乙酰胆碱对大鼠胃窦肌间神经丛氮能神经的影响

胃肠道主要的兴奋性神经递质是乙酰胆碱 ,而主要的抑制性递质是一氧化氮。形态学研究表明胆碱能神经和氮能神经之间存在大量的突触连接 ,提示二者互相影响对方的释放[1] 。本试验拟通过观察正常大鼠注射乙酰胆碱后胃窦肌间神经丛内氮能神经变化 ,间接了解乙酰胆碱对一氧化氮合成的影响。1　材料与方法　　健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 ,每组 8只 ,正常喂养。①正常对照组 ;②阿托品组 ,每天腹腔注射阿托品 0 .75ｍｇ/ｋｇ ,2 /ｄ ;③氯化氨甲酰胆碱组 ,每天腹腔注射氯化氨甲酰胆碱 1 μｇ/ｋｇ ,1 /ｄ ,4周后全麻下取大鼠…     

烫伤大鼠小肠肌间神经丛bax/bcl-2的表达及其意义

目的观察烫伤大鼠小肠肌间神经丛bax／bcl-2蛋白的表达特征与烫伤性细胞凋亡的关系。方法动物分成对照组和烫伤组，烫伤组又分24、48、72h等几个不同时间点，每组于不同时间点进行麻醉、灌注、取材、后固定，制成肠肌间神经丛铺片标本。采用免疫组织化学方法，进行bax／bcl-2检测。结果bax／bcl-2的表达在烫伤后24h阳性最强，以后随着时间延长而逐渐下降。结论细胞凋亡是大鼠严重烫伤后小肠肌间神经丛神经元丢失的重要原因，而bax／bcl-2是参与神经细胞凋亡的重要凋控基因。推测烫伤激活bcl-2蛋白的表达是体内最重要的抗凋亡机制之一。     

大鼠回肠肌间神经丛Cajal间质细胞的乙酰胆碱酯酶组化染色法和新功能

目的:寻找Cajal间质细胞(interstitial cell of Cajal,ICC)新染色法,并明确大鼠胃肠道ICC的吞噬功能.方法:选用健康成年Wistar大鼠进行苔盼蓝(TB)活体注射,同时,对回肠肌间神经丛进行乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学染色.结果:光镜下,在回肠肌间神经丛内,可观察到两种不同染色的细胞:①AChE阳性神经元,大多呈AChE强阳性,胞体多为圆形或卵圆形,部分为三角形或不规则形,体积大,胞体直径达20～25 μm,胞浆内含有棕褐色AChE阳性颗粒,细胞核不着色.AChE阳性神经元多以8～12个细胞密集成肠肌间神经节.神经节之间,由AChE阳性神经纤维束相连接.②TB阳性细胞即Cajal间质细胞,胞核大而圆,不着色,核周质少,胞质内含有TB阳性颗粒,体积小,胞体直径6～8μm,多位于三级神经纤维束分支所形成的网眼中,肠神经节内未见TB阳性细胞.ICC有二种类型,Ⅰ型细胞数目多,胞体呈三角形或不规则形,突起明显,常发出2～5个突起;Ⅱ型细胞数目少,胞体呈卵圆形,突起不明显.结论:此染色法可很好地显示ICC及其与神经元的形态学联系,同时也证实了ICC具有吞噬功能,ICC可能是胃肠道的重要免疫防御细胞之一.     

急性结肠炎大鼠肠运动功能和肌间神经丛形态学变化

目的：观察大鼠急性结肠炎症时,胃肠传输速率及其肌间神经丛形态学改变,探讨急性结肠炎大鼠肠动力障碍的机制。方法：20只大鼠分成对照组和急性结肠炎组,急性结肠炎组用乙酸灌肠制备急性结肠炎模型,第3天测定两组大鼠胃肠传输速率,并用酶组织化学方法观察结肠肌间神经丛内胆碱能和氮能神经的组织学改变。结果：急性结肠炎组大鼠胃肠传输速度明显减慢,肌间神经丛内胆碱能和氮能神经元的密度均明显降低（P〈0.05）。结论：急性结肠炎大鼠肌间神经丛内胆碱能和氮能神经元减少,可能是导致肠动力障碍的重要原因。     

TH在SOX-10基因敲除小鼠结肠肌间神经丛的表达

酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)是去甲肾上腺素合成的限速酶和肠交感神经标志物,TH的表达水平可间接反映组织中神经递质去甲肾上腺素(NE)的水平~([1]).     

