用LC-MS/MS法同时测定血清中维奈托克、伏立康唑和阿糖胞苷的血药浓度

目的 建立一种高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法同时检测人血清中维奈托克、伏立康唑、阿糖胞苷的药物浓度,拟应用于人体药代动力学试验生物样本的测定。方法 用蛋白沉淀法进行血浆样本前处理,Kinetex C18液相色谱柱(2.1 mm×50.0 mm, 2.6μm),A相为3 mmol·L^-1甲酸铵+0.1%甲酸水溶液,B相为0.1%甲酸的甲醇溶液,流速0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;在正离子模式下,多反应监测模式扫描监测维奈托克m/z 868.3→636.2和navitoclax m/z 974.4→742.4、伏立康唑m/z 350.2→281.1和氟康唑m/z 307.1→238.3、阿糖胞苷m/z 244.1→112.1和阿昔洛韦m/z 226.1→152.0。结果 该方法中维奈托克、阿糖胞苷、伏立康唑分别在2～5 000 ng·mL^-1、2～2 000 ng·mL^-1、5～2 000 ng·mL^-1线性关系良好,定量下限分别为2 ng·mL^-1     

LC-MS/MS法测定SD大鼠血浆中紫杉醇前药含量及其在临床前药代动力学研究中的应用

本实验建立了一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速、灵敏测定Sprague-Dawley (SD)大鼠血浆中紫杉醇前药(Pro-PTX)及紫杉醇(PTX)的浓度。血浆样本以乙腈(0.1%甲酸)沉淀蛋白后,选用Ultimate AQ-C18色谱柱(50 mm×3.0 mm, 3μm),以乙腈-1 mmol·L^-1甲酸铵(含0.1%甲酸)为流动相,选用三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,选择监测离子反应分别为m/z 983.4→415.2 (Pro-PTX)、m/z 854.4→286.1(PTX)和m/z 808.3→527.2 (多西他赛,内标)。方法验证结果表明,血浆中Pro-PTX和PTX的线性范围分别为2.00～500 ng·mL^-1(r> 0.99)和4.00～1 000 ng·mL^-1(r> 0.99),定量下限分别为2.00和4.00 ng·mL^-1; Pro-PTX和PTX低、中、高三浓度的质控样本批内、批间相对标准差(RSD)均小于9%...     

用LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中多黏菌素B和替加环素的浓度

目的 建立大鼠血浆中多黏菌素B和替加环素测定的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法,并研究其在大鼠体内的药代动力学特征。方法 用3%三氯乙酸-甲醇溶液(50∶50)对大鼠血浆进行沉淀蛋白处理。色谱柱：Symmetry C₁₈(150.0 mm×4.6 mm, 3.5μm),流动相：0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈,流速：0.6 mL·min^-1,柱温：40℃;离子源：电喷雾离子源,正离子检测模式,多反应检测。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、稳定性以及重现性。结果 替加环素的线性范围为25～2 500 ng·mL^-1,定量下限为25 ng·mL^-1,提取回收率为95.89%～107.90%;多黏菌素B_1+1-I的线性范围为82～8 200 ng·mL^-1,定量下限为82 ng·mL^-1,提取回收率为93.84%～97.70%;多黏菌素B₂的线性范围为9～900 ng·mL^-1<...     

LC-MS/MS法测定人血浆中阿美替尼的浓度

目的 建立一种测定人血浆中阿美替尼浓度的液质联用法。方法 以d3-索拉非尼为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白,用XSelect HSS XP (2.1 mm×100.0 mm, 2.5μm)色谱柱进行分离,流动相为2 mmol·L^-1乙酸铵(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)溶液,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,采用电喷雾离子源(ESI)、正离子、多反应监测模式。结果 血浆中内源性物质不干扰测定,阿美替尼在2～500 ng·mL^-1线性关系良好,定量下限为2 ng·mL^-1,日内、日间精密度RSD均小于15%,准确度在95.8%～105.2%,内标归一化的基质效应因子为96.3%～100.8%。结论 本方法高效、准确、快速,可用于阿美替尼血浆药物浓度测定及药代动力学研究。     

