闽东农村婴幼儿腹泻病原学调查

对闽东农村５８２例婴幼儿腹泻患者进行细菌性病原调查，在２０８例腹泻患儿粪便中检出致泻菌２４６株，检出率为４２．２６％，其中ＥＴＥＣ７７株（１３．２３％），ＥＩＥＣ１９株（３．２６％），空肠弯曲菌１７株（２．９２％），沙门氏茵６株（１．０３％），亲水性气单胞菌２株（０．３４％）。表明致泻大肠杆菌（ＥＴＥＣ，ＥＰＥＣ，ＥＩＥＣ）是我区婴幼儿致泻主导菌群，占检出菌的６６．３％。混合感染率在农村腹泻患儿中高达１７．３％，值得临床工作者重视。     

携带毒力岛大肠杆菌性小儿腹泻

目的：探讨携带毒力岛大肠杆菌（HPIEC）在小儿腹泻中的病原学地位。方法：采用PCR扩增和菌落原位杂交检测HPIEC－irp2毒力岛基因,并用血清学分型和聚合酶链反应（PCR）法检测各类致泻大肠杆菌。结果：从1032例腹泻患者粪便中分离出652株大肠杆菌,经血清学和PCR毒力基因分型,检出各类致泻大肠杆菌225株,其中肠致病性大肠杆菌（EPEC）20株,ETEC81株,产志贺样毒素大肠杆菌（SLTEC）47株,产志贺样毒素侵袭性大肠杆菌（ESIEC）74株,产毒素大肠杆菌（EIEC）3株。所有致泻大肠杆菌和未能分型的普通大肠杆菌株,再用HPIEC－irp2探针作菌落原位杂交,共检出携带毒力岛大肠杆菌（HPIEC－irp2)112株,总阳性率为17．2％。其中41例是从致泻大肠杆菌ESIEC（24／74）和SLTEC（17／47）中检出。携带毒力岛大肠杆菌性小儿腹泻的主要临床表现为食欲不振（87．5％）,腹痛（58．0％）,腹泻（＞6次／d,75．9）,发热（50．9％）,以粘液便为主（69．6％）。结论：携带毒力岛大肠杆菌是引起小儿腹泻的重要病原菌之一。     

产肠毒性大肠杆菌的耐药性和质粒特征

对从广州市某医院儿科病房腹泻儿童粪便中检测获得的４６株产肠毒性大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的４种遗传型（ＬＴ－ｈ、ｓＴ－ｐ、ＳＴ－ｈ和ＣＦＡ／Ｉ）菌株，用１４种常用抗生素进行敏感试验和质粒特征分析，结果：在１２４株大肠杆菌中，分别用ＥＴＥＣ的４种￣（３２）Ｐ－ＤＮＡ基因探针检测，总阳性率为３７．１０％（４６／１２４），ＳＴ－ｐ的阳性率最高，占６０．８７％（２８／４６），有三例病人分别受到２株具有不同遗传型ＥＴＥＣ感染。药物敏感试验，多数的菌株对青霉素Ｇ（１００％）、红霉素（７３．９１％）、氨苄青霉素（６９．５７％）和羧苄青霉素（６５．２２％）有抗性，８２．６１％以上的菌株对多粘菌素Ｂ、氟哌酸、庆大霉素和先锋霉素Ｖ是敏感的，４６株ＥＴＥＣ的质粒携带率为６３．０４％（２９／４６），各菌株之间的质粒图谱不尽相同，菌株的质粒携带数１－１１个不等，分子量１．１－７５．６Ｍｄ．发现抗四环素和氯霉素的菌株中，质粒的含量有显著差异（χ￣２＝１５．９９、Ｐ＜０．０１）。     

产肠毒性大肠杆菌的耐药性和质粒特征

对从广州市某医院儿科病房腹泻儿童粪便中检测获得的４６株产肠毒性大肠杆菌的４种遗传型菌株，用１４种常用抗生素进行敏感试验和质粒特征分析，结果：在１２４株大肠力中，分别用ＥＴＥＣ的４种＾３２Ｐ－ＤＮＡ基因探针检测，总阳性率为３７．１０％（４６／１２４），ＳＴ－ｐ的阳性率最高，占６０．８７％（２８／４６），有三例病人分别受到２株具有不同遗传型ＥＴＥＣ感染。药物敏感试验，多数的菌株对青霉素Ｇ（１００％）、     

