血小板源性生长因子受体基因重排的研究

血小板源性生长因子（PDGF）是血清中的一种强有丝分裂原分子，分子质量为28～31ku。PDGF可刺激成纤维细胞、内皮细胞、平滑肌细胞的增殖，其受体在人巨核细胞和巨核细胞系有表达。PDGF一方面通过与其受体相互作用刺激细胞的c-fos的表达，促进细胞有丝分裂，另一方面它可作用于骨髓微环境的间质细胞，使间质细胞产生更多的细胞因子，     

血小板源生长因子及其受体信号转导通路研究进展

血小板源生长因子是体内一种主要的促有丝分裂剂，具有广泛生物学作用，本文主要就PDGF及其受体的生理学特性和作用，PDGF介导的细胞内信号转导通路以及信号转导通路的组织特异性作一简要综述。     

血小板源生长因子及其受体信号转导通路研究进展

血小板源生长因子是体内一种主要的促有丝分裂剂,具有广泛生物学作用,本文主要就PDGF及其受体的生理学特性和作用,PDGF介导的细胞内信号转导通路以及信号转导通路的组织特异性作一简要综述。     

血小板源性生长因子及胰岛素样生长因子对大鼠腰椎间盘退变的影响

目的: 探讨血小板源性生长因子(PDGFs)及胰岛素样生长因子(IGFs)对大鼠椎间盘退变(IDD)的影响.方法: 36只成年健康SD大鼠,随机分为PDGFs实验组、PDGFs加IGFs实验组及阴性对照组3组,通过手术方法建立IDD模型.在术后不同时期对3组分别注射PDGFs、PDGFs加IGFs及生理盐水,于造模后1个月和2个月每组分别处死6只大鼠,完整取出L3～4椎间盘测量蛋白多糖含量,取L4～5椎间盘使用免疫组化法检测Ⅱ型胶原含量,取L5～6椎间盘使用流式细胞仪检测各组大鼠椎间盘细胞的凋亡情况.结果: 造模当日和术后1个月开始注射试剂的3组椎间盘蛋白多糖含量、Ⅱ型胶原含量及细胞凋亡率差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论: PDGFs对大鼠IDD有预防和治疗作用,PDGFs与IGFs联用有协同作用.     

鸦胆子乙醇提取物对血小板源性生长因子受体介导细胞迁移的抑制作用

目的：观察鸦胆子乙醇提取物对血小板源性生长因子受体β（PDGFRβ）介导细胞迁移的影响,阐明其起作用的有效成分。方法：用脂质体介导的细胞转染技术将人PDGFRβ 表达载体转染体外培养的不表达PDGFRβ的PAE细胞,G418抗性筛选建立稳定转染的细胞株,采用RT-PCR法检测PDGFRβ的表达;用细胞损伤修复实验观察细胞损伤24 h完全修复所需的血小板源性生长因子BB（PDGFBB）最低浓度;划痕实验观察加入不同浓度鸦胆子乙醇提取物24 h后,计算细胞迁移的抑制率及鸦胆子发挥抑制作用的主要成分溶于乙醇溶液的浓度。结果：RT-PCR检测转染组细胞表达PDGFRβ;细胞损伤修复实验检测细胞损伤24 h完全修复所需的血小板源性生长因子BB（PDGFBB）最低浓度为10  μg·L^-1;划痕实验检测随着鸦胆子乙醇提取物（70%乙醇溶液）浓度的增加,对细胞迁移的抑制率增加（P<0.05）,呈剂量效应关系;50%乙醇提取物和25%乙醇提取物（浓度≤10  μg·L^-1）对细胞迁移抑制不明显,鸦胆子乙醇提取物浓度>10  μg·L^-1主要导致细胞死亡。结论：鸦胆子抗肿瘤作用机制可能是通过抑制 PDGFRβ 介导的细胞迁移来实现的,其发挥作用的主要成分更易溶于70%的乙醇溶液中。     

