霍山石斛不同部位总黄酮的含量比较及黄酮类成分分析

目的 比较霍山石斛不同部位的总黄酮含量，并对其叶中黄酮类成分进行定性鉴别，明确霍山石斛黄酮积累部位及黄酮化合物组成。方法 采用AlCl₃比色法测定霍山石斛不同部位的总黄酮含量；应用超高效液相色谱-四级杆/飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF-MS)技术鉴定其不同部位的黄酮类化合物，使用Altima UHPLC C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；以0.4%甲酸(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱，流速0.9 m L·min^-1，柱温35℃。采用加热电喷雾离子化源(H-ESI)，负离子模式下采集数据，使用MassLynx V4.1软件处理数据。结果 霍山石斛不同部位中总黄酮含量比较：叶>茎>根，分别为2.06、0.630、0.477 mg·g^-1，三者存在显著性差异；在霍山石斛根、茎、叶中分别鉴定出53、61、68种黄酮类化合物。其化合物的类型主要以双碳糖苷为主，苷元主要是芹菜素。结论 霍山石斛中黄酮类化合物主要在叶中积累，其化学组成类型丰富，该研究结果可为霍山石斛的...     

基于高效液相色谱-二极管阵列光谱检测-电喷雾离子化质谱联用鉴定铁皮石斛叶中8种黄酮碳苷化合物及裂解规律研究

目的 采用高效液相色谱-二极管阵列光谱检测-电喷雾离子化质谱联用技术对铁皮石斛叶中黄酮碳苷类成分进行分析和鉴别。方法 用XB C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;0.4%甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min;柱温30 ℃;DAD扫描范围190~400 nm;检测波长335 nm。Agilent电喷雾离子阱多级质谱仪;负离子检测模式;毛细管电压4 500 V;干燥气温度350 ℃,干燥气流量12.0 L·min,雾化气压力241 kPa;扫描范围m/z 50~600。结果 首次从铁皮石斛叶中快速发现和鉴定了苷元均为芹菜素的8种黄酮二碳糖苷类化合物,单糖均连接在C-6位和C-8位。并探讨了黄酮碳苷化合物电喷雾质谱（ESI-MS）特征碎裂规律。结论 该方法灵敏度高、分离度好,适用于铁皮石斛叶化学成分的快速鉴定。黄酮二碳糖苷ESI-MS特征碎裂规律为快速发现和鉴定黄酮碳苷类化合物有一定借鉴作用。     

新西兰牡荆苷等4种碳苷黄酮的电喷雾质谱裂解规律研究

目的:利用电喷雾质谱技术对新西兰牡荆苷、木犀草素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷、槲皮素-6-C-葡萄糖苷和二氢槲皮素-6-C-葡萄糖苷4种碳苷黄酮的质谱裂解规律进行研究.方法:用电喷雾多级质谱(ESI-MSn)对该类化合物进行研究,并分别在正离子和负离子扫描模式下对其主要特征碎片离子进行解析.结果:负离子扫描模式下,主要发生糖环裂解,六碳糖碳苷主要产生脱去m/z 120,90的碎片峰,五碳糖碳苷主要产生脱去m/z 90,60的碎片峰,双糖碳苷主要产生连续脱去m/z120,90,60的碎片峰;正离子扫描模式下,主要发生糖羟基连续脱水,六碳糖碳苷产生脱去m/z 120的碎片峰,五碳糖碳苷产生脱去m/z 60的碎片峰.碳苷黄酮的负离子扫描模式比正离子扫描模式的质谱特征更明显.结论:分析了这4种碳苷黄酮的电喷雾多级质谱裂解规律,探讨了碳苷黄酮,特别是双糖碳苷黄酮质谱裂解规律,为碳苷黄酮的快速鉴别提供了参考.     