致腹泻大肠埃希菌及其检验诊断进展

无论在发展中国家还是在发达国家 ,由大肠埃希菌 (简称大肠杆菌 )所致的腹泻仍然严重威胁着人类健康 ,重要的致腹泻大肠杆菌已明确者有产毒素大肠杆菌 (ＥＴＥＣ)、肠致病性大肠杆菌 (ＥＰＥＣ)、肠出血性大肠杆菌 (ＥＨＥＣ)、肠侵袭性大肠杆菌 (ＥＩＥＣ)、肠聚集性大肠杆菌 (ＥＡＥＣ ,ＥＡｇｇＥＣ)、细胞脱落性大肠杆菌 (ＤＡＥＣ) ,尚有产坏死性毒素大肠杆菌、产志贺毒素且具侵袭力的大肠杆菌 (ＥＳＩＥＣ)等。其病原学诊断常被忽视 ,原因之一是除ＥＨＥＣ可致严重临床问题外 ,一般均易于治疗 ,服用抗生素加补液可迅速见效 ;其二是缺…     

16种抗菌药物对致病性大肠杆菌和志贺氏菌的MIC测定

１６种抗菌药物对从小儿腹泻粪便标本中分离到的不同血清型别的１１株肠致病性大肠杆菌（ＥＰＥＣ），９株肠侵袭性大肠杆菌（ＥＩＥＣ）及１５０株志贺氏菌进行最低抑菌浓度（ＭＩＣ）测定。结果显示，各菌株对头孢三嗪、丁胺卡那、头孢哌酮和头孢唑啉均较敏感（ＭＩＣ９０为＜２～３２ｍｇ／Ｌ）；氟哌酸、庆大霉素和氟霉素对两者的ＭＩＣ９０相差较大（对致病性大肠杆菌的ＭＩＣ９０分别是＞２５６、６４和＞１２８ｍｇ／Ｌ，对志贺氏菌的ＭＩＣ９０分别是６４、１０和３０ｍｇ／Ｌ）．而其余９种抗菌药物的抑菌效果都很差（除卡那霉素外，ＭＩＣ９０均大于１００ｍｇ／Ｌ）。     

产肠毒素大肠杆菌腹泻病的系列研究（Ⅱ）临床特点

用产肠毒素大肠杆菌（ＥＴＥＣ）的４种主要毒力基因（ＬＴ、ＳＴｐ、ＳＴｈ、ＣＦＡ／Ｉ）制成同位素标记的探针作为诊断手段，在广州市远郊农村对ＥＴＥＣ腹泻病做了系列研究。该病年发病率１２．１７％，年龄１个月～７５岁。不足５岁的发病率为８０．２８％，其中不足２岁的高达１８．９７％；５岁以上的为２．１８％，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）．男孩显著高于女孩（Ｐ＜０．０１）．发病高峰在７月（１．４７％）和１１月（１．７６％）。临床症状以腹泻（１００％）、呕吐（３２．５％）、食欲差（２８．９％）为主，９５％的不足２岁患者伴有上感症状，３１．３％有３８℃以下低热，个别达３９℃以上者常伴有合并感染，但成人少见，７５％患者为水样便或稀便，１４．５％为粘液便，３．６％为脓血便；有脓血便者常合并志贺氏菌、空肠弯曲菌或侵袭性大肠杆菌（ＥＩＥＣ）感染。８２％的患者每天大便３～５次，＞１０次者常有合并感染。菌型以ＥＴＥＣ－ＳＴｐ为主，依次为ＬＴ、ＳＴ／ＬＴ和ＣＦＡ／Ｉ。病程一般为３～４天。对常用抗菌药物敏感，但对红霉素、四环素、青霉素Ｇ有高度抗性，且多重抗性十分普遍。     

一株对37种抗菌药物敏感的侵袭性大肠杆菌

一株对３７种抗菌药物敏感的侵袭性大肠杆菌王秀英陈添弥１９９０～１９９４年，我们在对西藏６００余例腹泻病患者致病菌的调查研究中，从大量标本中分离筛选出１株对多种抗菌药物敏感的野生型侵袭性大肠杆菌（ＥＩＥＣ）。现将结果报告如下：一、材料与方法１．菌株来源...     

