断剂DIDS(二异硫氰酸二丙乙烯二磺酸,0.01~0.1mmol/L)可浓度依赖式的抑制溶血磷脂酸引起的血管平滑肌细胞增殖,其他Cl-通道阻断剂如5-硝基苯丙氨基苯甲酸(NPPB)、4乙酰氨基4异硫氰酸2,2二磺酸(SITS)、二苯丙氨基2,2二羧酸(DPC)(浓度均为10-7~10-3mol/L)和速尿(浓度均为10-5~10-3mol/L)等均无此作用,且DIDS对电压依赖性钙通道没有直接的影响。结论溶血磷脂酸可以开放DIDS敏感的Cl-通道,且该通道可能在溶血磷脂酸引起的血管平滑肌细胞增殖的调控上起一定的作用。     

卡托普利抑制实验性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对HSP70和P53的影响

采用氚-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)参入法,电镜,免疫组化,原位杂交法,观察了卡托普利(Cap)对实验性高血压大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用及对热应激蛋白70 kd(HSP70)及其mRNA和抑癌基因P53表达的影响。结果发现:Cap在降低血压同时,能减少VSMC的线粒体、粗面内质网和~3H-TdR参入量(均为P<0.01),并能逆转VSMC增殖时HSP70及其mRNA表达增强(均P<0.01),P53抑癌基因mRNA表达减弱(P<0.05)。结果表明:Cap能抑制实验性高血压大鼠的VSMC增殖,与HSP70及P53的调控有关。     

DDPH对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用氚－胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）参入、电镜、原位杂交及Northern blot杂交方法，观察了 1－ （2，6－二甲基苯氧基）－2－（3，4－二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（DDPH）对自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：DDPH在降低SHR血压 的同时，能减少VSMC的线粒体、粗面内质网及3H－TdR参入量（P＜0．01），并能逆转c－fos、c－myc、c－sis 原癌基因mRNA表达增强（P＜0．05或＜0．01）以及P53抑癌基因mRNA表达减弱（P＜0．05）。表明： DDPH能抑制SHR的VSMC增殖，与癌基因调控的分子生物学机制有关。     

川芎嗪对ET-1诱导的脐动脉平滑肌细胞增殖的作用

目的研究川芎嗪(TMPz)对内皮素(ET-1)诱导的人脐动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖的作用。方法培养人脐动脉平滑肌细胞,应用ET-1建立平滑肌增殖模型,后加入TMPz,设立梯度浓度的TMPz分组,最后细胞计数以及氚-胸腺嘧啶核苷掺入方法检测药物效应。结果TMPz抑制VSMC的作用与药物的浓度梯度呈正相关。结论TMPz可抑制VSMC的增殖。     

川芎嗪对ET-1诱导的脐动脉平滑肌细胞增殖的作用

目的研究川芎嗪（TMPz）对内皮素（ET-1）诱导的人脐动脉平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用。方法培养人脐动脉平滑肌细胞，应用ET-1建立平滑肌增殖模型，后加入TMPz，设立梯度浓度的TMPz分组，最后细胞计数以及氚-胸腺嘧啶核苷（^3H—TdR）掺入方法检测药物效应。结果TMPz抑制VSMC的作用与药物的浓度梯度呈正相关结论TMPz可抑制VSMC的增殖。