软坚护肝片的急性毒性及一般药理学研究

目的 观察软坚护肝片对实验动物的急性毒性及中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的影响.方法 小鼠20只,按最大给药量法给予软坚护肝片(19.84 g/kg),2次/d,14 d后观察急性毒性反应;不同剂量软坚护肝片(0.31、0.62、1.24 g/kg)分别给予各组小鼠灌胃给药,观察小鼠自主活动和运动协调能力;不同给药剂量软坚护肝片(0.31、0.62、1.24 g/kg)分别给予各组麻醉大鼠十二指肠给药,观察大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压、心率、呼吸频率、呼吸幅度.结果 软坚护肝片19.84 g/kg灌胃给药14 d后,小鼠无毒性反应.软坚护肝片各剂量组对小鼠自主活动和运动协调能力无明显影响(P＞0.05);对麻醉大鼠血压、平均动脉压、心率、呼吸频率、呼吸幅度均无明显影响(P＞0.05).结论 软坚护肝片对实验动物心血管系统、呼吸系统、自主神经系统均无明显影响.     

外源性硫化氢对大鼠慢性肝纤维化的保护作用

目的观察外源性硫化氢(H2S)对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化的保护作用。方法 CCl4复制大鼠肝纤维化模型后分为模型组和预防组,模型组给予生理盐水腹腔注射,预防组给予NaHS腹腔注射,观察各组大鼠血清中透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及白蛋白(Alb)的变化,以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活性变化及丙二醛(MDA)含量变化,并应用HE和Masson染色观察各组肝组织病理学改变。结果与模型组比较,预防组大鼠血清ALT、AST、HA、LN、PCⅢ及肝组织MDA含量均降低,而血清中Alb及肝组织中SOD及GSH-Px活性升高;病理学检测肝纤维化程度显著减轻。结论外源性H2S对CCl4诱导的大鼠慢性肝损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肝内胶原合成、减少自由基生成、减轻脂质过氧化及抑制肝星状细胞增殖活化有关。     

复合因素诱导脂肪性肝纤维化模型的建立

目的 采用复合因素诱导建立大鼠脂肪性肝纤维化模型.方法 SD大鼠,随机分为正常组、对照组、脂肪性肝纤维化模型组.对照组予以高脂乳剂灌胃,模型组予以高脂乳剂灌胃配合小剂量40?l4花生油溶液(1 ml/kg)皮下注射,对比造模.试验4、6、8周后分批处死,检测肝功能[血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)]、肝纤维化指标[血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)以及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量],并进行病理组织学和电镜观察.结果 模型组大鼠4周起血清ALT、AST、HA、LN、PⅢNP、CⅣ及肝组织Hyp含量均有增高趋势,8周后各指标显著增高.病理组织学检查提示,造模8周后,模型组大鼠肝小叶间纤维增生,部分纤维细胞向肝细胞间延伸;电镜观察提示肝星状细胞转变成肌成纤维细胞,周围有大量胶原纤维沉积.结论 采用高脂乳剂灌胃结合小剂量CCl4花生油溶液皮下注射持续8周,可成功复制出大鼠脂肪性肝纤维化模型.     