闽东农村婴幼儿腹泻病原学调查

对闽东农村1582例婴幼儿腹泻患者进行细菌性病原调查，在208例腹泻患儿粪便中检出致泻菌246株，检出率为42．26%，其中ETEC77株（13.23％)．EIEC19株(3.26％)．空肠弯曲菌17株(2．92%),沙门氏菌6株(1.03%)，亲水性气单胞菌2抹(0．34%)。表明致泻大肠杆菌(ETEC，EPEC,EIEC)是我区婴幼儿致泻主导菌群,占检出菌的66．3%。混合感染率在农村腹泻患儿中高达17．3%，值得临床工作者重视。     

南宁市新生儿腹泻病原检测及其防治研究

为了掌握南宁市新生儿腹泻的特点，有效控制新生儿腹泻，我们于１９８８年３月至１９９３年２月对南宁市内五家医院７８７例新生儿腹泻粪便进行了病原检测，耐药性监测和流行病学分析。检出各种致泻病原体２６１例，总检出率３３．２％。计２４种病原，细菌性感染占９６．６％。社会获得性腹泻检出率为２７．５％，病原性大肠菌占７１．３％，以ＥＰＥＣ为主（８８／１６０）。医院内获得性腹泻检出率４９．０％，以沙门氏菌为主（４     

Identification of Shiga- like toxin Escherichia coli isolated from children wi th diarrhea by polymerase chain reaction

目的：探讨产志贺样毒素大肠埃希菌（SLTEC）在小儿腹泻中的病原学地位。方法：根据肠出血性大肠埃希菌（EHEC）0157：H7SLT1、SLT2、eaeA基因片段设计了3对引物,采用PCR法检测大肠埃希菌中SLT1、SLT2、eaeA毒力基因。结果：29株标准致泻大肠埃希菌（EHEC、EPEC、ETEC）和10株其它肠道病原菌中,只有1株EHEC检出SLT1、SLT2、eaeA毒力基因,其它均为阴性。从1032例腹泻患儿粪便中分离的474株未定型大肠埃希菌中,检出SLT1 20株（4.2％）,SLT2 7株（1.5％）;74株产志贺样毒素侵袭性大肠埃希菌（ESIEC）中检出SLT115株（20.3％）,SLT2 5株（6.8％）。结论：SLTEC是太原地区引起小儿腹泻的一种重要的致泻病原菌。     

佛山市食品中致泻大肠埃希菌菌型分布及毒力研究

目的 了解佛山市食品中致泻大肠埃希氏菌的菌型分布及毒力携带情况。方法采集佛山市十类食品362件中分离的17株致泻大肠埃希氏菌。按GB4789．6-94国家卫生标准检验方法进行血清分型；用ELISA检测耐热肠毒素(ST)和不耐热肠毒素(LT)；毒力测定采用小鼠致病力试验和采用irp2和irpB基因探针菌落原位杂交检测ES-IEC菌株毒力岛。结果 菌型分布在三类11个型别上，其中EPEC占41．17％(7／17)，EIEC为35．29％(6／17)。ESIEC为23．53％(4／17)；17株致泻大肠埃希氏菌在七类食品中均有存在。对小鼠致病力试验均为阳性；耐热肠毒素(ST)和不耐热肠毒素(LT)均为阴性，其中4株ESIEC中1株携带耶尔森氏菌强毒力岛(HPI)。结论佛山市食品中污染致泻大肠埃希氏菌普遍，对小鼠致病力与耐热和不耐热肠毒素无必然联系；有携带耶尔森氏菌HPI的ESIEC存在。应引起足够重视。     

Molecular detection and antimicrobial resistance of diarrheagenic Escherichia coli strains isolated from diarrheal cases