用LC-MS/MS法测定人血浆中哌柏西利的浓度

目的 建立一种可靠、灵敏、专属的LC-MS/MS法测定人血浆中哌柏西利浓度,拟应用于人体药代动力学试验生物样本的测定。方法 以哌柏西利-d₈为内标,用蛋白沉淀法进行血浆样本前处理,用反相色谱柱Agilent Eclipse plus C18(2.1 mm×50 mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水溶液为A流动相,0.1%甲酸乙腈为B流动相,流速为0.4 mL·min^-1,梯度洗脱;在正离子模式下,多反应监测模式扫描检测哌柏西利m/z 448.1→m/z 380.1和哌柏西利-d₈m/z 456.0→m/z 388.1。结果 该方法在1～160 ng·mL^-1线性关系良好,定量下限为1 ng·mL^-1,批内、批间精密度%CV在0.65%～5.23%,平均准确度偏差在-2.64%～6.13%,提取回收率%CV为1.77%。结论 该方法灵敏度高,前处理简单,适用于哌柏西利药代动力学试验的血浆样本测定。     

达沙替尼与槲皮素在大鼠体内药动学相互作用特征

目的:探讨达沙替尼与槲皮素联用后在大鼠体内药动学相互作用特征。方法:将大鼠随机分为3组,分别灌胃给药达沙替尼3.5 mg·kg^-1、槲皮素35 mg·kg^-1、达沙替尼3.5 mg·kg^-1+槲皮素35 mg·kg^-1,连续给药14 d,于第15天给药后不同时间点眼眶采血,离心获取上层血浆。采用酶解法处理血浆样品,建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时检测血浆中的达沙替尼与槲皮素,描绘平均血药浓度-时间曲线,通过DAS 3.2.2软件对药动学参数进行分析。结果:达沙替尼单用与联用状态下主要药动学参数如下,AUC_0-t:(0.28±0.035),(0.49±0.051)μg·h·mL^-1;AUC_0-∞:(0.29±0.035),(0.51±0.047)μg·h·mL^-1;MRT_0-t:(7.74±0.31),(7.44±0.25) h; MRT_0-∞:(8...     

盐酸二甲双胍中基因毒杂质N-亚硝基二甲胺检测方法的建立

目的:建立高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)法测定盐酸二甲双胍原料药和制剂中N-亚硝基二甲胺(NDMA)。方法:采用Phenomenex ACE Excel 3 C₁₈-AR色谱柱(100 mm×4.6 mm, 3μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1,柱温40℃,进样量5μL;质谱离子化方式为APCI,正离子模式,多反应监测(MRM),NDMA的定量离子对为m/z 75.0→43.0,定性离子对为m/z 75.0→58.0。结果:NDMA质量浓度在1～100 ng·mL^-1范围内,线性关系良好;检测限为0.25 ng·mL^-1;30批样品的测定结果NDMA的含量为0～0.46μg·g^-1。结论:本方法可用于测定盐酸二甲双胍原料药和制剂中NDMA含量。     

超高效液相色谱-串联质谱检测法测定人血浆中非布司他浓度及药动学应用研究

目的：建立非布司他的超高效液相色谱-串联质谱检测法并应用于临床药动学研究。方法：采用乙腈沉淀蛋白的前处理方法,以双氯芬酸钠为内标,色谱柱为Shimadzu Shim-pack GIST C₁₈ column(2.1 mm×100 mm,2μm),流动相A为含0.01%甲酸和5 mmol·L^-1甲酸铵的水溶液,流动相B为乙腈,流速0.4 mL·min^-1,柱温40℃。采用ESI正离子MRM模式扫描,用于非布司他和内标定量的离子对分别为m/z 317.1→m/z 261.0,m/z 296.0→m/z 214.0。结果：非布司他在10～8000 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r>0.999),批内、批间精密度为4.30%～8.28%,相对偏差为–2.15%～6.03%,提取回收率为87.24%～97.77%,基质效应RSD<15%。该方法用于测定16例受试者服用非布司他后的血药浓度,AUC_0-t为(16 170.61±2 949.47)ng·mL^-1     