B族Ⅰ型清道夫受体过表达对血小板源性生长因子诱导的冠状动脉平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)在人冠状动脉平滑肌细胞(hCASMC)增殖和迁移过程中的作用及机制。方法常规培养hCASMC,根据处理方法将细胞分为空白对照组、5μg·L~(-1)血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)组、10μg·L~(-1)PDGF-BB组、20μg·L~(-1)PDGF-BB组、20μg·L~(-1)PDGF-BB+腺病毒绿色荧光蛋白(AdGFP)组(PDGF-BB+Ad-GFP组)、20μg·L~(-1)PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组(PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组)。采用噻唑兰法检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测各组细胞中SR-BⅠ表达,Transwell法检测各组细胞迁移情况。结果空白对照组及5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞中SR-BⅠ相对表达量分别为1.00±0.05、0.76±0.08、0.52±0.06、0.30±0.05,5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量均显著低于空白对照组(P<0.05),10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量均显著低于5μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05),20μg·L~(-1)PDGF-BB组细胞SR-BⅠ相对表达量显著低于10μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05)。培养24、48、72 h时,5、10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组及PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力均显著高于空白对照组(P<0.05),10、20μg·L~(-1)PDGF-BB组及PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力显著高于5μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05),20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组、PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力显著高于10μg·L~(-1)PDGF-BB组(P<0.05); PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞增殖能力低于20μg·L~(-1)PDGF-BB组和PDGF-BB+Ad-GFP组(P<0.05); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组与PDGF-BB+Ad-GFP组细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)。空白对照组、20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组及PDGFBB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数分别为24.2±3.6、76.6±4.2、75.2±4.8和60.6±3.6,各组细胞迁移数比较差异有统计学意义(F=40.695,P<0.01); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组及PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数显著高于空白对照组,PDGF-BB+Ad-GFP-SR-BⅠ组细胞迁移数显著低于20μg·L~(-1)PDGF-BB组、PDGF-BB+Ad-GFP组(P<0.05); 20μg·L~(-1)PDGF-BB组与PDGF-BB+Ad-GFP组细胞迁移数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PDGF-BB能够促进h CASMC增殖和迁移,并减少SR-BⅠ表达,过表达SR-BⅠ能够抑制PDGFBB的作用,抑制h CASMC增殖和迁移。     

丹参对自体静脉移植物血小板源生长因子及其受体蛋白表达的影响

目的探讨丹参对自体静脉移植替代动脉后血小板源生长因子(PDGF)及其受体蛋白表达的影响。方法将大鼠自体颈静脉移植于腹主动脉,分丹参组和对照组,丹参组于术前1d开始管饲丹参注射液(24g·kg-1·d-1)直至术后4周取材,检测移植静脉PDGF及其受体蛋白的表达。结果正常静脉未见PDGF及其受体的表达,术后4周移植静脉可见PDGF A、B链及其受体α、β亚基的表达,丹参组PDGF B链及PDGF受体α、β表达较对照组明显减少(P<0.01),PDGF A链两组无明显差异(P>0.05)。结论丹参可减少移植静脉PDGF B链及PDGF受体α、β亚基的表达。     

血小板源生长因子和表皮生长因子及其受体与肺动脉高压

肺动脉高压可由许多心脏和肺血管疾病所引起,目前多主张以安静时肺动脉平均压（ｍＰＡＰ）≥２．６６ｋＰａ（２０ｍｍＨｇ）,运动时的ｍＰＡＰ≥４．０ｋＰａ（３０ｍｍＨｇ）为肺动脉高压。肺动脉高压的发展包含两个病理过程,即血管收缩和血管构型重建。近年来,肺血...     