OBJECTIVE: To identify and classify Iranian isolates of diarrheagenic Escherichia coli (E. coli) on the basis of presence of virulence genes and to determine antibiotic susceptibility of isolated strains. METHODS: The current cross-sectional study was conducted in 2005 at the Pasteur Institute, Tehran, Iran. One hundred and ninety-three diarrheagenic E. coli isolated from diarrheal patients in different regions of Iran were included in current study. Virulence factor genes for diarrheagenic E. coli were detected by polymerase chain reaction. RESULTS: Of the 193 diarrheagenic E. coli detected by PCR, 86 (44.5%) were Shiga toxin-producing E. coli STEC, 74 (38.4%) enteropathogenic E. coli EPEC, 19 (9.8%) enteroaggregative E. coli, and 14 (7.3%) enterotoxigenic E. coli isolates. Susceptibility to 12 clinically important antimicrobial agents was determined for 193 strains of diarrheagenic E. coli. A high incidence of resistance to tetracycline (63%), ampicillin (62%), streptomycin (56%), amoxicillin/clavulanic acid (44.5%), trimethoprim/sulfamethoxazole (39.5%), and cephalothin (37%) was observed. CONCLUSION: The STEC and EPEC strains with high resistance to tetracycline and ampicillin, but highly susceptible to quinolones are among the most important causative agent of diarrhea in Iran. This study suggests that antimicrobial resistance is widespread among E. coli strains colonizing Iranian patients. Guidelines for appropriate use of antibiotics in developing countries require updating.     

淮安市2013-2015年致泻大肠埃希氏菌的检测和流行特征分析

目的：了解2013-2015年淮安市致泻大肠埃希氏菌的检出情况和流行特征,为疾病的防治提供依据。方法于2013-2015年从淮安市各哨点医院和社区医院腹泻门诊患者的795份粪便标本中分离大肠埃希氏菌,使用多重PCR方法筛查致泻大肠埃希氏菌,再结合生化实验验证。结果在795份腹泻标本中共检出致泻大肠埃希氏菌80株,检出率为10.06%。其中ETEC 34株,检出最高,其余依次为EAEC 18株、EPEC 16株、EIEC 7株和EHEC 5株。按季节分布统计,差异有统计学意义(P<0.05),夏秋两季为主要流行时段。城市和农村的地域分布则差异无统计学意义(P>0.05);从人群分布分析,不同性别阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),但不同年龄组之间比较则差异有统计学意义(P<0.05)。结论淮安市致泻大肠埃希氏菌主要流行型别为ETEC,夏秋两季为主要流行时段,≤5岁和6~18岁为易感人群,今后应加强对重点时段和人群的监测。     

免疫接种后牛血清与乳汁中特异性抗体效价的比较

目的：研究孕牛经免疫接种后，血清及乳汁中特异性抗体效价的变化关系。方法：以9株人肠道病原菌制备的混合抗原对孕牛进行系统免疫，分娩后收集血液和乳汁，检测其中特异性抗体的效价。结果：血清中抗体效价120d内始终维持在2^10～2^12．而常乳中抗体的效价120d内也能维持在2^6～2^7。结论：经过反复加强免疫使血清中特异性抗体效价始终维持在较高水平．就能保证乳计中特异性抗体效价维持在一定水平。     

烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性菌分离率及耐药性分析

目的了解我院特别是烧伤病区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌的流行情况,检测其对常用抗生素的耐药性,为临床治疗和控制ESBLs菌感染及流行提供重要依据.方法通过中心化验室收集我院2000年3月～2001年2月住院患者送检标本中大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌共计258株,应用VITEK自动检测系统(GNS-506药敏分析卡)及双纸片扩散法筛选产ESBLs菌.根据VITEK自动检测系统药敏检测结果分析比较产ESBLs菌和非产ESBLs菌对15种抗生素的敏感性,并对其中38株产ESBLs阳性菌进行12种临床常用抗生素MIC检测.结果 258株入选菌株中产ESBLs阳性率分别为:大肠杆菌18.8%(29/154);肺炎克雷伯杆菌12.5%(13/104).按标本种类分析,分泌物标本培养产ESBLs阳性率最高,为25.5%,与其他标本培养的总阳性率间的差别有显著性意义;按病区分析,烧伤病区产ESBLs阳性率(大肠杆菌38.5%;肺炎克雷伯杆菌25.0%)与其他病区产ESBLs阳性率间差别有显著性意义.药敏结果:产ESBLs的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南、美洛培南及头孢西丁的敏感率较高,其次是氨基糖苷类抗生素,产ESBLs的肺炎克雷伯杆菌对哌拉西林/三唑巴坦敏感,对其他抗生素的敏感性下降.结论烧伤病区是产ESBLs菌的高发病区,产ESBLs菌对亚胺培南的敏感率最高,其次是美洛培南、头孢西丁和丁胺卡那.     

