EpCam与Wnt/β-catenin在结肠癌中的表达及临床病理意义

目的 探讨EpCam与Wnt/β-catenin通路在结肠癌组织中表达分布情况及其临床病理意义,研究两者之间关系.方法 回顾性分析用免疫组化方法检测的60例结肠癌组织、20例癌旁不典型增生组织、60正常结肠黏膜组织内EpCam与Wnt/β-catenin蛋白表达.结果 (1)正常结肠黏膜组织、癌旁组织、癌组织中EpCam阳性表达呈现明显上升趋势,分别为23.5％、62.3％、96.5％;随着正常结肠黏膜组织向癌组织的转化,β-catenin的胞膜表达阳性率依次降低,而胞质表达阳性率则依次增高,在低分化癌组织中甚至出现了核表达,EpCam强阳性表达及Wnt/β-catenin胞质阳性率与肿瘤组织学类型,肿瘤浸润深度,淋巴结转移均有关;(2)发现EpCam与Wnt/β-catenin呈正相关(r=0.653,P＜0.05),(3)高表达EpCam和Wnt/β-catenin患者结肠癌复发率明显增加,5年生存率明显降低.结论 EpCam与Wnt/β-catenin通路在结肠癌存在正相关性,EpCam和Wnt/β-catenin高表达与肿瘤浸润,转移及预后有密切关系.     

长期砷暴露诱导人膀胱上皮细胞恶性转化的研究

目的构建低浓度长期亚砷酸钠(NaAsO_2)诱导人膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)恶性转化模型,研究低浓度长期砷暴露对SV-HUC-1恶性转化过程的影响。方法 0和0. 5μmol/L NaAsO_2分别长期处理SV-HUC-1至40周(约80代,10个月),观察暴露组及对照组细胞在培养至10、20、30和40周时形态,四氮唑盐比色(MTT)验证细胞增殖速率;划痕实验、Transwell细胞迁移实验验证细胞迁移能力;软琼脂集落形成实验观察细胞肿瘤形成能力。结果随NaAsO_2处理时间的延长,细胞由连接紧密的扁平多变形状向松散的长梭型转变; 0. 5μmol/L NaAsO_2处理至20周后,细胞活力显著增强,与处理10周时比较差异有统计学意义(P0. 01);划痕愈合实验显示,砷暴露20周后,划痕愈合面积显著大于10周(P0. 01); Transwell细胞迁移侵袭能力30周时显著高于10周(P0. 01);软琼脂集落形成实验显示,砷暴露30周后软琼脂上出现大量明显的锚定生长集落,20、30、40周组集落形成数量分别为10周组的1. 85、9. 79和15. 36倍(P0. 01),未经砷暴露组各代数有极少集落,且体积小,故忽略不计。结论 0. 5μmol/LNaAsO_2长期处理的SV-HUC-1可逐渐恶转,在砷处理20～30周时已初具恶性表型,40周后细胞恶性转化。     

氯化镉对人胚肺成纤维细胞的恶性转化作用

为研究氯化镉致人胚肺成纤维细胞的恶性转化作用,用染色体分析,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验和流式细胞术检测了转化细胞染色畸变,各细胞周期时相细胞的比例和ＤＮＡ合成情况。结果显示,氯化镉在０．００４μｍｏｌ／Ｌ、０．０２μｍｏｌ／Ｌ、０．０４μｍｏｌ／Ｌ３个实验浓度都可使人胚肺成纤维细胞生长排列紊乱。     