健脾软肝方预防给药降低TGF-β_1表达延缓肝纤维化进程研究

目的:研究自拟健脾软肝方预防给药对CCl4肝纤维化大鼠的作用,着重分析其对转化生长因子-β_1(Transforming Growth Factor-β_1,TGF-β_1)的影响。方法:60只清洁级雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为正常组,CCl4模型组,健脾软肝方低、中、高剂量组以及阳性药物扶正化瘀胶囊组,n=10。适应性喂养1周后给予CCl4腹腔注射复制肝纤维化大鼠模型,期间所有大鼠均接受预防给药,其中正常组和CCl4模型组给予生理盐水灌胃(1 m L·kg-1·d-1),阳性药物组给予扶正化瘀胶囊(0.405 g·kg-1·d-1)灌胃,健脾软肝方3个剂量组给予健脾软肝冲剂(2.7 g·kg-1·d-1)、(5.4 g·kg-1·d-1)和(10.8 g·kg-1·d-1)灌胃[1次/(kg·d)],全程密切监测大鼠一般情况,4周后处死大鼠检测肝功能、肝纤维化指标、肝脏病理学,同时Western blot检测TGF-β_1的表达特点。结果:与正常组相比,CCl4模型组毛色变暗,食欲减退,3个预防给药组和扶正化瘀胶囊组上述症状明显好转,同时健脾软肝方高剂量组明显好于扶正化瘀胶囊组;与正常组相比,模型组ALT和AST以及肝纤维化指标HA、PCIII、IV-C和LN明显增加(P0.05),3个预防给药组和扶正化瘀胶囊组则可以明显降低其含量(P0.05);HE及Masson染色可见,与正常组相比,CCl4模型组肝组织切片肝细胞肿胀明显,肝窦以及门静脉周围结缔组织明显增生,有假小叶形成,3个预防给药组和扶正化瘀胶囊组上述症状明显好转;与正常组相比,模型组TGF-β_1表达明显升高(P0.05),健脾软肝方3个预防给药组则可以明显降低其表达(P0.05)。结论:健脾软肝方预防给药可以明显延缓CCl4肝纤维化大鼠进展,其作用机制可能是通过降低TGF-β_1表达而实现。     

三七丹参对四氯化碳致小鼠实验性肝纤维化的影响

目的 观察三七丹参对四氯化碳(CCl4)所致实验性肝纤维化的影响.方法 采用CCl4复制小鼠肝纤维化模型,同时给1g/kg的三七丹参治疗,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(Alb)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(IV-C)和层粘蛋白(LN),并用光镜观察肝脏组织学改变,进行炎症活动度分级及肝纤维化分期.综合分析三七丹参对CCl4中毒性肝纤维化的防治作用.结果 三七丹参具有降低ALT、AST的作用,并显著降低HA、PCⅢ和ⅣC.经治疗后的肝细胞变性、坏死及纤维组织增生明显减少.结论 三七丹参具有抗实验性肝纤维化的作用.     

扶正化瘀胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化临床观察

[目的]观察慢性乙型肝炎肝纤维化患者用扶正化瘀胶囊治疗前后临床症状、体征、肝功能、血清肝纤维化指标的变化。[方法]治疗组27例患者服用由上海中医药大学肝病研究所研制的扶正化瘀胶囊,口服剂量为1.5g/次,3次/d;对照组25例只给予常规护肝治疗。两组疗程均为3个月。[结果]扶正化瘀胶囊可有效改善慢性乙型肝炎患者的临床症状与体征;恢复肝功能,其效果与具明确保肝降酶作用的药物相同。扶正化瘀胶囊具有明显抗肝纤维化作用,治疗组治疗后血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)较治疗前明显下降,两组比较有明显差异。[结论]扶正化瘀胶囊除有明确保肝作用外,还有一定的抗肝纤维化作用。     

丹芍化纤胶囊对基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的：探讨丹芍化纤胶囊抗大鼠肝纤维化的作用及对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组，除正常组外，其余采用四氯化碳(CCl4)、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周，然后两治疗组分别予以低剂量(0．5g／kg)、高剂量(1g／kg)丹芍化纤胶囊灌胃8周。实验结束后测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)及谷丙转氨酶(ALT)，光镜下观察肝组织纤维化程度，检测尿羟脯氨酸(Hyp)排出量，同时免疫组织化学SABC法检测肝组织MMP-1的表达。结果：治疗组与肝纤维化模型组及自然恢复组比较，肝脏指数、血清HA及ALT显著下降，肝纤维化程度显著减轻，尿Hyp排出明显增加，肝脏MMP-1表达显著增加。以上结果均以高剂量组较低剂量组改善明显。结论：丹芍化纤胶囊增加大鼠肝组织中MMP-1的表达，可能是其抗纤维化作用的机制之一。     