Preparation of Monoclonal Antibody and Development of Enzyme-linked Immunosorbent Assay Specific for Escherichia coil O157 in Foods

OBJECTIVE: To prepare monoclonal antibodies (MAb) and antisera specific for Escherichia coli (E. coli) O157, and to develop a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect E. coli O157 in foods. METHODS: Spleen cells from BALB/c mice immunized with the somatic antigen of E. coli O157:H7 were fused with murine Sp2/0 myeloma cells. The hybridoma cell line specific for E. coli O157 was established after having been subcloned. Antisera specific for E. coli O157 was prepared by intravenous injection into New Zealand rabbits with a stain of E. coli O157:H7. The sandwich ELISA was developed with the polyclonal antibody as the capture antibody and the MAb 3A5 as the detection antibody. The inoculated ground poultry meat and pasteurized milk were tested to confirm efficiency of the method. RESULTS: MAb 3A5 specific for E. coli O157 and O113:H21 belonged to subtype IgM. The ascetic titers of the antibody was 1:1x10(6). No cross-reactivity of the MAb was observed with strains of Salmonella spp, Yersinia enterocolitica, Shigella dysenteriae, etc. The purified polyclonal antibody had a titer of 1:1x10(5) with E. coli O157. The detection limit of this sandwich ELISA was 10(3)-10(4) cfu E. coli O157/mL in pure culture with a high specificity, which was characterized by every non-O157 strain with negative response. With 10h enrichment procedure, E. coli O157:H7 recovered well from inoculated ground poultry meat and pasteurized milk at levels of 0.1 cfu/g and 0.1 cfu/mL. CONCLUSION: MAb 3A5 specific for E. coli O157 and O113:H21 can be produced by immunizing BALB/c mice with a strain of E. coli O157:H7. Then a sandwich ELISA can be developed with the polyclonal antibody as the capture antibody and the MAb 3A5 as the detection antibody. The method is proved to be a sensitive and specific technique to detect low number of E. coli O157 in food.     

临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶的检测

目的：检测临床分离的临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）菌株的发生率、耐药性、流行性以及酶的基因型别。方法：采用双纸片法、琼脂稀释法、PCR、脉冲场电泳对1999年复旦大学附属华山医院临床分离的559株肺克雷伯菌和427株大肠埃希菌进行检测。结果：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产ESBL菌株的发生率分别为51％和23.6％,产ESBL菌株主要分布于ICU和神经外科病房,对大多数的β-内酰胺酶和非β-内酰胺类抗菌药物耐药;PFGE显示,产ESBL菌株（尤其是产ESBL肺炎克雷伯菌株）在ICU病房中存在同一菌株的克隆传播;PCR检测显示TEM型是最为常见的β-内酰胺酶型别,CTX-M型ESBL亦较为普遍。结论：产ESBL菌株在临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中较为普遍,而且为多重耐药菌株,在医院内中存在流行与传播。     

ICU病房革兰氏阴性杆菌耐药性分析

目的:了解我院重症监护病房革兰氏阴性杆菌的分布和耐药性情况. 方法: 使用纸片扩散法对276株临床分离菌进行抗菌药物敏感试验. 结果:分离出最常见的5种菌依次为:不动杆菌属、大肠埃希氏菌、克雷伯菌属、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌.ESBLs在大肠埃希氏菌和克雷伯菌属中的检出率分别为41.1%和52.2%.非发酵菌对大多数抗菌药物高度耐药.结论:加强耐药性监测,合理使用抗菌素十分重要.