铁皮石斛叶中黄酮碳苷类成分的高效液相指纹图谱及指标成分的含量测定

 目的 建立铁皮石斛叶中黄酮碳苷类成分HPLC指纹图谱,并同时测定主要成分芹菜素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-木糖苷的含量,为科学评价和有效控制其质量提供依据。方法 采用XB C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,甲醇-0.4%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长335 nm。收集了14批铁皮石斛叶和3批同属不同种石斛叶进行测定,用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价软件2004AB”对其质量进行评价,同时对黄酮碳苷类成分进行主成分分析。结果 建立了铁皮石斛叶黄酮碳苷类成分HPLC指纹图谱,标定了9个共有色谱峰,并采用对照品指认了8个色谱峰。3批同属不同种石斛叶与铁皮石斛叶对照图谱明显不同。主成分分析结果表明,黄酮二碳糖苷类成分中芹菜素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-木糖苷对其质量影响最为显著。结论 所建立的铁皮石斛叶黄酮碳苷类成分指纹图谱特征性强,方法简便,结合主要成分含量测定可更好地控制其质量,对铁皮石斛叶的鉴定及质量控制具有指导意义和参考价值。     

MS/MS技术快速发现和分析繁缕中的黄酮碳苷成分

目的：快速发现和分析繁缕中的黄酮碳苷类成分，为今后的活性成分研究提供依据；同时，探讨天然活性成分研究的思路与方法。方法：采用植化中的粗分离方法处理药材，进而以制备TLC与电喷雾串联质谱(MS／MS)技术离线连接，获得目标成分并进行结构分析。结果：从繁缕中分离得到并鉴定了三个黄酮碳苷类化合物。化合物Ⅰ为6，8-二葡萄糖基芹菜素；化合物Ⅱ的苷元为芹菜素，苷元分别以碳苷键与两个糖连接，一个为五碳糖，一个为六碳糖；化合物Ⅲ的苷元也是芹菜素，分别以碳苷键与两个糖连接，一个为五碳糖，一个为六碳糖，但六碳糖在A环上，五碳糖在B环上。在繁缕中，尚无这种黄酮碳苷的研究报道。结论：制备TLC与串联质谱技术离线连接，可以较为快速地发现和分析天然活性成分。在苷类化合物的ESI-MS／MS中，如果不首先出现脱糖基的碎片峰，而是有规律地产生脱去60，90，120质量单位的碎片峰，就基本可以判断为六碳糖的碳苷类化合物。如果是五碳糖，则只能产生脱去60，90质量单位的碎片峰，不产生脱120质量单位的碎片峰。这对于快速发现和鉴定碳苷类化合物有一定指导意义。     

铁皮石斛不同部位黄酮碳苷类成分及清除DPPH自由基能力比较研究

目的:对铁皮石斛根、茎、叶和花中黄酮碳苷类成分及抗氧化作用进行比较,为扩大铁皮石斛的药用部位提供实验依据。方法:采用TLC和HPLC及与对照品对照,对铁皮石斛不同部位黄酮类成分种类和含量进行分析;以清除DPPH自由基能力对抗氧化活性进行比较。结果:铁皮石斛茎、叶和花中含有种类相同的黄酮二糖碳苷类成分,并采用对照品指认了共有的8个色谱峰;但各黄酮碳苷的含量有显著差异,叶和花中黄酮碳苷的含量明显高于茎,叶和花HPLC色谱图相似度较高;根中黄酮类成分较少。茎中含有柚皮素,而根、叶和花均不含该成分。铁皮石斛茎和叶对DPPH自由基均有一定的清除作用,叶对DPPH自由基清除能力优于茎。结论:以黄酮碳苷含量及抗氧化活性为指标,铁皮石斛叶和花代替茎入药有一定可能性。该研究为铁皮石斛的综合开发利用提供了前期基础。     

