流式细胞计量术在临床医学中的应用

近年来，流式细胞计量术(flow cytometry,FCM)在细胞生物学、分子生物学、免疫学、血液学及肿癌学等学科领域中已经得到了广泛的应用。下面介绍FCM在细胞周期分析、细胞凋亡分析、核型分析、多价耐药性检测、免疫细胞分型分选、血液病的免疫分型、肿癌细胞监测、机体免疫状态监别等方面研究中的应用。     

网织血小板检测方法的改良及临床应用

目的 改良网织血小板（RP）检测方法并探讨其临床应用价值。方法 以噻唑橙（TO）作为RNA的荧光染料,利用流式细胞仪检测30例正常人（正常对照组）和48例各种血小板减少症外周血中含有RNA的RP百分数及RP绝对值,后者包括原发性血小板减少性紫癜（1TP）、再生障碍性贫血病人（AA）及初治急性白血病病人。结果ITP病人RP百分数明显高于正常对照组（F=65．29,q=10．26,P〈0．01）,而RP绝对值明显低于正常对照组（F=85．07,q=19．59,P〈0．01）;AA病人RP百分数及绝对值均低于正常对照组（q=3．47、16．41,P〈0．05、0．01）;AL组病人RP百分数与正常对照组比较无明显差异（q=0．51,P〉0．05）,但其RP绝对值明显低于正常对照组（q=15．46,P〈0．01）。结论 改良了传统的网织血小板检测方法并建立了简便、稳定的检测手段,为临床各类血小板减少性疾病的诊断提供了可靠的方法。     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF THE DETECTION OF MINIMAL RESIDUAL DISEASE IN CHILDHOOD B-ALL BY FLOW CYTOMETRY

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2例慢性肉芽肿病临床特征和中性粒细胞功能测定

目的：探讨2例慢性肉芽肿病（CGD）患儿临床特点、患儿及其父母血中性粒细胞活化功能。方法：收集2005～2010年在本院临床拟诊为CGD2例患儿的临床资料,同时采集患儿及其父母外周静脉血进行流式细胞术中性粒细胞功能测定。结果：2例皆为男性,外周血免疫细胞分型T、B细胞计数均正常,血清免疫球蛋白水平增高。流式细胞术呼吸爆发实验NAPDH氧化酶活性皆降低。结论i2例患儿临床症状符合慢性肉芽肿病改变,流式细胞术检测证实皆为中性粒细胞吞噬功能缺陷。     

A COMPARATIVE STUDY OF DNA FLOW CYTOMETRY AND MICROSPECTROPHOTOMETRY IN GASTRIC CARCINOMAS

Flow cytometric (FCM) and microspectrophotometric (MSP) measurements of cell nuclear DNA content were made in 53 fresh gastric carcinoma specimens and in 30 gastric mucosal specimens with chronic gastritis. DNA aneuploidy was found in 32/53 (60%) of gastric carcinomas, and appeared more frequently in wellor moderately differentiated tubular adenocarcinomas (90%) than in undifferentiated and mucousa cell carcinomas (23.6%) (P<0.001). No aneuploidy was found in chronic gastritis samples, but their proliferative cell fractions were higher than in normal control gastric mucosa samples (P<0.01). A comparison was made between FCM and MSP analyses of DNA content in 29 cases of gastric carcinoma, a high correlation rate (r=0.90) was found. The advantages and limitations of both methods are discussed, they may be used in combination for more precise cytochemical analysis.     

35例儿童急性淋巴细胞白血病DNA含量流式细胞术分析

对35例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血液标本进行了DNA含量流式细胞术(FCM)分析。依据DNA指数(DI)分类,35例中亚二倍体5例,二倍体22例,超二倍体8例。其中亚二倍体组患儿初诊时肝脾肿大及白细胞计数显著高于其它二组。患儿完全缓解(CR)后其DI值恢复正常。依据DNA含量做细胞周期分析表明,获CR后患儿的增殖期细胞百分数(P％)较初治时有显著下降。流式细胞术标本制做简单,便于临床常规使用。     

流式细胞术单分散细胞悬液样品的制备方法

流式细胞术是近年来发展的一项新技术,应用该项技术的重要环节是制备合格的单分散细胞悬液。本文对食管癌组织、脱落细胞和血液标本的悬液制备方法作了初步探讨,结果表明,胶原酶对实体肿瘤组织单细胞悬液制备是可行的。脱落细胞和血液样品容易得到合格的细胞悬液。并对影响流式细胞分析的一些因素作了简单的讨论。     