肠管睦肠脱垂肠壁神经丛神经元形态结构的改变

用光单独电观察乙状结肠直肠全层脱垂肠段肠壁内神经丛神经元的形态结构改变，结果表明，脱垂肠管的肌间神经丛和粘膜下神经丛的神经细胞发生尼氏体溶解或浓缩呈团块状，细胞核偏位和浓缩变小，细胞肿大或萎缩，神经节内细胞减少，胶质细胞增生，电镜下可见神经细胞粗面内质网肿胀，脱颗粒，线粒体肿大，嵴消失或呈空泡，高尔基复合体扩张等超微的改变。认为肠管直肠脱垂对肠壁内神经丛的损害在此病发生发展过程中，可能起着重要作用     

大鼠胃肠道肌间神经丛铺片的制备和染色法的研究

目的：对传统的消化道全层铺片技术和染色方法加以改进,以提高实验结果的准确性.方法：运用改进的方法制作消化道全层铺片,运用免疫荧光染色法显示胃肠道肌间神经丛,并以第I组代谢型谷氨酸受体mGluR1,mGluR5和神经型一氧化氮合酶（nNOS）为例进行染色,显示大鼠胃和小肠肌间神经丛.结果：采用免疫荧光染色并运用荧光显微镜进行观察,得到了较好的结果,可以更加清楚的显示肌间神经丛的整体结构以及单个神经元及神经纤维.结论：胃肠道肌间神经丛铺片结合免疫荧光染色方法是研究胃肠道肌间神经丛的理想方法,精确度较高,为实验结果的准确性打下了良好的基础.     

豚鼠胃肠道肠神经丛肽能神经的研究新进展

<正> 早在70年代末期,人们就发现在中枢及周缘神经系统存在着与循环血液中肽类激素成分相同的大分子物质。因这种大分子物质的作用方式不同于肽类激素,是由突触神经末梢释放而局部起作用的,故称之为神经肽。产生和释放神经肽的神经元为肽能神经元,部分肽能神经元是构成体内弥散的神经内分泌系统(DNES)的重要成分。经多方面的研究发现,胃肠道的肽能神经在组成上与胆碱能和肾上腺素能神经相并列,成为植物神经系的第3种成分。     

小肠肌间神经丛标本制作法

肌间神经丛标本制作难度较大,现就制作体会介绍如下. 取材 猫小肠(十二指肠上端为好)用生理盐水洗净肠管. 固定 用线结扎肠一端,注入固定液,使肠管尽量扩张,但不得胀裂.再结扎另一端,放人固定液中固定3天.固定液配方:60%酒精88 ml;甲醛12 ml.     

Improvement of mount preparations in showing myenteric nerve plexus from intestines of mice

Objective: The whole mount preparations of digestive tract is an effective experimental way to study the appearance and distribution of nerve plexus in digestive tract. Although myentric nerve plexus preparations technique was reported very early. But we have done experiment over and over during our research work in order to improve this traditional method and to meet the needs of our research work, we made some progresses in regular mount preparations after many experiments, which helped offer better situation in observing myentric nerve plexus. Methods: Five healthy male adult Kunming mice (20 -30 g in weight) were used in this study. After intraperitoneal injection of muscle relaxant,with dislocation of cervical vertebra method, the abdominal cavity was exposed through abdominal median incision. After several steps of mount preparations the mucous layer and longitudinal muscle layer mount preparations with myentric nerve plexus were stripped under anatomical microscope. Immunohistochemical staining was also used in our study.Results: The mount preparation samples with myentric nerve plexus from intestines of mice showed positive SP immunoreaction. The positive cells were dark brown. Many of the cytons appeared circular and oval, while some appeared triangular or irregular. Conclusion: Our improved method is really a good method to show enteric nerve plexus. The method has many advantages and is particularly applied to small animals such as Kunming mice and BALB/c mice,weighing from 20 g to 30 g.     

HCN2阳性细胞在小鼠胃肠道肌间神经丛内的分布

目的探讨超级化激活环核苷酸调控的阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated channel 2,HCN2)阳性细胞在小鼠胃肠道肌间神经丛的分布。方法成年昆明小鼠的胃肠道,包括胃、小肠、结肠,制作全层铺片,免疫细胞化学染色HCN2阳性细胞、胆碱能神经及Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)。结果成年小鼠胃肠道肌间神经丛的HCN2阳性细胞成簇紧密排列,多数阳性细胞为DogielⅡ型神经元,阳性产物分布在细胞质和细胞膜,每个神经节内可见数个至数十个阳性细胞;神经突起虽可见HCN2阳性产物,但主要存在于较粗的突起。HCN2阳性神经元分布密度在胃肠道各段存在较大差异(P<0.05):以结肠密度最高,胃次之,小肠略低。利用胆碱能神经元标志物胆碱乙酰转移酶(ChAT)和ICCs的标志物(c-kit蛋白)分别与HCN2通道进行双重免疫染色,可见HCN2存在于胆碱能神经元,未见HCN2存在于ICCs的胞体,ICCs的突起与HCN2阳性神经元距离很近。结论HCN2离子通道广泛表达于肌间神经丛,主要表达于胆碱能神...     