铁皮石斛黄酮苷类成分HPLC特征图谱优化及不同种源特征性分析

目的:优化铁皮石斛黄酮苷类成分HPLC特征图谱分析方法,明确不同种源的共性成分与特异性成分。方法:色谱条件采用Kromasil 100-5 C18色谱柱;流动相四氢呋喃-乙腈-甲醇(10∶22∶5)-0. 05%磷酸水溶液梯度洗脱;检测波长340 nm;柱温30℃;流速1. 0 mL·min~(-1)。结果:27批铁皮石斛共标示出13个黄酮类特征峰,鉴别了6个黄酮碳苷(新西兰牡荆苷Ⅱ,新西兰牡荆苷Ⅰ,夏佛塔苷,异夏佛塔苷,佛莱心苷,异佛莱心苷)与1个黄酮氧苷(芦丁)共7个特征峰。不同批次样品检出7~11个特征峰,其中新西兰牡荆苷Ⅱ为不同来源样品相对稳定的共有峰,芦丁、佛莱心苷与异佛莱心苷特征峰差异较大。根据特征峰的相对丰度,可将样品分为3大类,其中第Ⅰ类10批样品主要来源于广东、江西、福建、浙江(武义)等丹霞地貌(即"丹霞种"),以检出明显的芦丁强峰为特征;第Ⅱ类11批样品主要来源于云南、广西等地(包括了"云南广南种""广西铁皮兰种"),以能检出佛莱心苷与异佛莱心苷特征峰为特征;而第Ⅲ类6批样品主要来源于浙江(即"浙江本地种"),以难以检出佛莱心苷与异佛莱心苷特征峰,检出不同程度的芦丁峰为特征。比较"丹霞种"与"广西铁皮兰种"的仿野生和大棚栽培铁皮石斛HPLC特征图谱,结果仿野生铁皮石斛中的特征峰在大棚栽培石斛中也能稳定检出,验证了铁皮石斛种源的可靠性。结论:所建立的分析方法能对铁皮石斛黄酮类特征峰达到较好的分离效果,重复性好,基本明确了不同种源铁皮石斛的共性及特异性黄酮苷类成分。提示新西兰牡荆苷Ⅱ适合作为特征图谱的参照物峰;可根据芦丁相对丰度或佛莱心苷与异佛莱心苷特征峰的检出及相对丰度作为铁皮石斛"丹霞种""云南广南与广西铁皮兰种"与"浙江本地种"的判断依据。     

基于UPLC-Q-TOF-MS和HPLC-DAD的三七黄酮类成分定性与定量研究

采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)鉴定三七中的黄酮类成分，配有二极管阵列检测器的高效液相色谱(HPLC-DAD)测定不同产地、不同规格等级三七中3种主要黄酮类成分的含量。UPLC-Q-TOF-MS/MS分析分别采用正、负离子模式鉴定黄酮和花青素，共鉴定出三七中12个黄酮苷类和1个花色苷类成分，未检测到黄酮苷元。其中12个化合物首次从三七地下部分鉴定，8个化合物首次从该植物中鉴定，6个化合物首次从人参属中鉴定，4个化合物首次从五加科中鉴定。采用HPLC-DAD建立了同时测定三七中3种主要黄酮成分含量的方法，测定了20个不同产地、124组不同规格等级的721份三七样品中黄酮的含量。3种黄酮中，槲皮素-3-O-(2″-β-D-木糖基)-β-D-半乳糖苷含量最高，在测定样品中的平均值为161.0μg·g^-1;化合物槲皮素-3-O-己糖基-己糖苷、山柰酚-3-O-戊糖基-己糖苷的含量较低，以白麻苷和山柰酚-3-O-桑布双糖苷计含量，质量分数分别为18.5、49.4μg·g^-1。不同产地样品中黄酮含量存在显著差异；当固定...     