骨关节炎软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路调控对骨桥蛋白表达的影响

目的 探讨骨关节炎（0A）软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路调控对骨桥蛋白（OPN）的影响及低密度脂蛋白受体相关蛋白（LRP）-5对OPN表达的调控作用.方法 体外培养人OA软骨细胞和正常软骨细胞,Real Time-PCR法检测β-catenin和OPN在第1代OA和正常软骨细胞中mRNA的相对表达量;取第2代OA软骨细胞,分为LRP-5组和对照组,利用siRNA干扰LRP-5表达后,Real Tirne-PCR和Western Blot法检测LRP-5及OPN mRNA、蛋白相对表达量.结果 第1代OA软骨细胞中β-catenin和OPN mRNA相对表达量均明显高于正常软骨细胞（1.73±0.21比1.05±0.13,2.24±0.25比1.32±0.16）,差异有统计学意义（P＜0.01）.siRNA干扰LRP-5后,LRP组LRP-5和OPN mRNA、蛋白相对表达量均低于对照组（mRNA相对表达量：0.97±0.06比1.34±0.12,1.75±0.21比2.11±0.25,蛋白相对表达量：0.060±0.012比0.130±0.087,0.170±0.021比0.290±0.018）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 OA软骨细胞OPN表达与Wnt/β-catenin信号通路相关,通过干扰LRP-5可调控OA软骨细胞OPN的表达.     

镍精炼烟尘激活Wnt/β-catenin通路诱导人支气管上皮细胞Warburg效应的研究

目的 探讨Wnt/β-catenin通路在镍精炼烟尘诱导人支气管上皮（Beas-2B）细胞产生Warburg效应过程中的作用。方法 采用不同浓度镍精炼烟尘（0、12.5、25.0、50.0 μg/ml）处理Beas-2B细胞24 h，通过CCK-8法检测镍精炼烟尘的细胞毒性，使用乳酸试剂盒检测乳酸分泌量，使用免疫印迹法（Western blot）检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin和Warburg效应相关蛋白丙酮酸脱氢酶激酶1（pyruvate dehydrogenase kinase 1，PDK1）、单羧酸乳酸转运体1（monocarborxylat transporter 1，MCT1）和乳酸脱氢酶激酶A（lactate dehydrogenase A，LDHA）的表达水平。采用通路抑制剂XAV-939处理Beas-2B后以25.0 μg/ml镍精炼烟尘染毒24 h，检测Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平。结果 与对照组相比，镍精炼烟尘染毒组Beas-2B细胞的相对存活率明显降低，乳酸生成量随着镍精炼烟尘暴露浓度增加而升高（P<0.05），β-catenin及Warburg效应相关蛋白PDK1、MCT1和LDHA的表达水平均见增高且呈剂量依赖关系；Wnt/β-catenin通路抑制剂XAV-939可以抑制Warburg效应相关蛋白的表达（P<0.05）。结论 镍精炼烟尘可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路诱导Beas-2B细胞产生Warburg效应，从而将正常的线粒体氧化磷酸化转变为有氧糖酵解的能量代谢方式，并可能诱导癌症的发生。     

siRNA干扰β-catenin对亚砷酸钠致大鼠肺组织病变的影响

目的探讨通过si RNA干扰β-catenin对亚砷酸钠致大鼠体内砷水平和肺组织病变的影响。方法将32只健康成年SPF级SD大鼠按体重随机分为对照(超纯水)组、染砷空白对照组、染砷+β-catenin干扰组和染砷+阴性转染对照组,每组8只,雌雄各半。采用自由饮水方式染毒亚砷酸钠溶液(11.25 mg/kg),连续染毒16周;在最后1周,腹腔注射β-catenin si RNA转染试剂和阴性对照转染试剂(0.49μg/g),连续1周。观察大鼠肺组织病理学改变,检测大鼠血砷、尿砷和肺组织砷水平。结果染砷第16周,染砷空白对照组、染砷+β-catenin干扰组和染砷+阴性转染对照组大鼠体重较对照组减轻(P0.05)。染砷+β-catenin干扰组大鼠肺组织病理损伤较染砷空白对照组和染砷+阴性转染对照组严重,出现大部分纤维化,肺泡结构几乎消失。染砷空白对照组、染砷+β-catenin干扰组和染砷+阴性转染对照组大鼠血砷、尿砷和肺组织砷水平较对照组增加(P0.05)。染砷+β-catenin干扰组大鼠血砷、尿砷和肺组织砷水平较染砷+阴性转染对照组增加(P0.05);其中雄性大鼠肺组织砷含量较染砷空白对照组增加(P0.05)。结论长期砷暴露致大鼠肺组织病变;而干扰β-catenin基因后可能增加砷的蓄积,加重大鼠肺组织病变。     