用HPLC-MS/MS法检测多发性骨髓瘤患者血浆中来那度胺的浓度

目的 建立高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法测定多发性骨髓瘤患者血浆中来那度胺的浓度。方法 以¹³C 5-来那度胺为内标,血浆样本使用80%乙腈(含0.1%甲酸)沉淀蛋白。用Waters Atlantis^? HILIC silica色谱柱(5μm, 2.1 mm×150.0 mm)进行分离,流动相为5 mmol·L^-1甲酸铵水溶液(0.1%甲酸)/乙腈(0.1%甲酸),梯度洗脱的方式,流速0.3 mL·min^-1,柱温40℃,分析时间6 min。用电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM)扫描方式。来那度胺监测分析离子对为m/z 260.1→149.1,内标监测离子对m/z 265.1→149.1。结果 来那度胺在1～1 000 ng·mL^-1线性关系良好,相关系数>0.997,批内、批间精密度分别在11.5%和11.8%以内,批内、批间准确度分别为98.8%～108.9%和95.5%～105.0%。用本方法对33例临床患者的血浆浓度进行了检测分析...     

LC-MS/MS法检测中原汉族心房颤动患者达比加群血药浓度个体差异的研究

目的通过高效液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）法考察中原汉族心房颤动患者达比加群稳态血药浓度个体差异。方法人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,色谱柱为UItimate XB-C₈（3.0 mm×250 mm）,以0.1%甲酸水（A）,0.1%甲酸乙腈溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^-1,柱温为30℃,用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 472.2（母离子）→m/z 289.0/324.1 （达比加群）,m/z 436.0（母离子）→m/z 145.1/230.9 （内标利伐沙班）。考察其专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果血浆中达比加群的标准曲线方程为y=0.26x+1.76×10^-2（R²=0.992 3,w=1/x²）,在2～500ng·m L^-1线性关系良好,定量下限为2 ng·m L^-1;定量下限准确度范围在86...     

LC-MS/MS法检测中原汉族心房颤动患者达比加群血药浓度个体差异的研究

目的通过高效液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）法考察中原汉族心房颤动患者达比加群稳态血药浓度个体差异。方法人血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,色谱柱为UItimate XB-C₈（3.0 mm×250 mm）,以0.1%甲酸水（A）,0.1%甲酸乙腈溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^-1,柱温为30℃,用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 472.2（母离子）→m/z 289.0/324.1 （达比加群）,m/z 436.0（母离子）→m/z 145.1/230.9 （内标利伐沙班）。考察其专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、基质效应和稳定性。结果血浆中达比加群的标准曲线方程为y=0.26x+1.76×10^-2（R²=0.992 3,w=1/x²）,在2～500ng·m L^-1线性关系良好,定量下限为2 ng·m L^-1;定量下限准确度范围在86...     

HPLC-MS/MS法考察水黄皮素在SD大鼠体内的药代动力学特征

目的：建立大鼠血浆中水黄皮素的定量分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法：通过灌胃给予SD大鼠水黄皮素(10 mg·kg^-1),血浆样品经蛋白沉淀法处理后进行HPLC-MS/MS定量分析,以五味子醇甲为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈(50 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,流速0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)扫描,水黄皮素[M+H]⁺m/z 293.1→277.0,五味子醇甲[M+H]⁺m/z433.2→384.2;使用DAS软件计算相关药代动力学参数。结果：在1.5625～1600 ng·mL^-1浓度范围内,水黄皮素线性关系良好(r=0.9997),定量下限为1.5625 ng·mL^-1,精密度RSD和准确度RE均小于20%;低、中、高质控样品精密度RSD和准确度RE均小于15%,提取...     

用高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中尼洛替尼的浓度

目的 建立一种测定人血浆中尼洛替尼浓度的液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法,并应用于尼洛替尼健康受试者体内药代动力学研究。方法 以[¹³C,²H₃]-Nilotinib为内标,血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇-2 mmoL·L^-1醋酸铵水溶液(含0.1%甲酸)=66∶34 (v/v)为流动相,Agilent公司ZORBAX Eclipse plus C₈ (4.6 mm×100.0 mm, 3.5μm)色谱柱分离,流速为700μL·min^-1,每个样品的分析时间为10.0 min。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四极杆串联质谱仪,多反应监测模式。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、稳定性、基质效应和残留效应。结果 尼洛替尼的血浆浓度在2.50～2 000.00 ng·mL^-1内线性良好,批内、批间精密度均在1.10%～6.70%,相对偏差在±15%范围内。尼洛替尼血浆样品室温放置24 h,反复冻...     