归味消纤丸抗大鼠实验性肝纤维化的药效研究

目的：：从动物整体水平评价归味消纤丸抗四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化药效,进一步验证归味消纤丸抗肝纤维化作用。方法：将72只健康 SD 大鼠随机分为正常组、模型组、HGP 组、GWXX低、中、高剂量组(1.5、3、6 g/kg)。除正常组外每组均采用 CCl4灌胃方法造成大鼠慢性实验性肝纤维化模型,各药物组在造模同时每天给予相应药物。给药12周末,以大鼠肝脏指数、肝纤维四项(HA、LN、PCⅢ、C-Ⅳ)为指标,观察归味消纤丸抗大鼠实验性肝纤维化作用。结果：与正常组比较,模型组大鼠肝脏指数升高不明显(P >0.05)。与模型组比较,HGP 组、GWXX 中剂量组和 GWXX 高剂量组肝脏指数升高不明显(P >0.05),GWXX 低剂量组肝脏指数明显升高(P <0.05);与正常组比较,模型组大鼠血清 HA、PCⅢ、C-Ⅳ显著增高(P <0.01)。与模型组比较,HGP 组血清 HA 明显降低(P <0.05),血清 PCⅢ(P <0.01)显著降低,而血清 LN、C Ⅳ差异无统计学意义(P >0.05)。与模型组比较,GWXX 低剂量组和GWXX 高剂量组的血清 HA、PC Ⅲ显著降低(P <0.01),GWXX 中剂量组血清 HA、PC Ⅲ、C-Ⅳ(P <0.01)显著降低。结论：归味消纤丸能有效抑制 CCl4诱导的大鼠肝纤维化,尤其以 GWXX 中剂量组效果最为明显。     

丹芍化纤胶囊治疗大鼠肝纤维化对金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响

目的：探讨丹芍化纤胶囊对大鼠实验性肝纤维化TIMP-1表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组,除正常组外,其余采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后两治疗组分别予以低剂量(0．5g／kg)、高剂量(1g／kg)丹芍化纤胶囊灌胃治疗8周。实验结束后测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)及谷丙转氨酶(ALT),光镜下观察肝组织纤维化程度,检测尿羟脯氨酸(Hyp)排出量,同时用免疫组化SABC法检测肝组织中TIMP-1的表达。结果：治疗组与肝纤维化模型组、自然恢复组比较：肝脏指数、血清HA及ALT显著下降;肝纤维化程度显著减轻;尿Hyp排出明显增加;治疗组肝组织中TIMP-1的表达与肝纤维化模型组和自然恢复组相比则显著降低。结论：丹芍化纤胶囊能够抑制肝纤维化组织中TIMP-1的表达,从而提高MMP-1的活性,促进细胞外基质的降解,这可能是丹芍化纤胶囊抗肝纤维化作用的机制之一。     

蒿鳖养阴软坚方对免疫性肝纤维化大鼠的治疗作用

目的 探讨蒿鳖养阴软坚方对牛血清白蛋白 (BSA) 免疫性肝纤维化大鼠的治疗作用。方法 以 18 mg/mL BSA 与等体积的弗氏不完全佐剂混悬液足跖皮下多点注射5次免疫大鼠后,尾静脉攻击注射 BSA 生理盐水 (每次 2 mg/0.4 mL 递增至 3.4 mg/0.4 mL) 15 次,每周2次,制备肝纤维化模型;按体质量随机区组法分为模型组,蒿鳖养阴软坚方高、中、低剂量 (8.2、2.59、0.82 g/kg,2.59 g/kg 为临床等效剂量) 组,复方鳖甲软肝片组,秋水仙碱组,各治疗组均于造模结束后 ig 给药 (1 mL/100 g),每日1次,连续2个月,对照组和模型组分别 ig 等体积蒸馏水。酶谱法检测肝组织基质金属蛋白酶-2 和 -9 (MMP-2、MMP-9),荧光法测定血清丙二醛 (MDA),放免法检测血清透明质酸 (HA)、层黏连蛋白 (LN)、Ⅳ型胶原 (Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ)。结果蒿鳖养阴软坚方各剂量均能显著降低肝组织羟脯氨酸 (Hyp)、MMP-2 及 MMP-9、肝纤维化程度、血清 HA、LN、Ⅳ-C 水平 (P＜0.05),其高、中剂量能明显降低血清 MDA 水平 (P＜0.05)。结论 蒿鳖养阴软坚方对 BSA 免疫性肝纤维化大鼠具有治疗作用,抗脂质过氧化与降低 MMP-2 及 MMP-9 为其部分作用机制。