苦参碱对卵巢癌大鼠的干预效果及对Wnt/β-catenin通路的影响

目的 研究苦参碱对卵巢癌大鼠的干预效果及对Wnt/β-catenin通路的影响。方法 选取30只SD健康雌性大鼠,其中10只为正常组,另外20只大鼠建立卵巢癌模型,将建模成功的20只卵巢癌模型大鼠随机分为模型组和苦参碱组各10只。建模成功后苦参碱组大鼠腹腔注射3 mg·kg^-1·d^-1苦参碱,正常组、模型组腹腔注射同剂量生理盐水。对比分析3组大鼠肿瘤质量、腹水容积、血清CA125、HE4、ROMA风险指数,检测模型组和苦参碱组癌细胞凋亡率、增殖率及细胞周期变化,并检测3组大鼠卵巢组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白和下游调控蛋白相对表达量。结果 正常组大鼠无肿瘤、腹水,苦参碱组大鼠肿瘤质量、腹水容积高于模型组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、苦参碱组大鼠血清CA125、HE4水平、ROMA风险指数高于正常组大鼠,苦参碱组大鼠血清CA125、HE4水平、ROMA风险指数低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。苦参碱组大鼠卵巢癌细胞增殖率低于模型组大鼠,卵巢癌细胞凋亡率高于模型组,苦参碱组较模型组G0/G1...     

亚砷酸钠致人支气管上皮细胞恶性转化过程中氧化应激指标变化

目的探讨在亚砷酸盐致人支气管上皮(HBE)细胞恶性转化过程中氧化应激指标的变化趋势,初步探讨其对细胞恶性转化的作用。方法用1μmol/L亚砷酸钠连续染毒HBE细胞。通过形态学观察、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及软琼脂克隆实验鉴定细胞恶性转化情况,分别于暴露1、8、15、22、29、36、43代,以流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,检测细胞丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果亚砷酸钠长期染毒HBE细胞至43代时,细胞生长速度明显加快,且呈浸润型生长,MMP-9分泌量升高,细胞集落数量增多。与正常对照(0代)比较,22代及以前HBE细胞内ROS、MDA及SOD的水平均呈先升高后下降的波浪形趋势;29代及以后,ROS、MDA水平逐渐下降,且以ROS表现更为明显,而SOD水平呈逐渐升高趋势。结论细胞内氧化-抗氧化平衡失调可能在低剂量砷化合物诱导HBE细胞恶性转化过程中发挥重要作用。     

阻断Wnt/β-catenin信号通路对染尘小鼠肺泡灌洗液中细胞因子表达的影响

目的 观察β-catenin短发夹RNA干扰（shRNA）重组慢病毒阻断Wnt/β-catenin信号通路及其对染尘小鼠肺泡灌洗液中细胞因子表达的影响。方法 将小鼠分为生理盐水组、silica+Lv-shβ-catenin组、silica模型组（1mg SiO2/小鼠）和silica+Lv-shβ-catenin-NC组。染尘后7,28,56天处死动物,收集肺泡灌洗液。分别采用Western Blot和ELISA方法测定小鼠肺组织中β-catenin蛋白表达和肺泡灌洗液中白介素-1β（IL-1β）、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达情况。结果 染尘后各时间点,silica+Lv-shβ-catenin组小鼠肺组织中β-catenin蛋白表达均低于silica组和silica+Lv-shβ-catenin-NC组;且silica+Lv-shβ-catenin组小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著低于silica组和silica+Lv-shβ-catenin-NC组,且差异有统计学意义（P <0.05）。结论 通过干扰染尘小鼠肺组织中β-catenin的表达能够有效抑制其肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达。     

环境镉暴露与相关肾功能改变及尿转化生长因子-β1的关系

[背景]镉的慢性毒性作用远远超过其他重金属,肾脏是机体镉蓄积的主要器官,镉暴露对肾功能的毒性作用及其剂量反应关系有待进一步研究.[目的]探讨环境镉暴露与肾功能改变及尿转化生长因子(TGF)-β1水平的关系.[方法]采用横断面研究,选择华北某市镉污染灌溉区[后称:镉污染区;其土壤镉水平为0.238 mg·kg-1,略低于...     