基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术的正心降脂片化学成分研究

目的 建立一种快速鉴定中药复方制剂正心降脂片的高分辨质谱分析方法,系统阐明其化学成分组成。方法 采用超高效液相色谱-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)对正心降脂片成分进行分析,色谱柱为Thermo Accucore aQ RP18(2.1 mm×150 mm, 2.6 μm),流动相采用乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1。采用加热电喷雾离子源,正、负离子同时扫描模式采集数据。根据一级准分子离子精确质荷比、二级质谱碎片离子信息、文献报道和对照品比对鉴定正心降脂片的化学成分。结果 共鉴定了正心降脂片中105个化学成分,包括21个有机酸、59个黄酮类化合物(黄酮氧苷类37个,黄酮碳苷类10个,多甲氧基黄酮类化合物12个)、19个醌类化合物(11个蒽醌类和8个菲醌类)、3个二苯乙烯类化合物及3个其他类型化合物。其中29个化合物采用对照品比对进行了鉴定,并对各成分的药材来源进行了归属。结论 对正心降脂片的化学成分进行了系统、全面地分析,为其药效物质基础、质量控制及作用机制研究奠定了基础。     

王不留行中王不留行黄酮苷的分离与鉴定

目的分离鉴定王不留行药材中的特征成分。方法利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱进行分离,通过理化常数、核磁共振、变温核磁共振和质谱等多种技术鉴定化合物。结果分离得到一个化合物,鉴定为王不留行黄酮苷。结论王不留行黄酮苷在王不留行中的量较高,可以作为王不留行及其炮制品质量控制的指标性成分;首次报道了王不留行黄酮苷的13C-NMR数据及其旋转异构现象。     

丹霞种、云南广南种铁皮石斛中主要黄酮苷的分离鉴定

目的:对2个道地种源(丹霞种、云南广南种)铁皮石斛中的黄酮苷成分进行提取分离、纯化及结构鉴定,为确认铁皮石斛的共性黄酮苷成分提供实验依据。方法:(1)采用70%乙醇提取两个产地铁皮石斛叶的总黄酮成分,依次采用有机溶剂石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取粗提物,运用大孔吸附树脂AB-8,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)以及ODS柱色谱对水饱和正丁醇萃取部位进行分离纯化,通过化合物的理化性质结合HPLC,ESI-MSn,1H-NMR,13C-NMR等现代波谱学方法鉴定黄酮苷结构。(2)利用HPLC分析比较不同道地种源(丹霞种、云南广南种、广西铁皮兰种、浙江本地种)铁皮石斛的黄酮苷共有成分。结果:从2个产地铁皮石斛叶中共分离得到了5个黄酮苷化合物,经鉴定为芦丁,新西兰牡荆苷Ⅱ,新西兰牡荆苷Ⅰ,佛莱心苷,异佛莱心苷。4个不同道地种源(丹霞种、云南广南种、广西铁皮兰种、浙江本地种)铁皮石斛茎中均能检出新西兰牡荆苷Ⅱ,新西兰牡荆苷Ⅰ特征峰,其中新西兰牡荆苷Ⅱ丰度相对较大,而佛莱心苷、异佛莱心苷在云南广南种、广西铁皮兰种中出峰明显,芦丁则在丹霞种中尤为突出。结论:新西兰牡荆苷Ⅱ为铁皮石斛不同道地种源(丹霞种、云南广南种、广西铁皮兰种、浙江本地种)的共性黄酮苷成分,可作为铁皮石斛特征图谱的参照物。     

延边产朝药材肾炎草的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立朝药材肾炎草的HPLC-UV指纹图谱。方法 采用SunFire^TM C₁₈ (4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱;以乙腈(B)-0.4%冰醋酸溶液(A)梯度洗脱,检测波长253 nm,柱温40 ℃,进样量10 μL,流速1.0 mL · min^-1,采用对照品指认进行成分分析。结果 建立了朝药材肾炎草的HPLC-UV特征指纹图谱共有模式,标定了21个共有峰,指认了其中3个黄酮碳苷成分。10批次药材的相似度结果均大于0.95,相似程度高。结论 该方法简便,精密度、重复性和稳定性很好,特征性和专属性强,可为肾炎草药材整体质量控制提供有效手段。     