血小板源性生长因子-BB对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖、迁移及表型转化的影响

目的了解血小板源性生长因子-BB（PDGFBBB）对大鼠阴茎海绵体平滑肌（CCSM）细胞增殖、迁移及表型转化的影响并
初步探讨其作用机制。方法采用改良的组织块培养法培养Wistar大鼠CCSM细胞,并用细胞免疫荧光法鉴定。利用CCK-8法
检测不同浓度的PDGFBB对培养的大鼠CCSM细胞增殖的影响,并筛选出最适PDGFBB作用浓度。分别用0 ng/mL PDGFBB
与最适浓度PDGFBB处理CCSM细胞,利用划痕实验检测PDGFBB对CCSM细胞迁移的影响,24 h和48 h时利用qRT-PCR检
测细胞中转录因子myocardin及收缩型表型标志物α-SMA、SMMHC mRNA表达水平;用最适浓度PDGFBB处理CCSM 细胞
0、24 和48 h 后,利用western blotting 检测细胞中myocardin 的蛋白表达水平。结果原代培养的CCSM 细胞中α-SMA 和
smoothelin 阳性率分别约为96.5%和96%;不同浓度的PDGFBB均能明显促进CCSM细胞增殖,其最适浓度为12.5 ng/mL。
PDGFBB（12.5 ng/mL）能促进CCSM细胞迁移,下调CCSM细胞中myocardin、α-SMA和SMMHC mRNA表达水平（P均<0.01）;
在48 h内myocardin蛋白质的表达水平随着PDGFBB作用时间增加而降低。结论改良的组织块培养法可获得高纯的CCSM
细胞;PDGFBB可促进CCSM细胞增殖、迁移,使细胞从收缩型向合成型转化,其机制可能是通过下调myocardin。
     

血小板源生长因子-α受体结构域切除对肺血管平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨从血小板源生长因子－α（PDGF－α）受体水平阻断对肺血管平滑肌增殖的影响。方法：将组织贴块法培养的肺动脉平滑肌细胞（VSMC）分别施加小、中、大剂量的受体结构域切除的PDGF－α受体腺病毒重组体Ad5CMV-PaRtr(ACP),通过四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察细胞不同时相的增殖曲线；采用流式细胞学技术观察不同干预条件下VSMC细胞周期的变化。结果：中、大浓度ACP对细胞增殖有明显抑制作用。中、大剂量ACP干预后，VSMC生长明显受抑，波峰减弱或消失，第7－9天生长曲线才呈现上升趋势。在中浓度的ACP作用下，加入PDGF－BB不能促进VSMC的增殖。ACP干预前后，VSMC增殖周期中各期细胞构成发生显著的变化，以G0＋G1期细胞增多，S＋G2＋M期细胞减少为特征。与对照组相比，各组的G0＋G1期细胞均有显著升高（P＜0．05）。小剂量与中剂量、中剂量与大剂量间G0＋G1期细胞有显著性差异（P＜0．05）。结论：ACP作为细胞增殖抑制剂，能在中、大剂量下明显抑制VSMC的增殖，可使G0／G1期细胞数明显增多，且与ACP有剂量依赖关系。     

半相合细胞移植对CT-26结肠癌荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的:探讨半相合细胞移植的移植物对CT-26结肠癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及潜在机制。方法:取C57BL/6小鼠的脾细胞和骨髓细胞作为供体细胞;取18只CB6F1小鼠(受体),随机分成对照组、环磷酰胺组和移植组,每组6只,皮下种植小鼠结肠癌CT26细胞建立荷瘤小鼠模型;然后分别于尾静脉注射0.2 mL生理盐水、环磷酰胺、环磷酰胺+脾细胞+骨髓细胞,连续4周;于不同时间点检测3组小鼠肿瘤体积变化;于2周时取3组小鼠肿瘤、肝脏、小肠和皮肤组织,HE染色观察组织变化;ELISA法检测肿瘤组织中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α和TGF-β含量;流式细胞术检测移植组3 d、2周、4周时小鼠外周血细胞(H-2Kd/b)嵌合率;结果:2周时,环磷酰胺组和移植组小鼠肿瘤体积明显小于对照组(P均<0.01);与对照组和环磷酰胺组相比,移植组肿瘤组织中IL-2、IL-10、IFN-γ与TNF-α含量明显增高(P均<0.05),IL-4和TGF-β含量明显降低(P均<0.05);与移植3 d时相比,2、4周时移植组小鼠外周血中H-2Kb所占比例显著增加(P均<0.01...     