滋养细胞疾病DNA含量的流式细胞分析

用流式细胞术检测１９８７～１９９２年石蜡包埋标本４４例。其中正常绒毛８例，ＤＴ＝０．９９±０．０８，均为二倍体。葡萄胎１９例，ＤＩ＝１．１５±０．３２，非整倍体５例，占２６．３％，其中３例在随访中发生恶变为侵蚀性葡萄胎。滋养细胞肿瘤１７例，ＤＩ＝１．４５±０．４５，非整倍体１１例，占５４．５％。滋养细胞肿瘤ＤＮＡ指数及非整倍体率明显高于葡萄胎Ｐ＜０．０５。因此ＤＮＡ指数及非整倍体率增高是恶性肿瘤的一个特点，作为区别良、恶性肿瘤的一个定量依据，也是预测葡萄胎恶变的一个重要参数，为临床进行预防性化疗提供客观依据。     

CLINICAL APPLICATION OF FLOW CYTOMETRY IN LIVE RELATED DONOR RENAL TRANSPLANTATION

To monitor the activity of the humoral component in graft dysfunction following renal transplantation using live related donors, flowcytometric cross-match procedure was adopted. Antidonor antibodies were detected in the sera of both pre- and post-transplant patients using conventional serological cytotoxicity cross-match and flowcytometric cross-match assays. In the 52 pretransplant samples no significant differences were observed in flowcytometric and cytotoxicity tests except in 2 secondary transplant cases which were negative by cytotoxicity test. However, in post-transplant samples, floweytometry was found to be a more objective and useful test than cytotoxicity testing in distinguishing 6 out of 7 mild acute-graft-rejection episodes. Both tests were found to be negative in alt 5 cases of cyclosporin-A nephrotoxicity, 7 cases of acute tubular necrosis and 10 out of 11 cases of chronic rejection.KEY WORDS: Flowcytometry, Cross-match, Graft dysfunction, Kidney transplantation     

流式细胞仪检测粒细胞抗体在白细胞减少症免疫学分型中的临床意义(附101例病例分析)

目的 :检测白细胞减少症患者粒细胞抗体及其亚型 ,分析白细胞减少症免疫学分型。方法 :利用流式细胞仪和抗人IgG、IgA、IgM单克隆抗体检测白细胞减少症患者粒细胞抗体及其亚型。结果 :约 1 /4～ 1 /2的白细胞减少症患者粒细胞抗体阳性 ,不同病因白细胞减少症的粒细胞抗体亚型不同。结论 :用流式细胞仪测定粒细胞抗体方法灵敏、结果准确 ,可以为临床治疗白细胞减少提供依据。     

流式细胞术对人脑胶质瘤多药耐药膜糖蛋白测定的临床意义

目的：探讨流式细胞术对人脑胶质瘤多药耐药膜糖蛋白（P－gp）测定的临床意义。方法：采用流式细胞术直接免疫荧光染色法检测新鲜脑胶质瘤和正常脑组织标本中P－gp的表达。结果：不同性别、年龄、肿瘤大小之间P－gp表达阳性率无明显差异（P＞0．05），不同恶性程度之间P－gp表达阳性率差异有显著性（P＜0．05）。相同级别胶质瘤中复发与原发者P－gp表达差异有显著性（P＜0．05）。结论：P－gp表达与病人性别、年龄、肿瘤大小无关，与肿瘤恶性程度呈正相关，P-gp测定可判断胶质瘤对化疗药物敏感性，指导临床应用多药耐药逆转剂，制订化疗方案，亦对判断预后有指导作用。     

甲状旁腺功能亢进症的免疫组化和流式细胞学研究

应用抗Brdu和Ki—67两种单克隆抗体及免疫组化ABC法对29例甲状旁腺功能亢进症患者的甲状旁腺组织进行细胞增殖活力的测定,并将两种标记指数和流式细胞术的细胞周期时相分析进行对比。结果显示:1.免疫组化技术对于甲旁亢细胞增殖活力的测定优于流式细胞技术,可能提供更加客观和可信的指标。2.功能亢进的甲状旁腺细胞可能具有低增殖活力的生物学特性。     

肾上腺肿瘤DNA含量测定的临床意义

为明确DNA含量可否作为肾上腺肿瘤良恶性诊断的指标 ,采用FCM技术对肾上腺嗜铬细胞瘤 10例以及肾上腺皮质肿瘤 7例新鲜标本进行了DNA含量的测定。6例病理为皮质腺瘤标本 ,2例DNA含量为非整倍体 ,其中 1例出现肝转移而确诊为恶性 ,1例皮质腺癌为二倍体的患者无瘤生存 ,而肾上腺嗜铬细胞瘤以及瘤旁肾上腺标本DNA含量均为非整倍体 ,但病理学及随访均不支持恶性。认为采用FCM技术测定肾上腺肿瘤DNA含量对判断皮质肿瘤良恶性可能是一项重要方法 ,但对嗜铬细胞瘤的作用不大     