广陈皮水提物的化学成分分析

目的:研究广陈皮水提物的活性成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和制备高效液相色谱对广陈皮的水提物进行分离,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物的结构。结果:从广陈皮水提物中分离鉴定出7个化合物的结构,包括1个黄酮碳苷,2个二氢黄酮苷,2个多甲氧基黄酮,1个楝烷型降四环三萜和1个二糖,其结构分别鉴定为6,8-Di-C-β-葡糖基芹菜苷(1),橙皮苷(2),芸香柚皮苷(3),川陈皮素(4),橘皮素(5),柠檬苦素(6)和麦芽糖(7)。结论:化合物1和7为首次从该植物中分离得到。     

HPLC-MS/MS联用技术分析鉴定苏薄荷中的黄酮类成分

目的：分析鉴定苏薄荷中的黄酮类成分。方法：运用高效液相色谱分离与电喷雾（ESI）质谱技术对苏薄荷提取物中的黄酮类成分进行分析鉴定。结果：共分析了8个黄酮类成分，其中鉴定了1个黄酮苷元：香叶木素（diosmetin），4个黄酮苷：橙皮苷（hesperidin）、香叶木素-7-0-葡萄糖苷（diosmetin-7-0-glucoside）、蒙花苷（1inarin）、椴树素（tilianine），推断了2个黄酮苷和1个黄酮苷元的可能结构，其中橙皮苷、香叶木素-7-O-葡萄糖苷和香叶木素为首次从苏薄荷中发现。结论：HPLC-MS／MS能快速、准确地鉴定出天然产物中的化学成分。     

藏药紫花龙胆中龙胆苦苷的LC-MS定性和HPLC定量分析

目的:对藏药紫花龙胆提取液中龙胆苦苷成分进行定性分析和含量测定。方法:利用高效液相色谱-电喷雾-质谱/质谱(HPLC-ESI-MS/MS)联用结合LC-DAD-UV技术,通过和标准化合物龙胆苦苷的保留时间、紫外吸收光谱以及质谱中的准分子离子峰[M H] 相对照,快速鉴定了紫花龙胆提取液中的龙胆苦苷成分[1]。对其含量的测定则采用了毛细管高效液相色谱方法。结果:一级质谱扫描结果表明紫花龙胆甲醇提取液中主要有5个峰,第一个峰化合物结构为龙胆苦苷,准分子离子峰[M H] 为356.9,毛细管高效液相色谱结果表明藏药紫花龙胆中龙胆苦苷成分的百分含量为1.97%。结论:藏药紫花龙胆中龙胆苦苷是其主要成分。     

基于UPLC-Q-TOF-MS的砂糖橘皮化学成分分析

目的:通过超高效液相色谱串联-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术对砂糖橘果皮化学成分进行快速分析和鉴定。方法:采用Aglient Zorbax Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱进行色谱分离,流速0.6 m L·min~(-1),柱温35℃,进样体积0.5μL。飞行时间质谱,采用电喷雾(ESI)离子源,在正离子模式下采集数据,质量扫描范围设置为m/z 100~1 000,运行时间24 min,使用质谱分析软件Peak view中的目标化合物筛查法,结合保留时间、精确相对分子质量和二级质谱裂解碎片鉴定和推测成分。结果:在所设定的LC-MS条件下,结合对照品及文献报道的质谱数据对砂糖橘果皮的甲醇提取液分析,共分离鉴定了31个成分,包括5个黄酮碳苷,6个黄酮氧苷,17个多甲氧基黄酮,1个生物碱和2个多酚类化合物。结论:研究中建立的检测方法简便、准确,为快速鉴定分析化学成分提供一种有效的分析方法,并比较全面地阐明了砂糖橘果皮化学组成,这为砂糖橘果皮成为供开发利用的柑橘资源提供科学依据。     