宫颈鳞癌中β-catenin和DKK-1的表达及相关性研究

目的:研究β-catenin蛋白及DKK-1(Dickkopf-1)蛋白在宫颈鳞癌中的表达,探讨两者在宫颈鳞癌侵袭转移中的作用和机制,分析DKK-1表达水平改变时对宫颈鳞癌的侵袭能力和Wnt信号通路活性的影响。方法:应用免疫组织化学染色方法检测54例宫颈鳞癌组织、20例正常宫颈组织中β-catenin的异常表达和DKK-1蛋白的阳性表达,并分析不同宫颈组织临床及病理因素之间的关系。结果:宫颈鳞癌中DKK1蛋白的阳性表达低于正常宫颈组织,而β-catenin蛋白的异常表达高于正常宫颈组织(P<0.01);DKK-1和β-catenin蛋白在宫颈鳞癌中的表达与肿瘤分化程度、临床分期及有无淋巴转移有关(P<0.05)。宫颈鳞癌中DKK1的阳性表达与β-catenin的异常表达呈负相关(r=-0.465,P<0.01)。结论:DKK-1表达的减少或缺失与宫颈鳞癌的发生和发展密切相关,其机制可能与活化Wnt/β-catenin信号通路有关。     

槲皮素对百草枯染毒肺上皮细胞存活率和上皮间质转化标志的影响

  目的  探讨槲皮素（Que）对百草枯（PQ）处理肺上皮细胞（MLE-12）的存活率和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）的影响及机制。
  方法  采用CCK-8法分别检测不同剂量PQ（50、150、450 μmol/L）对MLE-12细胞存活率的影响。实验设立空白对照组、阳性对照组、PQ（150 μmol/L）+Que（30、60、90μmol/L）干预组、阴性对照组，在Que干预24 h后检测细胞存活率。应用荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹（Western blot）法分别检测α-SMA、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）、E-Cadherin、TGF-β1、Smad3、Akt、mTOR的mRNA和蛋白表达。
  结果  经PQ（150 μmol/L）处理后，60 μmol/L和90 μmol/L的Que能够显著提高MLE-12细胞存活率，与阳性对照组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。荧光定量PCR法和Western blot法检测结果表明，与空白对照组比较，50 μmol/L的PQ能提高α-SMA、CTGF、E-Cadherin、TGF-β1、Smad3、Akt、mTOR的mRNA表达，以及α-SMA、CTGF、E-Cadherin、TGF-β1、Smad3、Akt的蛋白表达（P < 0.05）；150 μmol/L的PQ能提高TGF-β1和mTOR的mRNA表达，以及α-SMA、E-Cadherin、TGF-β1、Smad3的蛋白表达（P < 0.05）；450 μmol/L的PQ能提高CTGF和Smad3的mRNA表达，以及α-SMA、E-Cadherin、Smad3的蛋白表达（P < 0.05）。在不同浓度Que干预PQ（150 μmol/L）染毒的MLE-12细胞后，与阳性对照组相比，30 μmol/L的Que能降低α-SMA、TGF-β1、Akt、mTOR的mRNA和蛋白表达水平，以及α-SMA、CTGF、Akt、mTOR的蛋白表达水平（P < 0.05）；60 μmol/L的Que能提高CTGF、E-Cadherin、Smad3、Akt的mRNA表达水平，以及α-SMA、Smad3、mTOR的蛋白表达水平（P < 0.05）；90 μmol/L的Que能降低TGF-β1、mTOR的mRNA表达水平，提高CTGF的mRNA表达水平，降低Akt、mTOR的蛋白表达水平（P < 0.05）。
  结论  百草枯染毒可能通过TGF-β1诱导细胞发生上皮间质转化。槲皮素干预能提高百草枯染毒MLE-12细胞的存活率，并能改变细胞上皮间质转化程度，其机制可能是通过调控TGF-β1/Smad和Akt/mTOR信号通路实现。
     