双染色─流式细胞计分析正常人外周血T细胞活化抗原的表达

作者利用双色荧光试剂，结合流式细胞术分析了１６例正常人外周血Ｔ细胞表面活化抗原的表达。结果表明，静止的外周血Ｔ细胞能表达少量低密度的活化抗原（ＣＤ２５、ＣＤ３８、ＨＬＡ─ＤＲ抗原），其平均值为：ＣＤ_３~＋ＣＤ_２５~＋细胞为６．０７±３，４５％；ＣＤ_３~＋ＣＤ_３８~＋为１１．６５±７．１３％；ＣＤ_３~＋ＤＲ＋为９．４７±４．２９％。ＰＨＡ刺激的Ｔ细胞活化抗原的表达明显增加，密度增强，以ＣＤ２５抗原的表达为著，但活化抗原出现的时间不一，为进一步研究病理状态下的Ｔ细胞表面活化抗原的变化提供了正常参考值。     

流式细胞术检测DNA含量在胃癌早期诊断中的价值

肿瘤的发生与发展是一个多基因、多因素的过程,胃癌亦是如此,它的发生与发展是一个极其复杂的过程,有众多复杂的分子生物学变化.用流式细胞术(FCM)测定细胞核DNA含量,可反映细胞的增殖能力,并可根据异倍体的出现,判断组织的良性与恶性.由于细胞核DNA含量的变化出现在细胞形态和组织结构改变之前,因此,检测胃黏膜癌前病变和胃癌细胞核内DNA含量,对分析癌前病变发展趋势,发现早期胃癌有一定价值.FCM检测细胞DNA倍体在胃癌的研究中虽然取得了一定成果,但能否同病理形态学一样作为胃癌诊断依据尚不明确.随着研究的不断深入,人们对它的了解越来越多,应用于胃癌早期诊断的前景更为广阔.     

加味玉屏风散对小鼠脾淋巴细胞增殖影响的流式细胞术分析

用流式细胞术分析了加味玉屏风散对小鼠脾淋巴细胞增殖周期中各时相分布及细胞增殖指数的影响,结果表明,本方具有促进淋巴细胞DNA合成,加快分裂增殖,延缓细胞衰老及增强免疫功能效应。     

肝硬化病人血小板4项参数的检测及意义

目的探讨肝硬化病人血小板计数(BPC)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)4项参数的变化及其临床意义。方法采用全自动血细胞分析仪及其配套试剂,检测50例正常人与108例肝硬化病人的外周血BPC、MPV、PDW、PCT。结果肝硬化病人BPC、PCT低于正常对照组,MPV、PDW则高于正常对照组,差异有显著性(F=4.63~6.54,P<0.01)。随着肝功能减退、Child-Pugh评分升高,BPC、PCT等明显下降,MPV、PDW明显上升,存在明显的相关性(r=0.502,P<0.01)。结论肝硬化病人BPC、MPV、PDW、PCT 4项参数的异常与肝脏功能受损的严重程度有关,肝硬化病人血小板4项参数检测对指导临床治疗及判断病人预后有重要意义。     

癌性胸腔积液K—ras基因突变检测及临床应用

目的 探讨Ｋ－ｒａｓ基因突变检测用于癌性胸腔积液的诊断价值。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对５８例生及３０例结核性胸积液进行Ｋ－ｒａｓ基因突变分析。结果：结核性胸液未发现突变，癌性胸液有１７例突变阳性，突变率２９．３％，其中腺癌所致胸腔积液突变率为３４．１％（１４／２１），鳞癌１６．７％（２／１２）。１７例Ｋ－ｒａｓ基因突变阳性的胸液中，１４例肉眼生，明显高于非血性胸液组，Ｐ〈０．０５。１８例未找     

骨密度测量仪的研制与临床应用

1986年11月～1987年9月,联合研制了GMY—Ⅰ型γ光子吸收扫描骨密度测量仪。通过1699例正常人的临床应用,证明该类仪器具有操作简便、灵敏度高、速度快、安全性能好、对被检对象无损伤及价格较便宜等优点。本文介绍了该仪器的技术原理及测试方法,并提供了20～60岁正常成年人男女两性不同年龄组骨盐含量及骨密度正常值。     

膀胱肿瘤流式细胞DNA含量分析及其与病理学分级的关系

用流式细胞分析术(FCM)检测114例膀胱移行上皮细胞癌病人的膀胱冲洗液,以了解该肿瘤细胞DNA异倍体的出现率和S期细胞比例与其病理学分级的关系。114例中,膀胱肿瘤属G_Ⅰ级者异倍体出现率20.8％,G_Ⅱ级者58％,G_Ⅲ级者91％。S期细胞比例G_Ⅰ级者为6.6±2.1％,G_Ⅱ级者13.4±4.4％,G_Ⅲ级者25±5.3％。结果表明,随着膀胱肿瘤病理分级的增高,异倍体出现率和S期细胞比例明显上升。作者还对膀胱肿瘤病人膀胱冲洗液和手术标本同时进行FCM检测,并对检测结果作了比较。