肝门阻断对大鼠肠肌间神经丛内AchE阳性神经元的影响

目的:研究肝门阻断后大鼠肠肌间神经丛内乙酰胆碱酯酶(AchE)阳性神经元表达的变化规律,以探讨肝门阻断对肠道功能影响的神经机制.方法:SD大鼠分成实验组(再按阻断时间分为肝门阻断20 min组、40 min组和60 min组)及对照组,取相同部位的部分小肠和结肠,制作肠肌间神经丛铺片标本行AchE染色,观察和比较各组AchE阳性神经元的分布密度和染色情况.结果:各实验组与对照组比较,肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量减少(P＜0.05或P＜0.01),且AchE阳性表达减弱;各实验组比较,肝门阻断60 min组的AchE阳性神经元数量明显少于20 min组(P＜0.05),20 min组的AchE阳性神经元胞体内可见强阳性染色颗粒,40 min组和60 min组不易见强阳性染色颗粒,染色较浅.结论:肝门阻断会影响或损伤肠神经系统的胆碱能神经,这可能是术后肠道运动功能障碍发生的神经机制.     

一氧化氮对大鼠胃窦肌间神经丛胆碱能神经的影响

一氧化氮是胃肠道主要的非胆碱能非肾上腺素能抑制性神经递质,它在胃肠道分布广泛且含量较高。形态学研究表明一氧化氮可能影响其它神经递质的释放［１］。本试验拟通过观察正常大鼠注射一氧化氮供体硝普钠后胃窦肌间神经丛内胆碱能神经变化,间接了解一氧化氮对乙酰胆碱合成的影响。１　材料与方法　　健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠２４只,雌雄各半,体重２５０～３５０ｇ,随机分为３组,每组８只：①正常对照组;②一氧化氮组,每天腹腔注射硝普钠０．５ｍｇ／ｋｇ,３／ｄ;③左型精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）组,每天腹腔注射Ｌ－ＮＡＭＥ１５…     

Changes in ultrastructure of the colon myenteric plexus and its significance in slow transit constipation

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｓｉｎｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｔｈｅｃｏｌｏｎｍｙｅｎｔｅｒｉｃｐｌｅｘｕｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｌｏｗｔｒａｎｓｉｔｃｏｎｓｔｉｐａｔｉｏｎ（ＳＴＣ）－Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｆｏｕｒｔｅｅｎｐａｔｉｅｎｔｓ（１ｍａｎａｎｄ１３ｗｏｍｅｎ，ａｇｅｄ２６～６８ｙｅａｒｓ，ｍｅａｎａｇｅ：４４ｙｅａｒｓ）ｗｉｔｈｓｅｖｅｒｅ，ｌｏｎｇｓｔａｎｄｉｎｇｉｄｉｏｐａｔｈｉｃＳＴＣｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｂｙｒａｄｉｏｐａｑｕｅｍａｒｋｅ…     

多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛氮能神经元的定位

目的研究5种多巴胺受体在大鼠胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元的分布。方法本文主要采用冰冻切片和全层铺片的免疫荧光组织化学方法观察胃体肌间神经丛中多巴胺受体的分布,以及与一氧化氮能神经元的共定位情况。结果 5种多巴胺受体亚型的免疫荧光和一氧化氮合酶的免疫荧光在胃体肌间神经丛均有分布,而且在一氧化氮合酶免疫阳性的神经元上存在有多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5的免疫阳性,而D_4没有明显的免疫阳性表达。结论多巴胺受体D_1、D_2、D_3和D_5分布在胃体肌间神经丛一氧化氮能神经元上,可能通过调节一氧化氮的合成和释放进而调节胃体平滑肌的运动。     

一种肠肌间神经丛胶质细胞无血清原代培养法的建立

目的 肠胶质细胞（enteric glial cell,EGC）在肠道多种生理及病理过程的调节中发挥重要作用,为了深入研究EGC的功能,排除在体及组织水平中神经体液因素的影响,获得一种简便高效的原代EGC分离培养方法非常必要。方法 取小鼠结肠纵行肌-肌间神经丛组织,经消化分离肠胶质细胞,采用含血清和无血清培养基交替培养法去除成纤维细胞后常规传代;运用细胞免疫荧光染色法检测原代EGC纯度;运用胞内钙成像技术实时观察EGC内Ca²⁺浓度（[Ca²⁺]i）变化以检测细胞活性。结果 每次实验获得的EGC至传代前细胞量可达约6.8×10⁵;无血清培养后成纤维细胞污染显著降低;胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）阳性的EGC占细胞总数的98.44%±1.07%,钙结合蛋白S100β阳性EGC占93.61%±3.16%,GFAP与S100β双阳性EGC占93.09%±2.99%;96.00%±4.00%的细胞在ATP诱导下发生胞内钙瞬变。结论 结合无血清培养可有效去除成纤维细胞污染,得到纯度较高、活性较好的肌间神经丛EGC。     

糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛内氮能神经和Cajal间质细胞的变化

目的:研究糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛氮能神经和Cajal间质细胞(ICC)的变化规律,并探讨肠功能异常的机制.方法:用链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型(n=12),同时设同批次同种系大鼠6只作为对照组(n=6).3个月后采用NOS组织化学染色法观察糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛的形态学变化,并对两组大鼠十二指肠肌间神经丛内NOS阳性神经元、神经节、节间束和Cajal间质细胞的密度进行了测定.结果:糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元、神经节、节间束和ICC数量均减少(P＜0.01).结论:糖尿病大鼠十二指肠肌间神经丛氮能神经和ICC的改变可能是糖尿病引起肠功能障碍的原因.