UHPLC-MS/MS测定人血浆中4种一线抗癫痫药物浓度及其临床应用

目的 建立对人血浆中丙戊酸钠、卡马西平、拉莫三嗪和左乙拉西坦浓度测定的超高效液相-串联质谱方法,并进行临床实际运用。方法 血浆样本甲醇沉淀蛋白后,采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱,进样1μL。选择正负离子同时监测模式分析,卡马西平、左乙拉西坦、拉莫三嗪、丙戊酸钠、替硝唑(内标)MRM通道分别为m/z 236.9→193.9,m/z 171.0→154.2,m/z 256.0→145.0,m/z 143.1→143.1,m/z 248.1→120.9;去簇电压和碰撞电压分别为70 V/21 V,90 V/10 V,90 V/23 V,–50 V/–10 V,90 V/42 V。结果 血浆样本中各代谢物丙戊酸钠(线性范围20～150μg·mL^-1)、卡马西平(线性范围2～15μg·mL^-1)、拉莫三嗪(线性范围0.5～15μg·mL^-1)、左乙拉西坦(线性范围2～60μg·mL^-1)在该方法...     

高效液相色谱串联质谱法同时检测人血浆伊马替尼及代谢物

目的：建立一种同时测定人血浆中伊马替尼及其活性代谢产物N-去甲基伊马替尼的高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）法,并应用于检测胃肠间质瘤患者伊马替尼及代谢物的浓度。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以含0.1%甲酸的水溶液和甲醇溶液为流动相;采用梯度洗脱,Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）色谱柱进行分离,流速为0.3 mL·min^-1;柱温为35℃。ESI离子源,正离子模式,多反应监测,用于定量分析的离子对为m/z494.2→m/z394.3（伊马替尼）、m/z480.3→m/z394.3（N-去甲基伊马替尼）、m/z502.5→m/z394.4（内标,伊马替尼-D₈）。结果：伊马替尼和N-去甲伊马替尼的线性范围均为50~10 000 ng·mL^-1,定量下限为50 ng·mL^-1,伊马替尼及代谢物的准确度分别为97.9%~109.0%,95.5%~103.5%,日内和日间变异系数<10%。结论：本方法简便、准确、灵敏、专属性强,适用于人血浆中伊马替尼及其代谢物浓度的检测。     

用HPLC-MS/MS法同时测定患者血浆中吉非替尼、厄洛替尼、尼洛替尼和伊马替尼的浓度

目的 建立同时测定吉非替尼、厄洛替尼、尼洛替尼和伊马替尼血药浓度的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。方法 用乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品,用Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm, 3.5μm)进行色谱分离,流动相为0.1%甲酸水(A)—0.1%甲酸乙腈(B);梯度洗脱,流速为0.7 mL·min^-1,柱温40℃,进样量3μL。以安罗替尼为内标,用电喷雾电离源,采用正电离模式,以多反应监测的方式进行扫描。考察该方法的专属性、标准曲线、定量下限、精密度、准确度、回收率、基质效应和稳定性。测定20例慢性粒细胞白血病(CML)患者伊马替尼和厄洛替尼的谷浓度及3例非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼和厄洛替尼的谷浓度。结果 4种药物的标准曲线分别为吉非替尼：y=2.536×10^-3x+9.372×10^-3(线性范围20～2 000 ng·mL^-1,R²=0.996 6),厄洛替尼：y=3.573×10^-3x+7.406×10<...     

HPLC-MS/MS法测定人血清中奋乃静浓度及其临床应用

目的采用高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)建立测定人血清中奋乃静浓度的方法。方法色谱条件:色谱柱为Aglient XDB-C18(4.6 mm×50 mm,1.8μm);流动相为甲醇-水(90∶10,V/V,2 mmol·L^-1甲酸铵);流速为0.7 m L·min^-1;柱温35℃;进样量10μL。采用乙腈蛋白沉淀法前处理血清样本,定量离子对分别为m/z 404.15→m/z 171.15(奋乃静)和m/z 412.15→m/z 179.15(奋乃静-d8)。采用该方法对52例233份精神分裂症患者多次口服奋乃静后稳态药物浓度进行监测。结果奋乃静标准曲线方程为Y=2.014X-0.012 8(R2=0.998 6),线性范围为0.10~10.00 ng·mL^-1。定量下限(0.10 ng·mL^-1),低(0.30 ng·mL^-1),中(3.00 ng·mL^-1),高(7.50 ng·mL^-1) 4个浓度的质控样品的批内和批间精密度RSD<15%,提取回收率分别为101.11%,95.37%,96.52%,101.32%。结论使用HPLC-MS/MS法检测奋乃静的血药浓度具有灵敏度高、可操作性强、结果准确度高等优点,可用于临床上奋乃静的血药浓度监测。     