煤焦沥青烟提取物致人支气管上皮细胞恶性转化细胞端粒损伤研究

目的 探讨煤焦沥青致人支气管上皮细胞(BEAS-2B)恶变细胞的端粒损伤作用.方法 用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化BEAS-2B的恶性转化模型,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测端粒DNA长度和端粒酶活力变化.结果 煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞后,30代时诱导组细胞能在软琼脂上形成典型的阳性克隆,染色体二倍体核型比例显著降低,形成恶性转化细胞.BEAS-2B恶性转化细胞端粒DNA长度缩短(0.41±0.03),与正常对照组(1.01±0.08)和二甲基亚砜(DMSO)组(0.92±0.04)比较,差异均有统计学意义(P ＜0.001).BEAS-2B恶性转化细胞端粒酶活力增强(1.62:0.07),与正常对照组(1.03±0.08)和DMSO组(1.11±0.03)比较,差异均有统计学意义(P＜0.001).结论 端粒损伤在煤焦沥青致细胞恶性转化中起重要作用.     

香烟烟雾提取物对A549细胞β防御素-2表达的影响

目的研究香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对人肺腺上皮细胞A549β防御素-2(humanβ-defensin2,hBD-2)表达的影响。方法培养A549细胞,加或不加LPS(10μg/ml)情况下用5%CSE进行干预。用RT-PCR法和Western Blot法分别检测hBD-2mRNA和蛋白表达变化。结果LPS可以诱导A549细胞hBD-2的表达;5%CSE不影响A549细胞hBD-2的表达,但可抑制LPS的诱导作用。结论CSE可以抑制LPS诱导的肺腺上皮细胞hBD-2表达,这可能与CSE减弱呼吸道抵御外界微生物入侵能力,导致呼吸道感染及慢性阻塞性肺疾病有关。     

香烟烟雾提取物对A549细胞β防御素-2表达的影响

目的研究香烟烟雾提取物（cigarette smoke extract,CSE）对人肺腺上皮细胞A549卢防御素-2（human β-defensin2,hBD-2）表达的影响。方法培养A549细胞,加或不加LPS（10艘刖）情况下用5％CSE进行干预。用RT—PCR法和Westem Blot法分别检测hBD-2mKNA和蛋白表达变化。结果LPS可以诱导A549细胞hBD-2的表达;5％CSE不影响A549细胞hBD-2的表达,但可抑制LPS的诱导作用。结论CSE可以抑制LPS诱导的肺腺上皮细胞hBD-2表达,这可能与CSE减弱呼吸道抵御外界微生物入侵能力。导致呼吸道感染及慢性阻塞性肺疾病有关。     

潜在转化生长因子结合蛋白2在镉致人支气管上皮细胞氧化损伤中的作用

目的 研究潜在转化生长因子结合蛋白2基因(latent transforming growth factor-β binding protein 2,LTBP2)在氯化镉致人支气管上皮细胞(the human bronchial epithelial cells,16HBE)氧化损伤中的作用。 方法 分别用10、20、30、40 μmol/L氯化镉处理16HBE细胞24 h,用30 μmol/L 氯化镉处理16HBE细胞12、24、48 h,利用qRT-PCR法检测细胞LTBP2基因表达变化。针对目的基因设计特异性shRNA序列,退火并组装到慢病毒载体pCDH上,构建16HBE稳定LTBP2低表达细胞株。分别用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力。 结果 30、40 μmol/L处理组细胞LTBP2 mRNA相对表达与氯化镉浓度为0 μmol/L对照组比较有统计学意义(P<0.05),且随着氯化镉染毒剂量的增加,LTBP2mRNA表达逐渐升高(P<0.01)。30 μmol/L氯化镉分别处理16HBE细胞24、48 h,细胞LTBP2 mRNA基因相对表达与氯化镉未染毒细胞比较差异有统计学意义(P<0.01)。不同浓度氯化镉处理16HBE及LTBP2低表达细胞株16HBE-shLTBP2不同时间,与16HBE相比,氯化镉处理的16HBE-shLTBP2 SOD含量显著升高(P<0.05),而MDA含量显著降低(P<0.05)。 结论 LTBP2低表达细胞减弱镉致细胞氧化损伤毒性,提示LTBP2基因可能在镉致细胞氧化损伤过程中发挥促氧化作用。     