黄连等6味中药中生物碱苷类成分的发现、分离和结构鉴定

生物碱是许多中药的重要活性成分，生物碱苷是其存在形式之一。因糖单元的引入改善了生物碱苷类成分的水溶性从而呈现更好的生物活性。鉴于生物碱苷在植物体内的含量较低，其研究相对较少。该研究采用超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS/MS),对含有重要生物碱的6种中药(黄连、黄柏、北豆根、青风藤、金果榄和防己)进行生物碱苷的识别和成分分析，结果表明除金果榄外，其他5种药材均含有生物碱苷，基于在线紫外吸收光谱、一级质谱准分子离子峰、二级质谱碎片离子信息以及相关文献报道，对各药材所含生物碱苷类成分进行鉴定，从中鉴定了42个生物碱苷，其中黄连和北豆根中鉴定出的生物碱苷较多，而黄连中的11个均为潜在的新化合物。进而以黄连为例，采用水煎煮，水提液经大孔吸附树脂粗分，D151阳离子交换树脂、ODS和MCI等柱色谱纯化，结合半制备高效液相色谱，进行目标生物碱苷的分离，得到2个新的生物碱苷，通过质谱、核磁等波谱数据鉴定其结构分别为(S)-7-羟基-1-(对羟基苄基)-2,2-N,N-二甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和(S)-N-甲基四氢巴马汀红碱-9-O-...     

霍山石斛HPLC特征图谱研究

目的建立霍山石斛(霍山米斛)HPLC特征图谱分析方法,拟定黄酮类成分指标群。方法采用Kromasil100-5 C18色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱);检测波长为340 nm;柱温为35℃;体积流量1.0m L/min。结果霍山石斛标示出24个黄酮类特征共有峰,10批样品的相似度为0.918⁰.990,相似度较高。结论方法准确可靠,重复性好,本研究为霍山石斛的质量控制提供了方法依据。     

基于UPLC-Q-TOF/MS技术分析高良姜醇提物的化学成分及胃溃疡寒证大鼠口服后的入血成分

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法分析高良姜醇提物的主要化学成分及胃溃疡寒证大鼠口服后的入血成分。方法 回流提取法提取药物;大鼠灌胃醇提物后腹主动脉取血;分析采用Acquity HSS T3 C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm);流动相0.1%甲酸水-甲醇;梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1;柱温35℃,MSE扫描正负离子模式检测。结果 综合色谱-质谱检测信息,包括色谱保留时间、分子量、离子碎片,结合相关文献报道,从高良姜乙醇提取物中鉴定出17个化学成分;胃溃疡寒证大鼠口服高良姜醇提物后,血清样本共鉴定出6个入血成分。结论 初步阐释了高良姜的药效物质基础,为研究高良姜抗胃溃疡寒证的药效物质提供了一定依据。     

基于UPLC-Q-TOF/MS技术分析红豆蔻醇提物的化学成分及胃溃疡寒证大鼠口服后的入血成分

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法分析红豆蔻醇提物的主要化学成分及胃溃疡寒证大鼠口服后的入血成分。方法 回流提取法提取药物;大鼠灌胃醇提物后腹主动脉取血;分析采用Acquity HSS T3 C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm);流动相0.1%甲酸水-甲醇;梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1;柱温35℃,MSE扫描正负离子模式检测。结果 综合色谱-质谱检测信息,包括色谱保留时间、分子量、离子碎片,结合相关文献报道,从红豆蔻乙醇提取物中鉴定出14个化学成分;胃溃疡寒证大鼠口服红豆蔻醇提物后,血清样本共鉴定出5个入血成分。结论 上述研究结果初步阐释了红豆蔻的药效物质基础,为研究红豆蔻抗胃溃疡寒证的药效物质提供了一定依据。