HPLC-MS/MS法测定人血清中达托霉素的方法研究及临床应用

目的:建立HPLC-MS/MS法测定人血清中达托霉素浓度,并应用于临床患者达托霉素血药浓度监测。方法:以达托霉素-d5为内标,甲醇、乙腈沉淀蛋白法处理样品。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC C₈柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm)柱;流动相为A相：水+0.1%甲酸、B相：1∶1甲醇∶乙腈+0.1%甲酸;流速0.4 ml·min^-1;柱温45℃;电喷雾离子化正离子模式,多反应离子监测(MRM)扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别是达托霉素m/z 810.70→m/z 159.05、m/z 810.70→m/z 313.30、m/z 810.70→m/z 341.05,达托霉素-d5(内标物)m/z 813.50→m/z 163.2、m/z 813.50→m/z 317.2;进样量2μl;分析时间为4 min。结果:人血清中达托霉素浓度在1～200μg·ml^-1线性关系良好(r=0.999 5),定量下限为0.05μg·ml^-1。低、中、高浓度达托霉素的提取回收率均>...     

液相色谱-串联质谱法检测人血浆中尼美舒利及其代谢物的浓度

目的 建立一种同时检测人血浆中尼美舒利及其代谢物4-羟基尼美舒利的液相色谱-串联质谱方法。方法 以非那西汀为内标,用乙腈沉淀蛋白法对人血浆样品进行处理。用Restek Allure PFP Propyl(100.0 mm×2.1 mm, 5μm)液相色谱柱分离,流动相为0.1%甲酸和0.1%甲酸-乙腈溶液,流速为0.2 mL·min^-1。用电喷雾离子源(ESI源),负离子多反应监测模式。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、稳定性和基质效应。结果 血浆中尼美舒利及4-羟基尼美舒利均在10.0～1 000.0 ng·mL^-1内线性关系良好,相关系数均>0.997 0,最低定量限均为10.0 ng·mL^-1,绝对回收率均>80%,日内、日间RSD均小于10.15%。结论 本方法操作简便、准确性好、灵敏度高,适用于人血浆中尼美舒利及其代谢物浓度的分析。     

超高效液相色谱串联质谱快速测定大鼠血浆的鸡骨草皂苷含量

目的建立并验证一种快速测定大鼠血浆中鸡骨草皂苷β-D-吡喃葡萄糖-3-(O-β-D-吡喃葡萄糖氧基)-齐墩果酸(AA-2)浓度的超高效液相串联三重四级杆质谱检测法(UPLC-MS/MS)。方法取大鼠适量全血,置肝素化离心管中,离心分离出血浆。氯唑沙宗(IS)作为内标,用乙腈-甲醇溶液(9∶1)进行蛋白质沉淀后,用UPLC BEH C₁₈Column(2.1mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以含0.1%的甲酸水和乙腈进行梯度洗脱。用电喷雾离子源负离子模式下的多反应监测模式(MRM)进行测定,AA-2和氯唑沙宗的离子对分别为m/z 793.5→631.4、m/z 168.1→132.1。结果 AA-2在10~5000 ng·mL^-1内线性良好,其回收率为70.4%~87.8%,日间和日内精密度均<10%,准确度为91.1%~104.1%。大鼠静脉给予3个浓度(1,3,5 mg·kg^-1)AA-2后,MRT_0-t分别为(0.32±0.13),(0.48±0.15),(0.44±0.08)h;t_1/2分别为(1.15±0.72),(1.32±0.90),(1.02±0.22)h;CL分别为(4.53±1.66),(4.44±0.94),(4.86±0.49)L·h^-1·kg^-1,C_max分别为(681.67±246.78),(1809.45±479.11),(4953.21±722.72)ng·mL^-1。结论该方法操作简便、快捷,灵敏度高,适于大鼠体内AA-2的药代动力学研究。