miR-26a靶向HMGA1基因对结肠癌细胞生长、侵袭和迁移的影响

目的：探讨miR-26a靶向高迁移率族蛋白1（HMGA1）基因对结肠癌细胞生长、侵袭和迁移的影响,阐明HMGA1基因是否为miR-26a的靶基因。方法：将miR-NC （对照）、miR-26a mimics （模拟物）和miR-26a inhibitor （抑制物）转染人结肠癌SW480细胞作为miR-NC组、miR-26a mimics组和miR-26a inhibitor组。RT-PCR和Western blotting法分别检测各组SW480细胞中HMGA1 mRNA和蛋白表达水平。采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测各组SW480细胞中双荧光素酶活性,以此确定HMGA1是否为miR-26a的靶基因。采用CCK8实验检测各组细胞增殖活力,Transwell小室法检测各组细胞侵袭数和迁移数。结果：HMGA1基因是miR-26a的靶基因。与miR-NC组比较,转染24、48和72 h时miR-26a mimics组SW480细胞增殖活力明显降低（P<0.01）,而miR-26a inhibitor组细胞增殖活力明显升高（P<0.01）。与miR-NC组比较,各时间点miR-26a mimics组和miR-26a mimics+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均降低（P<0.01）,而miR-NC+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均升高（P<0.01）;与miR-26a mimics组比较,各时间点miR-26a mimics+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均升高（P<0.01）;与miR-NC+pcDNA3.1-HMGA1组比较,各时间点miR-26a+pcDNA3.1-HMGA1组细胞增殖活力、细胞侵袭数和细胞迁移数均降低（P<0.01）。结论：HMGA1是miR-26a的靶基因。上调miR-26a表达可抑制人结肠癌SW480细胞增殖,下调miR-26a表达可促进人结肠癌SW480细胞增殖。     

内分泌腺性血管内皮生长因子对结肠癌LoVo细胞增殖和迁移的促进作用

目的：探讨内分泌腺性血管内皮生长因子（EG-VEGF）对结肠癌LoVo细胞相关恶性行为的影响。方法：采用不同浓度（50、100、200μg·L^-1） EG-VEGF处理的结肠癌LoVo细胞作为EG-VEGF组,采用不含EG-VEGF培养液培养的结肠癌LoVo细胞作为对照组。MTT法检测各组LoVo细胞的增殖活性,流式细胞术（FCM）检测各细胞周期LoVo细胞百分率,细胞划痕实验检测各组结肠癌LoVo细胞迁移率,Transwell实验检测各组结肠癌LoVo细胞迁移数。结果：MTT法,与对照组比较,50、100和200μg·L^-1EG-VEGF组LoVo细胞增殖活性明显升高（P<0.05）,且随着浓度的升高细胞增殖活性升高。FCM检测,与对照组比较,100μg·L^-1EG-VEGF组G₀/G₁期LoVo细胞百分率降低（P<0.05）,S期细胞百分率升高（P<0.05）,G₂+M期细胞百分率变化不明显。细胞划痕实验,100μg·L^-1EG-VEGF组LoVo细胞迁移率较对照组明显升高（P<0.05）。Transwell实验,50、100和200μg·L^-1EG-VEGF组结肠癌LoVo细胞迁移数较对照组明显升高（P<0.05）。结论：EG-VEGF可明显促进结肠癌LoVo细胞增殖和迁移,EG-VEGF可能与结肠癌的恶性发展有关联。     

血小板源性生长因子对人视网膜色素上皮细胞的作用

目的　观察血小板源性生长因子 (PDGF)对人视网膜色素上皮细胞 (hRPE)增殖和移行能力的影响 .方法　将体外培养的第 46代人视网膜色素上皮细胞分为DMEM组(改良型Eagle培养液 )和含有 2 0mL·L-1小牛血清的DMEM组(2 0 g·L-1DMEM ) ,每组分别加入不同浓度 (0 .1,1,5 ,10 ,5 0和 10 0 μg·L-1)的PDGF ,然后采用MTT比色法观察分析其对hRPE的增殖作用 ;应用hRPE损伤模型 ,计数进入缺损区的细胞 ,定量观察PDGF对hRPE移行的影响 .结果　①增殖作用 :0 .110 0 μg·L-1的PDGF均能促进hRPE的增殖 ,DMEM组 10 μg·L-1时促增殖作用最明显 ,增殖率达15 3% ;2 0 g·L-1DMEM组 5 0 10 0 μg·L-1的增殖率为 174% ,作用最强 .②移行作用 :PDGF能够显著促进hRPE的移行 ,并呈剂量依赖性 ,5 0 10 0 μg·L-1时促移行能力最强 ,DMEM组移行率为 5 10 % ,2 0mL·L-1FBS +DMEM组达 6 40 % .结论　PDGF能够促进hRPE的增殖和移行 ,有血清时可以加强这种作用 ,提示它在PVR的发病过程中可能发挥了重要作用     