甲基丙烯酸环氧丙酯致人支气管上皮细胞恶性转化过程中P16基因的甲基化状态

目的 分析甲基丙烯酸环氧丙酯(glycidyl methacrylate,GMA)致人支气管上皮16HBE细胞恶性转化过程中不同时点P16基因甲基化状态的差异,探讨GMA诱导16HBE细胞发生恶性转化相关DNA甲基化机制.方法 收获GMA转化早期(染毒结束)、转化前期(第10代)、转化后期(第30代)的16HBE细胞,采用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific PCR,MSP)检测该基因组P16基因启动子区的甲基化状态,并与未转化的16HBE细胞及同期培养的DMSO溶剂对照细胞进行比较.结果 转化早期及转化前期,正常对照组及DMSO溶剂对照细胞中该基因启动子区均表现为非甲基化,而GMA组细胞中表现为不同程度的甲基化,阳性对照表现为甲基化;转化后期,正常对照组细胞中该基因启动子区表现为非甲基化,而DMSO溶剂对照组及GMA组细胞中均表现为部分甲基化,阳性对照表现为甲基化.结论 在GMA诱导16HBE细胞恶性转化早期及前期P16基因的甲基化状态具有特异性,故可将其作为GMA诱导16HBE细胞发生恶性转化的一个早期敏感指标.     

水飞蓟宾胶囊对慢性HBV感染患者肝纤维化Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探讨水飞蓟宾胶囊对慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染患者肝纤维化的作用,并分析对其Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 选取2017年6月-2019年12月乌兰察布市中心医院收治的98例慢性HBV感染患者,随机分为治疗组(n=49)和常规组(n=49),常规组患者给予常规保肝药物治疗,治疗组患者在常规组基础上给予水飞蓟宾胶囊治疗,比较治疗前后两组患者肝功能、肝纤维化以及氧化应激指标的变化,记录治疗后36周、72周两组患者HBV DNA水平和谷丙转氨酶(ALT)复常率,并采用酶联免疫吸附法检测治疗前后两组患者血清Wnt3a、β-catenin和DKK1水平。结果 治疗后,治疗组患者ALT、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)水平、透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(PCⅣ)水平、丙二醛(MDA)水平和白细胞介素(IL)-4、IL-10水平低于常规组(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)水平和干扰素-γ(IFN-γ)水平高于常规组(P<0.05);治疗后36、72周,治疗组患者HBV DNA水平均低于常规组(P<0.05),ALT复常率均高于常规组(P<0.05);治疗后,治疗组患者血清Wnt3a、β-catenin水平低于常规组(P<0.05),DKK1水平高于常规组(P<0.05)。结论 水飞蓟宾胶囊治疗慢性HBV感染可保护患者肝功能,抑制肝纤维化,减轻氧化应激损伤和炎症反应,阻断HBV DNA复制,促进肝功能恢复,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。     

硫利达嗪通过抑制Wnt/β-catenin通路逆转宫颈癌HeLa/DDP细胞对顺铂的耐药性

目的探讨硫利达嗪对宫颈癌He La/DDP细胞耐药性的影响及其分子机制,为宫颈癌临床治疗的发展提供新的方向和实验依据。方法实验以终浓度15μmol/L硫利达嗪药物处理He La/DDP细胞24 h为实验组,未经硫利达嗪处理He La/DDP细胞作为对照组。通过CCK-8法检测硫利达嗪对细胞的抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50);通过划痕试验检测细胞的迁移能力,Transwell试验检测细胞的侵袭能力。通过蛋白质印迹法检测细胞中P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1 (MRP1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Snail蛋白和β-链蛋白(β-catenin)的相对表达量。采用荧光素酶报告基因检测Wnt通路活性。结果硫利达嗪能明显降低顺铂药物对He La/DDP细胞中的IC50,能降低He La/DDP细胞侵袭能力和迁移能力。分子水平上,硫利达嗪能降低He La/DDP细胞中耐药蛋白(P-gp和MRP1),增加细胞上皮性标志分子(E-cadherin)同时降低间质性标志分子(Vimentin和Snail)蛋白相对表达水平。进一步研究结果表明,硫利达嗪能抑制He La/DDP细胞中的Wnt通路活性,并降低β-catenin蛋白表达水平。结论硫利达嗪通过抑制Wnt通路,降低He La/DDP侵袭、迁移和上皮间充质转化,从而一定程度上逆转He La/DDP细胞耐药。