As2O3对小鼠结肠癌CT26细胞生长的抑制作用

目的 在体外观察三氧化二砷（As2O3）对小鼠结肠癌CT26细胞的抑制作用并探讨其作用机制,为其能否作为结肠癌的化疗药物提供理论基础.方法 将不同浓度As2O3作用于CT26细胞不同时间后,用MTT法检测各组细胞的生长抑制率;光镜下观察细胞形态学和结构的变化;采用免疫组织化学方法观察凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3在各药物组中的表达;应用Western blot测定各药物组中Bax和Caspase-3表达的变化.结果 ①MTT法检测发现不同浓度的As2O3作用CT26细胞后,细胞增殖受到不同程度的抑制,且随着浓度的升高和作用时间的延长作用越来越明显;②形态学观察可见随着As2O3浓度增加,各组中贴壁细胞数量逐渐减少,细胞间隙变大、细胞变圆、胞膜皱缩、胞体回缩,可见大小不等的凋亡小体;③免疫组织化学和Western blot检测显示,随着As2O3浓度的增加,各药物组细胞中Bax和Caspase-3蛋白表达也逐渐增加,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 As2O3具有明显的抑制结肠癌CT26细胞生长的作用,其作用可能与促进细胞凋亡相关.     

PARG抑制对小鼠结肠癌CT26细胞VEGF-C蛋白表达调控的初步研究

目的 初步探讨多聚(腺苷二磷酸核糖)水解酶[poly-(ADP-ribose)glycohydrolase,PARG]抑制对小鼠结肠癌CT26细胞VEGF-C蛋白表达影响.方法 分为实验组(GLTN处理)与对照组(GLTN未处理),采用Western blot法检测2组小鼠结肠癌CT26细胞的PARG、PARP-1、N...     

血小板衍生生长因子D通过ERK信号通路对肺癌H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

目的:探讨血小板衍生生长因子D (PDGF-D)对人肺癌H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并阐明其可能的作用机制。方法:选用人肺癌H1299细胞,分为对照组(转染空载体)和PDGF-D组(转染GV230-PDGF-D质粒),同时设空白组,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组细胞中PDGF-D mRNA表达水平和蛋白表达量。H1299细胞分为对照组(转染空载体)、PDGF-D组(转染GV230-PDGF-D质粒)、PDGF-D+PD98059组(转染GV230-PDGF-D质粒+ERK抑制剂PD98059)和PD98059组,PD98059终浓度为10μmol·L^-1。MTT法检测各组细胞增殖活性,划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell实验检测各组细胞中侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中磷酸化细胞外信号调节基酶(p-ERK)、细胞外信号调节基酶(ERK)、锌指转录因子Snail、基质金属蛋白酶1 (MMP-1)和跨膜黏附糖蛋白CD44的蛋白表达水平。结果:RT-qPCR法检测,...     

miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探究miR-28-5p对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 采用qRT-PCR检测miR-28-5p在正常结肠细胞NCM460与结肠癌细胞HCT116、SW480、SW620中表达量的差异.将HCT116、SW480、SW620各分为三组:对照组,过表达组,沉默组.对照组不予特殊处理,其余两组分别转染miR-2...     

肝细胞生长因子对肺癌细胞血管外游走的影响

目的:评价肝细胞生长因子(HGF)对肺癌细胞血管外游走的影响.方法:利用体外癌细胞血管外游走模型,观察VMRC-LCD、LK-2、RERF-LC-KJ等3种肺癌细胞的血管外游走状况,并计算游走至血管外的肺癌细胞数.结果:LK-2和RERF-LC-KJ可以通过血管内皮细胞间缝隙游走至血管外、肝细胞生长因子能够刺激肺癌细胞更多地浸润至血管外基质.结论:肝细胞生长因子能增强肺癌细胞的运动能力,加速肺癌细胞的血管外游走.